克雷伯菌,肺炎

摘要： 肺炎克雷伯菌是院内感染的常见条件致病菌.近年来,随着肺炎克雷伯菌所致肝脓肿患者的发病数不断增加,高毒力肺炎克雷伯菌引起广泛关注.高毒力肺炎克雷伯菌具有高黏液表型和高毒力的特征,可引起免疫力正常的患者发生重症社区获得性感染,如肝脓肿、肺炎、化脓性眼内炎及化脓性脑膜炎等.本文对高毒力肺炎克雷伯菌的流行病学及毒力因子的研究进展作一综述.

摘要： 目的 探讨改良序贯器官衰竭评分(improved sequential organ failure assessment,ISOFA)对肺炎克雷伯菌脓毒症预后的评估价值.方法 回顾性分析2018年1月1日至2019年6月30日吉林大学第一医院收治的379例肺炎克雷伯菌脓毒症患者的临床资料.按28 d预后情况分为存活组和死亡组,比较2组患者的年龄、性别、C反应蛋白、降钙素原、细菌耐药分级、发生脓毒症休克等指标.统计学分析采用独立样本t检验、曼-惠特尼U检验和x2x检验.logistic回归分析影响患者预后的危险因素;Spearman相关系数判定ISOFA与各评分系统包括查尔森评分(Charlson'sweighted index of comorbidities,WIC)、英国国家早期预警评分(national early warning system,NEWS)、急性生理学和慢性健康状况评分II(acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ,APACHE II)、简化急性生理学评分II(simplified acute physiology score Ⅱ,SAPS II)、急性脓毒症病死率评分(mortality in emergency department sepsis score,MEDS)、序贯器官衰竭评分(sequential organ failure assessment,SOFA)、急性胃肠损伤分级(acute gastrointestinal injury,AGI)的相关性;采用受试者操作特征曲线下面积(area under receiver operating characteristic curve,AUROC)比较各评分系统对肺炎克雷伯菌脓毒症预后的评估价值.采用Kaplan-Meier生存曲线评价ISOFA风险分层在生存情况中的意义.结果 379例肺炎克雷伯菌脓毒症患者中,存活组278例,死亡组101例.2组患者的年龄、性别、发生脓毒症休克、细菌耐药分级、C反应蛋白、降钙素原,以及WIC、NEWS、APACHE Ⅱ、SAPS II、MEDS、SOFA、AGI、ISOFA比较,差异均有统计学意义(t=-3.218,x2=6.781、24.374、27.208,Z =-3.689、-5.022、-4.396、-4.697、-7.438、-6.348、-6.358、-8.676、-6.680、-11.658,均P<0.01).单因素分析得到ISOFA 的计算方法 :ISOFA = SOFA+1.5 x AGI.多因素logistic回归提示ISOFA、性别、SOFA、降钙素原、C反应蛋白、细菌耐药分级是影响预后的独立危险因素.ISOFA 与WIC、NEWS、APACHE II、SAPSⅡ、MEDS、SOFA 的Spearman 相关系数分别为0.327、0.371、0.614、0.564、0.578、0.847.WIC、NEWS、MEDS、SAPS II、APACHE II、SOFA、SOFA+AGI、ISOFA预测肺炎克雷伯菌脓毒症预后的AUROC及95％可信区间分别为0.646(0.584～0.708)、0.657(0.597～0.716)、0.712(0.654～0.771)、0.713(0.653～0.773)、0.749(0.693～0.806)、0.788(0.737～0.838)、0.872(0.826～0.917)、0.891(0.845～0.937),表明ISOFA 预测效果最佳.Kaplan-Meier生存曲线提示,ISOFA低风险水平、中等风险水平、高风险水平间的生存情况差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 ISOFA对预测肺炎克雷伯菌脓毒症预后有重要的临床意义.

摘要： 目的 分析郑州市某三甲医院耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(CRKP)的基因组分型特征.方法 于2019年12月4日至2020年1月10日,自郑州市某三甲教学医院各临床科室送检且开展微生物检测的标本中分离出67株CRKP菌株.通过将全基因组测序和序列分析,确定多位点序列分型(MLST)型别(ST)和碳青霉烯类抗生素耐药基因.基于全基因组SNP构建进化树将67株CRKP划分克隆群,并且分析各克隆群的分离病房和分离日期.结果 67株CRKP分为4种ST型,其中64株为ST11型.ST11型菌株中有62株携带blaKPC-2基因.基于全基因组水平的SNP构建进化树,将64株ST11型菌株分为4个克隆群,其中2个克隆群为优势克隆群,分别包含33株和27株菌;另外2个克隆群分别只包含2株菌.优势克隆群在分离病区和分离日期上均没有聚集性.结论 携带blaKPC-2基因的ST11型菌株已分化出多个克隆群,且可在同一家医院存在多个克隆群菌株的平行、独立流行.

摘要： 目的 提高对侵袭性和非侵袭性肺炎克雷伯菌肝脓肿(KPLA)的临床及CT表现的认识.资料与方法回顾性分析51例KPLA患者的临床与CT资料,其中侵袭性KPLA 26例、非侵袭性KPLA 25例,比较两组KPLA患者的临床及CT表现.结果 与非侵袭性KPLA相比,侵袭性KPLA患者发病年龄更低(t=-2.419),2型糖尿病占比更高(x2=8.670);血小板、总蛋白水平更低(t=-3.118、-3.229),总胆红素更高、住院时间更长(t=2.535、2.810),差异均有统计学意义(P＜0.05).侵袭性KPLA和非侵袭性KPLA在肝脓肿部位、数量、大小、质地、分隔、脓腔气体表现方面差异无统计学意义(P＞0.05);动脉期脓肿周围异常强化发生率较低、血栓性静脉炎发生率较高,差异均有统计学意义(x2=14.334、12.253,P＜0.001).结论 侵袭性KPLA好发于2型糖尿病年轻患者,血小板及总蛋白水平较低,总胆红素水平较高.出现肝静脉血栓性静脉炎及动脉期脓肿周围无异常强化时,多提示脓肿已发生侵袭.

摘要： 目的:观察应用头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦治疗儿童肺炎克雷伯菌肺炎,对比其治疗效果以及细菌清除情况.方法:选择我院76例儿童肺炎克雷伯菌肺炎患儿为研究对象,根据随机数字表法将其分为对照组和观察组,各38例.对照组的患儿应用头孢哌酮/舒巴坦进行治疗,观察组应用哌拉西林/他唑巴坦进行治疗.治疗后,对两组药物的细菌清除效果、治疗效果以及患儿不良反应发生率进行观察与比较.结果:治疗1周后,研究组肺炎克雷伯菌检测阳性率以及清除效果分别为2.60％、97.40％,对照组为7.89％、92.11％,两组患儿的肺炎克雷伯菌检测阳性率均显著降低,研究组的细菌清除效果虽较高,但差异不具有统计学意义(P>0.05);研究组的不良反应发生率为5.26％,对照组为13.15％,研究组的不良反应发生率低于对照组,但差异不具有统计学意义(P>0.05);研究组的治疗有效率为94.73％,对照组为86.84％,与对照组相比,研究组的治疗有效率更高,但差异不具有统计学意义(P>0.05).结论:头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦均有明显的治疗效果,能有效清除患儿肺部细菌,且有较高的安全性.

摘要： 目的 探讨烧伤患者感染肺炎克雷伯菌后对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制.方法 选择2018年5月至2019年10月就诊于浙江省台州市中心医院的感染肺炎克雷伯菌的烧伤患者,并分离10株耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(CR-KP),然后分析CR-KP的耐药程度,采用聚合酶链反应(PCR)法检测常见的耐药基因,并通过质粒接合试验验证耐药基因的存在,同时分析膜孔OmpK36蛋白的表达量.结果 10株菌种均呈现了不同程度的耐药现象.PCR的结果显示全部耐药菌携带NDM基因,4株携带KPC基因,此外,仅有少部分的耐药菌携带产超广谱β-内酰胺酶基因和AmpC基因.质粒接合试验显示大部分接合菌对碳青霉烯类抗生素存在耐药,免疫蛋白印迹结果提示接合菌的膜孔OmpK36蛋白表达量减少.结论 烧伤患者感染肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因是质粒介导的NDM基因插入以及膜孔OmpK36蛋白表达量减少.

摘要： 目的 探讨亚胺培南联合常用抗菌药物对blaKPC-2型碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的体外抗菌作用.方法 选取乐清市人民医院2018年1月至2019年1月分离的6株非重复的经聚合酶链反应和DNA序列确认的blaKPC-2型CRKP菌株,测量其对常用9种抗菌药物的敏感率,采取棋盘稀释法进行亚胺培南联合8种抗菌药物的药物敏感性试验,计算部分抑菌浓度指数(FIC)并评价联合应用效果;通过绘制体外时间-杀菌曲线评估联合用药的杀菌作用.结果 6株blaKPC-2型CRKP菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢他啶、环丙沙星、利福平、头孢噻肟等抗菌药物耐药率为100.00％(6/6),对米诺环素、克拉维酸耐药率为66.67％(4/6),对替加环素耐药率为33.33％(2/6);亚胺培南联合替加环素抗菌作用较好,对4株起协同作用、2株起相加作用;以菌株KPN2进行亚胺培南联合替加环素治疗的时间-杀菌曲线显示:菌株KPN2在亚胺培南1/2最低抑菌浓度(MIC)与替加环素1/4 MIC在(t+2)时杀菌率＞95％,此作用可维持(t+10)h至(t+12)h,亚胺培南联合替加环素对002杀菌率逐步降低,002生长曲线逐渐上升.结论 体外药物敏感性试验显示,亚胺培南联合替加环素对blaKPC-2型CRKP具有较好协同杀菌作用,可供临床治疗blaKPC-2型CRKP感染患者时参考.

摘要： 目的 分析1株碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药及毒力特征.方法 将浙江大学医学院附属第二医院粪便中分离到的1株CRKP命名为肺炎克雷伯菌C35,采用微量肉汤稀释法测定抗菌药物的最低抑菌浓度;全基因组测序和基因组分析确定菌株所携带耐药基因和毒力基因;核心基因组单核苷酸多态性(SNP)分型分析CRKP菌株之间的同源性关系;采用接合试验评估耐药基因的转移能力和效率;采用大蜡螟毒力实验测定菌株的毒力表型.结果 肺炎克雷伯菌C35对大多数受试药物耐药,尤其碳青霉烯类、舒巴坦和多黏菌素.SNP分型显示肺炎克雷伯菌C35与多株分离自本院不同病房的CRKP菌株具有很高的同源性.该菌属于ST11型,携带包括blaKPC-2、blaCTX-M-199、mcr-1和tet(A)变异体等在内的13种耐药基因.blaKPc-2基因位于＞69800 bp的IncFⅡ型质粒上,blaCTX-M-199和mcr-1基因共同位于＞64800 bp的IncI2型质粒上,tet(A)变异体位于83628 bp的不可分型质粒上,3种质粒均为可接合性质粒.肺炎克雷伯菌C35还携带rmpA和rmpA2毒力基因以及气杆菌素(aerobactin)相关基因iucABCD,为典型的碳青霉烯耐药高毒力肺炎克雷伯菌(CR-hvKP).该菌在大蜡螟感染模型中也显示了较强的毒力表型,感染肺炎克雷伯菌C35菌株48 h后大蜡螟幼虫存活率仅为16.7％,明显低于无毒力对照菌株的80.0％.结论 本研究在1株肠道定植CR-hvKP中检测到多个可按合性耐药质粒,包括同时携带blaCTX-M-199和mcr-1基因的IncI2质粒,需引起警惕,并对此类菌株进行主动监测.

摘要： 目的 对1株致下肢气性坏疽肺炎克雷伯菌(KPN)进行全基因组测序及毒力特性分析,为认识致社区获得性重症感染KPN分子毒力特征提供参考.方法 患者于2018年3月13日进入急诊科治疗,主要临床症状为高热、左下肢气性坏疽及糖尿病酮症酸中毒.取患者脓液标本进行分离培养、菌株鉴定、高黏表型及药敏检测.对菌株进行全基因组测序并分析其多位点序列分型、荚膜分型、质粒分型、毒力及耐药基因.通过接合及消除试验分析质粒特征.血清杀菌试验及大蜡螟感染模型分析菌株毒力表型,双样本t检验比较待测菌株和对照菌株对大蜡螟幼虫半数致死率(LD50)差异.结果 检出菌株KPN41053,仅对氨苄西林耐药,高黏表型阴性.KPN41053染色体总长5 377 071 bp,属于ST660型,荚膜型为K16;携带一个IncFIB(K)/HI1B型毒力质粒(207 506bp),质粒包含多种毒力因子且序列与pLVPK高度相似,但其中rmpA和rmpA2均为假基因.该质粒接合试验阴性.通过质粒消除获得变异株KPN41053_PC.毒力表型分析显示,KPN41053为血清抗性(6级),而KPN41053_PC为血清中度敏感(3级),KPN41053对大蜡螟幼虫的lgLD50与高毒力对照株(ST23-K1 型)差异无统计学意义(t=0.32,P=0.765),低于 KPN41053_PC(t=5.97,P=0.004).结论 KPN41053为1株属于ST660型且高黏表型阴性的非典型高毒力KPN,毒力质粒为其关键毒力因子.KPN可导致糖尿病患者发生社区获得性气性坏疽.

摘要： 目的 探讨超声介入联合抗生素治疗肺炎克雷伯菌肝脓肿的临床特点,为临床诊治提供参考依据.方法 回顾性分析首都医科大学附属北京友谊医院2015年1月至2020年11月收治的100例肺炎克雷伯菌肝脓肿患者的临床资料.记录患者性别、年龄、脓肿直径、脓肿数量、脓肿分隔、气腔形成、住院时间,分析治疗前后血常规白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(GR％)、血小板计数(PLT)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血总胆红素(TBIL)、血浆凝血酶原活动度(PTA)等.结果 经联合治疗后,患者感染指标(WBC、PLT、GR％、CRP、PCT)明显下降,肝功能指标(ALT、AST、TBIL、PIA)明显好转,差异有统计学意义(P＜0.05).将患者以是否存在糖尿病分组,结果显示糖尿病组气腔形成的比例更高(x2=8.632,P=0.003),其余各临床指标组间差异无统计学意义(P＞0.05).糖尿病组以HbA1c=9％为界值分为两组进行分析,结果显示HbA1c＞9％组患病年龄偏小(t=2.861,P=0.006)、男性较多(X2=6.81,P=0.013)、形成多发脓肿的比例更大(x2=10.304,P=0.001),余临床指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 超声介入联合抗生素可有效治疗肺炎克雷伯菌肝脓肿,合并糖尿病者易形成气腔,临床中需予重点关注.

摘要： 本例为较典型的社区获得性肺炎克雷伯菌肺炎。患者的酗酒史可能是其易患因素。肺炎克雷伯菌为革兰氏阴性杆菌，是院内获得性感染的常见致病菌之一，而由此菌所致的社区获得性肺炎患者中，有酗酒更或肝病史的患者比例更高。此类肺炎进展较快，易迅速进展为感染性休克，此例患者即在发病i天后出现休克症状。此患者起病时多次查外周血白细胞及中性分类均无升高，反而降低，如在病情早期症状尚不严重时，可能误诊为病毒感染，但实际中严重脓毒症早期出现血白细胞下降亦是典型表现，在多个脓毒症指南中均有提及，只是传统的“细菌感染时血象升高”的观念可能仍盘根于一些一线医生的思维中。

摘要： 本发明涉及一种快速检测肺炎克雷伯菌的Elisa检测试剂盒及其制备方法。该试剂盒包含有：包被抗肺炎克雷伯菌ABC transporter substrate‑binding protein receptor及GlpQ蛋白多克隆抗体的酶标板、抗肺炎克雷伯菌FepA及MltD蛋白多克隆抗体、肺炎克雷伯菌阳性对照、阴性对照、洗涤液、酶标二抗、酶显色底物和终止液。本发明的试剂盒对肺炎克雷伯菌四种特异性表面蛋白进行联合检测，大大提高了肺炎克雷伯菌检测的灵敏度、特异性和可重复性，可用于对肺炎克雷伯菌非诊断性检测及研究工作。

摘要： 本发明涉及对肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种或臭鼻亚种特异的ITS，包括a)SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2、或b)不同于a)但编码的RNA序列与a)所编码的RNA序列相同的核苷酸序列，或上述a)或b)中缺失、替换或插入一或多个碱基、仍具有所述核苷酸功能的DNA序列或其互补DNA或RNA序列。上述ITS序列用于检测肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种或臭鼻亚种。扩增上述ITS序列的引物为SEQ ID NO：5-6或其互补的DNA序列。本发明还涉及检测肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种或臭鼻亚种的PCR试剂盒。本发明的ITS序列及试剂盒实现了对肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种或臭鼻亚种快速、准确、简便的检测和鉴定。

摘要： 本发明涉及一种快速检测肺炎克雷伯菌的Elisa检测试剂盒及其制备方法。该试剂盒包含有：包被抗肺炎克雷伯菌ABC transporter substrate‑binding protein receptor及GlpQ蛋白多克隆抗体的酶标板、抗肺炎克雷伯菌FepA及MltD蛋白多克隆抗体、肺炎克雷伯菌阳性对照、阴性对照、洗涤液、酶标二抗、酶显色底物和终止液。本发明的试剂盒对肺炎克雷伯菌四种特异性表面蛋白进行联合检测，大大提高了肺炎克雷伯菌检测的灵敏度、特异性和可重复性，可用于对肺炎克雷伯菌非诊断性检测及研究工作。

摘要： 本发明提供了一种肺炎克雷伯菌的扩增引物组、应用及肺炎克雷伯菌的检测方法，检测肺炎克雷伯菌的方法，包括以下步骤：1)提取待检测肺炎克雷伯菌样品的基因组；2)提供所述肺炎克雷伯菌的特异基因rcsA扩增引物组：CP1、CP2、F1、F2、D1、C1、R1、D2、C2、R2、C1*、C2*以及D1*、D2*；3)在包括所述扩增引物组的多交叉恒温扩增反应体系下，使用待检测肺炎克雷伯菌样品的基因组核酸作为模板进行恒温扩增，得到扩增产物；4)使用金纳米生物传感器检测步骤3)的扩增产物。本发明方法以多交叉恒温扩增为基础，结合纳米生物检测技术，能够快捷，敏感，高特异性的鉴定肺炎克雷伯菌。

摘要： 本发明涉及对肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种或臭鼻亚种特异的ITS，包括a)SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2、或b)不同于a)但编码的RNA序列与a)所编码的RNA序列相同的核苷酸序列，或上述a)或b)中缺失、替换或插入一或多个碱基、仍具有所述核苷酸功能的DNA序列或其互补DNA或RNA序列。上述ITS序列用于检测肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种或臭鼻亚种。扩增上述ITS序列的引物为SEQ ID NO：5－6或其互补的DNA序列。本发明还涉及检测肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种或臭鼻亚种的PCR试剂盒。本发明的ITS序列及试剂盒实现了对肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种或臭鼻亚种快速、准确、简便的检测和鉴定。

摘要： 本发明公开了一株肺炎克雷伯菌噬菌体vB_KpnP_ZK1，同时还提供了其医用用途，所述的菌株已于2020年11月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏名为Klebsiella pneumonia phagevB_KpnP_ZK1，保藏编号为：CCTCC NO：M 2020713。本发明的噬菌体具有较强的特异性，可选择性的杀灭K1型肺炎克雷伯菌，不杀伤其他有益细菌，且清除作用良好；本发明的噬菌体可以单独或与其他物质复配使用，可配置成喷洒液等液体试剂为消毒净化环境提供一种安全、无毒的噬菌体消杀产品。

摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌多重PCR检测方法。本发明根据兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的保守基因序列设计的特异性引物，并进一步优化建立了适宜于快速准确进行兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌检测的多重PCR扩增方法。该方法可特异性地检测出混合感染的兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌，检测成本低、效率高，适用于相关临床病例的快速诊断及流行病学调查。

摘要： 本发明提供了一种临床血液中检测肺炎克雷伯菌病原菌的方法，包括以下步骤：S1、血液中肺炎克雷伯菌基因组DNA的提取；S2、血液中肺炎克雷伯菌PCR检测：S2.1、利用肺炎克雷伯菌基因组DNA序列设计一段特异性的PCR引物，包括如SEQ ID NO.1所示的正向引物和SEQ ID NO.2所示的反向引物；引物所扩增的目的片段长度为411bp；S2.2、以步骤S1中从血液中提取的肺炎克雷伯菌基因组DNA为模板，采用特异性的PCR引物进行PCR扩增；S2.3、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测，扩增出长度为411bp的片段则判定为检测出肺炎克雷伯菌病原菌。本发明对血液中肺炎克雷伯菌的检测极限达到10CFU/mL。本发明不仅提高了血液中肺炎克雷伯菌感染的检测灵敏度，而且缩短了检测周期。

摘要： 本公开涉及一种用于检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及其毒力因子和耐药基因的核酸试剂、试剂盒、系统及方法，所述核酸试剂包括分别彼此独立存放或互相任意混合存放的SEQIDNO.1‑26所示的引物和SEQIDNO.29‑41所示的探针。本公开通过以上所述的引物和探针建立了检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及其携带的6种毒力因子和5种耐药基因的核酸试剂、试剂盒、系统及方法，能够实现快速、全面、敏感、特异、自动的检测结果判定，显著提高了对上述目标检测基因同时进行检测的敏感性、特异性和简便性。

摘要： 本发明涉及一种同步检测肺炎克雷伯氏菌和豚鼠气单胞菌的双重PCR引物及其检测方法，属于生物检测技术领域。去以肺炎克雷伯氏菌ompC基因和豚鼠气单胞菌的ahal基因为检测基因，在同一反应体系中可同时检测肺炎克雷伯氏菌和豚鼠气单胞菌，扩增产物大小分别为418bp和213bp，两对引物的检测灵敏度分别达到了1.0×10