动物源性成分

摘要： 本文应用DNA条码技术,研究通用引物,扩增动物源性加工食品中线粒体基因COI,开发检验快速、准确、低成本和高通量的食品中动物源性成分的快速检测方法。结果表明,该方法有很好的特异性,最低检出限为0.10 ng/μL,可以对未知、已知动物源性成分的食品进行快速、准确的定性、定量检测。

摘要： 随着生活水平的提高,消费者对食品的安全需求不断提高。而疯牛病、禽流感等疾病的出现,不仅容易给畜牧养殖业造成严重的经济损失,而且容易经动物源性食品走上消费者餐桌,威胁人体健康和生命安全。以疯牛病为例,该病是由朊病毒引起的神经系统疾病,具有死亡率高、传染性强等特点。自疯牛病出现以来,逐渐席卷全球,给养牛业造成巨大的经济损失。为控制疯牛病的发生和传播,世界各国颁发了一系列的饲料禁令和特殊风险物质的禁令,但这些禁令的落实均依赖于对食品和饲料中动物源性成分的检测,这样才能保证食品和饲料的安全。基于食品和饲料中动物源性成分检测的重要性,下文就结合《动物饲料及产品分析检测方法》一书内容进行分析。

摘要： 以鸡转化生长因子β-3(transforming growth factor beta-3,TGFB3)基因、猪朊蛋白(prion protein,PRNP)基因和鸭、牛生长激素(growth hormone,GH)基因为靶基因,设计合成特异性引物和TaqMan探针,通过对实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系和反应条件的优化,建立同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分的实时荧光PCR检测方法。结果表明:本研究所建立的方法只在鸡、鸭、猪或牛源性成分存在时才产生特异性扩增曲线,表明该方法具有良好的特异性;且对鸡、鸭、猪和牛源性成分的最低检测质量浓度分别可达到10.0、1.0、10.0、10.0 pg/μL,具有良好的灵敏性;应用建立的检测方法对市售34份速冻食品鸡、鸭、猪和牛源性成分进行同时检测,能够实现对速冻食品中4种动物源性成分的有效检测,进一步分析发现,15份速冻食品源性成分测定结果与外包装标注成分不一致。本研究所建立的同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分的实时荧光PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏性,且操作简单、适用范围广,能够满足日常检测需求。

摘要： 动物源性成分鉴定技术在打击肉制品掺假走私、维护市场秩序、保护野生动物资源等方面对检测方法的特异性、灵敏性、重复性提出了很高的要求.在本研究中,首次对黄羊(Procapra gutturosa)及其制品源性成分检测方法进行研究,研究结果表明,普通PCR方法特异性好,与马、牛、羊、猪、鼠、鸡等动物无交叉扩增,灵敏性达到0.1 ng/μL.应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测特异性好,与马、牛、羊、猪、鼠、鸡等动物无交叉扩增,灵敏性达到0.001 ng/μL,稳定性结果表明,组内试验Ct值的标准差(SD)为0.202,变异系数(CV％)为0.7006％;组间试验Ct值的SD为0.804,CV％为2.845％.黄羊源性成分检测技术方法,具有快速、特异以及灵敏等特点,为准确甄别动物源性成分提供了强有力的技术保障.

摘要： 动物源性成分鉴定技术在打击肉制品掺假走私、维护市场秩序、保护野生动物资源等方面对检测方法的特异性、灵敏性、重复性提出了很高的要求。在本研究中,首次对黄羊(Procapra gutturosa)及其制品源性成分检测方法进行研究,研究结果表明,普通PCR方法特异性好,与马、牛、羊、猪、鼠、鸡等动物无交叉扩增,灵敏性达到0.1 ng/μL。应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测特异性好,与马、牛、羊、猪、鼠、鸡等动物无交叉扩增,灵敏性达到0.001 ng/μL,稳定性结果表明,组内试验Ct值的标准差(SD)为0.202,变异系数(CV%)为0.7006%;组间试验Ct值的SD为0.804,CV%为2.845%。黄羊源性成分检测技术方法,具有快速、特异以及灵敏等特点,为准确甄别动物源性成分提供了强有力的技术保障。

摘要： 目的 分析对广佛地区销售食品的动物源性成分和氯霉素残留,以保障食品安全和维护消费者合法权益.方法 根据现行标准分析市场中110份牛肉、猪肉、鸡肉及其制品中牛、猪、鸡、鸭源性成分和氯霉素残留情况.结果 共检出24份掺假样品,总掺假率为21.82％.掺假情况主要集中在牛肉制品中.有3份样品检出氯霉素,不合格率为2.73％.按采样场所来看,产品质量和购买场所有一定相关性.结论 动物源性食品掺假现象在广佛地区较为严重,氯霉素残留也存在一定程度非法添加.进一步开展动物源性食品源性成分和兽药残留检验对食品安全具有重要意义.

摘要： 基于TaqMan探针RT-PCR技术,建立胆南星的牛、羊、猪源性成分鉴定方法.以提取的DNA为模板进行TaqMan探针RT-PCR检测样品中的牛、羊、猪源性成分.建立的方法特异性良好,牛羊猪源性成分的检出限分别为0.1、0.001和0.001 ng/μl,可用于检测胆南星中的胆汁来源.

摘要： 近年来,肉制品掺假事件不断被曝出,对全球食品安全和经济产生了一定的负面影响。笔者利用特异性引物及探针,对购买自农贸市场、大型超市、餐饮店和网络电商的牛肉及其制品进行动物源性成分和大豆成分检测,将检测结果与产品标签对比,调查样品掺假情况,以期为消费者及监管部门提供依据。检出结果显示:餐饮店样品中掺入非牛肉成分的种类最多,电商食品次之,超市产品较少;农贸市场样品采集过少,且为冷冻生制品,未发现掺入所检测的非牛源性成分的情况。包含6个种类的102份样品中,2份样品不含牛源性成分,占样品总数的2%;23份样品掺有非牛源性或大豆成分,且产品标签中未标明,占样品总数的22.5%。所检测到的非牛源性成分,较多的使用猪肉和鸡肉掺假,鸭肉和大豆成分掺假也占一定比例。

摘要： 建立适用于肉类罐头等长时间高温加工食品中猪、牛、羊、鸡、鸭5种动物源成分种属特异性PCR鉴别方法.通过使用猪、牛、羊、鸡、鸭的种属特异性引物,对5种动物的总DNA模板进行PCR扩增,得到分别为212、147、202、131、201 bp的扩增产物,将测序结果在美国国家生物技术信息中心(US National Center for Biotech-nology Information,NCBI)进行BLAST比对确认实验的准确性,并对市售罐头样品进行检测.该方法5种动物引物种属特异性良好,对猪、牛、羊、鸭源性成分的检测灵敏度可达1％,对鸡源性成分的检测灵敏度为2.5％.在对市售肉类罐头样品的检测中,6.6％样品与标签标注结果不符.该方法操作简便,成本低,结果准确可靠,可广泛用于肉类罐头食品和长时间高温加工食品中猪、牛、羊、鸡、鸭5种动物源成分的鉴别,具有十分广泛的实际应用价值.

摘要： 近年来,肉制品掺假事件不断被曝出,对全球食品安全和经济产生了一定的负面影响.笔者利用特异性引物及探针,对购买自农贸市场、大型超市、餐饮店和网络电商的牛肉及其制品进行动物源性成分和大豆成分检测,将检测结果与产品标签对比,调查样品掺假情况,以期为消费者及监管部门提供依据.检出结果显示:餐饮店样品中掺入非牛肉成分的种类最多,电商食品次之,超市产品较少;农贸市场样品采集过少,且为冷冻生制品,未发现掺入所检测的非牛源性成分的情况.包含6个种类的102份样品中,2份样品不含牛源性成分,占样品总数的2％;23份样品掺有非牛源性或大豆成分,且产品标签中未标明,占样品总数的22.5％.所检测到的非牛源性成分,较多的使用猪肉和鸡肉掺假,鸭肉和大豆成分掺假也占一定比例.

摘要： 肉制品主要成分标识的真实性是全球重要的食品安全问题之一,特别是肉制品中动物源性成分的掺假和标识问题已引发全球关注.如何对肉制品中动物源性成分进行鉴定和标识已成为产品真实性鉴定的热点.基于DNA分子稳定性强的优点,DNA检测技术被广泛用于食品安全检测和监测诸多领域,体现出了灵敏度高、特异性强等优势.本文重点从动物源性检测的靶序列DNA选择和DNA分析技术研究2个方面,阐述了肉制品中动物源性成分定性、定量检测技术的研究和应用,并讨论动物源性成分定量分析的可能性,为中国实施动物源性成分量化监管提供思路.

摘要： 民以食为天,食以安为先.但在利益的驱动下肉制品行业内掺假事件时有发生,严重侵害了消费者权益,并造成了不良的经济和社会影响.因此加强研究肉类产品动物源性成分的检测技术,广泛开展肉及肉制品中动物源性成分的检验意义重大.本文综述了目前已有的肉及肉制品中动物源性成分的核酸检测技术,并对有应用前景的新技术做了简要介绍.

摘要： 目的:为鉴定动物产品中驴、马和狐狸源性成分,建立了能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR体系. 方法:以驴肉、马肉和狐狸肉及其加工制品为研究对象,以动物线粒体保守序列16SrRNA基因为靶基因,设计特异性引物和以不同荧光素标记的特异TaqMan探针.通过优化PCR反应体系和条件,建立能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR方法.利用牛、猪、羊、水貂、狗、鸡、鸭、大豆、小麦、玉米等物种检测没有交叉反应. 结果:该方法模板DNA检测灵敏度为0.01ng,以驴肉为基质,掺入马和狐狸肉的体积检出限为1‰. 结论:本研究建立的驴、马和狐狸源性四重荧光实时PCR检测体系灵敏度高、特异性强,能有效鉴别动物产品中驴、马和狐狸的源性成分,也可用作相关动物皮张真伪的鉴别方法.

摘要： 目的:为鉴定动物产品中驴、马和狐狸源性成分,建立了能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR体系. 方法:以驴肉、马肉和狐狸肉及其加工制品为研究对象,以动物线粒体保守序列16SrRNA基因为靶基因,设计特异性引物和以不同荧光素标记的特异TaqMan探针.通过优化PCR反应体系和条件,建立能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR方法.利用牛、猪、羊、水貂、狗、鸡、鸭、大豆、小麦、玉米等物种检测没有交叉反应. 结果:该方法模板DNA检测灵敏度为0.01ng,以驴肉为基质,掺入马和狐狸肉的体积检出限为1‰. 结论:本研究建立的驴、马和狐狸源性四重荧光实时PCR检测体系灵敏度高、特异性强,能有效鉴别动物产品中驴、马和狐狸的源性成分,也可用作相关动物皮张真伪的鉴别方法.

摘要： 目的:为鉴定动物产品中驴、马和狐狸源性成分,建立了能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR体系. 方法:以驴肉、马肉和狐狸肉及其加工制品为研究对象,以动物线粒体保守序列16SrRNA基因为靶基因,设计特异性引物和以不同荧光素标记的特异TaqMan探针.通过优化PCR反应体系和条件,建立能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR方法.利用牛、猪、羊、水貂、狗、鸡、鸭、大豆、小麦、玉米等物种检测没有交叉反应. 结果:该方法模板DNA检测灵敏度为0.01ng,以驴肉为基质,掺入马和狐狸肉的体积检出限为1‰. 结论:本研究建立的驴、马和狐狸源性四重荧光实时PCR检测体系灵敏度高、特异性强,能有效鉴别动物产品中驴、马和狐狸的源性成分,也可用作相关动物皮张真伪的鉴别方法.

摘要： 目的:为鉴定动物产品中驴、马和狐狸源性成分,建立了能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR体系. 方法:以驴肉、马肉和狐狸肉及其加工制品为研究对象,以动物线粒体保守序列16SrRNA基因为靶基因,设计特异性引物和以不同荧光素标记的特异TaqMan探针.通过优化PCR反应体系和条件,建立能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR方法.利用牛、猪、羊、水貂、狗、鸡、鸭、大豆、小麦、玉米等物种检测没有交叉反应. 结果:该方法模板DNA检测灵敏度为0.01ng,以驴肉为基质,掺入马和狐狸肉的体积检出限为1‰. 结论:本研究建立的驴、马和狐狸源性四重荧光实时PCR检测体系灵敏度高、特异性强,能有效鉴别动物产品中驴、马和狐狸的源性成分,也可用作相关动物皮张真伪的鉴别方法.

摘要： 本发明提供了一种无动物源性和人源性成分的狂犬病疫苗的制备方法，包括以下步骤：A.采用第一无血清培养基a，建立无血清Vero细胞主细胞库和工作细胞库；B.采用第二无血清培养基b，建立无血清人用狂犬病疫苗毒株工作种子批；C.将步骤A的Vero工作细胞库的细胞复苏、传代扩增后接种生物反应器，采用第三无血清培养基c1，载体灌流培养；接种步骤B的毒株工作种子批，采用第四无血清培养基c2，培养病毒；收获病毒液，经超滤浓缩、病毒液灭活、纯化、半成品配制后分装冻干，得到无动物源性和人源性成分的狂犬病疫苗。本发明采用无血清培养替代现有有血清培养工艺、重组人血白蛋白替代现有人血白蛋白工艺，保证了生物制品安全性。

摘要： 本发明提供了一种无动物源性和人源性成分的狂犬病疫苗的制备方法，包括以下步骤：A.采用第一无血清培养基a，建立无血清Vero细胞主细胞库和工作细胞库；B.采用第二无血清培养基b，建立无血清人用狂犬病疫苗毒株工作种子批；C.将步骤A的Vero工作细胞库的细胞复苏、传代扩增后接种生物反应器，采用第三无血清培养基c1，载体灌流培养；接种步骤B的毒株工作种子批，采用第四无血清培养基c2，培养病毒；收获病毒液，经超滤浓缩、病毒液灭活、纯化、半成品配制后分装冻干，得到无动物源性和人源性成分的狂犬病疫苗。本发明采用无血清培养替代现有有血清培养工艺、重组人血白蛋白替代现有人血白蛋白工艺，保证了生物制品安全性。

摘要： 本发明涉及一种基于LAMP技术的植物源性食品中动物源性成分检测方法，该方法包括以下步骤：⑴按常规方法提取待测样品DNA；⑵配制待测样品的LAMP检测反应体系；⑶配制对照样品的LAMP检测反应体系；⑷进行LAMP扩增反应；⑸LAMP扩增结果的鉴定：在LAMP扩增产物中加入显色剂1000×SYBR GREEN I荧光染料，混匀，通过肉眼观察显色结果来判断扩增结果；当出现绿色，则为阳性，即判定样品中存在动物源性成分；当出现橙色，则为阴性，即判定样品中不存在动物源性成分。本发明具有高特异性，且具有快速高效、操作简便，检测成本低的特点，适合现场快速检测。

摘要： 本发明属于体外细胞培养技术领域，涉及一种用于培养T淋巴细胞的培养基，该培养基包括基础培养基以及用于替代人或牛血清的添加剂，所述添加剂包括重组人血白蛋白、重组人转铁蛋白、重组人胰岛素、胆固醇、油酸、亚油酸等。本发明的培养基优于现有培养基表现在以下几个方面：一是本发明的培养基解决了人源性成分和动物源性成分安全性的问题；二是本发明的培养基比对比培养基培养的T淋巴细胞有更高的增值倍数。

摘要： 本发明提供了一种水貂源性成分鉴定及动物制品中水貂、兔、狗成分的多重PCR检测试剂盒，属于动物源性成分分子检测技术领域。本发明试剂盒包括水貂、兔、狗各物种特异性引物、反应试剂以及阳性和空白对照。水貂特异性引物是能特异性扩增SEQ ID No.1所示的核苷酸序列的引物对。采用本发明的引物扩增样品DNA，对PCR扩增产物进行分析，可判定样品是否含有水貂种源性成分；同时，能鉴别是否掺有兔源或狗源成分，为毛皮制品的分子鉴定提供手段；另外，通过多重PCR检测，可一次性鉴别水貂源、兔源和狗源成分，建立肉类、毛皮掺假和饲料成分鉴别的有效方法。该方法和试剂盒具有简便、快速、全面、特异性强的特点，且成本较低，适用性广。

摘要： 本发明提供了一种狐源性成分鉴定及动物制品中狐、兔、狗成分的多重PCR检测试剂盒，属于动物源性成分分子检测技术领域。本发明试剂盒包括狐、兔、狗各物种特异性引物，反应试剂以及阳性和空白对照。狐狸特异性引物是能特异性扩增SEQ ID No.1所示的核苷酸序列的引物对。采用本发明的引物扩增样品DNA，对PCR扩增产物进行分析，可判定样品中是否含有狐狸种源性成分；同时，能鉴别是否掺有兔源或狗源成分，为毛皮制品的分子鉴定提供手段；另外，通过多重PCR检测，可一次性鉴别狐源、兔源和狗源成分。建立肉类掺假、毛皮和饲料成分鉴别的有效方法。该方法和试剂盒具有简便、快速、全面、特异性强的特点，且成本较低，适用性广。

摘要： 本发明涉及一种基于LAMP技术的植物源性食品中动物源性成分检测方法，该方法包括以下步骤：⑴按常规方法提取待测样品DNA；⑵配制待测样品的LAMP检测反应体系；⑶配制对照样品的LAMP检测反应体系；⑷进行LAMP扩增反应；⑸LAMP扩增结果的鉴定：在LAMP扩增产物中加入显色剂1000×SYBRGREENI荧光染料，混匀，通过肉眼观察显色结果来判断扩增结果；当出现绿色，则为阳性，即判定样品中存在动物源性成分；当出现橙色，则为阴性，即判定样品中不存在动物源性成分。本发明具有高特异性，且具有快速高效、操作简便，检测成本低的特点，适合现场快速检测。

摘要： 本发明属于体外细胞培养技术领域，涉及一种用于培养T淋巴细胞的培养基，该培养基包括基础培养基以及用于替代人或牛血清的添加剂，所述添加剂包括重组人血白蛋白、重组人转铁蛋白、重组人胰岛素、胆固醇、油酸、亚油酸等。本发明的培养基优于现有培养基表现在以下几个方面：一是本发明的培养基解决了人源性成分和动物源性成分安全性的问题；二是本发明的培养基比对比培养基培养的T淋巴细胞有更高的增值倍数。

摘要： 本发明提供了一种水貂源性成分鉴定及动物制品中水貂、兔、狗成分的多重PCR检测试剂盒，属于动物源性成分分子检测技术领域。本发明试剂盒包括水貂、兔、狗各物种特异性引物、反应试剂以及阳性和空白对照。水貂特异性引物是能特异性扩增SEQ？ID？No.1所示的核苷酸序列的引物对。采用本发明的引物扩增样品DNA，对PCR扩增产物进行分析，可判定样品是否含有水貂种源性成分；同时，能鉴别是否掺有兔源或狗源成分，为毛皮制品的分子鉴定提供手段；另外，通过多重PCR检测，可一次性鉴别水貂源、兔源和狗源成分，建立肉类、毛皮掺假和饲料成分鉴别的有效方法。该方法和试剂盒具有简便、快速、全面、特异性强的特点，且成本较低，适用性广。

摘要： 本发明提供了一种狐源性成分鉴定及动物制品中狐、兔、狗成分的多重PCR检测试剂盒，属于动物源性成分分子检测技术领域。本发明试剂盒包括狐、兔、狗各物种特异性引物，反应试剂以及阳性和空白对照。狐狸特异性引物是能特异性扩增SEQ？ID？No.1所示的核苷酸序列的引物对。采用本发明的引物扩增样品DNA，对PCR扩增产物进行分析，可判定样品中是否含有狐狸种源性成分；同时，能鉴别是否掺有兔源或狗源成分，为毛皮制品的分子鉴定提供手段；另外，通过多重PCR检测，可一次性鉴别狐源、兔源和狗源成分。建立肉类掺假、毛皮和饲料成分鉴别的有效方法。该方法和试剂盒具有简便、快速、全面、特异性强的特点，且成本较低，适用性广。