Hedgehog信号通路

摘要： 背景:课题组前期研究发现,糖皮质激素可抑制Hedgehog信号通路关键基因的表达,从而扰乱骨髓间充质干细胞成骨、成脂与成血管方向的分化,进而破坏骨内血供与骨组织结构,而补肾活血胶囊对此具有一定的治疗作用。目的:观察补肾活血胶囊对激素诱导的股骨头坏死SD大鼠骨组织破坏的修复作用,进一步研究补肾活血胶囊对成骨与Hedgehog信号通路相关因子的影响机制。方法:SD大鼠臀肌注射甲泼尼龙琥珀酸钠建立激素诱导相关的股骨头坏死大鼠模型;分别灌胃给予低、中、高不同剂量的补肾活血胶囊干预;并以臀肌注射生理盐水的大鼠为对照。给药8周后取材,通过剖检大体观察、组织病理学检查、qPCR与Western blot分析在不同层面综合评价补肾活血胶囊对激素性股骨头坏死大鼠骨组织修复的影响及其作用机制。结果与结论:①大体观察:干预8周后,各组大鼠股骨头样本大体观无明显差异;②苏木精-伊红染色:与模型组比较,各剂量补肾活血胶囊组大鼠均显著提高了骨小梁面积、降低了空骨陷窝率;③免疫组化:与模型组比较,各剂量补肾活血胶囊组大鼠在不同程度上提高了碱性磷酸酶、核心结合因子α1、Ⅰ型胶原蛋白、骨桥蛋白的表达;④qPCR检测:与模型组比较,各剂量补肾活血胶囊组大鼠提升了成骨相关指标碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原蛋白、核心结合因子α1与Hedgehog信号通路相关指标音猬因子、核转录因子1、核转录因子2的mRNA表达;⑤Western blot检测:与模型组比较,各剂量补肾活血胶囊组大鼠均在不同程度上提高了成骨相关指标碱性磷酸酶、核心结合因子α1、Ⅰ型胶原蛋白、骨桥蛋白与Hedgehog信号通路相关指标音猬因子、核转录因子2的蛋白表达;⑥研究初步证实了补肾活血胶囊对激素性股骨头坏死有一定的治疗作用,其作用机制与成骨相关的Hedgehog信号通路具有一定相关性。

摘要： 背景:激素性股骨头坏死是骨科常见的进行性难治性疾病,严重影响患者的正常生活和工作.骨髓间充质干细胞成骨成脂分化异常被证实参与了激素性股骨头坏死的发生发展及防治,但其作用机制尚不清楚.目的:观察补肾活血胶囊对糖皮质激素处理的骨髓间充质干细胞成骨-成脂分化及Hedgehog信号通路相关因子的影响.方法:分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,运用不同剂量的补肾活血胶囊含药血清及糖皮质激素干预,CCK-8法检测细胞增殖活性,茜素红染色和油红O染色观察骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化情况,Western blot检测细胞中成骨、成脂及Hedgehog信号通路相关因子的蛋白表达变化.结果 与结论:①补肾活血胶囊含药血清不仅能促进正常大鼠骨髓间充质干细胞的增殖,而且能明显改善糖皮质激素对骨髓间充质干细胞增殖的抑制效应;②成骨诱导3周后,补肾活血胶囊含药血清组与空白对照组相比成骨诱导能力增强,尤其是补肾活血胶囊中剂量组表现出更高的成骨活性;③成脂诱导2周后,油红O染色显示补肾活血胶囊含药血清组与空白对照组相比阳性染色面积均明显减少,其中补肾活血胶囊中剂量组抑制程度最为明显;④各组干预3 d后,Western blot检测显示补肾活血胶囊含药血清均能增强骨髓间充质干细胞中成骨因子Runx2、Col1a1和Hedgehog信号通路相关因子Shh、Gli1的蛋白表达,减弱成脂因子PPARγ、C/EBPα的蛋白表达;⑤结果表明,补肾活血胶囊含药血清能介导Hedgehog信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化、抑制其成脂分化.

摘要： 背景:激素性股骨头坏死是骨科常见的进行性难治性疾病,严重影响患者的正常生活和工作。骨髓间充质干细胞成骨成脂分化异常被证实参与了激素性股骨头坏死的发生发展及防治,但其作用机制尚不清楚。目的:观察补肾活血胶囊对糖皮质激素处理的骨髓间充质干细胞成骨-成脂分化及Hedgehog信号通路相关因子的影响。方法:分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,运用不同剂量的补肾活血胶囊含药血清及糖皮质激素干预,CCK-8法检测细胞增殖活性,茜素红染色和油红O染色观察骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化情况,Western blot检测细胞中成骨、成脂及Hedgehog信号通路相关因子的蛋白表达变化。结果与结论:(1)补肾活血胶囊含药血清不仅能促进正常大鼠骨髓间充质干细胞的增殖,而且能明显改善糖皮质激素对骨髓间充质干细胞增殖的抑制效应;(2)成骨诱导3周后,补肾活血胶囊含药血清组与空白对照组相比成骨诱导能力增强,尤其是补肾活血胶囊中剂量组表现出更高的成骨活性;(3)成脂诱导2周后,油红O染色显示补肾活血胶囊含药血清组与空白对照组相比阳性染色面积均明显减少,其中补肾活血胶囊中剂量组抑制程度最为明显;(4)各组干预3 d后,Western blot检测显示补肾活血胶囊含药血清均能增强骨髓间充质干细胞中成骨因子Runx2、Col1a1和Hedgehog信号通路相关因子Shh、Gli1的蛋白表达,减弱成脂因子PPARγ、C/EBPα的蛋白表达;(5)结果表明,补肾活血胶囊含药血清能介导Hedgehog信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化、抑制其成脂分化。

摘要： 背景:股骨头坏死病因与发病机制尚不明确,急待开展深入研究加以探索.目的:检测全髋关节置换后坏死股骨头样本中坏死区骨组织Hedgehog信号通路、成骨与成血管相关标志物的蛋白表达情况,尝试探究酒精、激素与创伤等不同因素致病的机制,为后续临床对股骨头坏死的防治提供理论支持.方法:收集山东中医药大学附属医院在2017年12月至2019年12月接受全髋关节置换后的股骨头坏死与股骨颈骨折患者的股骨头样本,挑选符合纳入标准的股骨头按病因分别归入对照组、特发组、酒精组、激素组以及创伤术后组,采用Western blot法检测不同病因坏死骨组织中Hedgehog信号通路、成骨与成血管相关指标的蛋白表达情况.结果 与结论:①通过观察各组股骨头样本的大致形态与冠状面,发现不同病因股骨头坏死患者股骨头样本在大致形态与剖面具有较为相似的病理表现,同时有相似的坏死和修复的组织学特征;②Western blot结果示,在不同病因股骨头坏死患者股骨头样本中成骨相关指标碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原蛋白、骨桥蛋白及RUNX2,成血管相关指标CD31、血管内皮生长因子A与激酶插入域受体、血管性血友病因子,以及Hedgehog信号通路指标刺猬蛋白、锌指蛋白1、锌指蛋白2的蛋白表达水平相较于对照组均出现了不同程度的改变;③结果 证明股骨头坏死的发生发展与成骨、成血管以及Hedgehog信号通路之间或存在着密切关联,而更深层机制则有待进一步研究.

摘要： 目的:利用体外培养的细胞研究抑制Hedgehog信号通路对恶性胸膜间皮瘤细胞增殖的影响。方法:使用浓度不同的Hedgehog通路特异性抑制剂Vismodegib,作用于恶性胸膜间皮瘤细胞;使用CCK-8法检测细胞的增殖抑制状态;RT-PCR方法检测恶性胸膜间皮瘤细胞中Gli1、VEGF、Wnt、TGF-βmRNA表达水平变化。结果:经Vismodegib浓度为25μmol/L作用48 h后,细胞形态有所改变;CCK-8检测显示经5、10、15、20、25、30μmol/L Vismodegib处理48 h后,细胞的增殖抑制率分别为10.31%、25.59%、34.53%、43.13%、60.69%、88.24%,Vismodegib能够显著抑制恶性胸膜间皮瘤细胞的增殖;进一步分析20.38μmol/L浓度Vismodegib作用于恶性胸膜间皮瘤细胞6、12、24、48 h后及5、10、15、20、25μmol/L Vismodegib处理恶性胸膜间皮瘤细胞48 h后,细胞Gli1、VEGF、Wnt、TGF-βmRNA的表达均下调(P<0.05)。结论:Vismodegib可以明显抑制恶性胸膜间皮瘤细胞的增殖,Hedgehog信号通路的激活可能是维持恶性胸膜间皮瘤细胞生长所须条件,下调Hedgehog信号通路抑制下游靶基因的表达。

摘要： 目的研究Hedgehog信号通路抑制剂维莫德吉(GDC-0449)对CCl_(4)联合二乙酰氨基芴(2-AAF)诱导的大鼠肝纤维化的干预作用。方法将18只Fisher344雌性大鼠随机分为正常组、CCl_(4)联合2-AAF模型组(CCl_(4)/2-AAF组)和GDC-0449组,每组6只。CCl_(4)/2-AAF组和GDC-0449组大鼠按2 mL/kg体质量皮下注射30%CCl_(4)-橄榄油溶液,每周2次,持续造模6周;自第7周始,在注射CCl_(4)-橄榄油溶液同时予2-AAF(100 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,同时GDC-0449组大鼠按25 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃干预,正常组大鼠予等体积橄榄油溶液注射及生理盐水灌胃,9周末处死取材。HE染色和天狼猩红(SR)染色观察各组大鼠肝组织病理及胶原沉积变化,SR阳性染色面积半定量分析和Ishak评分评估纤维化程度;碱水解法测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)水平;免疫组化、Western Blot、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肝组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、细胞角蛋白(CK)19、CK7、上皮细胞黏附分子(Epcam)及Hedgehog信号通路表达变化;免疫荧光共染观察CK19和卵圆细胞标志物6(OV6)共定位情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与正常组相比,CCl_(4)/2-AAF组大鼠肝组织炎性细胞聚集、胶原纤维沉积明显,存在明显的假小叶结构;肝组织Hyp水平和胶原阳性面积比显著增加(P值均<0.05),Ishak评分显著上升(P<0.05);α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ、Epcam、CK19、CK7、跨膜转运蛋白Smoothened(Smo)、Hedgehog配体Desert Hedgehog(Dhh)、Indian Hedgehog结合膜受体Patched(Ptch2)、胶质瘤相关致癌基因(Gli1、Gli2、Gli3)的表达显著增多(P值均<0.05);免疫荧光共染显示CCl_(4)/2-AAF组大鼠肝组织内CK19阳性细胞均表达OV6,且较正常组显著增多。与CCl_(4)/2-AAF组相比,GDC-0449组肝组织炎性细胞聚集、胶原沉积明显减少;肝组织Hyp水平、胶原阳性面积比显著降低(P值均<0.05),Ishak评分显著下降(P<0.05);α-SMA、Epcam、CK19、CK7、Smo、Ptch2、Gli1、Gli2和Gli3的表达显著减少(P值均<0.05);免疫荧光共染显示肝组织内共表达OV6与CK19的阳性细胞数显著减少。结论Hedgehog信号通路抑制剂GDC-0449显著抑制了CCl_(4)/2-AAF诱导的大鼠肝纤维化进展,且其作用机制与抑制肝星状细胞活化、胶原沉积,阻抑肝祖细胞活化增殖,并抑制其向胆管上皮细胞分化有关。

摘要： 目的研究Hedgehog(Hh)通路转录因子Gli1表达及6-姜烯酚介导Hh/Gli1通路对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及分子机制。方法应用慢病毒建立过表达Gli1基因MDA-MB-231稳转细胞株;qRT-PCR及Western blot实验验证Gli1过表达效率;CCK-8和EdU实验检测Gli1表达及6-姜烯酚对细胞活力的影响;细胞划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot实验检测Hh通路相关基因蛋白表达水平。结果成功建立MDA-MB-231-Gli1过表达稳转细胞株,当Gli1基因过表达时,细胞侵袭迁移能力明显提高,MDA-MB-231细胞中Hh通路基因Gli1,EMT标志基因Vimentin及Hippo通路基因YAP、TEAD4表达升高;应用Hh/Gli通路抑制剂Gant61抑制Gli1表达时,增殖、侵袭、迁移能力降低。应用6-姜烯酚处理细胞其增殖及侵袭迁移能力减弱,且Hh通路基因Gli1、Vimentin、YAP、TEAD4蛋白表达降低。结论Gli1基因能促进MDA-MB-231细胞侵袭迁移能力;6-姜烯酚能够通过Hedgehog信号通路抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭迁移能力,转录因子Gli1可能是其作用靶点之一。

摘要： 结直肠癌作为全球常见的恶性肿瘤之一,具有较高的发病率和死亡率,其发病机制较为复杂,可能与年龄、饮食习惯以及遗传等因素相关。目前外科手术仍为结直肠癌的主要治疗方式。Hedgehog信号通路在胚胎及生长发育期具有重要调节作用,该通路在包括结直肠癌在内的某些实体瘤的发生发展中扮演重要角色。Hedgehog信号通路与结直肠癌的发生机制存在相关性,甚至影响结直肠癌的侵袭能力,同时Hedgehog信号通路也可作为结直肠癌预后的评估指标及治疗靶点。

摘要： 目的探索miRNA-19a对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡和转移的影响,及对SMO蛋白和Hedgehog信号通路的影响。方法人骨髓瘤细胞系U266B1、LP-1、RPMI 8226和NCI-H929为研究模型,首先检测4种细胞中SMO蛋白的背景表达,然后使用U266B1细胞作为模型,设计了miRNA-19a inhibitor,以此建立miRNA-19a敲低组、对照质粒组和空载组。探究miRNA-19a敲减后细胞中SMO蛋白含量以及细胞增殖、凋亡和转移的变化。采用MTT法检测细胞毒性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell试验检测细胞侵袭能力。结果SMO蛋白在U266B1、LP-1、RPMI 8226和NCI-H929细胞系中表达量分别为0.925±0.057、0.889±0.067、0.904±0.075、0.507±0.048,其中以NCI-H929细胞系中表达量较低(P<0.05)。MiRNA-19a敲低组、对照质粒组和空载组miRNA-19a含量分别为0.325±0.058、1.158±0.128、1.172±0.131,miRNA-19a敲低组miRNA-19a含量显著降低(P<0.05)。对照质粒组、miRNA-19a敲低组和空载组SMO蛋白表达量分别为0.787±0.104、0.354±0.068、0.807±0.106,miRNA-19a敲低组SMO蛋白含量明显降低(P<0.05)。MTT实验显示,miRNA-19a敲低组细胞增殖OD值在24~72 h内明显低于空载组和对照质粒组(均P<0.05)。凋亡实验显示,miRNA-19a敲低组细胞凋亡率明显高于空载组和对照质粒组(均P<0.05)。Transwell实验显示,miRNA-19a敲低组侵袭细胞数明显低于其他2组(均P<0.05)。结论miRNA-19a/SMO蛋白可能是骨髓瘤细胞系U266B1中控制细胞恶性增长的关键信号,可以作为多发性骨髓瘤治疗的潜在靶点。

摘要： 目的:观察发育过程中咀嚼力缺乏对小鼠下颌牙槽骨改建的影响,并探讨Hedgehog信号通路在该过程中的表达变化。方法:选取3周龄C57BL/6J雄性小鼠,将其随机分为2组,分别通过正常饮食(hard diet,HD)和软食(soft diet,SD)喂养1周和3周,取小鼠下颌骨,应用micro-CT扫描及组织学染色法[HE染色、Goldner三色染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、免疫荧光染色]对骨改建情况进行分析。选取下颌磨牙区牙槽骨并提取RNA,行实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR),研究Hedgehog信号通路在骨改建中的变化情况。结果:喂养1周后,软食组小鼠根分叉区牙槽骨量即出现显著降低;喂养3周后,其骨量丢失进一步加重。组织学染色结果发现,软食组根方1/2区域牙槽骨矿化程度显著降低,矿化区域显著减少,且破骨活动显著增强。Hedgehog信号通路下游分子Smoothened(SMO)、Patched1(PTCH1)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(glioma-associated oncogene homolog 1,GLI1)表达上调。结论:下颌骨发育过程中,咀嚼刺激不足表现为牙槽骨量降低,Hedgehog通路相关分子SMO、PTCH1、GLI1、IFT88表达均上调,提示Hedgehog信号通路在该过程中起重要作用。

摘要： 目的:肝纤维化是肝脏对各种急慢性炎症刺激损伤修复反应的结果,活化的肝星状是肝纤维化发生的核心环节.中药活性成分姜黄素具有显著的抑制肝星状细胞活化作用,然而其中机制尚不明确.有研究显示hedgehog信号通路与肝星状细胞的激活密切相关.本论文研究hedgehog信号通路在姜黄素体外对抑制肝星状细胞活化过程中的作用.rn 方法:大鼠肝星状细胞体外培养。免疫荧光和western blot法检测hedgehog信号通路相关因子以及肝星状细胞活化标志物的表达。流式细胞仪检测肝细胞细胞增殖周期及凋亡率。Transwell迁移实验检测肝星状细胞迁移能力。rn 结果:本研究发现姜黄素能够通过阻断hedgehog信号通路抑制肝星状细胞增殖，促进活化的肝星状细胞凋亡，抑制肝星状细胞活化标志物的表达和肝星状细胞的迁移能力并促进肝星状细胞脂滴堆积。rn 结论:姜黄素可通过阻断hedgehog信号通路抑制肝星状细胞活化。这一研究进一步揭示了姜黄素抑制肝纤维化的分子机理。

摘要： 目的:在构建三阴性乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer, TNBC)的蛋白质相互作用网络基础上,探讨化痰散结方对TNBC MDA-MB-231细胞增殖抑制作用以及对Hedgehog(Hh)通路转录因子Gli1表达的影响. 方法:筛选在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获得TNBC相关基因;使用STRING进行文本挖掘并构建TNBC蛋白质相互作用网络;将互作数据读入Cytoscape3.4.0,分别应用插件JEPETTO 1.3.1和MCODE1.4.2实现拓扑分析和聚类分析;基于DAVID数据库富集关键通路用于表征簇的生物学重要性.针对关键通路Hh及其转录因子Gli1,采用MTT法检测化痰散结方对MDA-MB-231细胞的增殖抑制率,Western blot法检测Gli1蛋白的表达情况. 结果:构建了由1537个节点(蛋白质)和23681个边(相互作用)组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键通路Hh信号传导通路和基因Gli1.实验结果表明化痰散结方能抑制MDA-MB-231细胞的增殖并能降低Gli1蛋白的表达. 结论:TNBC蛋白质相互作用网络是一个受多信号通路传导、多基因调控的复杂过程,其中Hh通路及其下游转录基因Gli1很可能是关键节点,而化痰散结方对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用机制之一是降低Hh通路中Gli1的表达.

摘要： 目的:在构建三阴性乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer, TNBC)的蛋白质相互作用网络基础上,探讨化痰散结方对TNBC MDA-MB-231细胞增殖抑制作用以及对Hedgehog(Hh)通路转录因子Gli1表达的影响. 方法:筛选在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获得TNBC相关基因;使用STRING进行文本挖掘并构建TNBC蛋白质相互作用网络;将互作数据读入Cytoscape3.4.0,分别应用插件JEPETTO 1.3.1和MCODE1.4.2实现拓扑分析和聚类分析;基于DAVID数据库富集关键通路用于表征簇的生物学重要性.针对关键通路Hh及其转录因子Gli1,采用MTT法检测化痰散结方对MDA-MB-231细胞的增殖抑制率,Western blot法检测Gli1蛋白的表达情况. 结果:构建了由1537个节点(蛋白质)和23681个边(相互作用)组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键通路Hh信号传导通路和基因Gli1.实验结果表明化痰散结方能抑制MDA-MB-231细胞的增殖并能降低Gli1蛋白的表达. 结论:TNBC蛋白质相互作用网络是一个受多信号通路传导、多基因调控的复杂过程,其中Hh通路及其下游转录基因Gli1很可能是关键节点,而化痰散结方对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用机制之一是降低Hh通路中Gli1的表达.

摘要： 目的:在构建三阴性乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer, TNBC)的蛋白质相互作用网络基础上,探讨化痰散结方对TNBC MDA-MB-231细胞增殖抑制作用以及对Hedgehog(Hh)通路转录因子Gli1表达的影响. 方法:筛选在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获得TNBC相关基因;使用STRING进行文本挖掘并构建TNBC蛋白质相互作用网络;将互作数据读入Cytoscape3.4.0,分别应用插件JEPETTO 1.3.1和MCODE1.4.2实现拓扑分析和聚类分析;基于DAVID数据库富集关键通路用于表征簇的生物学重要性.针对关键通路Hh及其转录因子Gli1,采用MTT法检测化痰散结方对MDA-MB-231细胞的增殖抑制率,Western blot法检测Gli1蛋白的表达情况. 结果:构建了由1537个节点(蛋白质)和23681个边(相互作用)组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键通路Hh信号传导通路和基因Gli1.实验结果表明化痰散结方能抑制MDA-MB-231细胞的增殖并能降低Gli1蛋白的表达. 结论:TNBC蛋白质相互作用网络是一个受多信号通路传导、多基因调控的复杂过程,其中Hh通路及其下游转录基因Gli1很可能是关键节点,而化痰散结方对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用机制之一是降低Hh通路中Gli1的表达.

摘要： 目的:在构建三阴性乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer, TNBC)的蛋白质相互作用网络基础上,探讨化痰散结方对TNBC MDA-MB-231细胞增殖抑制作用以及对Hedgehog(Hh)通路转录因子Gli1表达的影响. 方法:筛选在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获得TNBC相关基因;使用STRING进行文本挖掘并构建TNBC蛋白质相互作用网络;将互作数据读入Cytoscape3.4.0,分别应用插件JEPETTO 1.3.1和MCODE1.4.2实现拓扑分析和聚类分析;基于DAVID数据库富集关键通路用于表征簇的生物学重要性.针对关键通路Hh及其转录因子Gli1,采用MTT法检测化痰散结方对MDA-MB-231细胞的增殖抑制率,Western blot法检测Gli1蛋白的表达情况. 结果:构建了由1537个节点(蛋白质)和23681个边(相互作用)组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键通路Hh信号传导通路和基因Gli1.实验结果表明化痰散结方能抑制MDA-MB-231细胞的增殖并能降低Gli1蛋白的表达. 结论:TNBC蛋白质相互作用网络是一个受多信号通路传导、多基因调控的复杂过程,其中Hh通路及其下游转录基因Gli1很可能是关键节点,而化痰散结方对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用机制之一是降低Hh通路中Gli1的表达.

摘要： 目的:在构建三阴性乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer, TNBC)的蛋白质相互作用网络基础上,探讨化痰散结方对TNBC MDA-MB-231细胞增殖抑制作用以及对Hedgehog(Hh)通路转录因子Gli1表达的影响. 方法:筛选在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获得TNBC相关基因;使用STRING进行文本挖掘并构建TNBC蛋白质相互作用网络;将互作数据读入Cytoscape3.4.0,分别应用插件JEPETTO 1.3.1和MCODE1.4.2实现拓扑分析和聚类分析;基于DAVID数据库富集关键通路用于表征簇的生物学重要性.针对关键通路Hh及其转录因子Gli1,采用MTT法检测化痰散结方对MDA-MB-231细胞的增殖抑制率,Western blot法检测Gli1蛋白的表达情况. 结果:构建了由1537个节点(蛋白质)和23681个边(相互作用)组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键通路Hh信号传导通路和基因Gli1.实验结果表明化痰散结方能抑制MDA-MB-231细胞的增殖并能降低Gli1蛋白的表达. 结论:TNBC蛋白质相互作用网络是一个受多信号通路传导、多基因调控的复杂过程,其中Hh通路及其下游转录基因Gli1很可能是关键节点,而化痰散结方对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用机制之一是降低Hh通路中Gli1的表达.

摘要： 研究Hedgehog (Hh)信号通路及Wnt信号通路在乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)药物抵抗中的作用及机制.通过CCK-8 assay和球囊形成实验检测MCF-7细胞和无血清非黏附悬浮培养富集BCSCs的MCF-7 mammosphere (MCF-7 MS)对紫杉醇和盐霉素反应的差异.应用Western blot等检测MCF-7和MCF-7 MS细胞中Hh通路关键因子PTCH、SMO、Gli1、Gli2以及Wnt通路关键因子Wnt1、p-LRP6、β-catenin等的表达,并考察紫杉醇或盐霉素处理后MCF-7和MCF-7 MS细胞中上述蛋白的表达变化差异.结果表明，比Wnt信号通路，Hedgehog信号通路是介导乳腺癌干细胞药物抵抗的重要信号转导通路。

摘要： 研究Hedgehog (Hh)信号通路及Wnt信号通路在乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)药物抵抗中的作用及机制.通过CCK-8 assay和球囊形成实验检测MCF-7细胞和无血清非黏附悬浮培养富集BCSCs的MCF-7 mammosphere (MCF-7 MS)对紫杉醇和盐霉素反应的差异.应用Western blot等检测MCF-7和MCF-7 MS细胞中Hh通路关键因子PTCH、SMO、Gli1、Gli2以及Wnt通路关键因子Wnt1、p-LRP6、β-catenin等的表达,并考察紫杉醇或盐霉素处理后MCF-7和MCF-7 MS细胞中上述蛋白的表达变化差异.结果表明，比Wnt信号通路，Hedgehog信号通路是介导乳腺癌干细胞药物抵抗的重要信号转导通路。

摘要： 研究Hedgehog (Hh)信号通路及Wnt信号通路在乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)药物抵抗中的作用及机制.通过CCK-8 assay和球囊形成实验检测MCF-7细胞和无血清非黏附悬浮培养富集BCSCs的MCF-7 mammosphere (MCF-7 MS)对紫杉醇和盐霉素反应的差异.应用Western blot等检测MCF-7和MCF-7 MS细胞中Hh通路关键因子PTCH、SMO、Gli1、Gli2以及Wnt通路关键因子Wnt1、p-LRP6、β-catenin等的表达,并考察紫杉醇或盐霉素处理后MCF-7和MCF-7 MS细胞中上述蛋白的表达变化差异.结果表明，比Wnt信号通路，Hedgehog信号通路是介导乳腺癌干细胞药物抵抗的重要信号转导通路。

摘要： 研究Hedgehog (Hh)信号通路及Wnt信号通路在乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)药物抵抗中的作用及机制.通过CCK-8 assay和球囊形成实验检测MCF-7细胞和无血清非黏附悬浮培养富集BCSCs的MCF-7 mammosphere (MCF-7 MS)对紫杉醇和盐霉素反应的差异.应用Western blot等检测MCF-7和MCF-7 MS细胞中Hh通路关键因子PTCH、SMO、Gli1、Gli2以及Wnt通路关键因子Wnt1、p-LRP6、β-catenin等的表达,并考察紫杉醇或盐霉素处理后MCF-7和MCF-7 MS细胞中上述蛋白的表达变化差异.结果表明，比Wnt信号通路，Hedgehog信号通路是介导乳腺癌干细胞药物抵抗的重要信号转导通路。

摘要： 本发明提供了一类靶向Smo蛋白的Hedgehog(Hh)信号通路抑制剂及其制备方法和用途，本发明通过浸提、溶剂分配、色谱柱分离和HPLC纯化等系列流程制备得到3个新型靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂。这3个天然生物碱化合物在Shh‑lightⅡ细胞中表现出显著的Hedgehog信号通路抑制活性，并在与荧光环巴胺竞争性结合Smo的实验中表现出明显的竞争活性，表明是它们是靶向Smo蛋白从而抑制Hh信号通路。以此类化合物为先导化合物，进行结构优化，可为治疗Hedgehog信号通路异常激活相关疾病特别是Smo抑制剂的新药研发提供候选药物，将具有重要的现实意义。这一类靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂化合物1‑3的结构式如下：

摘要： 一种Hedgehog信号通路抑制剂在制备治疗EGFR过度表达的癌症的药物中的用途。所述Hedgehog信号通路抑制剂还可以与EGFR抑制剂联合使用。本发明还涉及包含上述两种抑制剂的药物组合物。

摘要： 本发明属于生物医药领域，具体涉及Hedgehog信号通路基因、调节剂在调节气道上皮细胞生理功能中的应用。本发明首次证实了Hedgehog信号通路基因Shh或Smo基因失活导致气道上皮细胞生成障碍，并进一步证实了Cyclopamine或GANT 58可以作为Hedgehog信号通路抑制剂，抑制道上皮纤毛细胞和杯状细胞生成，粘液分泌减少；H‑SHH重组蛋白能够作为Hedgehog信号通路激活剂，促使气道上皮纤毛细胞和杯状细胞过度生成，粘液分泌增加。本发明请求保护Hedgehog信号通路基因、调节剂在调节气道上皮细胞生理功能中的应用，这对于肺部疾病的诊疗具有重要意义。

摘要： 本发明涉及异位骨化治疗产品领域，特别是涉及Hedgehog信号通路抑制剂在制备治疗异位骨化产品中的用途，所述Hedgehog信号通路抑制剂包括SMO抑制剂、Hh蛋白抑制剂、Gli抑制剂，所述Gli抑制剂包括Gli1抑制剂、Gli2抑制剂和Gli3抑制剂。本发明的Hedgehog信号通路抑制剂在制备治疗异位骨化产品中的用途为临床上异位骨化的治疗提供潜在靶标，Hedgehog信号通路抑制剂例如JQ1可能作为治疗异位骨化的潜在药物，尤其是治疗损伤引起的跟腱异位骨化的药物。

摘要： 本公开涉及一种新型Hedgehog信号通路抑制剂及其制备方法，本公开的Hedgehog信号通路抑制剂能有效地抑制SMO受体活性，阻滞SHH信号通路，具有良好的阻滞肿瘤细胞增殖的作用，作为肿瘤治疗候选药物具有良好应用前景。

摘要： 本发明涉及Hedgehog信号通路抑制剂治疗自闭症的用途。本发明首次发现通过抑制Hedgehog信号通路能够治疗自闭症，并且实验验证了Hedgehog信号通路抑制剂能够明显改善自闭症行为缺陷，能够用于制备治疗自闭症的药物。

摘要： 本发明公开一种用于儿童Hedgehog信号通路驱动肿瘤的药物组合物，所述药物组合物包含如下重量份的成分：三氧化二砷0.046份、环磷酰胺1～4500份。本发明所述药物组合物，采用三氧化二砷联合环磷酰胺等化疗药物联合使用，对于儿童Hedgehog信号通路驱动肿瘤具有良好的治疗效果，尤其是对于神经母细胞瘤、腺泡型横纹肌肉瘤、髓母细胞瘤、骨肉瘤、尤文氏肉瘤的治疗效果较好，本发明为儿童Hedgehog信号通路驱动肿瘤的治疗提供了新的药物选择及治疗方法。

摘要： 本发明提供了一类靶向Smo蛋白的Hedgehog(Hh)信号通路抑制剂及其制备方法和用途，本发明通过浸提、溶剂分配、色谱柱分离和HPLC纯化等系列流程制备得到3个新型靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂。这3个天然生物碱化合物在Shh‑lightⅡ细胞中表现出显著的Hedgehog信号通路抑制活性，并在与荧光环巴胺竞争性结合Smo的实验中表现出明显的竞争活性，表明是它们是靶向Smo蛋白从而抑制Hh信号通路。以此类化合物为先导化合物，进行结构优化，可为治疗Hedgehog信号通路异常激活相关疾病特别是Smo抑制剂的新药研发提供候选药物，将具有重要的现实意义。这一类靶向Smo蛋白的Hedgehog信号通路抑制剂化合物1‑3的结构式如下：

摘要： 本发明涉及医药技术领域，且公开了柴胡皂苷B1在制备Hedgehog信号通路的抑制剂中的作用与用途，具体涉及柴胡皂苷B1在制备Hedgehong信号通路抑制剂中的用途，和预防和治疗肾纤维化中的用途。本发明的目的是提供证明柴胡皂苷B1对Hedgehog信号通路特异性抑制的实验方法和证据，以及柴胡皂苷B1治疗或预防肾纤维化症状的药理活性，并证实了其在Hedgehog信号通路的作用靶点及抗纤维化效应，本发明可进一步用于制备新的Hedgehog信号通路抑制剂和抗纤维化药物。

摘要： 本发明分别通过体外细胞和体内实验表明了土荆皮乙酸(PAB)是SMO受体的拮抗剂，对Hedgehog信号通路有抑制效果，对Hedgehog通路活化依赖的肿瘤也具有显著的体内抗肿瘤效应。因此，可将PAB用于制备抑制Hedgehog信号通路相关的制剂。本发明不仅提供了PAB用于制备靶向Hedgehog信号通路的抗肿瘤药物的理论基础，还扩大PAB的应用领域。PAB能剂量依赖性地抑制髓母细胞瘤中的Hedgehog信号通路，具有剂量适中、疗效显著、作用靶点明确等优点，在临床上具有抗癌以及治疗其他Hedgehog信号通路异常相关疾病的应用前景。