生精细胞

摘要： 男性的生殖力是到了青春期以后开始发育的,睾丸的生精细胞逐渐成熟,产生正常的精子。男性不像女性有闭经,理论上讲,男性的生殖能力始终是存在的。现实中,也有80多岁有生育能力、生孩子的男性。总体而言,随着年龄的增长,男性生殖能力是逐渐下降的,而下列7个因素可改善男性生育力。1.体育锻炼。从整体上看,体育锻炼可以增强体质,提高免疫功能,提高人体的健康水平。同时,适当锻炼还可改善"睾丸环境",刺激精子生成,提高精子的质量。

摘要： 精液中生精细胞的异常脱落是睾丸生殖功能受损的直接反应和表现,通过精液细胞学分析能够观察生精细胞和精子发生、发展的各个阶段。如果生精细胞脱落的数量、比例及形态异常,将有可能引起睾丸生精功能障碍,导致不育。精液细胞学分析丰富了男性不育的检测手段,并从细胞水平进一步分析病因及潜在的危险因素,为男性不育的诊断和治疗拓宽了视野,提供了新的思路。本文从精液细胞学的研究现状、检测方法及临床意义进行综述,并从细胞形态学的视角探索精液细胞学在男性不育实验诊断中的应用价值。

摘要： 目的:构建尼古丁诱导的小鼠生精细胞体外损伤模型,探讨小鼠骨髓间质干细胞来源的胞外囊泡(mouse bone marrow mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles,mBMMSCs-EVs)对于小鼠GC-1生精细胞损伤的修复作用。方法:采用不同浓度尼古丁(0、8、16、32μg/mL)处理GC-1生精细胞24、48、72 h,通过MTT实验筛选尼古丁诱导GC-1生精细胞损伤的最适浓度和时间;将GC-1生精细胞分为对照组、尼古丁组、尼古丁+胞外囊泡组;通过MTT实验、Transwell实验和流式细胞术凋亡实验观察mBMMSCs-EVs干预前后受损生精细胞GC-1生物学特性的变化。结果:MTT实验结果表明,32μg/mL尼古丁作用GC-1生精细胞24 h时,细胞增殖能力明显降低(P<0.05),mBMMSCs-EVs作用于尼古丁预处理后,细胞增殖能力明显增高(P<0.05);与对照组相比,尼古丁组GC-1生精细胞迁移能力明显降低,细胞凋亡能力明显升高(P均<0.01),与尼古丁组相比,尼古丁+胞外囊泡组生精细胞增殖和迁移能力明显升高,细胞凋亡能力明显下降(P<0.01或<0.05)。结论:mBMMSCs-EVs可以逆转尼古丁引发的GC-1生精细胞增殖、迁移能力的损伤以及细胞凋亡。

摘要： 目的 探讨视黄酸(RA)通过miR-210对隐睾生精细胞增殖分化的影响。方法 使用氟他胺诱导隐睾小鼠模型,实验分为:正常对照组、氟他胺组、RA治疗组、miR-210敲降组、miR-210过表达组以及miR-210过表达+RA治疗组,每组各10只。使用RT-qPCR检测miR-210、C-kit和PLZF mRNA的表达水平。使用Western blot检测C-kit和PLZF的表达水平。结果 RA可显著上调隐睾组织中C-kit、PLZF mRNA和蛋白的表达水平,下调miR-210的表达水平。敲降miR-210可上调隐睾组织中C-kit、PLZF mRNA和蛋白表达水平,而过表达miR-210则具有相反的结果;同时,过表达miR-210+RA治疗可恢复过表达miR-210对C-kit和PLZF表达的抑制作用。结论 miR-210在隐睾组织中高表达,RA可通过下调miR-210的表达水平促进隐睾生精细胞增殖分化。

摘要： 目的探讨精液生精细胞形态学检查联合血清卵泡刺激素(FSH)水平检测在非梗阻性无精子症(NOA)患者睾丸显微取精术(M-TESE)中的应用价值。方法以2019年10月至2021年10月在该院生殖医学中心接受M-TESE的41例NOA患者为研究对象,采集精液标本进行生精细胞形态学检查和血清FSH水平检测。将精液生精细胞形态学检查检出生精细胞的患者作为阳性组,未检出生精细胞的患者作为阴性组;显微镜下找到成熟精子为M-TESE成功,未找到成熟精子为M-TESE未成功。分析两组患者的血清FSH水平和M-TESE的成功率。结果41例NOA患者中,阳性组18例,占43.9%;阴性组23例,占56.1%。M-TESE成功15例,未成功26例,总成功率为36.6%,其中阳性组M-TESE成功率为66.7%(12/18),阴性组M-TESE成功率为13.0%(3/23),两组的M-TESE成功率比较,差异有统计学意义(P<0.001)。阳性组血清FSH水平为(27.2±14.2)mIU/mL,阴性组为(39.3±15.0)mIU/mL,差异有统计学意义(P=0.012)。结论NOA患者精液生精细胞形态学检查联合血清FSH水平检测对M-TESE成功率有一定的预测作用。

摘要： 目的:比较改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法制作小鼠生精细胞减数分裂中期染色体标本的优劣.方法:选用8～12周龄雄性Balb/c小鼠,分别采用改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法进行减数分裂中期染色体制备,并用Giemsa染色.光镜下观察小鼠生精细胞减数分裂不同阶段分裂相细胞染色体形态并计数,计算各分裂相细胞的检出率.结果:体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法对生精细胞减数分裂中期染色体核型的检出率分别为10.37％和6.46％.秋水仙素处理小鼠的最适浓度是4 mg/kg,体内注射秋水仙素制备法制得的核型分裂相比空气干燥直接制备法多,直接制备法得到的染色体核型边缘清晰,更便于计数.结论:体内注射秋水仙素制备法的优势在于核型分裂相多,而空气干燥直接制备法的优势在于染色体核型边缘清晰,更便于计数,可根据不同实验需求进行选择.

摘要： 目的 探究茶多酚(TP)对精索静脉曲张(Vc)SD大鼠生精细胞凋亡及细胞色素c(Cyt-c)、波形蛋白表达的影响及机制.方法 将36只SD大鼠分为对照组、Vc组和Vc+TP组,每组12只.Vc组和Vc+TP组通过左肾静脉结扎构建精索静脉曲张模型,Vc+TP组大鼠给予茶多酚(40 mg/kg)灌胃,对照组和Vc组以等量生理盐水灌胃,连续4周.干预4周后取出大鼠睾丸组织,通过HE染色和TUNEL染色观察睾丸组织损伤和生精细胞凋亡情况,并检测茶多酚对氧化应激指标的影响.通过RT-qPCR和Western blot检测Cyt-c和波形蛋白表达.结果 HE染色结果显示,Vc组出现广泛的上皮损伤,Vc+TP组损伤情况明显轻于Vc组.Vc组凋亡指数高于对照组及Vc+TP组(P<0.05).Vc组丙二醛(MDA)水平高于对照组及Vc+TP组(P<0.05),而超氧化物歧化酶(SOD)水平低于对照组及Vc+TP组(P<0.05);Vc组波形蛋白mRNA和蛋白表达水平均低于对照组及Vc+TP组(P<0.05),而Cyt-c mRNA和蛋白表达水平均高于对照组及Vc+TP组(P<0.05).结论 茶多酚可通过抑制氧化应激反应保护线粒体功能并促进波形蛋白的表达,从而抑制生精细胞凋亡,减轻睾丸损伤,达到缓解精索静脉曲张的目的.

摘要： 目的 探究miR-125b靶向调控Bcl-2修饰因子(BMF)对生精细胞增殖的影响.方法 选取7日龄雄性昆明小鼠,分离得到生精细胞进行培养.将miR-NC、miR-125b mimic、miR-125b inhibitor分别转染至生精细胞中,将生精细胞分为三组.采用实时荧光定量PCR、Western blot检测各组miR-125b和BMF的表达水平,CCK-8实验检测各组生精细胞增殖能力.结果 miR-125b对BMF基因具有靶向调控作用;miR-125b mimic组miR-125b相对表达水平最高而BMF相对表达水平最低,miR-125b inhibitor组miRNA相对表达水平最低而BMF相对表达水平最高(P<0.05);miR-125b mimic组增殖能力最强而miR-125b inhibitor组增殖能力最弱(P<0.05).结论 miR-125b对BMF基因具有靶向调控作用,miR-125b靶向抑制BMF基因表达,促进生精细胞的增殖,对男性不孕不育治疗中的精子发育过程有积极意义.

摘要： 实验旨在观察太湖猪不同日龄睾丸组织的生长发育,探讨猪睾丸曲精细管的增长及生精细胞发育规律.选取60、90、310日龄正常个体、310日龄晚熟个体(每组30头)的太湖猪睾丸组织,制样片进行组织学观察并测量分析.结果显示:随着日龄增加,太湖猪睾丸曲细精管、精原细胞、初级精母细胞以及精子细胞直径均逐渐增加;其中90日龄的睾丸曲细精管直径较60日龄极显著增加,310日龄正常个体及310日龄晚熟个体的曲精细管直径、精原细胞直径、初级精母细胞直径以及精子细胞直径较前期阶段均极显著增加,且310日龄晚熟个体的各指标均低于310日龄正常个体.结果证明90～310日龄太湖猪公猪的睾丸生长发育较快,310日龄(晚熟个体)的睾丸增长速度较正常同龄个体慢,但仍呈增加趋势.

摘要： 目的 探索叉头相关的磷蛋白结合结构域1(Forkhead-associated phosphopeptide-binding domain 1,FHAD1)在雄性小鼠睾丸中的表达及功能.方法 购买不同周龄C57BL/6J雄性小鼠(包括0.5 d雄性5只,1周、2周、3周、4周、5周龄雄性小鼠各3只)以及成年C57BL/6J雌、雄性小鼠各3只.收集成年小鼠的心、肝脏、脾、肺、肾脏、脑、肌肉、肠、脂肪、卵巢以及各周龄雄性小鼠睾丸等组织,提取组织mRNA和蛋白.RT-PCR检测fhad1在成年小鼠不同脏器以及在不同周龄小鼠睾丸中mRNA表达情况;Western Blot法检测FHAD1在小鼠不同脏器以及不同周龄小鼠睾丸中的蛋白表达.密度梯度沉降法分选出成年雄鼠睾丸的支持细胞、间质细胞、精原干细胞、粗线期精母细胞和圆形精子细胞,RT-PCR检测fhad1在小鼠睾丸组织中各细胞的基因表达情况.运用RNA干扰技术,敲低GC-2细胞中fhad1的表达,Western Blot法检测FHAD1和DNA损伤标志物磷酸化的组蛋白(γH2AX)及磷酸化的DNA损伤修复关键蛋白(p-NBS1)的表达水平.结果 RT-PCR及Western Blot结果显示,fhad1 mRNA及FHAD1蛋白在雄性小鼠的睾丸中特异表达,从2周龄开始表达并持续至成年;不同时期生精细胞表达结果显示,fhad1 mRNA主要在粗线期精母细胞和圆形精子细胞中表达.RNA干扰实验结果表明,与阴性对照组相比,敲低FHAD1后GC-2细胞中γH2AX水平显著上升[(1.99±0.14)vs.(0.99±0.10)]、p-NBS1水平显著下降[(0.24±0.07)vs.(1.01±0.10)](P<0.001).结论 FHAD1为雄性小鼠睾丸特异蛋白,主要表达在粗线期的精母细胞以及圆形精子细胞中;下调FHAD1使GC-2细胞的DNA损伤增加,机制上可能与NBS1的磷酸化相关.

摘要： 目的:该文研究菟丝子黄酮对雷公藤多苷所致大鼠睾丸生精细胞凋亡及相关蛋白的影响及其机制.rn 方法:通过体外培养大鼠睾丸生精细胞,采用流式细胞仪检测雷公藤多苷、雷公藤多苷配伍菟丝子黄酮的含药血清对生精细胞凋亡的影响;采用western blot方法检测各组含药血清对生精细胞中SCF/c-kit、C-myc和CREM蛋白表达的影响.rn 结果:雷公藤多苷12mg/kg和9mg/kg剂量组均可显著增加生精细胞的凋亡率,使生精细胞中SCF/c-kit、C-myc和CREM蛋白表达显著降低;配伍菟丝子黄酮后,可显著改善雷公藤多苷对生精细胞凋亡的抑制作用;同时可显著增加雷公藤多苷对生精细胞中相关蛋白表达量的抑制作用.rn 结论:临床上可通过合理配伍菟丝子来改善雷公藤及相关制剂对生精细胞的损伤作用,增强雷公藤及相关制剂的疗效.

摘要： 目的：探讨通精灵对实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡与线粒体超微结构的影响以及其部分作用机制. 方法：雄性Wistar大鼠75只随机分为假手术组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组15只.制备大鼠精索静脉曲张模型,造模完成后4周开始给药,持续8周.观察大鼠的一般情况;Annexin V-FITC方法检测各组生精细胞凋亡;免疫组化检测Cyt-c蛋白表达;透射电镜观测各组生精细胞线粒体超微结构. 结果：与假手术组比较,模型组生精细胞凋亡率明显升高(P＜0.01).与模型组相比较,通精灵各组凋亡率均有下降,差异具有显著性(P＜0.01).Cyt-c在间质细胞和各级生精细胞的细胞质中可见棕黄色表达,以精母细胞较明显.与假手术组相比较,模型组Cyt-c表达升高(P＜0.01).与模型组比较,通精灵各组Cyt-c表达降低(P＜0.01).透射电镜结果显示模型组生精细胞线粒体数目减少,超微结构发生改变,线粒体损伤.通精灵各组线粒体存在不同程度的超微结构的改变,但改变程度与模型组相比较轻. 结论：精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡率明显升高,线粒体超微结构改变,线粒体损伤明显,生精细胞Cyt-c蛋白表达升高,通精灵可能是通过保护生精细胞线粒体超微结构,抑制生精细胞Cyt-c蛋白表达,从而调节线粒体途径引起的精索静脉曲张大鼠生精细胞过度凋亡.

摘要： 睾丸生精细胞凋亡,是发生在生理条件下的或者是由某些因素诱发而导致的细胞死亡,它是组织对各种不良刺激的反应,是一个连续、动态的,需要多基因参与的复杂过程.本文就指出通过大量研究证实,在精子生成过程中,各个阶段都会发生生精细胞的自发性凋亡,其中重点介绍了线粒体在细胞凋亡过程中的作用，并介绍了其他因素介导线粒体导致细胞凋亡的机制，其主要发生在3个阶段，即A型精原细胞的有丝分裂、精母细胞的减数分裂以及精子发生的过程.

摘要： 目的:通过观察知柏地黄汤对解脲支原体(UU)感染大鼠精液常规各项指标及生精细胞凋亡因子Cyt-c、AIF表达的影响,探讨UU感染导致不育症的病理机制及知柏地黄汤的干预作用.rn 方法:SPF级SD大鼠60只,随机抽取45只,经膀胱接种UU悬液,建立UU睾丸感染动物模型.剩余15只同步注射生理盐水作为正常对照组,于接种后的第7天取睾丸穿刺液运用培养法检测UU,判断造模成功否.造模成功后,UU感染模型大鼠再随机分成模型组、阿奇霉素组、知柏地黄汤组.治疗组分别给予相应药物灌胃,正常组、模型组给予相同剂量的生理盐水.以上各组均灌胃给药,每日一次,连续给药21d.处死大鼠后取睾丸附睾组织,采用机械分离法分离精子细胞,应用彩色精子动态检测系统进行精子运动参数测定,检测各组UU培养结果,生精细胞凋亡率,采用ELISA方法检测生精细胞凋亡因子Cyt-c、AIF表达水平.rn 结果:与正常组相比,UU感染模型组大鼠A级精子、B级精子、直线速度、平均速度均明显降低,UU培养阳性率、生精细胞凋亡率明显升高,生精细胞凋亡因子Cyt-c、AIF表达水平差异均有统计学意义(P＜0.01).经治疗后,与模型组比较,中药组和西药组UU培养阳性率降低,比较有统计学意义(P＜0.05),且中药组与西药组比较无统计学意义(P＞0.05),A级精子、B级精子、直线速度、曲线速度、平均速度水平提高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),且中药组在提高A级精子、B级精子、曲线速度、平均速度方面效果优于西药组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).两组Cyt-c、AIF表达水平亦明显降低(P＜0.01),但中药组与西药组比较无统计学意义(P＞0.05).rn 结论:UU感染可以降低大鼠精子活力,是诱发不育症的重要病理机制之一,知柏地黄汤不仅能有效抑制UU的生长、繁殖,具有抗UU作用,而且能通过下调大鼠生精细胞凋亡因子Cyt-c、AIF表达可能是知柏地黄汤治疗UU感染,提高大鼠精液质量的机制之一.

摘要： 目的:辛基酚具有类雌激素作用,对雄性动物有一定的生殖毒性,为了进一步评价辛基酚对雄性动物生精细胞精子发生过程的影响,在前期对青春期大鼠精子Igf2和Peg3印记基因DMR区CpG岛甲基化研究的基础上,从基因表达和蛋白水平检测了睾丸生精细胞中参与染色体重构的重要蛋白--组蛋白去乙酰基转移酶的变化,以探讨辛基酚对雄性动物生殖毒性的分子机制.rn 方法:取健康成年雄性大鼠60只，分4组，为辛基酚50mg/kg, 150mg/kg, 450mg/kg三个剂量组和生理盐水对照组，每组15只，连续灌胃染毒4周，最后一次给药后24小时处死动物，搜集分离精子，提取精子RNA，应用随机引物合成第一链cDNA，纯化定量，在相等模板的前提下PCR扩增，RT-PCR检测翠丸生精细胞组蛋白去乙酞基转移酶基因家族表达量的变化。根据基因家族表达量的变化结果，采用SDS-PAGE和Western检测HDAC4的变化。rn 结果:HDAC基因家族表达量的检测结果显示:与正常对照组比较，辛基酚150mg/kg,450mg/kg剂量组攀丸HDAC 1的表达量略有增高、HDAC4明显降低、50mg/kg剂量组均无明显变化;所有剂量组的HDAC2未能检出、HDAC3没有改变:针对辛基酚150mg/kg,450mg/kg剂量组翠丸HDAC4明显降低，SDS-PAGE和Western结果显示各剂量组的HDAC4均出现了90KD的剪接带，提示该蛋白在辛基酚的作用下被剪切。rn 结论:较高水平的辛基酚会干扰精子发生过程中的染色体重构，对雄性动物生殖细胞的形成有一定的毒性。

摘要： 目的:通过观察知柏地黄汤对解脲支原体(UU)感染大鼠精液常规各项指标及生精细胞TRPV1、TRPV5 mRNA和蛋白表达的影响,探讨UU感染导致不育症的病理机制及知柏地黄汤的干预作用.rn 方法:4～5月龄SD大鼠60只,随机抽取45只,经膀胱接种UU悬液,建立UU睾丸感染动物模型.剩余15只同步注射生理盐水作为正常对照组,于接种后的第7天取睾丸穿刺液运用培养法检测UU,判断造模成功否.造模成功后,UU感染模型大鼠再随机分成模型组、阿奇霉素组、知柏地黄丸组.知柏地黄丸组给药量为1g/kg·d(即1ml/d),阿奇霉素组给药量为0.105mg/kg·d(即1ml/d),正常组、模型组给予相同剂量的生理盐水.以上各组均灌胃给药,每日一次,连续给药21d.处死大鼠后取睾丸附睾组织,采用机械分离法分离精子细胞,应用彩色精子动态检测系统进行精子运动参数测定,采用实时定量PCR法及Western Blot法测定生精细胞TRPV1、TRPV5 mRNA和蛋白表达.rn 结果:与正常组相比,模型组大鼠A级精子、B级精子、直线速度、平均速度均明显降低,生精细胞TRPV1、TRPV5 mRNA与蛋白表达均明显下降(P＜0.01),UU培养阳性率升高(P＜0.05),经治疗后,与模型组比较,中药组和西药组UU培养阳性率降低,比较有统计学意义(P＜0.05),且中药组与西药组比较无统计学意义(P＞0.05),A级精子、B级精子、直线速度、曲线速度、平均速度水平提高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),而两组均不能提高直线运动水平.中药组在提高A级精子、B级精子、曲线速度、平均速度方面效果优于西药组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),而两组TRPV1、TRPV5 mRNA与蛋白表达亦明显上调(P＜0.01).rn 结论:UU感染可以降低大鼠精子活力,是诱发不育症的重要病理机制之一,知柏地黄汤不仅能有效抑制UU的生长、繁殖,具有抗UU作用,而且能通过上调大鼠生精细胞TRPV1、TRPV5mRNA与蛋白表达可能是知柏地黄汤治疗UU感染,提高大鼠精液质量的机制之一.

摘要： 细胞凋亡为缺血再灌注损伤中细胞死亡的重要形式之一,睾丸扭转修复过程中的生精细胞的大量凋亡是造成患者生育能力下降的主要原因.磷酸酰肌醇-3激酶(phosphoinositide-3 kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase,Akt)为重要的细胞存活信号通路,多种生长因子对生精细胞均有保护作用,但这些因子的下游的转导通路却很复杂,但PI3K/Akt的激活却是阻止生精细胞凋亡的共同特征.PI3K/Akt在睾丸缺血再灌注损伤中起到重要的作用,在一定的条件下,PI3K/Akt通路的激活可以有效的抑制生精细胞的凋亡,起到保护患者生育能力的作用.

摘要： 棉酚,又称棉籽醇,是一种黄色的酚类化合物,对人类和哺乳类动物有广泛的毒性作用.醋酸棉酚是棉酚最常用的药用形式.研究发现,棉酚具有抗炎、抗疟、抗病毒、抗生育及诱导肿瘤细胞凋亡的能力.本试验通过对雄性小鼠灌喂不同浓度的棉酚,观察小鼠睾丸组织结构和组织细胞凋亡图片,来检测棉酚对生精细胞凋亡的影响;利用PCR以及免疫组化技术测定小鼠睾丸组织Bax和Bcl-2基因和蛋白表达量,研究醋酸棉酚对雄性小鼠生殖系统的影响,为棉酚生殖毒性的研究提供实验基础.试验结果表明，醋酸棉酚能造成小鼠睾丸生精细胞结构异常，引起小鼠生殖系统不同程度的损伤，导致小鼠睾丸生精细胞发生凋亡，生精细胞凋亡与Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达存在着一定的关系，即Bcl-2与Bax参与了小鼠生精细胞的凋亡调控，并且表达与所服棉酚剂量有关，棉酚造成雄性小鼠生殖能力下降可能是由于生精细胞凋亡所引起的，虽然棉酚诱导生精细胞凋亡是由多种基因参与调控的过程，其中Bcl-2基因和Bax基因起到重要的作用。

摘要： "精血同源"是中医学的基础理论之一,对临床辨证和用药具有重要作用.睾丸间质细胞和支持细胞均能合成分泌血管内皮生长因子,不仅能促进新血管的生成,还可调控睾酮的合成和生精细胞的增殖分化.血管内皮生长因子在生精中的作用揭示了"精血同源"理论的科学内涵,对临床中医实践有指导意义.

摘要： 目的:探索雷公藤多苷对精子发生相关基因Herc4表达的影响和枸杞多糖促进该损伤修复的机制.rn 方法:将SD幼鼠随机分为5组,分别是混合高剂量组、混合中剂量组、混合低剂量组、雷公藤多苷组、枸杞多糖组.各组灌服相应药物,连续8周.8周末取睾丸,用蛋白印迹法检测Herc4表达、免疫组化法检测Bax/Bcl-2表达.rn 结果:Herc4表达以雷公藤多苷组为最低,混合低剂量组最高;但是各组间差异没有统计学意义(P＞0.05).雷公藤多苷组高表达Bax,低表达Bcl-2;各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).rn 结论:雷公藤多苷可下调SD幼鼠精子发生相关基因Herc4的表达,促进生精细胞凋亡.枸杞多糖可促进该损伤修复;机制是上调睾丸组织的Herc4表达,抑制生精细胞凋亡.

摘要： 本发明公开了二烯丙基二硫(DADS)在制备预防和/或治疗辐射对睾丸组织的损伤的药物中的应用。具体地，本发明明确了DADS能降低辐射对小鼠精子活力的影响，能有效对抗辐射对精子的损伤反应，能保护睾丸组织细胞中的部分蛋白质免受辐射的损伤，能有效对抗辐射对睾丸组织细胞脂质的损伤反应，能有效降低辐射对睾丸组织细胞核酸的损伤反应，对于预防和治疗辐射对生殖系统的损伤具有显著的意义。而且DADS低毒性，容易获得，成本低，是脂溶性分子，易穿透血‑脑屏障、血‑睾屏障及血‑气屏障等生理性屏障，起到水溶性药物难以到达的生理部位发挥作用，具有很好的应用前景。

摘要： 本发明提供了及一种贝类精巢生精细胞解离和分离的方法，属于海洋贝类细胞的分离技术领域。将增殖期贝类精巢破碎，依次用质量浓度0.1％胶原酶Ⅳ溶液消化和质量百分浓度0.25％胰蛋白酶溶液消化，解离精巢获得单细胞悬液；配制体积浓度10％、22％和35％的Percoll溶液，按浓度由大到小的顺序装入同一离心管中，向离心管的顶层加入贝类生精细胞单细胞悬液，离心，分别收集3层细胞。采用两步酶解法可将精巢组织中的生精细胞成功解离为单细胞悬液，细胞存活率可高到96.62％，并可在体外进行正常培养。同时分离出较高纯度的精原细胞和精母细胞，为研究贝类配子发生和繁育机制提供重要的材料，具有较高的指导意义和应用价值。

摘要： 本发明涉及医学研究领域，涉及隐睾特异性生精细胞模型的制备方法。本发明公开了一种隐睾特异性生精细胞模型的制备方法，包括下列步骤：收集隐睾患者新鲜尿液，离心沉淀种子细胞；细胞加入种子细胞培养液，培养；iPS细胞的建立和鉴定；iPS细胞体外诱导分化为生精细胞。本发明方法具有以下突出优点和特点：一，所选种子细胞为来源于尿液的细胞，其取材方式完全无创，易于被患儿接受，对于研究儿科疾病尤为重要；二，从尿源性细胞得到的iPS细胞通过各种鉴定，证实其具有和ES细胞类似的特性，可体外诱导分化为生精细胞，为研究隐睾发病的分子机制和药物筛选提供了实验平台。

摘要： 一种发育阶段特异性生精细胞玻片的制备方法，是将取自动物的睾丸组织去除包膜，分散曲精小管，在解剖显微镜下，根据曲精小管的透光差异确定该部位所在生精上皮波模式对应的分期，选择感兴趣的部位区段制备玻片，于液氮中冷冻后，1wt％多聚甲醛溶液固定，制成需要的特异性生精细胞玻片。本发明方法的最大优势是在体外对生精过程相关分子进行活细胞水平的检测，并且能够获得全面、客观、精确的实验结果，反应生精细胞发育阶段特异性基因产物的表达特征。

摘要： 本发明公开了一种冷冻保存的牛生精细胞体外培养方法，将新鲜牛睾丸组织进行程序化冷冻或玻璃化冷冻；将牛睾丸组织进行冷冻复苏，然后制备单细胞悬液；利用制备的单细胞悬液制备饲养层细胞；利用制备的饲养层细胞进行支持细胞与生精细胞共培养。与现有技术相比，本发明能有效的保证一次性采集足够的样品，并在低温条件下储藏和运输，且能利用冷冻复苏后的样品进行酶消化得到活率较高的生精细胞。经过冷冻复苏后的生精细胞，能在体外进行长期的培养与传代，为后续的细胞实验奠定了基础。具有操作简单、不受时间和距离限制的特点，能减少采样次数与成本。

摘要： 本发明公开了一种大鼠原代生精细胞体外分离的方法，采用的方案包括：1)取新鲜离体大鼠双侧睾丸，剥除被膜及血管，获得睾丸组织；2)将睾丸组织消化处理制备单细胞悬液；3)将单细胞悬液培养直至非生精细胞贴壁后，吸出未贴壁的悬浮细胞，对悬浮细胞采用Percoll法分离获得生精细胞。本发明为体外研究大鼠睾丸生殖功能奠定基础，该方法实现了体外分离和培养大鼠睾丸生精细胞，并证实这种方法分离和培养的生精细胞体外存活率高，且存活时间较长。利用该方法能获得正常的大鼠睾丸生精细胞，花费少，操作简单，可重复度高，能满足多种实验需求，值得大范围推广。

摘要： 本发明提供了及一种贝类精巢生精细胞解离和分离的方法，属于海洋贝类细胞的分离技术领域。将增殖期贝类精巢破碎，依次用质量浓度0.1％胶原酶Ⅳ溶液消化和质量百分浓度0.25％胰蛋白酶溶液消化，解离精巢获得单细胞悬液；配制体积浓度10％、22％和35％的Percoll溶液，按浓度由大到小的顺序装入同一离心管中，向离心管的顶层加入贝类生精细胞单细胞悬液，离心，分别收集3层细胞。采用两步酶解法可将精巢组织中的生精细胞成功解离为单细胞悬液，细胞存活率可高到96.62％，并可在体外进行正常培养。同时分离出较高纯度的精原细胞和精母细胞，为研究贝类配子发生和繁育机制提供重要的材料，具有较高的指导意义和应用价值。

摘要： 本发明涉及医学研究领域，涉及隐睾特异性生精细胞模型的制备方法。本发明公开了一种隐睾特异性生精细胞模型的制备方法，包括下列步骤：收集隐睾患者新鲜尿液，离心沉淀种子细胞；细胞加入种子细胞培养液，培养；iPS细胞的建立和鉴定；iPS细胞体外诱导分化为生精细胞。本发明方法具有以下突出优点和特点：一，所选种子细胞为来源于尿液的细胞，其取材方式完全无创，易于被患儿接受，对于研究儿科疾病尤为重要；二，从尿源性细胞得到的iPS细胞通过各种鉴定，证实其具有和ES细胞类似的特性，可体外诱导分化为生精细胞，为研究隐睾发病的分子机制和药物筛选提供了实验平台。

摘要： 利用间接免疫荧光染色检测生精细胞核蛋白的方法，是从动物的睾丸组织中分离曲精小管，利用低渗液处理生精细胞，采用间接免疫荧光染色方法检测生精细胞核蛋白，其中，所述的低渗液中包括有17mM柠檬酸钠、50mM蔗糖、5mMEDTA、0.5mMDTT、0.5mMPMSF，30mMTris，pH值为8.2。本发明使用低渗液对细胞进行通透处理，使细胞快速膨胀，染色质散开，核内蛋白质充分释放，生精细胞能够更好地与一抗结合，继而增强二抗的结合效率，使荧光着色更加完全充分，可以成功制备生精细胞染色体并进行核型分析。

摘要： 本发明公开了一种基于生精细胞特异性单克隆抗体筛选和鉴定肿瘤/睾丸抗原的方法，以人生精细胞作为免疫原，应用淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体，免疫组化法筛选生精细胞特异性单克隆抗体；然后在蛋白水平上研究所筛选的单克隆抗体识别的抗原分子在肿瘤组织和其他正常组织的表达分布规律。以此为基础，采用免疫组化染色选择针对肿瘤/睾丸抗原表达规律的单克隆抗体，作为候选识别肿瘤/睾丸抗原的抗体；通过免疫沉淀-质谱分析等现代蛋白组学的技术，鉴定相应单克隆抗体所识别的新肿瘤/睾丸抗原分子。