磷脂酶C

摘要： 目的:探讨钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)激动剂R568对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肾脏病变的影响。方法:以16周龄雄性SHR和Wistar Kyoto(WKY)大鼠(血压正常)为研究对象,实验分为WKY组、SHR+生理盐水(normal saline,NS)组及SHR+R568组。干预8周后(24周龄),使用无创血压仪器检测各组大鼠血压,接着处死大鼠,收集各组大鼠肾脏。采用苏木精-伊红、过碘酸-雪夫及Masson染色观察各组大鼠肾脏形态学改变;采用免疫组化检测各组大鼠肾脏组织中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NAGL)、CD68和磷脂酶C(phospholipase C,PLC)的表达;采用免疫荧光染色检测各组大鼠肾脏组织中CaSR表达及巨噬细胞的极化类型;采用Western blotting和qRT-PCR检测CaSR、NAGL、Ⅲ型胶原蛋白、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、caspase-1、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)及IL-18的表达。结果:与WKY组相比,SHR+NS组大鼠血压显著升高,肾组织中CaSR和PLC表达及M2型巨噬细胞数量显著减少,而CD68、NAGL和NLRP3炎症小体相关蛋白表达及M1型巨噬细胞数量显著增多(P<0.05);与SHR+NS组相比,R568干预8周后大鼠血压显著降低,大鼠肾组织中CaSR和PLC表达及M2型巨噬细胞数量显著增多,而CD68、NAGL和NLRP3炎症小体相关蛋白表达及M1型巨噬细胞数量显著减少(P<0.05)。结论:CaSR激活可通过激活PLC信号通路抑制NLRP3炎症小体活化,减少巨噬细胞向M1极化,促进其向M2极化,以降低血压并减轻高血压肾损伤。

摘要： 为了提高脱胶效率,以冷榨菜籽原油为原料,磷脂含量为指标,采用磷脂酶Lecitase Ultra和磷脂酶C复合酶法对冷榨菜籽油进行脱胶。采用单因素试验考察磷脂酶Lecitase Ultra反应时间、磷脂酶C反应时间、加水量、磷脂酶Lecitase Ultra添加量、磷脂酶C添加量、柠檬酸溶液添加量对脱胶油磷脂含量的影响,并通过响应面法优化脱胶条件。对优化的脱胶条件下所得到的脱胶油的理化指标进行了检测,并与国标一级压榨菜籽油进行了比较。结果表明:磷脂酶Lecitase Ultra和磷脂酶C对冷榨菜籽油进行酶法脱胶的最佳工艺条件为磷脂酶Lecitase Ultra添加量33 mg/kg,磷酯酶Lectase Ultra反应时间90 min,磷脂酶C添加量65 mg/kg,磷脂酶C反应时间60 min,加水量33 mL/kg,柠檬酸溶液添加量1.2 mL/kg;在优化条件下脱胶,脱胶油中磷脂含量为2.3 mg/kg,脱胶油的过氧化值和酸值均达到一级压榨菜籽油的国家标准。综上,磷脂酶Lecitase Ultra和磷脂酶C复合脱胶效果较好,所优化的工艺条件可用于菜籽油的脱胶。

摘要： 为了避免传统脱胶方式引起的化学品消耗大、水耗高,而且脱胶油得率低、残磷量高等问题,以大豆原油为原料,采用磷脂酶C对其进行酶法脱胶,考察加酶量、柠檬酸添加量、脱胶温度和脱胶时间对磷脂脱除和脱胶油得率的影响。结果表明,磷脂酶C脱胶的最佳反应条件为0.45 g/mL柠檬酸添加量0.15 mL(100 g原油)、加酶量40 mg/100 g(以油质量计)、脱胶温度50°C、脱胶时间4 h。在最佳条件下,磷脂酶C脱胶油中含磷量降至1.00 mg/kg。酶法脱胶油的脂肪酸组成和各脂肪酸相对含量与大豆原油相比无显著差异。与酸化脱胶相比,酶法脱胶油的得率无显著差异,油中甘一酯和甘二酯相对含量分别增加了0.49、1.15百分点,甘三酯相对含量减少了2.28百分点,油脚中磷脂的组成及各组分相对含量无变化。

摘要： 磷脂酶C(phospholipase C,PLC)广泛参与植物的生命活动和代谢过程,在抵御真菌感染的过程中发挥重要作用.本研究基于非洲菊转录组测序数据,鉴定出13个非洲菊PLC基因家族成员,其中NPC有3个,PI-PLC有10个.非洲菊PLC的蛋白序列长度在98～594 aa之间,蛋白理论分子量为11410.25～67998.85 kDa,等电点为4.74～9.59,均为不稳定亲水蛋白.亚细胞定位预测结果显示,13个成员分别定位于细胞壁、细胞膜、细胞质、叶绿体和细胞核中,表明不同成员功能上可能存在多样性.进化树分析表明,13个非洲菊PLC蛋白可分为2个亚组,进化关系较近的蛋白结构组成相似.非洲菊PLC家族成员在拟南芥中的同源蛋白PLC2、PLC4、AT2G40116可相互作用.非洲菊转录组的FPKM值分析表明,GjPLC2、GjPLC3、GjPLC8、GjPLC10在非洲菊中表达量高,感病植株中变化大,可能在抵御真菌感染过程中发挥重要作用.研究结果可为进一步研究非洲菊PLC基因的生物学功能提供依据.

摘要： 为进一步研究磷脂酶C(phospholipase C)的性质,以一株实验室前期验证的产磷脂酶C铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的染色体为模板,扩增得到磷脂酶C的编码基因PAplc。构建重组大肠杆菌表达质粒pET28a-PAplc,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。SDS-PAGE分析发现,重组PAplc蛋白主要以包涵体形式出现,分子量8.5×10^(4)。以直接稀释法复性,蛋白回收率27.5%,纯度大于98%。以p-NPPC法测得重组PAplc比酶活为63.79 U/mg,最适反应温度为60°C,最适反应pH为7.5;温度低于50°C、pH为7.0~9.0时重组PAplc比较稳定。Zn^(2+)、Cu^(2+)和Co^(2+)对重组PAplc酶活有明显的抑制作用;低浓度Mg^(2+)、Ca^(2+)、Mn^(2+)对其酶活有促进作用。

摘要： 研究太瑞斯梭孢壳霉(Thielavia terrestris)磷脂酶C为核心的玉米胚芽油酶法脱胶工艺.以玉米油磷含量为评价指标,分别研究磷脂酶C添加量、氢氧化钠(NaOH)和柠檬酸体积比、反应温度、反应时间等4个因素对玉米胚芽油酶法脱胶效果的影响.结果表明:玉米胚芽油酶法脱胶最佳工艺条件为磷脂酶C加酶量5000 U/kg,NaOH和柠檬酸的体积比为4,反应温度为35°C,酶解时间为1 h.在该最优条件下,玉米胚芽油磷含量由最初102.7 mg/kg降低至24.0 mg/kg,水解率为76.6％.

摘要： 磷脂酶C(phospholipase C,PLC)是参与脂质和Ca2+依赖信号通路的重要调节酶,它能将磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2)水解生成2个重要的第二信使分子:脂类的二酰甘油和可溶性分子肌醇1,4,5-三磷酸.磷脂酶C根据其水解磷脂的底物不同,可分为磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C和非特异性磷脂酶C.植物PLC基因通过调控各种信号途径,从而在植物的非生物胁迫(渗透胁迫、低温胁迫、干旱胁迫等)以及生物胁迫的应答过程中具有重要作用.综述了植物磷脂酶C分类、结构、生化特性和生理功能,并对相关领域的研究方向进行了展望.

摘要： 目的 探讨DNA甲基化修饰在口腔白斑癌变中的作用.方法 选取40例口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织和28例口腔白斑(oral leukoplakia,OLK)组织以及40例健康口腔黏膜组织进行DNA甲基化检测.下载GEO(Gene Expression Omnibus)数据库中OSCC、OLK和健康口腔黏膜的表达谱数据.分别对DNA甲基化数据和表达谱数据进行重复性比对,对DNA甲基化数据进行差异分析以及对相应表达谱数据进行IPA分析(Ingenuity Pathway Analysis).结果 数据分析结果显示DNA甲基化具有更大的灵活性和不稳定性.IPA通路分析表明,OLK差异甲基化位点相关基因主要富集在细胞运动和分化过程.OS-CC差异甲基化位点相关基因主要富集在细胞增殖、迁移、氧化调节、抗凋亡等过程.OLK和OSCC差异甲基化位点相关基因共同富集于磷酸肌醇代谢过程和磷脂酶C信号通路.结论 DNA甲基化改变参与口腔鳞癌形成,磷酸肌醇代谢激活可能促使口腔白斑癌变.

摘要： 为进一步研究磷脂酶C(phospholipase C)的性质,以一株实验室前期验证的产磷脂酶C铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的染色体为模板,扩增得到磷脂酶C的编码基因PAplc.构建重组大肠杆菌表达质粒pET28a-PAplc,并转化大肠杆菌BL21(DE3).SDS-PAGE分析发现,重组PAplc蛋白主要以包涵体形式出现,分子量8.5×104.以直接稀释法复性,蛋白回收率27.5％,纯度大于98％.以p-NPPC法测得重组PAplc比酶活为63.79 U/mg,最适反应温度为60°C,最适反应pH为7.5;温度低于50°C、pH为7.0～9.0时重组PAplc比较稳定.Zn2+、Cu2+和Co2+对重组PAplc酶活有明显的抑制作用;低浓度Mg2+、Ca2+、Mn2+对其酶活有促进作用.

摘要： 选取米曲霉磷脂酶C(PLC)对葵花籽油进行酶法脱胶.采用单因素试验分别研究了混合体系pH、酶解温度、酶解时间、加酶量和柠檬酸质量分数对葵花籽油酶法脱胶效果的影响.结果表明,葵花籽油酶法脱胶的最佳工艺条件为:混合体系pH 7.5,酶解温度25°C,酶解时间3 h,加酶量5000 U/kg,柠檬酸质量分数20％(添加量0.1％).在最佳工艺条件下,葵花籽油磷含量从55.8 mg/kg降至8.2 mg/kg,脱胶率为85.3％,达到植物油工业精炼要求(磷含量≤10 mg/kg).

摘要： 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C对细胞功能起关键作用.PLC水解磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2),在配体介导的信号转导中产生肌醇-1,4,5-三磷酸(IP3)和二酰基甘油(DAG).PLC同工酶在多种组织中分布广泛，调节细胞功能.PLC亚型同工酶参与GPCR介导的信号转导。PLCγ亚型通过多种生长因子与受体酪氨酸激酶(RTK)的结合被激活。对PLC条件基因敲除小鼠的研究不仅有助于了解PLC的细胞特异性功能，而且有助于了解其病理生理作用。

摘要： 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C对细胞功能起关键作用.PLC水解磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2),在配体介导的信号转导中产生肌醇-1,4,5-三磷酸(IP3)和二酰基甘油(DAG).PLC同工酶在多种组织中分布广泛，调节细胞功能.PLC亚型同工酶参与GPCR介导的信号转导。PLCγ亚型通过多种生长因子与受体酪氨酸激酶(RTK)的结合被激活。对PLC条件基因敲除小鼠的研究不仅有助于了解PLC的细胞特异性功能，而且有助于了解其病理生理作用。

摘要： 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C对细胞功能起关键作用.PLC水解磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2),在配体介导的信号转导中产生肌醇-1,4,5-三磷酸(IP3)和二酰基甘油(DAG).PLC同工酶在多种组织中分布广泛，调节细胞功能.PLC亚型同工酶参与GPCR介导的信号转导。PLCγ亚型通过多种生长因子与受体酪氨酸激酶(RTK)的结合被激活。对PLC条件基因敲除小鼠的研究不仅有助于了解PLC的细胞特异性功能，而且有助于了解其病理生理作用。

摘要： 与传统脱胶方法相比,经过多年发展,酶法脱胶已具备节能减排、减少杂质流入下游、环境友好、适应性强等诸多优点.在国内外研究中,目前较为热门的运用于大豆油酶法脱胶的磷脂酶主要有磷脂酶A1和磷脂酶C.最早应用于油脂脱胶的磷脂酶A2由于生产成本较高、需要Ca2+作为激活剂等一系列原因,目前的进一步研究报道较少.本文主要将介绍磷脂酶A1(Lecitase(R)Novo/Lecitase(R)Ultra)和磷脂酶C在植物油酶法脱胶中的研究现状以及大豆毛油品质对酶法脱胶的潜在影响,以期进一步推动酶法脱胶在油脂脱胶生产中的应用.

摘要： 与传统脱胶方法相比,经过多年发展,酶法脱胶已具备节能减排、减少杂质流入下游、环境友好、适应性强等诸多优点.在国内外研究中,目前较为热门的运用于大豆油酶法脱胶的磷脂酶主要有磷脂酶A1和磷脂酶C.最早应用于油脂脱胶的磷脂酶A2由于生产成本较高、需要Ca2+作为激活剂等一系列原因,目前的进一步研究报道较少.本文主要将介绍磷脂酶A1(Lecitase(R)Novo/Lecitase(R)Ultra)和磷脂酶C在植物油酶法脱胶中的研究现状以及大豆毛油品质对酶法脱胶的潜在影响,以期进一步推动酶法脱胶在油脂脱胶生产中的应用.

摘要： 与传统脱胶方法相比,经过多年发展,酶法脱胶已具备节能减排、减少杂质流入下游、环境友好、适应性强等诸多优点.在国内外研究中,目前较为热门的运用于大豆油酶法脱胶的磷脂酶主要有磷脂酶A1和磷脂酶C.最早应用于油脂脱胶的磷脂酶A2由于生产成本较高、需要Ca2+作为激活剂等一系列原因,目前的进一步研究报道较少.本文主要将介绍磷脂酶A1(Lecitase(R)Novo/Lecitase(R)Ultra)和磷脂酶C在植物油酶法脱胶中的研究现状以及大豆毛油品质对酶法脱胶的潜在影响,以期进一步推动酶法脱胶在油脂脱胶生产中的应用.

摘要： 与传统脱胶方法相比,经过多年发展,酶法脱胶已具备节能减排、减少杂质流入下游、环境友好、适应性强等诸多优点.在国内外研究中,目前较为热门的运用于大豆油酶法脱胶的磷脂酶主要有磷脂酶A1和磷脂酶C.最早应用于油脂脱胶的磷脂酶A2由于生产成本较高、需要Ca2+作为激活剂等一系列原因,目前的进一步研究报道较少.本文主要将介绍磷脂酶A1(Lecitase(R)Novo/Lecitase(R)Ultra)和磷脂酶C在植物油酶法脱胶中的研究现状以及大豆毛油品质对酶法脱胶的潜在影响,以期进一步推动酶法脱胶在油脂脱胶生产中的应用.

摘要： 将磷脂酶C用于食用油脱胶是一种新型工艺,用于羊油脱胶中又可以很好地保留其风味.通过小样试验发现加酶量、反应温度及加水量对磷脂酶C用于羊油脱胶效果的影响较大,对这三个因素分别进行单因素实验,在单因素实验的基础上,采用响应曲面法(RSM)优化制备工艺条件,结果表明,影响磷脂酶C用于羊油脱胶效果的主要因素主次关系为:加酶量＞反应温度＞加水量,最佳工艺条件为:加酶量80mL/kg,反应温度46°C,加水量60.50mL/kg.在此条件下得到的脱胶羊油中磷脂含量为82.68mg/kg.为羊油的脱胶精炼及磷脂酶C用于动物油的脱胶提供了一定的理论参考.

摘要： 将磷脂酶C用于食用油脱胶是一种新型工艺,用于羊油脱胶中又可以很好地保留其风味.通过小样试验发现加酶量、反应温度及加水量对磷脂酶C用于羊油脱胶效果的影响较大,对这三个因素分别进行单因素实验,在单因素实验的基础上,采用响应曲面法(RSM)优化制备工艺条件,结果表明,影响磷脂酶C用于羊油脱胶效果的主要因素主次关系为:加酶量＞反应温度＞加水量,最佳工艺条件为:加酶量80mL/kg,反应温度46°C,加水量60.50mL/kg.在此条件下得到的脱胶羊油中磷脂含量为82.68mg/kg.为羊油的脱胶精炼及磷脂酶C用于动物油的脱胶提供了一定的理论参考.

摘要： 将磷脂酶C用于食用油脱胶是一种新型工艺,用于羊油脱胶中又可以很好地保留其风味.通过小样试验发现加酶量、反应温度及加水量对磷脂酶C用于羊油脱胶效果的影响较大,对这三个因素分别进行单因素实验,在单因素实验的基础上,采用响应曲面法(RSM)优化制备工艺条件,结果表明,影响磷脂酶C用于羊油脱胶效果的主要因素主次关系为:加酶量＞反应温度＞加水量,最佳工艺条件为:加酶量80mL/kg,反应温度46°C,加水量60.50mL/kg.在此条件下得到的脱胶羊油中磷脂含量为82.68mg/kg.为羊油的脱胶精炼及磷脂酶C用于动物油的脱胶提供了一定的理论参考.

摘要： 本发明提供了具有磷脂酶活性的新型多肽，编码它们的核酸和与它们结合的抗体，所述磷脂酶活性包括，例如，磷脂酶A、B、C和D活性，马铃薯块茎蛋白活性，磷脂酸磷酸酶(PAP)和/或脂酰水解酶(LAH)活性。也提供包括应用这些磷脂酶的工业方法，如，油脱胶，以及包括应用这些磷脂酶的产品。

摘要： 本发明提供了一株表达磷脂酶C的菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.8499。利用本发明所提供菌株和制备方法制备所得的磷脂酶C可以用于油脂精炼，脱胶效果良好，可以广泛应用于油脂精炼、添加剂、医药等领域。

摘要： 本发明提供了一种分离的表达磷脂酶C的地衣芽孢杆菌菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.7878。利用本发明所提供菌株和制备方法制备所得的磷脂酶C可以用于油脂精炼，脱胶效果良好，可以广泛应用于油脂精炼、添加剂、医药等领域。

摘要： 本发明提供了一种分离的表达磷脂酶C的短小芽孢杆菌菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.7879。利用本发明所提供菌株和制备方法制备所得的磷脂酶C可以用于油脂精炼，脱胶效果良好，可以广泛应用于油脂精炼、添加剂、医药等领域。

摘要： 本发明提供分离的、合成的或重组的核酸，由所述核酸编码的多肽，以及它们的应用。所述核酸包括本发明所述的核酸序列，编码具有磷脂酶活性的多肽。所述磷脂酶活性包括磷脂酶A、B、C和D活性，马铃薯块茎储藏蛋白活性，以及脂酰水解酶活性。一方面，所述核酸编码缺少天然前导(信号)序列的磷脂酶。另一方面，所述核酸还包括异源核苷酸序列。该异源核苷酸序列编码前导(信号)序列或催化结构域。所述前导(信号)序列或催化结构域包括磷脂酶前导(信号)序列或催化结构域，或非磷脂酶前导(信号)序列或催化结构，或酵母前导(信号)序列。

摘要： 本发明提供了具有磷脂酶活性的新型多肽，编码它们的核酸和与它们结合的抗体，所述磷脂酶活性包括，例如，磷脂酶A、B、C和D活性，马铃薯块茎蛋白活性，磷脂酸磷酸酶(PAP)和/或脂酰水解酶(LAH)活性。也提供包括应用这些磷脂酶的工业方法，如，油脱胶，以及包括应用这些磷脂酶的产品。

摘要： 本发明提供具有磷脂酶活性，包括，例如，磷脂酶A、B、C和D活性，马铃薯块茎储藏蛋白活性，脂酰水解酶(LAH)活性的新型多肽，编码它们的核酸和结合它们的抗体。也提供包括应用这些磷脂酶的工业方法，如，油脱胶，以及包括应用这些磷脂酶的产品。

摘要： 本发明提供了一种具有溶血磷脂酶和/或磷脂酶活力的蛋白。本发明提供的蛋白具有与SEQ ID NO：3、4、5、6或19所示序列，或与SEQ ID NO：3、4、5、6或19所示序列具有至少90％同源性，且所述蛋白源自黑曲霉。本发明的蛋白不仅可以作为磷脂酶和/或溶血磷脂酶，而且，还可以用于同时需要磷脂酶和溶血磷脂酶的应用，例如，可以应用于L‑α‑甘油磷酸胆碱的制备。

摘要： 本发明公开了一种肉桂链霉菌产磷脂酶D的方法及磷脂酶D活性测定方法，属于食品生物技术领域。本发明通过筛选获得一株高产磷脂酶D的链霉菌，分类命名为肉桂链霉菌SP.005，保藏编号为CCTCC M 2019558。通过对该肉桂链霉菌进行斜面、种子、发酵三级培养，并在此条件下，生产磷脂酶D酶，经酶活测定方法，其酶活可达15.66U/mL以上，最后将发酵液经分离纯化制得磷脂酶D酶粉。该生产工艺不仅有效地提高了产量，且所生产出的磷脂酶D具有较高的磷酰基转移活性，可用于进行磷脂酰丝氨酸的高效生产。

摘要： 本发明公开了一种磷脂酶D的生产工艺以及磷脂酶D制品，涉及酶制剂领域。本发明提供的磷脂酶D的生产工艺采用含有葡萄糖4.5‑5.5g/L、蛋白胨4.5‑5.5g/L、酵母浸粉4.5‑5.5g/L、柠檬酸三钠4.5‑5.5g/L、KH2PO4 1.8‑2.2g/L以及MgSO4 0.48‑0.52g/L，pH6.8‑7.2的发酵培养液对链霉菌属菌株进行发酵培养生产磷脂酶D，该生产工艺通过发酵环节的液体发酵培养基和发酵参数进行优化配置，得到链霉菌属菌株发酵的最佳条件，该生产工艺不仅有效地提高了产量，且所生产出的磷脂酶D具有较高的酶活性。