逆转录聚合酶链反应
逆转录聚合酶链反应的相关文献在1992年到2022年内共计3052篇,主要集中在肿瘤学、基础医学、内科学
等领域,其中期刊论文2998篇、会议论文42篇、专利文献290298篇;相关期刊601种,包括中华实验和临床病毒学杂志、中华检验医学杂志、吉林大学学报(医学版)等;
相关会议38种,包括中国糖尿病防治康复高峰论坛、中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会、世界中联第五届男科国际学术大会、中华中医药学会第十二次全国中医男科学术大会、国际中医男科第七届学术大会、第二届海峡两岸中医男科学术论坛等;逆转录聚合酶链反应的相关文献由10998位作者贡献,包括冼磊、吕建新、姚登福等。
逆转录聚合酶链反应—发文量
专利文献>
论文:290298篇
占比:98.96%
总计:293338篇
逆转录聚合酶链反应
-研究学者
- 冼磊
- 吕建新
- 姚登福
- 王静
- 吴平生
- 王燕
- 许晓群
- 陈铭伍
- 刘军
- 吴玮
- 张敏
- 张磊
- 张蕾
- 王俊
- 薛永权
- 陈勇
- 高红
- 仲人前
- 冷希圣
- 刘红
- 姜冠潮
- 李岩
- 李莉华
- 武雪亮
- 王芳
- 郑树
- 陈萍
- 陶志华
- 冯天达
- 吴信华
- 常彬
- 张健
- 彭吉润
- 李刚
- 李力
- 李毅
- 李锋
- 李霞
- 王敏
- 等
- 罗兵
- 聂玉强
- 赵庆华
- 邹立林
- 陈奎生
- 陈子兴
- 陈燕
- 韩永华
- 亓建洪
- 关亚群
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郝振宇;
兰道亮;
李成燚;
李键
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摘要:
猫传染性腹膜炎是猫科动物一种致死性的疾病,是目前导致猫死亡的主要疫病之一。该病的病原体是猫冠状病毒,该病毒有猫肠道冠状病毒和猫传染性腹膜炎病毒2种生物型,目前主流解释是猫肠道冠状病毒内部突变为猫传染性腹膜炎病毒,事实上该病的致病机制和免疫机制尚不明确。目前免疫组化是该病诊断的金标准,但由于其可操作性不强,临床上主要通过临床症状、临床检查和实验室检查进行综合性判断。论文综述了猫传染性腹膜炎的诊断方法,对该病的诊断技术研究和临床应用有一定的指导意义。
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赵学辉;
李秋影;
阚轩;
王婧婷;
孙亚男
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摘要:
目的 分析喉癌中N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)甲基化修饰差异基因表达水平,探讨其在喉癌进展中的作用。方法 采用m^(6)A-mRNA表观转录组芯片检测3对喉癌组织及相应癌旁组织中m^(6)A甲基化修饰差异表达基因,并选择显著差异表达的含有6个跨膜BAX抑制子基序(transmembrane BAX inhibitor motif containing 6,TMBIM6)基因行逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)、甲基化RNA免疫沉淀定量PCR(methylated RNA immunoprecipitation-qPCR,MeRIP-qPCR)及免疫组织化验证,最后检测其甲基化位点。结果 在差异表达基因和m^(6)A甲基化基因的联合分析中,共获得135个高甲基化高表达基因,2958个高甲基化低表达基因,129个低甲基化高表达基因,682个低甲基化低表达基因。对显著高表达的TMBIM6基因行RT-qPCR、MeRIP-qPCR和免疫组化验证结果与基因芯片一致,鉴定出TMBIM6基因甲基化位点位于3’非编码区的2222碱基位。结论 TMBIM6基因通过m^(6)A修饰机制在喉癌中发挥癌基因的作用,可望成为喉癌的分子标记物及潜在的治疗靶点。
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秦浩仁;
杨向红
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摘要:
神经营养因子酪氨酸受体激酶(NTRK)基因融合于1986年在结直肠癌中首次被发现,这种致癌的NTRK基因融合已经被发现存在于多种不同组织学类型的成人和儿童肿瘤中。NTRK基因融合为靶向治疗提供了新的靶点,目前针对该种基因突变的不限年龄、不限肿瘤类型的广谱抗癌药Larotrectinib和Enrectinib也已经在美国、日本、欧洲地区批准上市。本文将从原肌球蛋白受体激酶(TRK)蛋白的生理与功能、NTRK基因融合与肿瘤发生、NTRK基因融合的检测、NTRK基因融合的靶向治疗4个方面进行梳理阐述。
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杨志;
秦冬梅;
周波;
肖光军
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摘要:
目的:探讨反应体系混匀与否对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测结果的影响。方法:两种不同逆转录时长的实时荧光PCR法试剂均按以下方法处理。试剂盒内自带的阳性对照用生理盐水配制成稀释度为1∶1,1∶10,1∶100三个浓度水平的试验样本。每个浓度水平的样本检测16次,其中8次的混匀体系先混匀再瞬离后上机检测(混匀组),而另外8次的反应体系则直接瞬离后上机检测(非混匀组),检测结果以阈值循环数(Ct值)表示。比较每个浓度水平混匀组与非混匀组的结果差异。当组间差异具有统计学意义时,则进一步分析差异有无临床意义(实际意义),当两组的均值之差在0.5以内,则认为差异无临床意义。结果:对于逆转录时间较长的试剂,各浓度水平组间差异均无统计学意义(P>0.05);对于逆转录时间较短的试剂,部分组间差异具有统计学意义(P<0.05),但无临床意义(组间均值之差在0.5以内)。结论:用实时荧光RT-PCR法检测新型冠状病毒核酸时,反应体系混匀与否对检测结果无影响。
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徐玉兵;
刘兴晖;
肖玲;
朱诗应;
陈禹;
王臣娟
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摘要:
目的研究0~16岁儿科住院患者下呼吸道13项病原体混合感染的临床指导价值。方法选取2021年1月至12月上海地区0~16岁儿科住院患者731例,样本来源为痰液或肺泡灌洗液,以聚合酶链反应(PCR)毛细电泳片段分析法检测13种呼吸道病原体核酸,按年龄分组后分析最常见的感染病原体和混合感染的病原体分布。结果以检出1种以上病原体为阳性,731例样本中总阳性样本数558例,阳性率为76.33%,以0~1岁组和>5~6岁组阳性率较高,其次为>2~3岁组,各年龄组阳性率比较,差异有统计学意义(P5~6岁组最高。558例阳性病例中114例样本检出2种病原体,混合感染检出率为20.43%;混合感染样本中,混合感染类型有12种,以MP、HPIV、鼻病毒(HRV)三者两两混合感染为主。混合感染病例中,>4~5岁组占比最高,为51.35%(19/37),各年龄组差异有统计学意义(P1~2岁组、>2~3岁组和>3~4岁组均以HRV合并其他病毒为主。结论下呼吸道感染住院患儿病原体以MP、HRSV和HPIV为主,混合感染以MP、HPIV、HRV两两混合感染及三者混合感染其他病原体为主,混合感染病例中>4~5岁患儿占比最高,混合感染类型以0~1岁组最多,针对此2组患儿需考虑PCR毛细电泳片段分析法确诊呼吸道病原体,以便选择特异性药物、提高治疗的针对性和时效性。
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林妍雪;
秦艳丽;
张继明
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摘要:
HDV感染的流行率和危害程度一直被低估,低筛查率和低诊断率或带来严重疾病负担。HDV RNA作为病毒复制的直接证据,对于丁型肝炎的诊断和管理具有重要意义。本文总结了HDV RNA检测的临床意义,并介绍了检测方法的进展,以期促进丁型肝炎的筛查和诊断。
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王蓝晨;
王昱;
王颖;
杨仕赛;
朱贵明
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摘要:
目的运用生物信息学分析家蝇(Musca domestica L.)肌动蛋白5 C(Actin-5 C)基因,构建Actin-5 C启动子双荧光素酶报告基因表达载体。方法使用伯克利果蝇基因组计划(BDGP)在线分析软件、Promoter 2.0和在线比对启动子网站(FPROM)等多种启动子预测工具,分析、预测家蝇肌动蛋白Actin-5 C基因5′端上游非编码区,根据预测结果构建截短式启动子萤火虫荧光素酶报告基因重组质粒,转染草地贪夜蛾卵巢细胞系sf9细胞,并使用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)进行萤火虫荧光素酶报告基因的检测。结果Actin-5 C基因5′端上游的-2609~-94 bp,预测有启动活性,且分值达0.8分以上,其中-2198~-2148 bp分值最高、达0.98分;在-220 bp和-1444 bp处分别检测到CAAT和TATA盒信号,经比较取最有可能的1156 bp(-1236~-80 bp)、1745 bp(-1825~-80 bp)及2059 bp(-2139~-80 bp)截断启动子片段,构建pGL 3-1156、pGL 3-1745及pGL 3-2059质粒,RT-PCR检测到3种重组质粒中的萤火虫荧光素酶报告基因转录成功。结论生物信息学预测工具研究家蝇Actin-5 C基因启动子可以简化认知基因的过程,根据预测结果构建了家蝇Actin-5 C基因萤火虫荧光素酶报告基因表达载体。
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周倩倩;
曹晶晶;
张韶雅;
张桂;
岳燕;
鲁辛辛;
赵建玉;
隋文君;
黄艳飞;
王玫;
张明新;
孙宇峰;
袁梁;
白婕
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摘要:
目的 通过大样本流感样病例检测,明确抗原检测与核酸检测两种方法联合应用原则,从而快速明确流感诊断,控制流感暴发,减少资源浪费.方法 采集2019年1月至2020年1月北京同仁医院发热门诊的4 622份流感样病例咽拭子标本,其中流感季3 230份,非流感季1 392份,采用快速抗原法和实时荧光逆转录聚合酶链反应(qPCR)两种方法对其进行流感病毒检测.不一致结果采用第二种核酸检测试剂进行比对.比较快速抗原法对于不同年龄敏感度与特异度的差异,以及不同亚型、不同病毒载量的检出差异.结果 甲型流感病毒快速抗原法的敏感度为33.7%(577/1 710),特异度为93.5%(2 723/2 912),与qPCR的一致率为71.4%(3 300/4 622).在流感季,甲型流感病毒快速抗原法阳性预测值及阴性预测值分别为84.1%(570/678)和57.4%(1 464/2 552).在非流感季,其阳性预测值及阴性预测分别为8.0%(7/88)和96.5%(1 259/1 304).甲型流感病毒快速抗原法与乙型流感病毒存在交叉反应,为2.3% (18/766).儿童的敏感度比成人高[56.7%(164/289)比29.1%(413/1 421)].快速抗原法对于不同流感亚型(H1N1和H3N2)的检出率差异无统计学意义(x2=0.131,P=0.718),其敏感度随循环阈值(Ct值)增大而降低.结论 甲型流感病毒快速抗原法阳性结果可确诊.在流感季,甲型流感病毒抗原阴性应进行核酸检测,而非流感季阴性结果可排除感染.快速抗原法对儿童的敏感度比成人高,敏感度与Ct值呈负相关.
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王蓝晨;
王昱;
王颖;
杨仕赛;
朱贵明
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摘要:
目的 运用生物信息学分析家蝇(Musca domestica L.)肌动蛋白5 C(Actin-5 C)基因,构建Actin-5 C启动子双荧光素酶报告基因表达载体.方法 使用伯克利果蝇基因组计划(BDGP)在线分析软件、Promoter 2.0和在线比对启动子网站(FPROM)等多种启动子预测工具,分析、预测家蝇肌动蛋白Actin-5 C基因5′端上游非编码区,根据预测结果构建截短式启动子萤火虫荧光素酶报告基因重组质粒,转染草地贪夜蛾卵巢细胞系sf9细胞,并使用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)进行萤火虫荧光素酶报告基因的检测.结果 Actin-5 C基因5′端上游的-2609~-94 bp,预测有启动活性,且分值达0.8分以上,其中-2198~-2148 bp分值最高、达0.98分;在-220 bp和-1444 bp处分别检测到CAAT和TATA盒信号,经比较取最有可能的1156 bp(-1236~-80 bp)、1745 bp(-1825~-80 bp)及2059 bp(-2139~-80 bp)截断启动子片段,构建pGL3-1156、pGL3-1745及pGL3-2059质粒,RT-PCR检测到3种重组质粒中的萤火虫荧光素酶报告基因转录成功.结论 生物信息学预测工具研究家蝇Actin-5 C基因启动子可以简化认知基因的过程,根据预测结果构建了家蝇Actin-5 C基因萤火虫荧光素酶报告基因表达载体.
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杨华;
黄赛;
高丽;
朱海燕;
王书红;
黄文荣;
王全顺;
窦丽萍;
王莉莉;
于力
- 《中华医学会第十二次全国血液学学术会议》
| 2012年
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摘要:
目的:应用多重巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测急性髓系白血病(AML)患者MLL基因相关融合基因的发生率及临床意义.方法:433例AML患者应用上述方法检测11种MLL基因相关融合基因(dupMLL、MLL-AF9、MLL-ELL、MLL-AF10、MLL-AF17、MLL-AF6、MLL-ENL、MLL-CBP、MLL-AF1P、MLL-AF1Q、MLL-AFX1).结果:在433例AML患者中检测出以上融合基因阳性患者68例,阳性率为15.7%,以上11种基因的阳性例数及阳性率分别为21(4.84%)、15 (3.46%)、10 (2.31%)、8(1.85%)、4(0.92%)、3(0.69%)、3(0.69%)、1(0.23%)、1(0.23%)、1(0.23%)、1(0.23%).
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谷贵山;
马韧石;
刘公;
张德宝;
黄旭
- 《第12届全国骨肿瘤学术会议》
| 2011年
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摘要:
本研究利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对3例正常人松质骨组织,3例骨肿瘤组织的TRPV5及calbindin-D9K,calbindin-D2RK mRNA进行检测。结果显示:所有正常骨组织标本(包括股骨、髂骨)显示清晰的TPRYS 320bp特异性扩增条带,未见明显杂带。同样,这些骨组织标本中同时也有calbindin-D9K和calbindin-D28K的特异性扩琳条带。骨肿心标本中,骨巨细胞瘤显示TRPYS特异性扩增条带,并且存在calbindin-D9K和calbindin-D28K特异性扩增条带。而非管化性纤维瘤未间TRPV5、calbindin-D9K和calbindin-D28K特异性扩增条带。
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LI Li-min;
李丽敏;
ZHU Wei-xia;
朱卫霞;
YAO Zuo-jun;
姚作俊;
SUN Li-dan;
孙立旦;
SONG Qin-ye;
宋勤叶
- 《第五届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨北京畜牧兽医学会“瑞普杯”新思想、新观点、新方法演讲会》
| 2016年
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摘要:
为了建立一种能够快速检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染的敏感、特异的多重RT-PCR(mRT-PCR)方法,本试验分别针对TGEV和PEDV的N基因、RVA的VP7基因设计了4对引物(其中针对PEDV N基因的引物为内、外两对),结合mRT-PCR和PEDV的套式RT-PCR(nRT-PCR),建立了同时检测TGEV和PEDV、RVA的mRT-PCR方法.mRT-PCR能够同时扩增出针对三种病毒的预期大小的目的核苷酸片段,并且可以与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪伪狂犬病及猪圆环病毒2型感染进行鉴别诊断.该方法可以检测到TGEV、PEDV和RVA的最低核酸浓度分别为803.9pg/μL、16.07pg/μL和321.5pg/μL.应用mRT-PCR检测了133份腹泻仔猪的血清、肛拭子或小肠组织,其中TGEV、PEDV与RVA的阳性率分别为12.1%、88.0%和21.9%,并检测到了PEDV与RVA或TGEV双重感染及PEDV、TGEV和RVA三重感染的样品.在检测临床样品时,mRT-PCR和单项RT-PCR检出TGEV、PEDV和RVA的符合率分别为93.54%、96.77%和93.54%.上述结果表明,mRT-PCR能够快速鉴别检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染三种传染病,PEDV是引起当前仔猪腹泻的主要病原.
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LI Li-min;
李丽敏;
ZHU Wei-xia;
朱卫霞;
YAO Zuo-jun;
姚作俊;
SUN Li-dan;
孙立旦;
SONG Qin-ye;
宋勤叶
- 《第五届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨北京畜牧兽医学会“瑞普杯”新思想、新观点、新方法演讲会》
| 2016年
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摘要:
为了建立一种能够快速检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染的敏感、特异的多重RT-PCR(mRT-PCR)方法,本试验分别针对TGEV和PEDV的N基因、RVA的VP7基因设计了4对引物(其中针对PEDV N基因的引物为内、外两对),结合mRT-PCR和PEDV的套式RT-PCR(nRT-PCR),建立了同时检测TGEV和PEDV、RVA的mRT-PCR方法.mRT-PCR能够同时扩增出针对三种病毒的预期大小的目的核苷酸片段,并且可以与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪伪狂犬病及猪圆环病毒2型感染进行鉴别诊断.该方法可以检测到TGEV、PEDV和RVA的最低核酸浓度分别为803.9pg/μL、16.07pg/μL和321.5pg/μL.应用mRT-PCR检测了133份腹泻仔猪的血清、肛拭子或小肠组织,其中TGEV、PEDV与RVA的阳性率分别为12.1%、88.0%和21.9%,并检测到了PEDV与RVA或TGEV双重感染及PEDV、TGEV和RVA三重感染的样品.在检测临床样品时,mRT-PCR和单项RT-PCR检出TGEV、PEDV和RVA的符合率分别为93.54%、96.77%和93.54%.上述结果表明,mRT-PCR能够快速鉴别检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染三种传染病,PEDV是引起当前仔猪腹泻的主要病原.
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LI Li-min;
李丽敏;
ZHU Wei-xia;
朱卫霞;
YAO Zuo-jun;
姚作俊;
SUN Li-dan;
孙立旦;
SONG Qin-ye;
宋勤叶
- 《第五届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨北京畜牧兽医学会“瑞普杯”新思想、新观点、新方法演讲会》
| 2016年
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摘要:
为了建立一种能够快速检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染的敏感、特异的多重RT-PCR(mRT-PCR)方法,本试验分别针对TGEV和PEDV的N基因、RVA的VP7基因设计了4对引物(其中针对PEDV N基因的引物为内、外两对),结合mRT-PCR和PEDV的套式RT-PCR(nRT-PCR),建立了同时检测TGEV和PEDV、RVA的mRT-PCR方法.mRT-PCR能够同时扩增出针对三种病毒的预期大小的目的核苷酸片段,并且可以与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪伪狂犬病及猪圆环病毒2型感染进行鉴别诊断.该方法可以检测到TGEV、PEDV和RVA的最低核酸浓度分别为803.9pg/μL、16.07pg/μL和321.5pg/μL.应用mRT-PCR检测了133份腹泻仔猪的血清、肛拭子或小肠组织,其中TGEV、PEDV与RVA的阳性率分别为12.1%、88.0%和21.9%,并检测到了PEDV与RVA或TGEV双重感染及PEDV、TGEV和RVA三重感染的样品.在检测临床样品时,mRT-PCR和单项RT-PCR检出TGEV、PEDV和RVA的符合率分别为93.54%、96.77%和93.54%.上述结果表明,mRT-PCR能够快速鉴别检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染三种传染病,PEDV是引起当前仔猪腹泻的主要病原.
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LI Li-min;
李丽敏;
ZHU Wei-xia;
朱卫霞;
YAO Zuo-jun;
姚作俊;
SUN Li-dan;
孙立旦;
SONG Qin-ye;
宋勤叶
- 《第五届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨北京畜牧兽医学会“瑞普杯”新思想、新观点、新方法演讲会》
| 2016年
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摘要:
为了建立一种能够快速检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染的敏感、特异的多重RT-PCR(mRT-PCR)方法,本试验分别针对TGEV和PEDV的N基因、RVA的VP7基因设计了4对引物(其中针对PEDV N基因的引物为内、外两对),结合mRT-PCR和PEDV的套式RT-PCR(nRT-PCR),建立了同时检测TGEV和PEDV、RVA的mRT-PCR方法.mRT-PCR能够同时扩增出针对三种病毒的预期大小的目的核苷酸片段,并且可以与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪伪狂犬病及猪圆环病毒2型感染进行鉴别诊断.该方法可以检测到TGEV、PEDV和RVA的最低核酸浓度分别为803.9pg/μL、16.07pg/μL和321.5pg/μL.应用mRT-PCR检测了133份腹泻仔猪的血清、肛拭子或小肠组织,其中TGEV、PEDV与RVA的阳性率分别为12.1%、88.0%和21.9%,并检测到了PEDV与RVA或TGEV双重感染及PEDV、TGEV和RVA三重感染的样品.在检测临床样品时,mRT-PCR和单项RT-PCR检出TGEV、PEDV和RVA的符合率分别为93.54%、96.77%和93.54%.上述结果表明,mRT-PCR能够快速鉴别检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染三种传染病,PEDV是引起当前仔猪腹泻的主要病原.
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LI Li-min;
李丽敏;
ZHU Wei-xia;
朱卫霞;
YAO Zuo-jun;
姚作俊;
SUN Li-dan;
孙立旦;
SONG Qin-ye;
宋勤叶
- 《第五届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨北京畜牧兽医学会“瑞普杯”新思想、新观点、新方法演讲会》
| 2016年
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摘要:
为了建立一种能够快速检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染的敏感、特异的多重RT-PCR(mRT-PCR)方法,本试验分别针对TGEV和PEDV的N基因、RVA的VP7基因设计了4对引物(其中针对PEDV N基因的引物为内、外两对),结合mRT-PCR和PEDV的套式RT-PCR(nRT-PCR),建立了同时检测TGEV和PEDV、RVA的mRT-PCR方法.mRT-PCR能够同时扩增出针对三种病毒的预期大小的目的核苷酸片段,并且可以与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪伪狂犬病及猪圆环病毒2型感染进行鉴别诊断.该方法可以检测到TGEV、PEDV和RVA的最低核酸浓度分别为803.9pg/μL、16.07pg/μL和321.5pg/μL.应用mRT-PCR检测了133份腹泻仔猪的血清、肛拭子或小肠组织,其中TGEV、PEDV与RVA的阳性率分别为12.1%、88.0%和21.9%,并检测到了PEDV与RVA或TGEV双重感染及PEDV、TGEV和RVA三重感染的样品.在检测临床样品时,mRT-PCR和单项RT-PCR检出TGEV、PEDV和RVA的符合率分别为93.54%、96.77%和93.54%.上述结果表明,mRT-PCR能够快速鉴别检测猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒感染三种传染病,PEDV是引起当前仔猪腹泻的主要病原.
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SUN Ying-feng;
孙英峰;
LU Chao;
路超;
TANG Pei-juan;
唐佩娟;
LI Xiu-mei;
李秀梅;
ZhANG Li-xin;
张立新
- 《第五届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨北京畜牧兽医学会“瑞普杯”新思想、新观点、新方法演讲会》
| 2016年
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摘要:
根据GenBank登录的类NADC30(NADC30-like)、高致病性(highly pathogenic,HP)与经典(Classical)PRRSV Nsp2基因序列,设计了1对引物,建立一步鉴别诊断NADC30-like、HP及Classical PRRSV的RT-PCR检测方法.结果表明,该方法能从NADC30-like、HP及Classical PRRSV基因组中分别扩增出628,931,1021bp的特异性片段,病毒基因组混合后能够同时扩增.敏感性试验结果表明该方法能检测分别检测到0.54,5.17,9.25pg的核酸含量;特异性结果表明该方法在同等条件下检测PRV、CSFV、PCV2、JEV、PEDV、TGEV、RV、SIV均为阴性.对2014-2016年采集的396份临床样品进行检测,27份为NADC30-like PRRSV,74份为HP-PRRSV,5份为Classical PRRSV.本研究建立的RT-PCR诊断方法,具有特异、灵敏、快速等特点,可用于一步区分NADC30-like、HP及Classical PRRSV,为进一步的PRRS流行病学研究提供了重要的技术手段.
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SUN Ying-feng;
孙英峰;
LU Chao;
路超;
TANG Pei-juan;
唐佩娟;
LI Xiu-mei;
李秀梅;
ZhANG Li-xin;
张立新
- 《第五届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨北京畜牧兽医学会“瑞普杯”新思想、新观点、新方法演讲会》
| 2016年
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摘要:
根据GenBank登录的类NADC30(NADC30-like)、高致病性(highly pathogenic,HP)与经典(Classical)PRRSV Nsp2基因序列,设计了1对引物,建立一步鉴别诊断NADC30-like、HP及Classical PRRSV的RT-PCR检测方法.结果表明,该方法能从NADC30-like、HP及Classical PRRSV基因组中分别扩增出628,931,1021bp的特异性片段,病毒基因组混合后能够同时扩增.敏感性试验结果表明该方法能检测分别检测到0.54,5.17,9.25pg的核酸含量;特异性结果表明该方法在同等条件下检测PRV、CSFV、PCV2、JEV、PEDV、TGEV、RV、SIV均为阴性.对2014-2016年采集的396份临床样品进行检测,27份为NADC30-like PRRSV,74份为HP-PRRSV,5份为Classical PRRSV.本研究建立的RT-PCR诊断方法,具有特异、灵敏、快速等特点,可用于一步区分NADC30-like、HP及Classical PRRSV,为进一步的PRRS流行病学研究提供了重要的技术手段.