您现在的位置: 首页> 研究主题> 印迹法,蛋白质

印迹法,蛋白质

印迹法,蛋白质的相关文献在1999年到2021年内共计258篇,主要集中在肿瘤学、基础医学、内科学 等领域,其中期刊论文258篇、专利文献210018篇;相关期刊88种,包括法医学杂志、中国病理生理杂志、中华实验和临床病毒学杂志等; 印迹法,蛋白质的相关文献由1258位作者贡献,包括刘晓颖、朱恒锐、李晓明等。

印迹法,蛋白质—发文量

期刊论文>

论文:258 占比:0.12%

专利文献>

论文:210018 占比:99.88%

总计:210276篇

印迹法,蛋白质—发文趋势图

印迹法,蛋白质

-研究学者

  • 刘晓颖
  • 朱恒锐
  • 李晓明
  • 汪云飞
  • 王芳
  • 范礼斌
  • 乔新民
  • 何俊奇
  • 何芳
  • 侯令密
  • 期刊论文
  • 专利文献

搜索

排序:

年份

    • 晏燕; 陈先卓; 秘双燕; 吴增波
    • 摘要: 目的 探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)中人婆罗双树样基因4(SALL4)调控相关miRNAs的鉴定及其抑制肿瘤转移的机制.方法 取对数期生长期的人OSCC Tca8113细胞构建负载miRNAs前体序列的慢病毒重组体转染Tca8113细胞,将上、下调Tca8113细胞内miRNA表达丰度的细胞设为上调组与下调组、单纯Tca8113细胞作为对照组;采用半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测各组细胞转染前后SALL4 mRNA和蛋白表达,采用双荧光素酶报告系统验证miRNA对SALL4的靶向调控,并鉴定miRNA-S,检测SALL4调控相关的miRNA对Tca8113细胞侵袭、转移能力的影响.结果 上调组Tca8113细胞中SALL4 mRNA表达分别高于下调组和对照组,下调组低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05),但均高于对照组,且差异均有统计学意义(P0.05),但均少于对照组,且差异均有统计学意义(P<0.05).结论 SALL4调控相关miRNAs在人OSCC中呈低表达,能抑制肿瘤细胞的侵袭、转移,有望成为口腔鳞状细胞癌治疗新靶点.
    • 申萌萌; 刘雁峰; 马小娜; 贾静; 王峥; 朱庆文
    • 摘要: 目的:探索围着床期小鼠子宫内膜自噬情况.方法:选择36只ICR妊娠小鼠随机分为空白组、胚胎着床障碍模型组,每组小鼠18只.模型组采用米非司酮制备,每组每日予以生理盐水灌胃,分别于妊娠第4、5、6天脱颈处死小鼠各6只.观察子宫形态,计算各组平均胚胎着床位点数,检测自噬标志物微管相关轻链蛋白3-Ⅱ(LC3-Ⅱ),透射电镜观察子宫内膜细胞中自噬小体的表达.结果:空白组妊娠第4天(pd4)子宫无明显串珠样改变,妊娠第5天(pd5)、妊娠第6天(pd6)子宫串珠样改变明显且分布均匀.模型组pd4、pd5未见明显串珠样改变,pd6可见少量串珠稀疏分布.空白组pd6的胚胎着床位点数较pd4增多,差异有统计学意义(P0.05).模型组pd5、pd6平均胚胎着床位点数分别低于空白组pd5、pd6(P0.05).透射电镜下空白组小鼠子宫内膜细胞完整,pd5自噬小体数量较pd4减少,pd6又增多.模型组部分细胞损伤、坏死,pd4自噬小体表达较空白组多,亦较模型组pd5、pd6多.结论:自噬参与并调控胚胎着床过程,自噬异常可能破坏子宫内膜细胞活性和功能,影响胚胎着床.
    • 王彦云; 孙云; 蒋涛
    • 摘要: 目的 探讨基因分析联合蛋白质印迹(Western blotting)法在极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(VLCADD)ACADVL基因新发突变位点致病性鉴定中的临床应用.方法 收集2017年6月1日至2020年10月31日南京市新生儿疾病筛查中心筛查的290738例新生儿遗传代谢病筛查样本中,通过串联质谱法检测疑似VLCADD的4例患儿及父母,采集外周血进行基因分析,并用Western blotting检测外周血中极长链酰基辅酶A脱氢酶(VLCAD,也称为ACADVL)蛋白表达量变化.结果 4例患儿通过基因分析被诊断为VLCADD,共检测到8个突变位点[2个疑似致病变异(c.664 G>C、c.342+1 G>A),5个临床意义不明(c.694 G>A、c.1699 C>T、c.1030 A>G、c.1247 C>T、c.833_835 del),1个位点为首次报道(c.1077+6 T>A)].4个家系共计12个外周血样本通过Western blotting均能检测到ACADVL蛋白的表达,但患儿的目标蛋白表达量均明显低于其父母.家系1的外周血样本保存时间较另外3个家系长,ACADVL蛋白在家系1的父母检测中明显低于另外3个家系;且与外周血保存时间基本一致的非VLCADD家系5比较,家系5内参ACTIN蛋白表达量下降更为明显.结论 疑似VLCADD患儿的ACADVL基因检测的位点为临床意义不明时,建议使用新鲜的外周血样本,通过Western blotting完善ACADVL蛋白检测,该结果与基因检测结果可互为补充.
    • 康传依; 赵娜; Mavlikhanova Asiya; 胡建
    • 摘要: 目的 观察神经节苷脂(ganglioside,GM1)对慢性酒精中毒小鼠海马组织Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达水平的影响.方法 将40只雄性Balb/c小鼠采用随机区组分组法分为慢性酒精中毒组、对照组、低剂量GM1治疗组、高剂量GM1治疗组,每组10只;慢性酒精中毒组采用酒精灌胃法建立慢性酒精中毒小鼠模型(酒精水溶液浓度逐渐从5%增加至35%),对照组使用等量生理盐水灌胃,低、高剂量治疗组在酒精灌胃后分别给予GM1(每天10、30 mg/kg)腹腔注射.于灌胃4周后进行酒精偏好实验测试及行为学测试,蛋白质印迹法测定4组小鼠海马组织Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平,组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用Bonferroni法.结果 4组酒水消耗率差异有统计学意义(F=630.83,P<0.05),对照组(18.9%±2.2%)和高剂量GMI治疗组(50.9%±3.2%)酒水消耗率低于慢性中毒组(56.5%±3.0%).行为学测试结果显示4组悬尾试验累积不动时间(F=379.52)、避暗实验进入暗室潜伏期(F=7 001.18)和进入暗室错误次数(F=33.87)以及疲劳转棒实验小鼠跌落时间(F=305.06)差异均有统计学意义(均P<0.05),且慢性酒精中毒组行为学测试结果均低于对照组,而高剂量GM1治疗组优于慢性酒精中毒组,差异均有统计学意义(P<0.05).蛋白质印迹法示,4组Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达水平差异均有统计学意义(F=12.42、14.07、242.37,均P<0.05).与慢性酒精中毒组相比,对照组和高剂量GM1治疗组海马组织Caspase-3蛋白和Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白在对照组、高剂量GM1治疗组、低剂量GM1治疗组海马区的表达水平显著高于慢性酒精中毒组(P<0.05).结论 GM1可以下调慢性酒精中毒小鼠海马组织Caspase-3、Bax蛋白表达水平,提高Bcl-2蛋白的表达水平.
    • 吴茂旺; 苏莉; 何芳; 徐祥
    • 摘要: 目的 研究整合素β1(integrinβ1)在两种创伤性脑损伤模型大鼠脑组织中的阳性表达特征,探讨运用integrinβ1阳性表达推断颅脑损伤致伤方式的可行性.方法 采用液压冲击法和单摆式打击法打击大鼠枕部,分别建立直线加速与旋转加速两种闭合性脑损伤模型.120只SD大鼠被随机分为直线加速损伤组、旋转加速损伤组、假手术组及正常对照组.用免疫组织化学染色及Western印迹法检测大鼠伤后30 min、3 h、6 h、12 h、3 d、7 d不同部位脑组织的integrinβ1阳性表达,所得数据经SPSS 18.0软件统计分析.结果 脑损伤后30 min即可检测到integrinβ1阳性表达,伤后6 h达到高峰,随着损伤经过时间的延长,表达呈增强趋势.在伤后相同时间点,直线加速损伤组与旋转加速损伤组integrinβ1在枕部打击点及丘脑部位的阳性表达差异无统计学意义(P>0.05),而在额叶、脑干处表达差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Integrinβ1在脑组织内阳性表达的特征可以用来推断打击点及致伤方式,对颅脑损伤经过的重建具有应用价值.
    • 何俊奇; 杨畅; 陆定艳; 李靖; 刘欢; 王永林; 刘亭
    • 摘要: 目的:建立细胞色素P450酶3A4(CYP3A4)、1A2(CYP1A2)及2E1(CYP2E1)的快速免疫印迹(Western blot)检测方法.方法:培养HepG2细胞并提取总蛋白,饲养大鼠并制备肝组织匀浆液、S9以及微粒体,以4种标本为对象分别以不同的封闭时间、抗体孵育时间和分离胶类型等常规Western blot条件设置A、B、C、D、E及F组用以考察CYP3A4的最佳检测条件;使用Western blot快速孵育仪,分别以不同的Western blot封闭和抗体孵育时间条件设置A、B、C和D、E、F及G、H、I组分别用以考察CYP3A4、CYP1A2及CYP2E1的最佳检测条件.结果:常规Western blot不同条件下,对CYP3A4的检测中C组检测灵敏度在HepG2、肝微粒体样品检测中高于A、B、D、E及F组(P<0.05),在组织匀浆、S9样品检测中C组检测灵敏度高于A、B、E组(P<0.05);在使用Western blot快速孵育仪孵育条件下,对CYP3A4的检测C组灵敏度在HepG2、肝组织匀浆及S9样品检测中高于A、B组(P<0.05),在肝微粒体样品检测中高于B组(P<0.05);对CYP1A2的各组样品检测中,F组的检测背景干净、条带的均一性均优于D、E组;对CYP2E1检测显示,在肝组织匀浆、S9及肝微粒体样品中I组的检测灵敏度高于G、H组(P<0.05).结论:与常规检测条件相比,改进后的Western blot封闭孵育方式能够有效地对CYP3A4、CYP1A2及CYP2E1进行快速检测,缩短了封闭孵育的时间.
    • 何俊奇; 杨畅; 陆定艳; 李靖; 刘欢; 王永林; 刘亭
    • 摘要: 目的:建立细胞色素P450酶3A4(CYP3A4)、1A2(CYP1A2)及2E1(CYP2E1)的快速免疫印迹(Western blot)检测方法。方法:培养HepG2细胞并提取总蛋白,饲养大鼠并制备肝组织匀浆液、S9以及微粒体,以4种标本为对象分别以不同的封闭时间、抗体孵育时间和分离胶类型等常规Western blot条件设置A、B、C、D、E及F组用以考察CYP3A4的最佳检测条件;使用Western blot快速孵育仪,分别以不同的Western blot封闭和抗体孵育时间条件设置A、B、C和D、E、F及G、H、I组分别用以考察CYP3A4、CYP1A2及CYP2E1的最佳检测条件。结果:常规Western blot不同条件下,对CYP3A4的检测中C组检测灵敏度在HepG2、肝微粒体样品检测中高于A、B、D、E及F组(P<0.05),在组织匀浆、S9样品检测中C组检测灵敏度高于A、B、E组(P<0.05);在使用Western blot快速孵育仪孵育条件下,对CYP3A4的检测C组灵敏度在HepG2、肝组织匀浆及S9样品检测中高于A、B组(P<0.05),在肝微粒体样品检测中高于B组(P<0.05);对CYP1A2的各组样品检测中,F组的检测背景干净、条带的均一性均优于D、E组;对CYP2E1检测显示,在肝组织匀浆、S9及肝微粒体样品中I组的检测灵敏度高于G、H组(P<0.05)。结论:与常规检测条件相比,改进后的Western blot封闭孵育方式能够有效地对CYP3A4、CYP1A2及CYP2E1进行快速检测,缩短了封闭孵育的时间。
    • 陈京伟; 官大威; 王鹏飞; 张孟周; 张忠铎; 程浩; 孙英富; 温书恒; 郭相伸; 赵锐
    • 摘要: 目的 检测小鼠脑挫伤后不同时间点大麻素2型受体(cannabinoid type 2 receptor,CB2R)的表达情况,并探索其与损伤时间的相关性.方法 通过PCI3000精密颅脑损伤撞击器建立小鼠脑挫伤模型,利用免疫组织化学染色、免疫荧光染色和Western印迹法检测不同损伤时间点损伤区周围CB2R的表达变化.结果 免疫组织化学染色结果显示,假手术组脑皮质中仅少量细胞呈CB2R阳性表达,脑挫伤后CB2R阳性细胞率逐渐升高,于伤后12 h和伤后7 d两次达到高峰,随后逐渐下降,至伤后28 d基本恢复至正常水平.Western印迹法检测结果与免疫组织化学染色结果一致.免疫荧光染色结果显示,脑挫伤后CB2R阳性神经元、CB2R阳性单核细胞、CB2R阳性星形胶质细胞数与总细胞数的比值变化均呈单峰模式,分别于伤后12 h、1 d、7 d达到高峰.结论 小鼠脑挫伤后CB2R在神经元、单核细胞及星形胶质细胞中的表达提示,其可能参与调节这些细胞的生物学功能.脑挫伤后CB2R的动态表达存在时间规律性,有望成为法医学脑挫伤损伤时间推断的生物学指标.
    • 赵建新; 金馨; 黄俊杰; 姚艺; 喻林升; 范琰琰
    • 摘要: 目的 检测乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)在小鼠皮肤切创愈合过程中的时序性表达及分布特征,探讨其在创口愈合中的作用及其作为创口形成时间推断参考指标的可行性.方法 45只C57BL/KsJ小鼠被随机分为1个对照组和8个切创组.切创组建立皮肤切创模型,分别于伤后6 h、12 h、1 d、3d、5d、7d、10d、14d提取皮肤创口样本;对照组提取未切创的皮肤组织.应用免疫组织化学染色、双重免疫荧光染色及Western印迹法检测皮肤样本中AChE的表达与分布.结果 免疫组织化学染色结果显示,伤后6~12 h,AChE主要表达于浸润的多形核白细胞;伤后1~3 d,大量浸润的单个核细胞呈现AChE阳性染色;伤后5~14 d,AChE阳性细胞以成纤维样细胞为主.AChE的阳性细胞率于伤后6 h开始增多,伤后1 d达到峰值.双重免疫荧光染色结果显示,AChE阳性的单个核细胞和成纤维样细胞主要为巨噬细胞和肌成纤维细胞.Western印迹法检测结果显示,各切创组AChE表达的相对表达水平均高于对照组,于伤后1 d达到峰值,此后下降,于伤后7 d达到第2个峰值.结论 皮肤创口愈合期间AChE时序性表达于多形核白细胞、巨噬细胞和肌成纤维细胞,提示其可能参与创口愈合的炎症反应和纤维性修复的调节.联合使用多种方法检测AChE的表达,可以为创口形成时间的推断提供参考依据.
    • 孟利峰; 白晓鸣; 周文; 马骏; 冯伟荣
    • 摘要: Objective To analyze the regulatory of miRNA (miR)-149-5p for the expression of Aurora-B in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). Methods The pathologic histology paraffin blocks of 61 patients with ESCC in Shanxi Provincial People's Hospital from January 2010 to December 2017 were collected. The immunohistochemical staining and tissue section in situ hybridization method were used to observe the expressions of Aurora-B and miR-149-5p in the tumor tissues and adjacent mucosas of the patients, and their relationship with clinicopathological parameters was analyzed. miRNA was predicted by using software TargetScan and miR walk. The relationship between Aurora-B and miR-149-5p were verified by using Western blot in ESCC TE-1 cells. Results The result of immunohistochemical staining showed that in 61 patients, 37 (61%) tumor tissues showed higher expression of Aurora-B compared with adjacent mucosas, the Aurora-B expression in 15 (26%) tumor tissues were in line with benign tissues, the Aurora-B expression in 9 (13%) tumor tissues were inferior to benign tissues. The expression of Aurora-B were not correlated with age (χ2=0.008, P=0.929), gender (χ2=0.088, P=0.767), grade of differentiation (χ2=2.632, P=0.268), but correlated with TNM staging (χ2=15.153, P<0.01) and lymph node metastasis (χ2=5.979, P=0.014). The miR-149-5p was predicted to combine with Aurora-B 3'untraslated region (UTR) by using TargetScan and miRwalk software. The result of in situ hybridization showed that the miR-149-5p showed low expression in 22 (36%) tumor tissues. The expression of miR-149-5p was correlated with Aurora-B expression (χ2 = 5.622,P= 0.018), and not correlated with age (χ2= 2.617, P= 0.106), gender (χ2= 1.529, P= 0.216), grade of differentiation (χ2 = 2.854, P= 0.240), TNM staging (χ2 = 0.870, P= 0.351) and lymph node metastasis (χ2= 0.128, P= 0.351). The Western blot results of TE-1 cells showed that the expression of Aurora-B in simultaneous over-expression of miR-149-5p and Aurora-B group was higher than that in over-expression of miR-149-5p group, and lower than that in over-expression of Aurora-B group. Conclusion The miR-149-5p can be involved in ESCC progression through regulating the expressions of Aurora-B.%目的 探讨食管鳞状细胞癌中miRNA-149-5p(miR-149-5p)对Aurora-B表达的调控作用.方法 收集山西省人民医院2010年1月至2017年12月收治的61例食管鳞状细胞癌患者的病理组织蜡块,免疫组织化学染色检测肿瘤组织以及对应癌旁组织Aurora-B表达,组织切片原位杂交检测miR-149-5p表达,分析二者与临床病理参数之间的关系.通过TargetScan和miR walk软件预测对应miR-149-5p结合位点.运用蛋白质印迹法验证食管鳞状细胞癌TE-1细胞中Aurora-B及miR-149-5p的关系.结果 免疫组织化学染色结果显示,61例患者中,37例(61%)肿瘤组织Aurora-B表达高于癌旁组织,15例(26%)与癌旁组织一致,9例(13%)低于癌旁组织;Aurora-B表达与患者年龄(χ2=0.008,P=0.929)、性别(χ2=0.088,P=0.767)、分化程度(χ2=2.632,P=0.268)无关,而与TNM分期(χ2=15.153,P<0.01)和淋巴结转移(χ2=5.979,P=0.014)有关.TargetScan和miRwalk软件预测发现,miR-149-5p与Aurora-B 3''非翻译区(UTR)结合.61例石蜡组织切片原位杂交结果显示,miR-149-5p在22例(36%)患者肿瘤组织中低表达,miR-149-5p表达与Aurora-B表达有关(χ2=5.622,P=0.018),与患者年龄(χ2=2.617,P=0.106)、性别(χ2=1.529,P=0.216)、分化程度(χ2=2.854,P=0.240)、TNM分期(χ2=0.870,P=0.351)和淋巴结转移(χ2=0.128,P=0.351)无关.蛋白质印迹法检测结果显示,TE-1细胞miR-149-5p和Aurora-B同时过表达组的Aurora-B表达高于miR-149-5p单独过表达组,低于Aurora-B单独过表达组.结论 miR-149-5p可能通过调控Aurora-B表达参与食管鳞状细胞癌发展进程.
  • 查看更多

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号