睾丸发育

摘要： 旨在克隆犏牛蛋白磷酸酶1调节亚基11(protein phosphatase 1 regulatory subunit 11,PPP1R11)基因,分析其在不同发育阶段睾丸中的表达与定位,为解析其在雄性生殖中的功能机制提供理论依据。本研究采集成年犏牛睾丸、附睾、心、肝、脾、肺、肾、大肠、小肠、胃、肌肉和脂肪组织(n=3),犏牛和牦牛在胎牛时期(5~6月龄)、幼年时期(1~2岁)和成年时期(3~4岁)睾丸(n=3)作为试验材料。通过RT-PCR技术克隆犏牛PPP1R11基因并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)构建PPP1R11基因在犏牛不同组织中的表达谱,比较分析PPP1R11在犏牛和牦牛不同时期睾丸中的表达,利用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)技术检测PPP1R11蛋白的细胞定位和表达。结果显示,犏牛PPP1R11基因CDS区为324 bp,编码107个氨基酸,犏牛PPP1R11蛋白与其他哺乳动物同源性较高;PPP1R11可与PPP1R2、PPP1R7、PPP1CB和UTP20等蛋白相互作用,互作蛋白功能主要与蛋白质的磷酸化相关,参与调控睾丸发育、精子发生和性成熟等生物学过程。PPP1R11在犏牛组织中广泛表达,其中在睾丸组织中的表达量最高,相对表达水平极显著高于其它组织(P<0.01);该基因在犏牛睾丸中的表达量随年龄增长呈上升趋势,幼年和成年时期犏牛睾丸中PPP1R11的表达与同时期牦牛相比差异极显著(P<0.01);IHC染色结果发现,PPP1R11蛋白在犏牛精原细胞和支持细胞中低表达并与牦牛存在显著差异,雄性犏牛初级精母细胞数量减少并且减数分裂阻滞于此。本研究表明,犏牛与牦牛PPP1R11在睾丸中存在时空表达差异,提示该基因可能与犏牛雄性不育相关,其具体作用机制有待进一步研究。

摘要： 目的探究转录因子Jun在小鼠睾丸发育过程中的表达模式。方法采用半定量PCR和免疫印迹方法检测Jun在小鼠睾丸发育过程中的表达模式,采用免疫荧光染色方法观察Jun在成年小鼠睾丸生精上皮周期中的定位。结果半定量PCR和免疫印迹结果显示,Jun在小鼠出生6 d后的睾丸中已有表达,在第8 d达到峰值,之后随着睾丸发育其表达量逐渐下降。免疫荧光染色结果发现Jun在生精上皮各期与睾丸支持细胞细胞核的标志物SOX9均存在共定位,其在Ⅰ-Ⅶ期的支持细胞核中表达水平较低,Ⅷ-Ⅹ期支持细胞核中表达水平显著升高,进入Ⅺ-Ⅻ期后水平又下降;此外Jun在生精上皮Ⅷ期开始表达于精原细胞细胞核中,并一直持续到Ⅻ期。结论Jun在小鼠睾丸发育早期即开始表达,在成年小Ⅺ鼠睾丸中主要定位于支持细胞与精原细胞的胞核中,提示其可能对于睾丸支持细胞发挥正常功能和维持精原细胞增殖分化具有重要作用。

摘要： 【目的】试验旨在从代谢组学角度探究关中奶山羊睾丸发育代谢机制。【方法】选择1月龄断奶雄性关中奶山羊和24月龄体成熟的雄性关中奶山羊各6只,采集睾丸组织,使用液相色谱-质谱(LC-MS)技术对睾丸组织进行化学检测,通过多维和单维分析相结合的方式对两组不同代谢物进行化学检测、对比与鉴别,通过富集差异代谢物分析筛选关中奶山羊发育代谢中的潜在关键通路。【结果】在1和24月龄关中奶山羊睾丸组织中共筛选出334个差异代谢物,其中显著上调137个,显著下调197个。对前36个差异代谢物进行比较鉴定发现,分别为脂质和类脂质分子、有机酸及其衍生物、未分类化合物和苯丙烷和聚酮化合物四大类。经相关性分析发现,在1和24月龄关中奶山羊睾丸发育过程中,脂质和类脂质分子与甘油磷脂呈最大正相关,羧基及其衍生物与甘油磷脂呈最大负相关。对不同的代谢物进行富集分析,筛选出7条潜在的重要代谢通路,分别为肿瘤中的胆碱代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、肿瘤中的中心碳代谢、铁死亡、谷胱甘肽代谢、氨酰-tRNA生物组成以及牛磺酸和亚牛磺酸代谢。【结论】本试验从代谢组学角度揭示了1和24月龄关中奶山羊睾丸的差异代谢物及代谢机制,为今后哺乳动物睾丸的发育研究奠定了基础。

摘要： 睾丸是雄性哺乳动物的生殖器官,其基本功能是产生精子和分泌雄激素。生产实际中睾丸大小可以作为家畜早期育种选择的有效途径。本文就睾丸发育过程进行简单阐述,此外,对睾丸大小生殖生物学意义进行阐述,以期为后期家畜育种提供有效的理论依据。

摘要： 目的 比较腹腔镜下疝囊高位结扎术与开放术式对小儿腹股沟斜疝术后睾丸发育情况及预后的影响.方法 选取2015年1月～2018年12月惠州市第一妇幼保健院收治的300例腹股沟斜疝患儿作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组(150例)与观察组(150例).观察组采用腹腔镜疝囊高位结扎术,对照组采用开放手术.比较两组的临床指标、睾丸体积、并发症发生情况、疾病复发情况.结果 观察组住院时间及手术时间短于对照组,住院费用高于对照组,术中出血量少于对照组,差异有统计学意义(P0.05);术后,观察组患侧睾丸体积大于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组的阴囊水肿、睾丸萎缩、患侧精索静脉曲张及复发率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 与开放术式相比,小儿腹股沟斜疝患者采用腹腔镜疝囊高位结扎术的创伤较小,利于患儿术后恢复,术后复发少,并不会对患儿的睾丸发育造成影响.

摘要： 目的 探究沉默信息调节因子1(SIRT1)在小鼠生殖细胞发育中的功能.方法 利用Cre-LoxP系统构建SIRT1雄性生殖细胞特异性敲除小鼠模型,所有小鼠均为C57BL/6背景.提取对照组(Con)小鼠和SIRT1雄性生殖细胞特异性敲除(cKO)小鼠睾丸总RNA,进行转录组测序分析.两组间比较采用t检验.结果 cKO小鼠睾丸组织SIRT1信使RNA水平(0.14±0.04)低于Con组(1.32±0.09),差异有统计学意义(t=26.144,P＜0.01).cKO小鼠睾丸组织SIRT1蛋白水平(0.28 ±0.05)低于Con组(1.01±0.06),差异有统计学意义(t=19.705,P＜0.01).转录组测序筛选出差异表达基因3816个,基因本体(GO)功能富集分析显示,差异表达基因显著富集于转录调控、精子发生及精子活力等生物学功能;京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析显示,差异表达基因主要涉及信号通路包括细胞因子-细胞因子受体相互作用、转化生长因子-β(TGF-β)信号通路、补体等.结论 雄性生殖细胞特异性SIRT1敲除,导致小鼠睾丸中与精子发生、精子活力及转录调控相关关键基因表达发生变化,影响小鼠生育力.

摘要： 睾丸来源于肾体内侧的性腺始基,妊娠6~7周时睾丸开始形成,4个月时逐渐成熟,开始自后腹膜向骨盆方向下降,多在出生时或出生后6月内下降至阴囊。阴囊能随外界温度变化收缩、舒张,进而调节其温度,保障睾丸的发育和生产精子能力。隐睾是指患者一侧或双侧睾丸未能按照正常发育过程从腰部腹膜后下降至同侧阴囊内,又称睾丸下降不全,是小儿最常见的男性生殖系统先天性疾病之一。由于缺乏阴囊的温度调节作用,睾丸发育差、影响睾丸生产精子能力,还影响患者的心理。而且,隐睾容易发生扭转及损伤,甚至有癌变可能。

摘要： 旨在探究双酚A (BPA)对子代雄鼠睾丸发育的影响.本研究将8周龄体重18～22 g的SPF级母鼠随机分为7组,每组4个重复,每个重复5只,A组每天给予普通蒸馏水,B组每天饮水给予0.05 mg· kg-1 BPA,C组每天饮水给予0.5 mg· kg-1 BPA组,D组每天饮水给予5 mg· kg-1 BPA,E组每天饮水给予10 mg·kg-1 BPA,F组每天饮水给予20 mg·kg-1 BPA,G组每天饮水给予50 mg· kg-1 BPA.F0代母鼠自怀孕起直至F1代子鼠断奶止饮水染毒BPA,F1代雄鼠于断奶(21日龄)处死.ELISA结果显示,母鼠染毒BPA剂量5 mg·kg-1以上时,子代血清和睾丸组织BPA含量显著增加(P＜0.05).睾丸器官指数测定结果证明,染毒BPA剂量大于等于20 mg·kg-1可导致子代雄鼠睾丸指数显著增大(P＜0.05).H&E染色显示,母鼠染毒BPA剂量大于等于10 mg·kg-1可导致睾丸生精小管萎缩,小管间隙变大.彗星试验结果证明,染毒BPA大于等于5 mg· kg-1可使子代睾丸细胞核DNA损伤显著上升(P＜0.05).免疫组化结果显示,母鼠染毒BPA剂量大于等于20 mg· kg-1时子代睾丸雄激素受体(AR)表达量显著减少(P＜0.05).转录组测序结果显示,母鼠染毒50 mg·kg-1BPA后子代雄鼠睾丸剪切体代谢通路U5 snRNA亚基编码基因Snrnp40上调,剪切体通用蛋白组件编码基因Hnrnpu下调,导致mRNA转录后修饰第一步受阻,荧光定量PCR结果与转录组测序结果一致,证实了转录组结果.结果表明,母鼠暴露于低剂量BPA可以引起子代睾丸发育异常,其分子机制可能与剪切体进行mRNA转录后修饰第一步反应受阻有关.

摘要： 为了阐明半番鸭性腺发育特征及Dmrtl在鸭性腺中的表达模式,利用HE染色比较半番鸭、番鸭、白改鸭胚胎期性腺不同发育阶段的组织形态特征,利用TUNEL试剂盒检测半番鸭、番鸭、白改鸭不同发育阶段胚胎期细胞凋亡情况,利用定量PCR分析Dmrt1在半番鸭、番鸭、白改鸭不同发育阶段胚胎期的表达,利用HE染色观察成年半番鸭睾丸的发育情况及睾丸的组织结构特征,IHC检测SSEA-1和Dmrt1蛋白在成年半番鸭睾丸中的表达.结果表明:半番鸭胚胎发育至1/2时期时半番鸭睾丸和卵巢结构出现异常,半番鸭、番鸭、白改鸭胚胎发育不同阶段单位面积性腺中细胞凋亡没有可比性,胚胎发育至1/2时半番鸭、番鸭、白改鸭雄性性腺中Dmrt1的表达达到最高值,显著高于雌性性腺中的表达(P＜0.05),之后Dmrt1在胚胎性腺中的表达下降.成年半番鸭睾丸发育异常,个体差异较大,所有个体睾丸占体重比例均低于3％,左右两侧睾丸组织形态结构基本一致.左右侧睾丸间质细胞组织和曲精细管依稀可见,曲精细管之间相隔很近,数目很多,每个曲细精管切面面积较小,发育不充分,间质细胞较少,曲精细管之内有单层细胞排列或多层细胞充满管腔,睾丸中未见成熟的精子.SSEA-1主要表达于精原细胞.DMRT1在不同半番鸭睾丸间质细胞中均未见表达,DMRT1主要表达部位集中于曲精细管精原细胞的细胞核.根据研究结果,推测半番鸭孵化1/4至1/2胚胎期时性腺发育处于关键时期.Dmrt1在半番鸭、番鸭、白改鸭1/2胚胎期时性腺发育中起重要作用.Dmrtl能促进成年半番鸭睾丸发育.

摘要： 9只杂交公羔羊随机分为3组,组1饲喂基础日粮,组2每天在基础日粮中添加50mgDL-α-生育酚乙酸酯,组3在试验期第一天日粮中一次性添加4500mgDL-α-生育酚乙酸酯.试验期共90天,比较维生素E不同添加方式对公羊睾丸发育的影响.结果显示,各组睾丸重量差异不显著(P＞0.05);组2曲细精管直径显著高于组1(P＜0.05),精原细胞数密度极显著高于组1和组3(P＜0.01),而精母细胞、支持细胞和间质细胞数密度各组间无显著差异(P＞0.05).

摘要： 本研究以健康成年小鼠为研究对象，探讨低剂量三丁基锡暴露对性别决定基因表达和性激素水平的影响。健康成年ICR雄性小鼠自由采食饮水，每日光照时间12h，饲养湿度45%-55%，饲养温度20-23°C。将成年小鼠随机分为溶剂对照组，TBT 1 mg/kg·bw暴露组，每组7只。小鼠正常饲养7d后，每三天经腹腔注射染毒，30 d后处死小鼠，取睾丸组织并制备血清。研究表明，低剂量的TBT暴露能够抑制雄性小鼠性腺的发育;同时，使血清中孕酮与雌二醇水平下降。另外，在本实验中，三丁基锡对小鼠性腺发育影响及雄性性别决定基因表达的遏制，为TBT导致哺乳动物性别发育障碍提出了新机制。

摘要： 精原干细胞移植有助于阐明雄性生殖干细胞和其在睾丸龛的生理功能，检查精子发生缺陷，纠正雄性不育和引入遗传改进雄性生殖系。本文主要介绍了幼鼠睾丸的发育特点及作为精原干细胞移植的受体制备方法。

摘要： 本研究旨在观察羊驼睾丸出生后发育和精子发生过程中细胞凋亡和凋亡相关蛋白Bcl2和Caspase3的定位。取材新生、12月龄和24月龄羊驼睾丸，用TUNEL法检测睾丸发育和精子发生过程的细胞凋亡、用免疫组织化学技术检测凋亡相关蛋白Bcl2和Caspase3在羊驼出生后发育和精子发生过程中的定位。结果显示新生羊驼睾丸未检测到TUNEL阳性细胞，Caspase3和Bcl2表达于问质细胞，提示在新生期凋亡蛋白参与间质细胞凋亡的调节，为曲精小管的发育提供空间;12月龄羊驼睾丸TUNEL阳性细胞定位于曲精小管中央部分，Caspase3和Bcl2定位于间质细胞和曲精小管中央生殖细胞，提示在青春期(12月龄)羊驼睾丸，细胞凋亡和凋亡相关蛋白参与曲精小管管腔形成的调节;24月龄羊驼睾丸TUNEL阳性细胞定位于精原细胞、精母细胞和精子细胞，Caspase3和Bcl2定位于间质细胞和各个发育阶段的生精细胞，Caspase3阳性细胞在精原细胞最高，向精母细胞和精子细胞逐渐减少，Bcl2在精原细胞弱阳性表达，在血睾屏障以内的曲精小管近腔室部分呈弥散性强阳性表达，提示在性成熟(24月龄)羊驼睾丸精子发生过程中，细胞凋亡主要发生于精原细胞和早期精母细胞，Bcl2可能抑制精母以后生殖细胞的凋亡。在羊驼睾丸出生后发育和精子发生过程中存在细胞凋亡现象;凋亡蛋白Caspase3和Bcl2参与羊驼睾丸发育和精子发生过程中细胞凋亡的调节。

摘要： 通过HE染色，光镜观测断奶后3月龄到6月龄羔羊曲精细管生殖上皮发育的组织形态，研究羔羊性成熟过程。结果显示：3月龄曲精细管内生殖母细胞排列疏松，染色效果不明显，多位于精细管中部;4月龄生殖母细胞开始附着在基膜，有分化的精母细胞形成，还有A型、B型精原细胞可见;5月龄各级精母细胞、精子大量可见，开始趋于性成熟;6月龄生殖细胞几乎全部附于基膜，间质细胞增多。

摘要： 以中国白色杜洛克×二花脸构建的资源家系F2代和F3代公猪群体为实验对象，系统研究了178头F2代90日龄和138头F3代60日龄公猪睾丸性状，以及206头F2代310日龄公猪的精液品质和睾丸性状。结果表明，该公猪群体中由于祖代遗传背景的不同，个体间各性状均有不同程度的分离。此外，通过F2代310日龄公猪睾丸重、附睾重、体重、生精小管直径、血液睾酮浓度、性欲及精液品质等性状间的相关性分析。为公猪育种和繁殖性状的QTL定位提供了重要参考。

摘要： 本文简要论述了通过对大鼠从青春期至性成熟期的高脂高热量饮食所引起的肥胖来观察肥胖对雄性大鼠睾丸发育及精子生成的影响。

摘要： 作者对高原鼠兔(Ochotona Curzoniae)在上海地区的若干繁殖特性作了观察.结果表明,鼠兔的精子畸形率较高(为11.64﹪),影响了其在上海低海拔地区的繁殖;非繁殖季节应用外源生殖激素对诱导雄性鼠兔的睾丸发育亦有一定的效果.作者还对高原鼠兔的睾丸发育状况等作了观察.

摘要： 影响精了产量的因素分为影响精子的发育与功能的因素。影响精子发育的因素主要出现在仔猪生命的前两个月，并且大部分刺激主要是增加支持细胞群体的数目。已有研究表明初生重、断奶前生长、人为驯化对精子产量具有显著而永久的影响。因此，在公猪出生之前给予好的条件将使养猪从业人员获得更多回报。影响精子功能的因素往往出现在青春期以后，并且大部分出现的因素都对支持细胞释放精了和精子在附睾中的成熟具有负效应的，这些因素既包括光周期、营养和环境温度等研究比较广泛的，也包括采精频率、饲养环境等研究的较少。所有的这些因素均可通过一些合理的方法去减少它们对精子产量的不利影响。

摘要： 本发明公开了一种咪达唑仑对体外培养的睾丸间质细胞发育影响的试验方法，包括培育大鼠、分离CD90阳性细胞、培育睾丸间质干细胞(SLC)、检测咪达唑仑对增殖和分化的影响、扩增SLCs并检测细胞活力、DAPI染色并计数、流式细胞仪分析细胞、睾酮(T)和孕酮(P4)分析、通过QPCR及WB实验进行mRNA及蛋白表达检测、通过SNK检验确定显著性差异并绘制图表。其步骤简单，可以有效验证咪达唑仑药物对睾丸间质干细胞的增殖和分化的影响。

摘要： 本发明公开了一种咪达唑仑对体外培养的睾丸间质细胞发育影响的试验方法，包括培育大鼠、分离CD90阳性细胞、培育睾丸间质干细胞(SLC)、检测咪达唑仑对增殖和分化的影响、扩增SLCs并检测细胞活力、DAPI染色并计数、流式细胞仪分析细胞、睾酮(T)和孕酮(P4)分析、通过QPCR及WB实验进行mRNA及蛋白表达检测、通过SNK检验确定显著性差异并绘制图表。其步骤简单，可以有效验证咪达唑仑药物对睾丸间质干细胞的增殖和分化的影响。

摘要： 本发明公开了一种促进公猪睾丸细胞增殖发育的复合添加剂及制备方法，通过精胺、亚精胺、β‑羟基‑β‑甲基丁酸、氮‑氨甲酰谷氨酸、胍基乙酸、辅酶Q10与玉米芯混合，加乙酰乙酸、丙酮酸和三酰甘油搅拌混合，制粒风干；取三酰甘油酯加入至丙酮中作为包衣液；进行包衣处理，制得微囊化包被颗粒；将谷氨酸、天门冬氨酸、葡萄糖、乳酸、棕榈酸、溶血性磷脂、花生四烯酸、原儿茶酸、25‑羟维生素D3逐级混合，加入制得的微囊化包被颗粒，加入玉米淀粉混合。本发明添加剂能有效促进公猪睾丸精源干细胞、支持细胞和间质细胞的增殖分化，促进睾丸的生精小管发育和睾丸的发育，进而提高公猪生殖细胞的生精能力，改善公猪精液品质和繁殖寿命。

摘要： 本发明属于人类基因组技术领域,所述的人睾丸发育特异性蛋白－19基因(testis development specific protein gene 19,NYD－SP19)基因全长cDNA序列为1501bp,其开放阅读框序列为1131bp,其编码376个氨基酸,该基因在基因库(Genbank)中的编号为AF367471。本发明利用NYD－SP19基因克隆制备融合蛋白,并用该蛋白免疫动物制备单克隆和多克隆抗体,同时将基因克隆用于睾丸特异功能基因表达芯片的制备。

摘要： 本发明属于人类基因组技术领域,所述的人睾丸发育特异性蛋白－18基因(testis development specific protein gene 18,NYD－SP18)基因全长cDNA序列为1613bp,其开放阅读框序列为1035bp,其编码344个氨基酸,该基因在基因库(Genbank)中的编号为AF367470。本发明利用NYD－SP18基因克隆制备融合蛋白,并用该蛋白免疫动物制备单克隆和多克隆抗体,同时将基因克隆用于睾丸特异功能基因表达芯片的制备。

摘要： 本发明属于人类基因组技术领域,所述的人睾丸发育特异性蛋白－20B基因(testis development specific protein gene 20B,NYD－SP20B)基因全长cDNA序列为1231bp,其开放阅读框序列为963bp,其编码320个氨基酸,该基因在基因库(Genbank)中的编号为AY032684。本发明利用NYD－SP20B基因克隆制备融合蛋白,并用该蛋白免疫动物制备单克隆和多克隆抗体,同时将基因克隆用于睾丸特异功能基因表达芯片的制备。

摘要： 本发明属于人类基因组技术领域,所述的人睾丸发育特异性蛋白－26基因(testis development specific protein gene 26,NYD－SP26)基因全长cDNA序列为1520bp,其开放阅读框序列为1188bp,其编码395个氨基酸,该基因在基因库(Genbank)中的编号为AF380838。本发明利用NYD－SP26基因克隆制备融合蛋白,并用该蛋白免疫动物制备单克隆和多克隆抗体,同时将基因克隆用于睾丸特异功能基因表达芯片的制备。

摘要： 本发明属于人类基因组技术领域,所述的人睾丸发育特异性蛋白－5基因(testis development specific protein gene 5,NYD－SP5)基因全长cDNA序列为3598bp,其开放阅读框序列为3084bp,其编码1027个氨基酸,该基因在基因库(Genbank)中的编号为AY014282。本发明利用NYD－SP5基因克隆制备融合蛋白,并用该蛋白免疫动物制备单克隆和多克隆抗体,同时将基因克隆用于睾丸特异功能基因表达芯片的制备。

摘要： 本发明属于人类基因组技术领域,所述的人睾丸发育特异性蛋白－27基因(testis development specific protein gene 27,NYD－SP27)基因全长cDNA序列为2132bp,其开放阅读框序列为1515bp,其编码504个氨基酸,该基因在基因库(Genbank)中的编号为AF035866。本发明利用NYD－SP27基因克隆制备融合蛋白,并用该蛋白免疫动物制备单克隆和多克隆抗体,同时将基因克隆用于睾丸特异功能基因表达芯片的制备。

摘要： 本发明属于人类基因组技术领域,所述的人睾丸发育特异性蛋白－20基因(testis development specific protein gene 20,NYD－SP20)基因全长cDNA序列为1365bp,其开放阅读框序列为1092bp,其编码363个氨基酸,该基因在基因库(Genbank)中的编号为AF367472。本发明利用NYD－SP20基因克隆制备融合蛋白,并用该蛋白免疫动物制备单克隆和多克隆抗体,同时将基因克隆用于睾丸特异功能基因表达芯片的制备。