细胞系,肿瘤

摘要： 目的 探讨Ⅴ型胶原蛋白α2(COL5A2)基因在胃癌(GC)组织中的表达及与患者预后的关系.方法使用Oncomine数据库分析COL5A2基因在GC组织的表达;通过cBioPortal数据库探寻COL5A2基因突变情况;利用Kaplan-Meier Plotter平台绘制COL5A2 mRNA表达水平与GC患者预后的生存曲线;使用GEPIA数据库对COL5A2基因在GC中的表达及临床预后关系进行验证;采用GeneMANIA数据库分析COL5A2基因-基因互作网络,并进行功能富集分析.通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测4种GC细胞株(HGC-27、MKN-45、BGC-823和SGC-7901)COL5A2 mRNA的表达水平;用小干扰RNA(siRNA)抑制HGC-27细胞COL5A2基因的表达,将细胞分为转染NC si-RNA的阴性对照组(si-NC组)和转染COL5A2 siRNA的转染组(si-1、si-2和si-3组),最后通过CCK-8和细胞克隆实验检测COL5A2基因下调对GC细胞增殖的影响.结果数据库分析显示COL5A2基因在GC组织中高表达,且与GC患者的肿瘤分期呈正相关;cBioPortal数据库研究发现COL5A2基因在GC中的突变率为10.36％,并且COL5A2基因突变组比非突变组总生存期更长;生存曲线分析表明高COL5A2 mRNA表达与GC患者较差的临床预后显著相关;此外,通过GeneMANIA数据库探索发现COL5A2基因与COL5A1、BMP1、ITGA1等20种基因互作调控,主要与细胞外基质受体交互、骨骼系统开发以及肽交联等有关.qRT-PCR检测结果显示,COL5A2 mRNA在HGC-27和MKN-45细胞株中显著高表达;HGC-27细胞经过下调COL5A2基因表达后,与si-NC组相比,si-1和si-2组的细胞增殖能力以及克隆形成能力均明显下降.结论COL5A2基因在GC组织和细胞中高表达,与患者的肿瘤分期和不良预后密切相关,COL5A2基因突变患者预后较好,且COL5A2基因与细胞外基质受体交互、骨骼系统开发、肽交联等有关,下调COL5A2基因的表达可抑制GC细胞的增殖和克隆形成能力,因此COL5A2基因有望成为治疗GC的潜在新靶点.

摘要： 目的 研究乳腺癌细胞来源的外泌体对乳腺癌BT549细胞的增殖、侵袭和迁移的影响.方法 使用超速离心的方法对人乳腺癌BT549细胞培养液中的外泌体进行提取和纯化,以通用透射电子显微镜观察外泌体的形态和大小,蛋白免疫印迹实验鉴定外泌体的标志蛋白,以CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测外泌体对BT549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响.结果 透射电子显微镜下外泌体的形状为椭圆形,外包被一层磷脂膜,直径40～110 nm;蛋白免疫印迹实验结果显示外泌体内标志蛋白TSG101以及外标志蛋白CD63均明显富集;CCK-8实验结果显示共培养24 h后,实验组的BT549细胞增殖力较对照组明显增强(F=12.99～50.95,P<0.001);细胞划痕实验结果显示外泌体明显促进了BT549细胞的迁移(t=8.93,P<0.01);Transwell实验结果显示实验组BT549细胞迁移数较对照组明显增多(t=4.77,P<0.01).结论 乳腺癌细胞来源的外泌体能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,表明肿瘤来源外泌体可作为交叉信号的传递平台,在促进肿瘤的生长和肿瘤转移方面发挥自分泌作用.

摘要： 目的研究乳腺癌细胞来源的外泌体对乳腺癌BT549细胞的增殖、侵袭和迁移的影响。方法使用超速离心的方法对人乳腺癌BT549细胞培养液中的外泌体进行提取和纯化,以通用透射电子显微镜观察外泌体的形态和大小,蛋白免疫印迹实验鉴定外泌体的标志蛋白,以CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测外泌体对BT549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。结果透射电子显微镜下外泌体的形状为椭圆形,外包被一层磷脂膜,直径40~110 nm;蛋白免疫印迹实验结果显示外泌体内标志蛋白TSG101以及外标志蛋白CD63均明显富集;CCK-8实验结果显示共培养24 h后,实验组的BT549细胞增殖力较对照组明显增强(F=12.99~50.95,P<0.001);细胞划痕实验结果显示外泌体明显促进了BT549细胞的迁移(t=8.93,P<0.01);Transwell实验结果显示实验组BT549细胞迁移数较对照组明显增多(t=4.77,P<0.01)。结论乳腺癌细胞来源的外泌体能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,表明肿瘤来源外泌体可作为交叉信号的传递平台,在促进肿瘤的生长和肿瘤转移方面发挥自分泌作用。

摘要： 目的探讨Ⅴ型胶原蛋白α2(COL5A2)基因在胃癌(GC)组织中的表达及与患者预后的关系。方法使用Oncomine数据库分析COL5A2基因在GC组织的表达;通过cBioPortal数据库探寻COL5A2基因突变情况;利用Kaplan-Meier Plotter平台绘制COL5A2 mRNA表达水平与GC患者预后的生存曲线;使用GEPIA数据库对COL5A2基因在GC中的表达及临床预后关系进行验证;采用GeneMANIA数据库分析COL5A2基因-基因互作网络,并进行功能富集分析。通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测4种GC细胞株(HGC-27、MKN-45、BGC-823和SGC-7901)COL5A2 mRNA的表达水平;用小干扰RNA(siRNA)抑制HGC-27细胞COL5A2基因的表达,将细胞分为转染NC si-RNA的阴性对照组(si-NC组)和转染COL5A2 siRNA的转染组(si-1、si-2和si-3组),最后通过CCK-8和细胞克隆实验检测COL5A2基因下调对GC细胞增殖的影响。结果数据库分析显示COL5A2基因在GC组织中高表达,且与GC患者的肿瘤分期呈正相关;cBioPortal数据库研究发现COL5A2基因在GC中的突变率为10.36%,并且COL5A2基因突变组比非突变组总生存期更长;生存曲线分析表明高COL5A2 mRNA表达与GC患者较差的临床预后显著相关;此外,通过GeneMANIA数据库探索发现COL5A2基因与COL5A1、BMP1、ITGA1等20种基因互作调控,主要与细胞外基质受体交互、骨骼系统开发以及肽交联等有关。qRT-PCR检测结果显示,COL5A2 mRNA在HGC-27和MKN-45细胞株中显著高表达;HGC-27细胞经过下调COL5A2基因表达后,与si-NC组相比,si-1和si-2组的细胞增殖能力以及克隆形成能力均明显下降。结论COL5A2基因在GC组织和细胞中高表达,与患者的肿瘤分期和不良预后密切相关,COL5A2基因突变患者预后较好,且COL5A2基因与细胞外基质受体交互、骨骼系统开发、肽交联等有关,下调COL5A2基因的表达可抑制GC细胞的增殖和克隆形成能力,因此COL5A2基因有望成为治疗GC的潜在新靶点。

摘要： 目的 研究微小RNA-144-3p(miRNA-144-3p)靶向调控配对盒基因8(PAX8)对甲状腺癌细胞顺铂耐药性的影响.方法 体外培养人甲状腺癌细胞株FTC-133,并构建对顺铂耐药的人甲状腺癌细胞株FTC-133,采用反转录PCR(RT-PCR)检测FTC-133细胞和顺铂耐药FTC-133细胞中miRNA-144-3p相对表达量.将顺铂耐药FTC-133细胞分为A组、B组、C组,A组不作任何处理,B组转染空质粒,C组转染pCDNA3.1+miRNA-144-3p质粒,采用RT-PCR检测各组miRNA-144-3p、PAX8相对表达量,采用MTT法检测各组顺铂耐药细胞的半数抑制浓度(IC50)值;采用CCK-8法检测各组增殖率,采用流式细胞术检测各组凋亡率.结果 顺铂耐药FTC-133细胞中miRNA-144-3p相对表达量显著高于FTC-133细胞[(0.93 ±0.24)vs(0.26±0.04),P ＜ 0.05];B组顺铂耐药FTC-133细胞IC50值、增殖率、凋亡率及miRNA-144-3p、PAX8相对表达量与A组比较差异无统计学意义(P ＞0.05);C组顺铂耐药FTC-133细胞IC50值、增殖率及miRNA-144-3p相对表达量显著高于B组(P＜0.05),细胞凋亡率、PAX8相对表达量显著低于B组(P ＜0.05).结论 miRNA-144-3p过表达可能通过下调PAX8基因表达而增加甲状腺癌细胞的顺铂耐药性,促进甲状腺癌细胞增殖并抑制其凋亡.

摘要： 目的 探讨微小RNA(miR)-5590-3p对转化生长因子βⅡ型受体(TGFBR2)基因表达的抑制作用及对胃癌细胞HS-746T侵袭和增殖的影响.方法 体外培养胃癌细胞系,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胃癌组织和细胞系中miR-5590-3p的表达.采用脂质体转染法分别转染miR-NC和miR-5590-3p模拟物至胃癌细胞HS-746T中,分别命名为miR-5590-3p组和miR-NC组.qRT-PCR检测转染效果.Transwell实验和CCK-8实验检测转染后胃癌细胞HS-746T侵袭和增殖能力.生物信息学软件预测和双荧光素酶报告基因系统验证miR-5590-3p的靶基因.qRT-PCR和Western blot检测转染后细胞中TGFBR2及下游蛋白的表达.结果 miR-5590-3p在胃癌组织的表达明显低于癌旁组织(P＜0.01).miR-5590-3p在胃癌细胞系的表达明显低于正常胃黏膜上皮细胞(P＜0.05),在 HS-746T 细胞中表达最低(P＜0.01).转染后 miR-5590-3p 组 miR-5590-3p 的表达(11.76±0.21)明显高于miR-NC组(1.06±0.21),差异有统计学意义(P＜0.01).miR-NC组和miR-5590-3p组侵袭细胞数量分别为(101.20±15.47)个和(26.53±6.53)个,miR-5590-3p组细胞侵袭能力明显下降(P＜0.01).与miR-NC组比较,miR-5590-3p组细胞增殖能力明显降低(P＜0.05).生物信息学软件显示miR-5590-3p的靶基因是TGFBR2.双荧光素酶报告基因系统证实miR-5590-3p可靶向结合TGFBR2基因(P＜0.01).Western blot结果显示,与miR-NC组比较,miR-5590-3p组HS-746T细胞中TGFBR2的表达明显降低(P＜0.01).肿瘤侵袭相关蛋白ZEB-1、ZEB-2表达降低,细胞周期相关蛋白CDK1和Cyclin B表达降低.结论 miR-5590-3p可通过靶向结合并调控TGFBR2基因的表达,抑制胃癌细胞HS-746T的侵袭和增殖能力.

摘要： 目的 研究星形胶质细胞升高基因1(AEG-1)调控细胞自噬及上皮间质转化(EMT)诱导甲状腺乳头状癌(PTC)增殖和转移及其作用机制.方法 体外培养正常甲状腺细胞和PTC细胞.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测AEG-1在PTC细胞中的表达,选择AEG-1最高表达的PTC细胞进行AEG-1 shRNA的感染,分为sh-NC组和sh-AEG-1组.采用CCK8和EdU(5-乙炔基-2'-脱氧尿苷)实验检测AEG-1对PTC细胞增殖能力的影响;Transwell小室实验检测AEG-1对PTC细胞转移能力的影响;裸鼠皮下成瘤实验检测AEG-1 对PTC细胞体内生长能力的影响;Western blot检测AEG-1对自噬相关蛋白和EMT相关蛋白表达影响.分别采用自噬诱导剂Rapamycin和EMT诱导剂转化生长因子-β(TGF-β)处理sh-NC组和sh-AEG-1组PTC细胞,采用CCK8和Transwell小室实验分别检测各组细胞的增殖和转移能力.结果 与正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1 相比,PTC细胞中AEG-1的表达水平增加,其中在TPC-1细胞中表达最高.AEG-1 shRNA转染TPC-1细胞后,细胞的增殖、转移和体内成瘤能力均降低(P＜0.05).与sh-NC组相比,sh-AEG-1 组细胞中自噬相关蛋白P62、Beclin1表达增加和LC3B蛋白表达降低,EMT相关蛋白E-cadherin表达增加和N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P＜0.05).CCK8和Transwell小室实验表明自噬诱导剂Rapamycin和EMT诱导剂TGF-β处理均减弱了 sh-AEG-1对PTC细胞增殖和转移能力的抑制作用(P＜0.05).结论 AEG-1通过诱导细胞自噬及EMT促进PTC细胞增殖和转移能力.

摘要： 目的 探讨抑制素Beta A(INHBA)在胃癌组织中表达与临床病理资料相关性及对胃癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响及机制.方法 利用GEPIA公共数据库验证INHBA在胃癌及癌旁组织中mRNA表达情况及与患者病理分期及预后的关系,利用Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析INHBA与患者临床预后的关系;病理标本行免疫组化验证INHBA在胃癌与癌旁组织中蛋白表达水平及其表达水平与患者临床病理分期相关性;体外实验中,利用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖能力,利用划痕实验检测细胞迁移能力,利用transwell小室实验检测细胞侵袭转移能力,利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测INHBA表达与上皮-间质样转化(EMT)相关蛋白的表达相关性.结果 GEPIA数据库及Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析显示,与正常组织相比,INHBA mRNA在多种癌症组织中高表达,在胃癌组织中显著高表达(P＜0.05);INHBA mRNA的高表达与胃癌临床分期及不良预后相关(P＜0.05);免疫组化结果显示,胃癌组织中INHBA的染色评分显著高于癌旁组织(P＜0.05),并且其表达水平与患者临床TNM分期有关(P＜0.05);MTT、划痕实验、transwell小室结果显示,INHBA过表达可以促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭转移能力,而干扰INHBA的表达可以抑制细胞增殖、迁移和侵袭转移能力;Western blot结果显示,INHBA过表达后CDH1的表达量明显下调,而CDH2的表达量上调;抑制INHBA表达后CDH1的表达量明显上调,而CDH2的表达量下调.结论 INHBA在胃癌组织中较癌旁组织高表达,其表达水平与患者肿瘤进展及不良预后相关,INHBA可以促进胃癌MGC-803细胞系的增殖、迁移及侵袭能力,其机制可能与INHBA促进细胞EMT有关.

摘要： 目的 探讨尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)在肺腺癌间质中的表达水平及过表达NNMT对肺腺癌细胞生物学功能的影响.方法(1)收集150例肺腺癌患者手术切除的组织标本.免疫组织化学染色检测癌组织和间质细胞中NNMT的表达水平,并分析其表达与患者临床病理特征及预后间的关系.(2)分别转染过表达NNMT质粒(NNMT组)和对照质粒(control组)构建稳定表达NNMT的肺成纤维细胞系HFL-1,采用荧光定量PCR(qPCR)、细胞免疫荧光、蛋白质印迹法(Western blot)检测NNMT表达水平.(3)收集过表达NNMT及control组HFL-1细胞的培养上清,分别和肺腺癌A549、PC9细胞进行共培养,通过细胞增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell侵袭实验以及划痕愈合实验比较2种培养液对A549、PC9细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响.结果(1)免疫组化染色显示,150例患者组织标本中65例癌细胞中NNMT呈高表达,83例间质细胞中NNMT呈高表达.有淋巴结转移和病理分期Ⅲ～Ⅳ期患者肿瘤间质细胞中NNMT高表达比例较高,且肿瘤间质中高表达NNMT患者的总生存率明显低于低表达者.(2)成功构建了稳定过表达NNMT的HFL-1细胞,Western blot、qPCR、细胞免疫荧光染色均提示NNMT组NNMT表达高于control组.(3)细胞共培养结果显示,与control组相比,表达NNMT的肺成纤维细胞系的培养液可以显著促进A549和PC9细胞的增殖、克隆形成、迁移以及侵袭.结论肿瘤间质表达的NNMT与肺腺癌的恶性进展密切相关,可能是肿瘤靶向生物治疗的潜在靶点.

摘要： 目的 观察微小RNA (miR)-5787在乳腺癌组织及多种乳腺癌细胞系中的表达,分析过表达miR-5787对乳腺癌细胞侵袭和增殖的影响并探讨其可能的作用机制.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-5787在47例乳腺癌组织及癌旁组织、4种乳腺癌细胞系及正常乳腺上皮细胞中的表达.选择miR-5787表达最低的乳腺癌细胞系,分别转染miR-5787模拟物(实验组)和对照NC模拟物(对照组).qRT-PCR检测两组细胞中miR-5787的表达.Transwell侵袭实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)分别检测过表达miR-5787对乳腺癌细胞侵袭和增殖的影响.生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证miR-5787可配对结合的靶基因.qRT-PCR和Western blot检测靶基因mRNA及蛋白的表达.结果 与癌旁组织(5.05±0.82)相比,乳腺癌组织miR-5787的表达(1.32±0.33)明显降低(P＜0.01).与正常乳腺上皮细胞相比,4种乳腺癌细胞系miR-5787的表达均降低(P＜0.05),HCC1937细胞中的表达最低(P＜0.01).转染miR-5787模拟物后,实验组HCC1937细胞中miR-5787的表达明显高于对照组(P＜0.01),表明转染成功.过表达miR-5787可抑制乳腺癌HCC1937细胞的侵袭(P＜0.05)和增殖(P＜0.05).生物信息学软件预测miR-5787的靶基因可能是硫酸乙酰肝素糖蛋白2(HSPG2),miR-5787可配对结合HSPG2 mRNA(P＜0.01).qRT-PCR和Western blot结果显示,过表达miR-5787可明显抑制HSPG2蛋白和mRNA的表达(P＜0.01),波形蛋白(Vimentin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)表达明显降低(P＜0.05).结论 乳腺癌组织和细胞系中miR-5787均呈低表达,过表达miR-5787通过靶向干扰HSPG2基因的表达,抑制乳腺癌HCC1937细胞的侵袭和增殖.

摘要： 本发明提供了一种人源化PD‑L1肿瘤细胞系，所述细胞系为MC‑38‑hPD‑L1，并建立具有人源化PD‑L1肿瘤细胞系的动物肿瘤模型，同时揭示了一种人源化PD‑L1肿瘤细胞系的构建方法，具体通过CRISPR‑CAS9敲除动物源的PD‑L1，扩大培养获得敲除细胞库，提取DNA进行PCR扩增，回收扩增产物并进行克隆，最后通过慢病毒体系将人源PD‑L1在mPD‑L1 KO的MC‑38细胞系中过表达，随后进行慢病毒的包装及Puromycin筛选获得人源化的PD‑L1的MC‑38细胞系。结果显示抗体治疗后的肿瘤浸润CD8 T淋巴细胞明显表现出更强的杀伤和增殖能力，此外我们也发现抗体治疗后肿瘤浸润的Treg细胞明显被抑制。这从分子机理上进一步证明该方法有效可行。

摘要： 本发明公开了一种小鼠肾透明细胞癌循环肿瘤细胞系和肾透明细胞癌循环肿瘤细胞的分离与培养方法，涉及肿瘤细胞的分离与培养技术领域；所述小鼠肾透明细胞癌循环肿瘤细胞系为原位肾癌NOD/SCID小鼠的循环肿瘤细胞；所述环肿瘤细胞的分离与培养方法主要包括以下步骤：首先用病毒感染人源性肾透明细胞癌细胞系786‑O，使其稳转绿色荧光蛋白和具有Puromycin抗性，并对该细胞系进行培养；再建立小鼠模型，采集小鼠外周血并进行培养、分离得到肾癌循环肿瘤细胞。本发明的分离与培养方法简单易操作，分离获得的循环肿瘤细胞可以进行正常的传单培养，可以广泛应用于临床研究。

摘要： 本发明公开了小鼠前列腺癌循环肿瘤细胞系及前列腺癌循环肿瘤细胞分离和培养方法。所述循环肿瘤细胞系的保藏编号为CCTCC C201601。所述分离和培养方法包括：建立原位前列腺癌动物模型、取血、裂解红细胞、分离培养及传代。获得的循环肿瘤细胞质量均一，经免疫荧光及划痕和穿膜实验鉴定符合循环肿瘤细胞的特性，具有较强的转移和侵袭能力，是实验室研究前列腺肿瘤转移机制的良好实验工具，也为临床预防前列腺癌转移提供了研究细胞模型。本发明的循环肿瘤细胞分离及培养方法简单易操作，分离的细胞可稳定传代，方便实验室研究循环肿瘤细胞特性等实验。本发明在研究肿瘤转移方面将会有广泛的应用。

摘要： 本发明涉及一种肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法及肿瘤细胞系免疫组化对照品，属于肿瘤阳性参照物技术领域。本发明的对照品的制备方法，是以肿瘤细胞系为对象，制备成细胞系蜡块，为免疫组化实验提供形态相对一致的对照品，保证实验结果的可靠性及可重复性；可以很好的保证细胞形态的一致性，同时能够长久的保存对照品，减少了因为对照样本的问题造成实验结果的不确定性的发生几率。

摘要： 本发明提供了一种人源化PD‑L1肿瘤细胞系，所述细胞系为MC‑38‑hPD‑L1，并建立具有人源化PD‑L1肿瘤细胞系的动物肿瘤模型，同时揭示了一种人源化PD‑L1肿瘤细胞系的构建方法，具体通过CRISPR‑CAS9敲除动物源的PD‑L1，扩大培养获得敲除细胞库，提取DNA进行PCR扩增，回收扩增产物并进行克隆，最后通过慢病毒体系将人源PD‑L1在mPD‑L1 KO的MC‑38细胞系中过表达，随后进行慢病毒的包装及Puromycin筛选获得人源化的PD‑L1的MC‑38细胞系。结果显示抗体治疗后的肿瘤浸润CD8 T淋巴细胞明显表现出更强的杀伤和增殖能力，此外我们也发现抗体治疗后肿瘤浸润的Treg细胞明显被抑制。这从分子机理上进一步证明该方法有效可行。

摘要： 本发明涉及来自具肝细胞表型能够产生白蛋白和凝血因子的已分化细胞的细胞系，所述细胞源自人白血病细胞系，优选人THP1细胞系，所述细胞保留无限增殖特性。在本发明细胞系中，优选称为PSC－THP1－EP、PSC－THP1－EP－FAST、PSC－THP1－HEP和PSC－THP1－EPEP的细胞系。本发明还涉及用于获得本发明细胞系的方法及所述细胞系的用途，尤其是用于制备白蛋白和/或凝血因子的用途。

摘要： 本发明公开了一种小鼠肾透明细胞癌循环肿瘤细胞系和肾透明细胞癌循环肿瘤细胞的分离与培养方法，涉及肿瘤细胞的分离与培养技术领域；所述小鼠肾透明细胞癌循环肿瘤细胞系为原位肾癌NOD/SCID小鼠的循环肿瘤细胞；所述环肿瘤细胞的分离与培养方法主要包括以下步骤：首先用病毒感染人源性肾透明细胞癌细胞系786‑O，使其稳转绿色荧光蛋白和具有Puromycin抗性，并对该细胞系进行培养；再建立小鼠模型，采集小鼠外周血并进行培养、分离得到肾癌循环肿瘤细胞。本发明的分离与培养方法简单易操作，分离获得的循环肿瘤细胞可以进行正常的传单培养，可以广泛应用于临床研究。

摘要： 本发明提供了一种原代肿瘤细胞筛选培养基，所述原代肿瘤细胞筛选培养基由以下体积百分比的成分组成：5％～20％的无细胞腹水、3％～15％的胎牛血清，其余为哺乳动物细胞培养基。本发明提供的筛选培养基成分能够选择性杀伤间质细胞，对肿瘤细胞生长具有高选择性。同时，能够提高肿瘤细胞的增殖速度，缩短培养周期。本发明提供的肿瘤细胞系构建方法可以纯化癌细胞系至99％以上，大大提高了体外构建肿瘤细胞系的成功率。

摘要： 本发明公开了小鼠前列腺癌循环肿瘤细胞系及前列腺癌循环肿瘤细胞分离和培养方法。所述循环肿瘤细胞系的保藏编号为CCTCC C201601。所述分离和培养方法包括：建立原位前列腺癌动物模型、取血、裂解红细胞、分离培养及传代。获得的循环肿瘤细胞质量均一，经免疫荧光及划痕和穿膜实验鉴定符合循环肿瘤细胞的特性，具有较强的转移和侵袭能力，是实验室研究前列腺肿瘤转移机制的良好实验工具，也为临床预防前列腺癌转移提供了研究细胞模型。本发明的循环肿瘤细胞分离及培养方法简单易操作，分离的细胞可稳定传代，方便实验室研究循环肿瘤细胞特性等实验。本发明在研究肿瘤转移方面将会有广泛的应用。

摘要： 通过提供与肿瘤相关的MUC‑1抗原结合的能力，对NK细胞和NK细胞系进行修饰增加其对癌细胞的选择性。这种经修饰的NK细胞和NK细胞系的产生是通过基因修饰产生NK‑CAR，其可选地经进一步修饰增加对癌细胞的细胞毒性。