精子生成

摘要： 旨在探索发生可变剪切事件的MEI1基因对蒙古马精子生成的调控作用,实现利用分子调控技术提高马的精子数量和精液品质,有效提高繁殖效率,降低生产成本,加快遗传进展,促进种群繁衍。本研究以两岁蒙古马的睾丸支持细胞(SC)作为研究对象,构建未发生外显子跳跃(exon skip,ES)事件的MEI1-1-pIRES2-EGFP重组质粒和发生ES事件的MEI1-2-pIRES2-Dsred重组质粒,并分别转染睾丸支持细胞;每组3个重复,分别在转染0、24、48、72 h时用CCK-8检测转染细胞的增殖及活性;G418抗生素筛选转染细胞;收集转染细胞并提取总RNA,经反转录后qRT-PCR检测减数分裂相关基因在两种细胞中的差异表达情况等。成功构建了MEI1-1-pIRES2-EGFP载体和MEI1-2-pIRES2-Dsred载体,经琼脂糖凝胶电泳和测序试验检测到载体构建成功并绘制重组质粒质谱图;CCK-8检测发现转染两种质粒的细胞在转染48 h时细胞活性最高、增殖情况最好且MEI1-2-pIRES2-Dsred转染的细胞活性最高;经G418筛选转染细胞发现转染效率增加;检测结果发现,减数分裂通路部分基因(BUB1、CUL1、CCNB1、PPP2R5C、CCNB2等)及支持细胞信号通路中调节精子发生减数分裂的部分因子(ARID4A、FSH、GDNF、Stra8、NRG1等)在两类细胞中的表达量差异显著,且均在转染MEI1-2-pIRES2-Dsred质粒的SC内表达量高。结果表明,发生ES事件的MEI1基因更有利于调控减数分裂及精子发生,为探索可变剪切事件影响蒙古马精子生成调控机制奠定了理论基础。

摘要： 高脂血症(高血脂)除会引起心脑血管疾病外,也是男性不育的重要原因,一些动物实验和临床研究发现,脂质谱的改变与男性的不育症有关,其会对睾丸的发育及精子生成产生重要影响。高脂血症主要与遗传、不健康饮食及生活方式、糖尿病等有关,肥胖、烟酒嗜好、糖尿病者为高危人群,其对男性生殖功能产生负面影响。

摘要： 男性的生殖力是到了青春期以后开始发育的,睾丸的生精细胞逐渐成熟,产生正常的精子。男性不像女性有闭经,理论上讲,男性的生殖能力始终是存在的。现实中,也有80多岁有生育能力、生孩子的男性。总体而言,随着年龄的增长,男性生殖能力是逐渐下降的,而下列7个因素可改善男性生育力。1.体育锻炼。从整体上看,体育锻炼可以增强体质,提高免疫功能,提高人体的健康水平。同时,适当锻炼还可改善"睾丸环境",刺激精子生成,提高精子的质量。

摘要： 目的CatSper1是精子特定的电压门控Ca2+通道蛋白,在精子生成和受精过程中具有重要作用。本研究旨在分析CatSper1基因在版纳微型猪近交系(BMI)的表达调控模式、序列特征与潜在的生物学功能。方法取成年BMI公猪睾丸进行转录组测序;采用RT-PCR技术克隆CatSper1的完整编码序列;分析CatSper1的序列、结构特征及相互作用蛋白;利用转录组测序数据构建CatSper1的lncRNA和miRNA调控网络,并进行GO功能注释。结果RNA-seq获得CatSper1基因的平均表达量和平均TPM值分别为2817.5和33.6。CatSper1 CDS区全长为2166 bp(GenBank登录号:OK042306),编码721个氨基酸,含有233个氨基酸残基组成的Ion_trans保守结构域以及与精子生成相关的保守跨膜螺旋结构。CatSper1蛋白与10个雄性育性相关蛋白质存在相互作用,尤其与该基因家族成员CatSper2-4蛋白互作最为紧密。CatSper1基因受10个miRNAs靶向调控,分别有16个和14个lncRNAs与CatSper1竞争性结合ssc-miR-1343和ssc-miR-744。GO注释发现CatSper1基因在分子功能(MF)、生物学过程(BP)、细胞成分(CC)等方面均具有重要功能。结论本研究报道了CatSper1在BMI睾丸中的表达,基因的分子结构特征和表达调控网络,为深入研究CatSper1基因在BMI精子发生、精子获能和顶体反应等重要生物学过程中的功能奠定了基础。

摘要： 为研究环状RNA(circRNA)在杜洛克和大白猪睾丸中的表达差异,采用去除组织总RNA中核糖体RNA(rRNA)和线性RNA的方法构建特异性猪睾丸circRNA文库,并在Illumina PE150平台上进行测序,测序数据经过质控、比对、拼接后得到用于后续分析的数据.运用生物信息学软件find_circ和CIRI识别circRNA,并进行表达水平统计,从而得到猪睾丸组织circRNA表达谱,然后用DEseq2进行组间表达差异分析,对差异表达circRNA进行功能富集分析以筛选与雄性生殖相关的circRNA.结果发现,共识别到21 743个circRNAs,其中632个circRNAs在杜洛克和大白猪中的表达差异显著(|log2(FoldChange)|＞1,P＜0.05),在杜洛克猪上调表达的circRNAs有281个,下调表达的有351个.差异表达circRNA富集结果显示,有52个GO条目与繁殖相关,其中有9个与雄性生殖相关.经进一步筛选鉴定,有6个与雄性生殖相关的circRNAs(circ_0030058、circ_0009504、circ_00178101、circ_0019933、circ_0033379和circ_0017932),它们可能参与精原细胞分化、精子发生和精子细胞发育等生物学过程.综上所述,杜洛克和大白公猪睾丸中存在表达丰度不同的circRNA,这些circRNA可能参与精子生成,可以作为预测公猪生育能力的生物标记.

摘要： 目的 探讨氯氰菊酯对青春期雄性大鼠生殖系统的影响及相关机制.方法 随机将40只SD健康青春期雄性大鼠分为正常组和低中高剂量组各10只,四组大鼠分别进行干预.采用RT-PCR法检测miR-409bmiR-30b-3p表达,检测各组大鼠生殖系统重量,检测精子生成存活情况,采用免疫透射比浊法检测性激素氧化应激指标水平.结果 高剂量组miR-409bmiR-30b-3p表达精囊重量高于低中剂量组(P<0.05),前列腺睾丸附睾重量及精子数量每日精子生成量精子成活率低于低中剂量组(P<0.05).高剂量组TLH水平低于低中剂量组(P<0.05),FSHLPOTASROS水平高于低中剂量组(P<0.05).结论 氯氰菊酯干预能够调控青春期雄性大鼠miR-409bmiR-30b-3p表达,影响大鼠生殖系统发育精子生成存活及性激素水平,其机制可能是氯氰菊酯干预能够引起睾丸氧化应激反应.

摘要： [目的]以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)为材料,初步探索猪睾丸表达序列37(TEX37)基因的特性和功能,为该基因在猪精子生成过程的作用研究奠定基础.[方法]利用Oligo7软件设计特异引物扩增BMI TEX37基因整个编码区,应用实时荧光定量PCR技术检测BMI 15个组织的TEX37 mRNA表达谱,并初步预测TEX37蛋白质的功能,最后构建TEX37的多物种氨基酸系统进化树.[结果]扩增得到BMI TEX37编码区序列长561 bp,编码186个氨基酸,基因登录号KU705619,氨基酸登录号AOC89037.多组织相对荧光定量表达分析表明:TEX37基因在睾丸中呈相对最高表达,在其他组织中呈相对较低表达.生物信息学分析表明:TEX37蛋白质含有TSC21结构域,二级结构以无规则卷曲为主,N末端疏水,C末端亲水,有2类磷酸化位点,无跨膜螺旋结构和信号肽.系统聚类表明:BMI与其他物种相似度在67％以上,进化较保守.[结论]该研究可为TEX37基因在猪精子生成方面的作用机理研究提供参考.

摘要： 苯并芘(BaP)是有着显著致癌作用的化合物.之前检测出的多种重要致癌物质中,有将近一半以上是归属于多环芳烃类的化合物.各地区的动物类科学实验表明,BaP具备致畸、致癌、致突变性以及生殖毒性.近年来苯并芘的生殖毒性受到广泛关注,本文围绕苯并芘在体内的生殖毒性,综述了苯并芘对雄性生殖系统损伤效应的研究.

摘要： 公羊生殖保健是实现工厂化高效养羊的关键保障措施之一,科学、合理、高效地利用优秀种公羊,可以为养羊业创造丰厚的效益.本文从精子发生的阶段与时间、环境因素对精子生成的影响、公羊效应、公羊的精液品质与性欲的分类标准、公羊生殖保健的技术程序和公羊生殖保健的技术原理等等方面进行综述,并提出了相应的处理方案.

摘要： 抗肿瘤药物在杀死肿瘤细胞的同时常常引发生精细胞的大量死亡.导致男性生精功能的损害.本文探讨对不同种类抗肿瘤药物造成的睾丸组织学改变,促性腺激素水平的变化以及对精子生成的影响等.

摘要： 影响精了产量的因素分为影响精子的发育与功能的因素。影响精子发育的因素主要出现在仔猪生命的前两个月，并且大部分刺激主要是增加支持细胞群体的数目。已有研究表明初生重、断奶前生长、人为驯化对精子产量具有显著而永久的影响。因此，在公猪出生之前给予好的条件将使养猪从业人员获得更多回报。影响精子功能的因素往往出现在青春期以后，并且大部分出现的因素都对支持细胞释放精了和精子在附睾中的成熟具有负效应的，这些因素既包括光周期、营养和环境温度等研究比较广泛的，也包括采精频率、饲养环境等研究的较少。所有的这些因素均可通过一些合理的方法去减少它们对精子产量的不利影响。

摘要： 影响精了产量的因素分为影响精子的发育与功能的因素。影响精子发育的因素主要出现在仔猪生命的前两个月，并且大部分刺激主要是增加支持细胞群体的数目。已有研究表明初生重、断奶前生长、人为驯化对精子产量具有显著而永久的影响。因此，在公猪出生之前给予好的条件将使养猪从业人员获得更多回报。影响精子功能的因素往往出现在青春期以后，并且大部分出现的因素都对支持细胞释放精了和精子在附睾中的成熟具有负效应的，这些因素既包括光周期、营养和环境温度等研究比较广泛的，也包括采精频率、饲养环境等研究的较少。所有的这些因素均可通过一些合理的方法去减少它们对精子产量的不利影响。

摘要： 影响精了产量的因素分为影响精子的发育与功能的因素。影响精子发育的因素主要出现在仔猪生命的前两个月，并且大部分刺激主要是增加支持细胞群体的数目。已有研究表明初生重、断奶前生长、人为驯化对精子产量具有显著而永久的影响。因此，在公猪出生之前给予好的条件将使养猪从业人员获得更多回报。影响精子功能的因素往往出现在青春期以后，并且大部分出现的因素都对支持细胞释放精了和精子在附睾中的成熟具有负效应的，这些因素既包括光周期、营养和环境温度等研究比较广泛的，也包括采精频率、饲养环境等研究的较少。所有的这些因素均可通过一些合理的方法去减少它们对精子产量的不利影响。

摘要： 影响精了产量的因素分为影响精子的发育与功能的因素。影响精子发育的因素主要出现在仔猪生命的前两个月，并且大部分刺激主要是增加支持细胞群体的数目。已有研究表明初生重、断奶前生长、人为驯化对精子产量具有显著而永久的影响。因此，在公猪出生之前给予好的条件将使养猪从业人员获得更多回报。影响精子功能的因素往往出现在青春期以后，并且大部分出现的因素都对支持细胞释放精了和精子在附睾中的成熟具有负效应的，这些因素既包括光周期、营养和环境温度等研究比较广泛的，也包括采精频率、饲养环境等研究的较少。所有的这些因素均可通过一些合理的方法去减少它们对精子产量的不利影响。

摘要： 目的：松果菊苷(ECH)为管花肉苁蓉保护生殖损伤的有效成分,本研究对其作用途径、靶器官和作用机制进行了探索研究. 方法：为探究ECH的作用途径,分别给予5mg/kg、20mg/kg和80mg/kg剂量的ECH,以及15mg/kg丙酸睾酮(阳性对照组)和20mg/kg恩杂鲁胺(阴性对照组).利用HPLC法检测ECH的药代动力学参数及体内分布,利用实时荧光定量PCR仪、放射性免疫实验以及显微镜下观察实验检测精子质量、激素含量、激素调节途径下丘脑-垂体-性腺轴上相关基因的表达变化,激素生成途径中相关基因的表达变化,利用Western blot法检测雄激素受体(AR)在细胞质与核中的表达.利用ELISA、组织免疫荧光和分子对接的方式检测ECH与AR的结合情况. 结果：表明ECH可在下丘脑中检测出来.高剂量的ECH可显著提高精子的数量,对精子的运动能力和活性无显著性影响.ECH可提高T和LH的分泌,促进下丘脑-垂体-性腺轴上相关基因的表达,增加合成激素途径的基因(CYP11A1,CYP17A1,HSD3β,HSD17β和StAR)的表达.ECH能够抑制性结合到AR蛋白上,抑制下丘脑中AR从细胞质转移到细胞核中. 结论：ECH为管花肉苁蓉中的主要活性成分,可促进精子的总数,同时提高T和LH的合成分泌,其可进入下丘脑,抑制AR的转运进而抑制HPA轴的负反馈调节作用,刺激正反馈调节,增加LH和T的分泌,促进精子的生成.

摘要： 目的：松果菊苷(ECH)为管花肉苁蓉保护生殖损伤的有效成分,本研究对其作用途径、靶器官和作用机制进行了探索研究. 方法：为探究ECH的作用途径,分别给予5mg/kg、20mg/kg和80mg/kg剂量的ECH,以及15mg/kg丙酸睾酮(阳性对照组)和20mg/kg恩杂鲁胺(阴性对照组).利用HPLC法检测ECH的药代动力学参数及体内分布,利用实时荧光定量PCR仪、放射性免疫实验以及显微镜下观察实验检测精子质量、激素含量、激素调节途径下丘脑-垂体-性腺轴上相关基因的表达变化,激素生成途径中相关基因的表达变化,利用Western blot法检测雄激素受体(AR)在细胞质与核中的表达.利用ELISA、组织免疫荧光和分子对接的方式检测ECH与AR的结合情况. 结果：表明ECH可在下丘脑中检测出来.高剂量的ECH可显著提高精子的数量,对精子的运动能力和活性无显著性影响.ECH可提高T和LH的分泌,促进下丘脑-垂体-性腺轴上相关基因的表达,增加合成激素途径的基因(CYP11A1,CYP17A1,HSD3β,HSD17β和StAR)的表达.ECH能够抑制性结合到AR蛋白上,抑制下丘脑中AR从细胞质转移到细胞核中. 结论：ECH为管花肉苁蓉中的主要活性成分,可促进精子的总数,同时提高T和LH的合成分泌,其可进入下丘脑,抑制AR的转运进而抑制HPA轴的负反馈调节作用,刺激正反馈调节,增加LH和T的分泌,促进精子的生成.

摘要： 目的：松果菊苷(ECH)为管花肉苁蓉保护生殖损伤的有效成分,本研究对其作用途径、靶器官和作用机制进行了探索研究. 方法：为探究ECH的作用途径,分别给予5mg/kg、20mg/kg和80mg/kg剂量的ECH,以及15mg/kg丙酸睾酮(阳性对照组)和20mg/kg恩杂鲁胺(阴性对照组).利用HPLC法检测ECH的药代动力学参数及体内分布,利用实时荧光定量PCR仪、放射性免疫实验以及显微镜下观察实验检测精子质量、激素含量、激素调节途径下丘脑-垂体-性腺轴上相关基因的表达变化,激素生成途径中相关基因的表达变化,利用Western blot法检测雄激素受体(AR)在细胞质与核中的表达.利用ELISA、组织免疫荧光和分子对接的方式检测ECH与AR的结合情况. 结果：表明ECH可在下丘脑中检测出来.高剂量的ECH可显著提高精子的数量,对精子的运动能力和活性无显著性影响.ECH可提高T和LH的分泌,促进下丘脑-垂体-性腺轴上相关基因的表达,增加合成激素途径的基因(CYP11A1,CYP17A1,HSD3β,HSD17β和StAR)的表达.ECH能够抑制性结合到AR蛋白上,抑制下丘脑中AR从细胞质转移到细胞核中. 结论：ECH为管花肉苁蓉中的主要活性成分,可促进精子的总数,同时提高T和LH的合成分泌,其可进入下丘脑,抑制AR的转运进而抑制HPA轴的负反馈调节作用,刺激正反馈调节,增加LH和T的分泌,促进精子的生成.

摘要： 本发明涉及细胞工程领域，具体提供一种体外培养睾丸组织诱导生成精子细胞的方法，包括如下步骤：(1)培养胶块的制备：将1.2％的琼脂糖胶切块置于6孔板中，加入培养基浸泡过夜后，吸掉旧培养基，加入新鲜培养基，此时的琼脂糖胶块用作培养胶块；所述培养基的成分及含量为：90％MEMα+10％KSR；(2)取新生5.5天和新生10.5‑12.5天的小鼠睾丸，去外层白膜，分割成块状组织样品；(3)将组织样品置于前述的培养胶块上，将6孔板置于细胞培养箱中进行培养；(4)新生5.5天的小鼠睾丸组织培养22‑25天得到圆形精子；新生10.5‑12.5天的小鼠睾丸组织培养27天左右得到长形精子。

摘要： 本发明公开了一种丝瓜未受精子房胚状体的再生成苗方法及专用培养基。本发明提供的专用培养基，其配方包括NH

摘要： 本发明涉及细胞工程领域，具体提供一种体外培养睾丸组织诱导生成精子细胞的方法，包括如下步骤：(1)培养胶块的制备：将1.2％的琼脂糖胶切块置于6孔板中，加入培养基浸泡过夜后，吸掉旧培养基，加入新鲜培养基，此时的琼脂糖胶块用作培养胶块；所述培养基的成分及含量为：90％MEMα+10％KSR；(2)取新生5.5天和新生10.5-12.5天的小鼠睾丸，去外层白膜，分割成块状组织样品；(3)将组织样品置于前述的培养胶块上，将6孔板置于细胞培养箱中进行培养；(4)新生5.5天的小鼠睾丸组织培养22-25天得到圆形精子；新生10.5-12.5天的小鼠睾丸组织培养27天左右得到长形精子。

摘要： 本发明属于抑制缺氧下精子生成减少技术领域，公开了一种VHA抑制DR5在缺氧下精子生成减少的检测方法，使用VHA基因敲除小鼠和C57BL/6小鼠作为研究对象，通过低氧的诱导构建缺氧性精子生成减少模型；分离实验小鼠的曲精小管精母细胞作为研究对象，低氧体外刺激，运用western blot、免疫细胞化学、qPCR技术验证VHA抑制精母细胞表达DR5的调节作用和分子机制。本发明提供的一种VHA抑制DR5在缺氧下精子生成减少的检测方法，明确了缺氧抑制VHA在缺氧性精子生成减少中的作用及其对抑制DR5的表达的分子机制，为治疗缺氧性精子生成减少提供必要的理论依据和新的治疗策略。

摘要： 本发明提供了一种精子生成障碍动物模型及其制备方法与应用。本发明首次发现了PD‑L1过表达对精子生成、成熟过程具有干扰作用，提出PD‑L1可作为治疗精子生成障碍疾病的靶点。同时提供了一种精子生成障碍动物模型的构建方法，通过使PD‑L1过表达得到所述动物模型；所述的构建方法仅仅改变了PD‑L1基因的表达，并不会对动物模型的其他基因表达造成直接影响，也不会影响动物模型的其他表型变化；同时，方法重复性好，简单易行，能够特异、高效地增强PD‑L1基因的表达，构建得到的动物模型稳定。本发明为精子生成障碍相关科学研究及临床诊治提供重要的动物基础、实验材料及新思路，对于临床治疗不孕不育具有重要价值与意义。

摘要： 一种用于检测精子生成障碍传代效应的标志性微小核糖核酸标志物及其应用。本发明属于生物技术及生殖医学领域，公开了一种用于检测精子生成障碍传代效应中的微小核糖核酸(microRNA，miRNA)标志物及其应用。该标志物选自rho‑miR‑1‑3p、rho‑miR‑124‑3p、rho‑miR‑190a‑5p中的多种。该标志物对监测精子生成障碍传代效应具有特异性和敏感性，为精子生成障碍传代效应的诊断监测提供一种可靠的检测依据和快速检测方法，具有重要的应用价值。

摘要： 本发明提供了一种精子生成障碍动物模型及其制备方法与应用。本发明首次发现了PD‑L1过表达对精子生成、成熟过程具有干扰作用，提出PD‑L1可作为治疗精子生成障碍疾病的靶点。同时提供了一种精子生成障碍动物模型的构建方法，通过使PD‑L1过表达得到所述动物模型；所述的构建方法仅仅改变了PD‑L1基因的表达，并不会对动物模型的其他基因表达造成直接影响，也不会影响动物模型的其他表型变化；同时，方法重复性好，简单易行，能够特异、高效地增强PD‑L1基因的表达，构建得到的动物模型稳定。本发明为精子生成障碍相关科学研究及临床诊治提供重要的动物基础、实验材料及新思路，对于临床治疗不孕不育具有重要价值与意义。

摘要： 本发明涉及了一种中药组合物，尤其是涉及了一种促进精子生成提高质量降低畸形的中药组合物，中药组合物由香附、柴胡、生地、人参、党参、黄芪、女贞子、旱莲草、菟丝子、杜仲、桑寄生、枸杞子、巴戟天、山萸肉、鸡血藤、杜仲、续断、狗脊、党参、白术、砂仁、五指毛桃、合欢皮、山药、麦芽、山楂、黄精、白芍、龙眼肉、麦冬、沙参、玄参、桔梗、阿胶、石斛组成，本促进精子生成提高质量降低畸形的中药组合物克服现有技术的不足，能有效提高男性身体机能，增加受孕几率，提高辅助生殖中胚胎质量，减少激素类用药，减少相关药物导致的副作用，同时补益气血，健身强体，有利于机体整体的功能。

摘要： 本发明属于抑制缺氧下精子生成减少技术领域，公开了一种VHA抑制DR5在缺氧下精子生成减少的检测方法，使用VHA基因敲除小鼠和C57BL/6小鼠作为研究对象，通过低氧的诱导构建缺氧性精子生成减少模型；分离实验小鼠的曲精小管精母细胞作为研究对象，低氧体外刺激，运用western blot、免疫细胞化学、qPCR技术验证VHA抑制精母细胞表达DR5的调节作用和分子机制。本发明提供的一种VHA抑制DR5在缺氧下精子生成减少的检测方法，明确了缺氧抑制VHA在缺氧性精子生成减少中的作用及其对抑制DR5的表达的分子机制，为治疗缺氧性精子生成减少提供必要的理论依据和新的治疗策略。

摘要： 一种用于检测精子生成障碍传代效应的标志性微小核糖核酸标志物及其应用。本发明属于生物技术及生殖医学领域，公开了一种用于检测精子生成障碍传代效应中的微小核糖核酸(microRNA，miRNA)标志物及其应用。该标志物选自rho‑miR‑1‑3p、rho‑miR‑124‑3p、rho‑miR‑190a‑5p中的多种。该标志物对监测精子生成障碍传代效应具有特异性和敏感性，为精子生成障碍传代效应的诊断监测提供一种可靠的检测依据和快速检测方法，具有重要的应用价值。