RNA

摘要： 目的探讨CD38在缺血/再灌注诱导的局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤及在炎症反应中的可能作用。方法建立SD大鼠局灶性脑缺血模型,给大鼠脑海马注射Ad-siCD38腺病毒,评估大鼠神经功能;用Elisa法检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平;用HE染色法观察大鼠脑海马组织形态学变化;用尼氏染色法观察大鼠神经元形态变化,用高尔基体染色法观察脑神经元及树突棘变化;用免疫组化法检测GFAP阳性细胞表达水平、RT-PCR和Western blot法检测大鼠脑组织中NF-kB、TNF-α、IL-1β、IL-6和CD38 mRNA及蛋白表达水平。结果与模型组比较,Ad-si CD38腺病毒干预能通过增加脑组织中尼氏小体、树突棘数量及神经元树突分支复杂性改善大鼠脑损伤情况,降低大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6含量,显著下调大鼠脑组织NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-6和CD38 mRNA及蛋白表达水平,并能减少大鼠脑组织中GFAP的阳性表达水平。结怡通过CD38基因下调调节炎症反应来延缓局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑损伤。

摘要： 脑卒中发病率和病死率在世界范围内处于较高水平,缺血性脑卒中占所有脑卒中病例的80%~85%[1]。神经炎症是发生在中枢神经系统的炎症过程,是对组织损伤/感染的适应性反应[2]。中枢神经系统内的某种细胞在感染或创伤的刺激下激活,引发一系列炎性反应,导致神经炎症发生[3]。神经炎症是一把双刃剑。缺血性脑卒中发生时起初短暂上调的炎症过程可起到一定的保护作用,但随着炎症刺激的不断扩大会发生一系列炎性级联反应,导致继发性脑组织损伤,功能恢复不良[4-5]。

摘要： 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)LNC01309对人肝癌细胞增殖和迁移能力的影响及作用机制。方法收集2018年2月—2019年6月在解放军总医院第六医学中心手术治疗的12例肝细胞癌(以下简称肝癌)患者标本及对应的癌旁组织,采用荧光定量PCR方法检测LNC01309的相对表达量。利用荧光定量PCR法检测LNC01309在人肝癌细胞系(Hep G2、SNU-398和Hep 3B)和人永生化正常肝细胞系(THLE-2)中的表达水平。在肝癌细胞Hep G2中过表达LNC01309,分为质粒对照组(pEXP-control)和过表达组(pEXP-LNC01309)。采用CCK-8检测各组细胞增殖变化,采用划痕愈合试验和Transwell试验检测各组细胞迁移能力。利用RNA免疫共沉淀试验检测LNC01309与RBM38的相互作用(分组为IgG组和RBM38抗体组)。利用放线菌酮追踪分析检测LNC01309对于RBM38蛋白稳定性的影响。在肝癌细胞Hep G2中过表达RBM38进行回复试验,采用CCK-8试验、划痕愈合试验和Transwell试验,分别检测细胞增殖和迁移能力的变化。计量资料两组间比较采用t检验。结果LNC01309在肝癌组织中的平均表达水平高于癌旁组织(4.225±2.285 vs 1.541±0.530,t=3.618,P=0.004)。LNC01309在肝癌细胞(Hep G2、SNU-398和Hep 3B)中的相对表达水平亦均高于正常肝细胞(THLE-2)(t值分别为4.231、6.489、14.480,P值均<0.05)。过表达LNC01309的Hep G2细胞(t=9.172,P<0.001)相对于对照组,细胞的生长速度明显上升(第96小时OD_(450)值:1.885±0.107 vs 2.527±0.234,t=4.330,P=0.012),迁移能力上调(划痕愈合试验:11.65%±2.40%vs 35.66%±4.90%,t=9.837,P<0.001;Transwell试验:100.00%±3.11%vs 161.00%±35.93%,t=4.399,P=0.005);然而过表达LNC01309诱导的肝癌细胞增殖和迁移能力的上调效应,都能够被RBM38部分抑制(第96小时OD_(450)值:2.500±0.227 vs 1.913±0.282,t=2.812,P=0.048;168.00%±9.43%vs 117.20%±18.03%,t=6.622,P<0.001)。相对于IgG对照组,RBM38抗体能够显著富集沉淀LNC01309(t=3.846,P=0.031)。放线菌酮试验结果显示,过表达LNC01309组细胞中RBM38蛋白稳定性显著下调(t=8.038,P=0.001)。结论新发现的LNC01309通过与RBM38的相互作用降低了RBM38蛋白稳定性,促进肝癌细胞的增殖与迁移。

摘要： 目前,缺血性脑卒中已成为威胁我国公众健康的主要疾病。近年来,研究发现长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在缺血性脑卒中的发生、发展进程中起着重要的作用。探究lncRNA在缺血性脑卒中发病过程中的作用机制,将为缺血性脑卒中诊疗手段的突破提供新的方向。本文通过对lncRNA在缺血性脑卒中中的作用及调控机制进行总结,为今后进一步研究缺血性脑卒中的病因及发病机制提供参考。

摘要： 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)PVT1对变应性鼻炎(AR)进展的影响及其相关作用机制。方法24只BALB/c小鼠,其中6只作为对照组,余18只采用卵白蛋白和氢氧化铝建立AR模型并采用随机数字表法均分为模型组、AR+NC组(尾静脉注射空载体慢病毒)、AR+shPVT1组(尾静脉注射LncRNA PVT1干扰载体慢病毒),每组6只。采用行为学评分评估各组小鼠过敏症状;HE染色观察各组小鼠鼻黏膜组织病理学改变;实时荧光定量PCR检测各组小鼠鼻黏膜组织中LncRNA PVT1、miR-149-5p和几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)mRNA的表达;Western blot检测CHI3L1蛋白表达;ELISA分析各组小鼠血清IgE、白细胞介素(IL)-5、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。构建LncRNA PVT1和CHI3L1的野生型(WT)和突变型(MT)荧光素酶报告质粒,单独或同时与miR-149-5p mimic共转染293T细胞,采用双荧光素酶实验分析并计算各组细胞荧光素酶相对活性。结果与模型组相比,AR+shPVT1组小鼠行为学评分降低;血清中IgE、IL-5和TNF-α水平降低;鼻黏膜组织中LncRNA PVT1 mRNA表达水平降低,miR-149-5p mRNA表达水平升高,CHI3L1 mRNA及蛋白水平均降低,鼻黏膜组织炎症反应减轻。双荧光素酶实验证实LncRNA PVT1通过竞争性结合miR-149-5p,上调miR-149-5p靶基因CHI3L1的表达。结论在AR模型小鼠中异常高表达的LncRNA PVT1通过发挥竞争性内源RNA作用抑制miR-149-5p表达而上调CHI3L1的表达,引发小鼠鼻黏膜组织的炎性症状并促进过敏反应。

摘要： 目的探讨LincRNA-P21通过靶向miR-17-3p对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞迁移和侵袭作用的影响。方法qPCR检测30例TNBC患者肿瘤组织、癌旁正常组织以及6种乳腺细胞(乳腺正常细胞MCF-10A,乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA-MB-468、BT549、T47D)LincRNA-P21和miR-17-3p的表达。取MDA-MB-231细胞,单独过表达LincRNA-P21(实验设对照组、pcDNA3.1空白组、pcDNA-LincRNA-P21组),抑制miR-17-3p表达(实验设对照组、miR-17-3p空白组、miR-17-3p抑制剂组),过表达LincRNA-P21+抑制miR-17-3p表达(实验设对照组、miR-17-3p抑制剂组和pcDNA-LincRNA-P21+miR-17-3p inhibitor组)。CCK-8法检测MDA-MB-231细胞增殖,集落形成实验检测细胞的集落数量,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。Western blot检测E-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果TNBC患者组织中LincRNA-P21的表达明显低于癌旁组织(0.48±0.03 vs.1.03±0.06,t=11.714,P<0.01),miR-17-3p的表达显著高于癌旁组织(2.93±0.17 vs.1.02±0.04,t=15.593,P<0.01)。乳腺癌细胞系中LincRNA-P21表达量明显低于MCF-10A,miR-17-3p表达量高于MCF-10A(P<0.01)。单独过表达LincRNA-P21或抑制miR-17-3p后,MDA-MB-231细胞增殖能力、集落形成数量、迁移和侵袭能力均明显下降。过表达LincRNA-P21的同时抑制miR-17-3p,MDA-MB-231细胞增殖能力、集落形成数量、迁移和侵袭能力出现进一步下降,且上调E-cadherin的表达,抑制Vimentin的表达(P<0.05)。结论LincRNA-P21通过竞争性结合miR-17-3p来抑制MDA-MB-231细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭。

摘要： 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)生长抑制特异因子5(GAS5)靶向微小RNA(miR)-103,从而减轻3T3L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)的机制。方法培养并诱导分化3T3L1小鼠前脂肪细胞,油红O染色鉴定细胞分化情况。建立3T3L1脂肪细胞IR模型。实验分为对照组、模型组、空载体组(转染pEGFP-C1空载体)、GAS5过表达组(转染pEGFP-C1-GAS5载体)、GAS5过表达+mimic NC组(转染pEGFP-C1-GAS5+mimic NC)、GAS5过表达+miR-103 mimic组(转染pEGFP-C1-GAS5+miR-103 mimic)。实时荧光定量PCR检测细胞中GAS5、miR-103 mRNA水平;液体闪烁法检测葡萄糖摄取能力;蛋白质免疫印迹检测细胞中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、p-IRS-1、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白表达水平;双荧光素酶鉴定miR-103与GAS5的靶向位点。结果诱导后脂肪细胞呈圆形、胞体变大,胞浆丰富,含有大量脂滴,油红染色明显,呈"指环样"结构,模型构建成功。与对照组比较,模型组、空载体组、GAS5过表达+miR-103 mimic组细胞中GAS5mRNA水平、葡萄糖摄取能力、p-IRS-1/IRS-1、PPARγ、GLUT4、p-AKT/AKT蛋白水平降低,细胞中miR-103 mRNA水平升高(P<0.05);与模型组、空载体组比较,GAS5过表达组、GAS5过表达+mimic NC组细胞中GAS5 mRNA水平、葡萄糖摄取能力、p-IRS-1/IRS-1、PPARγ、GLUT4、p-AKT/AKT蛋白水平升高,而miR-103 m RNA水平降低(P<0.05);与GAS5过表达组、GAS5过表达+mimic NC组比较,GAS5过表达+miR-103 mimic组细胞中GAS5 mRNA水平、葡萄糖摄取能力、p-IRS-1/IRS-1、PPARγ、GLUT4、p-AKT/AKT蛋白水平降低,miR-103 mRNA水平升高(P<0.05)。miR-103与GAS5存在互补的结合位点并经双荧光素酶靶向关系验证。结论过表达GAS5后靶向下调miR-103的表达可减轻3T3L1脂肪细胞IR。

摘要： 胃癌是我国最常见的消化道肿瘤,治疗效果欠佳。已发现的RNA修饰方式超过150种,而m^(6)A的动态修饰是RNA修饰中丰度最高的方式。m^(6)A修饰在RNA代谢中扮演重要角色,且参与到细胞的增殖、分化和凋亡等多种生物学过程中。在胃癌的发生发展中m^(6)A修饰失衡也发挥重要作用,深入研究胃癌的分子机制能为胃癌的治疗提供新的策略。

摘要： 目的筛选糖皮质激素性骨质疏松(GIOP)破骨细胞中差异表达的环状RNA(circRNA),并分析地塞米松对其作用。方法通过密度差异离心法分离收集9例患者血液中的单核细胞,设置对照组、地塞米松刺激组(1×10^(-7)M地塞米松+50 ng/ml核因子κ-B配体受体致活剂(RANKL)+25 ng/ml人乳腺癌细胞(MCF)-1)和诱导组(50 ng/ml RANKL+25 ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)3个分组,分别诱导分化培养7、14、21 d,观察单核细胞分化成破骨细胞的情况。收集分别培养7、14、21 d细胞进行circRNAs表达谱测序,并比较分析差异表达的circRNAs,选择差异显著的9个cirRNAs进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证。验证结果与筛选的circRNA差异性一致的,进行基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果地塞米松组培养7、14和21 d后的样本相较于诱导组和对照组形成更大量的破骨细胞。芯片结果显示,与对照组相比,干扰组中共发现3776个差异表达的circRNAs(FC≥2.0,P<0.05),其中574个上调、3202个下调。差异表达的circRNAs主要影响鸟嘌呤-5′-三磷酸GTP酶激活剂的活性、腺苷核糖核苷酸的结合等,对细胞外基质等细胞成分的形成也有影响。RT-PCR表明hsa-circ-006157的表达水平与芯片结果差异最小。构建circRNA-miRNA-mRNA共表达网络,结果显示hsa-circ-006157与hsa-miR-4723-3p、hsa-miR-297、hsa-miR-502-3p和hsa-miR-7111-3p存在密切相互作用,主要在细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)和转化生长因子(TGF-β)等通路的信号转导方向起作用。结论本研究证实了地塞米松在单核细胞诱导分化为破骨细胞过程中的促进作用,并筛选验证了其中差异表达的基因hsa-circ-006157,进一步分析其相互作用及涉及的通路,从体外阐明cicrRNA在中的作用及机制。

摘要： 在本次试验中,从清远养鸡场采集疑似感染H9亚型禽流感病毒鸡群的口腔及泄殖腔拭子进行病毒分离,使用血凝及血凝抑制试验进行初步鉴定,提取病毒RNA,使用针对H9亚型禽流感病毒HA基因的特异性鉴定引物对该分离株进行RT-PCR检测,回收特异性目的片段后进行测序分析,结果显示,该毒株属于H9亚型禽流感病毒。

摘要： 目的:揭示4种常见证候荷瘤小鼠神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征。方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip (Agilent)、 及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array (Affymetrix)等先进技术,观察H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺、甲状腺、睾丸、胸腺、脾脏、肿瘤基因表达的特征。结果:共获得早期气虚证、早期邪毒壅盛证,中期阳气虚证,中晚期气阴阳虚证等4种证候荷瘤小鼠,及正常对照小鼠等以上8个组织(正常对照缺肿瘤)计39张RNA电泳图谱和芯片检测结果。发现,肿瘤发生后,下丘脑基因表达异常活跃;相反,垂体与肾上腺基因表达显著抑制,以邪毒壅盛证最典型,以后垂体与肾上腺抑制逐渐解除,但到中晚期气阴阳虚证的肾上腺有失代偿倾向;不同的是,甲状腺基因转录十分活跃,而皋丸却减弱。肿瘤发生后,胸腺、脾脏基因表达活跃,但胸腺到中晚期气阴阳虚证出现了失代偿。结论:以上不同组织基因表达的改变,构成了荷瘤小鼠早期气虚与邪毒壅盛证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证特征性表现,这对深入认识肿瘤常见证候神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征和演变,指导临床辨证论治具有重要的意义。

摘要： 目的:揭示4种常见证候荷瘤小鼠神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征。方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip (Agilent)、 及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array (Affymetrix)等先进技术,观察H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺、甲状腺、睾丸、胸腺、脾脏、肿瘤基因表达的特征。结果:共获得早期气虚证、早期邪毒壅盛证,中期阳气虚证,中晚期气阴阳虚证等4种证候荷瘤小鼠,及正常对照小鼠等以上8个组织(正常对照缺肿瘤)计39张RNA电泳图谱和芯片检测结果。发现,肿瘤发生后,下丘脑基因表达异常活跃;相反,垂体与肾上腺基因表达显著抑制,以邪毒壅盛证最典型,以后垂体与肾上腺抑制逐渐解除,但到中晚期气阴阳虚证的肾上腺有失代偿倾向;不同的是,甲状腺基因转录十分活跃,而皋丸却减弱。肿瘤发生后,胸腺、脾脏基因表达活跃,但胸腺到中晚期气阴阳虚证出现了失代偿。结论:以上不同组织基因表达的改变,构成了荷瘤小鼠早期气虚与邪毒壅盛证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证特征性表现,这对深入认识肿瘤常见证候神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征和演变,指导临床辨证论治具有重要的意义。

摘要： 目的:揭示4种常见证候荷瘤小鼠神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征。方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip (Agilent)、 及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array (Affymetrix)等先进技术,观察H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺、甲状腺、睾丸、胸腺、脾脏、肿瘤基因表达的特征。结果:共获得早期气虚证、早期邪毒壅盛证,中期阳气虚证,中晚期气阴阳虚证等4种证候荷瘤小鼠,及正常对照小鼠等以上8个组织(正常对照缺肿瘤)计39张RNA电泳图谱和芯片检测结果。发现,肿瘤发生后,下丘脑基因表达异常活跃;相反,垂体与肾上腺基因表达显著抑制,以邪毒壅盛证最典型,以后垂体与肾上腺抑制逐渐解除,但到中晚期气阴阳虚证的肾上腺有失代偿倾向;不同的是,甲状腺基因转录十分活跃,而皋丸却减弱。肿瘤发生后,胸腺、脾脏基因表达活跃,但胸腺到中晚期气阴阳虚证出现了失代偿。结论:以上不同组织基因表达的改变,构成了荷瘤小鼠早期气虚与邪毒壅盛证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证特征性表现,这对深入认识肿瘤常见证候神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征和演变,指导临床辨证论治具有重要的意义。

摘要： 目的:揭示4种常见证候荷瘤小鼠神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征。方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip (Agilent)、 及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array (Affymetrix)等先进技术,观察H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺、甲状腺、睾丸、胸腺、脾脏、肿瘤基因表达的特征。结果:共获得早期气虚证、早期邪毒壅盛证,中期阳气虚证,中晚期气阴阳虚证等4种证候荷瘤小鼠,及正常对照小鼠等以上8个组织(正常对照缺肿瘤)计39张RNA电泳图谱和芯片检测结果。发现,肿瘤发生后,下丘脑基因表达异常活跃;相反,垂体与肾上腺基因表达显著抑制,以邪毒壅盛证最典型,以后垂体与肾上腺抑制逐渐解除,但到中晚期气阴阳虚证的肾上腺有失代偿倾向;不同的是,甲状腺基因转录十分活跃,而皋丸却减弱。肿瘤发生后,胸腺、脾脏基因表达活跃,但胸腺到中晚期气阴阳虚证出现了失代偿。结论:以上不同组织基因表达的改变,构成了荷瘤小鼠早期气虚与邪毒壅盛证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证特征性表现,这对深入认识肿瘤常见证候神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征和演变,指导临床辨证论治具有重要的意义。

摘要： 目的:揭示4种常见证候荷瘤小鼠神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征。方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip (Agilent)、 及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array (Affymetrix)等先进技术,观察H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺、甲状腺、睾丸、胸腺、脾脏、肿瘤基因表达的特征。结果:共获得早期气虚证、早期邪毒壅盛证,中期阳气虚证,中晚期气阴阳虚证等4种证候荷瘤小鼠,及正常对照小鼠等以上8个组织(正常对照缺肿瘤)计39张RNA电泳图谱和芯片检测结果。发现,肿瘤发生后,下丘脑基因表达异常活跃;相反,垂体与肾上腺基因表达显著抑制,以邪毒壅盛证最典型,以后垂体与肾上腺抑制逐渐解除,但到中晚期气阴阳虚证的肾上腺有失代偿倾向;不同的是,甲状腺基因转录十分活跃,而皋丸却减弱。肿瘤发生后,胸腺、脾脏基因表达活跃,但胸腺到中晚期气阴阳虚证出现了失代偿。结论:以上不同组织基因表达的改变,构成了荷瘤小鼠早期气虚与邪毒壅盛证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证特征性表现,这对深入认识肿瘤常见证候神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征和演变,指导临床辨证论治具有重要的意义。

摘要： 目的:揭示4种常见证候荷瘤小鼠神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征。方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip (Agilent)、 及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array (Affymetrix)等先进技术,观察H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺、甲状腺、睾丸、胸腺、脾脏、肿瘤基因表达的特征。结果:共获得早期气虚证、早期邪毒壅盛证,中期阳气虚证,中晚期气阴阳虚证等4种证候荷瘤小鼠,及正常对照小鼠等以上8个组织(正常对照缺肿瘤)计39张RNA电泳图谱和芯片检测结果。发现,肿瘤发生后,下丘脑基因表达异常活跃;相反,垂体与肾上腺基因表达显著抑制,以邪毒壅盛证最典型,以后垂体与肾上腺抑制逐渐解除,但到中晚期气阴阳虚证的肾上腺有失代偿倾向;不同的是,甲状腺基因转录十分活跃,而皋丸却减弱。肿瘤发生后,胸腺、脾脏基因表达活跃,但胸腺到中晚期气阴阳虚证出现了失代偿。结论:以上不同组织基因表达的改变,构成了荷瘤小鼠早期气虚与邪毒壅盛证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证特征性表现,这对深入认识肿瘤常见证候神经-内分泌-免疫网络基因表达的特征和演变,指导临床辨证论治具有重要的意义。

摘要： 目的：观察不同证候荷瘤小鼠的情志与神经内分泌基因表达的特征。方法：采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip(Agi lent)、及Genechip Mouse Exon 1.0 sT Array(Affymetrix)等先进技术，观察邪毒壅盛证、气虚证、阳气虚证、气阴阳虚证等H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺基因表达与剪接。结果：抓力/旷场检测表明荷瘤小鼠存在焦虑、恐惧、愤怒等情志，其中邪毒壅盛小鼠尤为严重；荷瘤小鼠下丘脑基因表达较正常小鼠有显著改变，并导致垂体、肾上腺的抑制，其中邪毒壅盛较同期气虚小鼠程度严重；不同证候荷瘤小鼠下丘脑、垂体等组织POMC、CRHBP、CRHR、GnRH、GnRHR等基因不同程度地发生了外显子剪接方式的改变，其中以邪毒壅盛证尤甚。结论：荷瘤小鼠存在情志的改变，存在下丘脑一垂体一肾上腺等神经内分泌组织基因表达与剪接的显著差异与特征，其中以邪毒壅盛证最为严重，这可能是导致该证候小鼠预后差的重要因素；不同证候荷瘤小鼠下丘脑等组织发生大量的基因表达和外显子剪接的差异，推测部分与情志、不同证候有关，值得深入研究．

摘要： 目的：观察不同证候荷瘤小鼠的情志与神经内分泌基因表达的特征。方法：采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip(Agi lent)、及Genechip Mouse Exon 1.0 sT Array(Affymetrix)等先进技术，观察邪毒壅盛证、气虚证、阳气虚证、气阴阳虚证等H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺基因表达与剪接。结果：抓力/旷场检测表明荷瘤小鼠存在焦虑、恐惧、愤怒等情志，其中邪毒壅盛小鼠尤为严重；荷瘤小鼠下丘脑基因表达较正常小鼠有显著改变，并导致垂体、肾上腺的抑制，其中邪毒壅盛较同期气虚小鼠程度严重；不同证候荷瘤小鼠下丘脑、垂体等组织POMC、CRHBP、CRHR、GnRH、GnRHR等基因不同程度地发生了外显子剪接方式的改变，其中以邪毒壅盛证尤甚。结论：荷瘤小鼠存在情志的改变，存在下丘脑一垂体一肾上腺等神经内分泌组织基因表达与剪接的显著差异与特征，其中以邪毒壅盛证最为严重，这可能是导致该证候小鼠预后差的重要因素；不同证候荷瘤小鼠下丘脑等组织发生大量的基因表达和外显子剪接的差异，推测部分与情志、不同证候有关，值得深入研究．

摘要： 目的：观察不同证候荷瘤小鼠的情志与神经内分泌基因表达的特征。方法：采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip(Agi lent)、及Genechip Mouse Exon 1.0 sT Array(Affymetrix)等先进技术，观察邪毒壅盛证、气虚证、阳气虚证、气阴阳虚证等H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺基因表达与剪接。结果：抓力/旷场检测表明荷瘤小鼠存在焦虑、恐惧、愤怒等情志，其中邪毒壅盛小鼠尤为严重；荷瘤小鼠下丘脑基因表达较正常小鼠有显著改变，并导致垂体、肾上腺的抑制，其中邪毒壅盛较同期气虚小鼠程度严重；不同证候荷瘤小鼠下丘脑、垂体等组织POMC、CRHBP、CRHR、GnRH、GnRHR等基因不同程度地发生了外显子剪接方式的改变，其中以邪毒壅盛证尤甚。结论：荷瘤小鼠存在情志的改变，存在下丘脑一垂体一肾上腺等神经内分泌组织基因表达与剪接的显著差异与特征，其中以邪毒壅盛证最为严重，这可能是导致该证候小鼠预后差的重要因素；不同证候荷瘤小鼠下丘脑等组织发生大量的基因表达和外显子剪接的差异，推测部分与情志、不同证候有关，值得深入研究．

摘要： 目的：观察不同证候荷瘤小鼠的情志与神经内分泌基因表达的特征。方法：采用小鼠计量化四诊和辨证方法、RNA Nano LabChip(Agi lent)、及Genechip Mouse Exon 1.0 sT Array(Affymetrix)等先进技术，观察邪毒壅盛证、气虚证、阳气虚证、气阴阳虚证等H22荷瘤小鼠下丘脑、垂体、肾上腺基因表达与剪接。结果：抓力/旷场检测表明荷瘤小鼠存在焦虑、恐惧、愤怒等情志，其中邪毒壅盛小鼠尤为严重；荷瘤小鼠下丘脑基因表达较正常小鼠有显著改变，并导致垂体、肾上腺的抑制，其中邪毒壅盛较同期气虚小鼠程度严重；不同证候荷瘤小鼠下丘脑、垂体等组织POMC、CRHBP、CRHR、GnRH、GnRHR等基因不同程度地发生了外显子剪接方式的改变，其中以邪毒壅盛证尤甚。结论：荷瘤小鼠存在情志的改变，存在下丘脑一垂体一肾上腺等神经内分泌组织基因表达与剪接的显著差异与特征，其中以邪毒壅盛证最为严重，这可能是导致该证候小鼠预后差的重要因素；不同证候荷瘤小鼠下丘脑等组织发生大量的基因表达和外显子剪接的差异，推测部分与情志、不同证候有关，值得深入研究．

摘要： 提供了用于产生包含在细胞中彼此相互作用的RNA的嵌合RNA的方法和组合物。在一些实施方案中，嵌合RNA可用于鉴定细胞中至少100个、至少500个、至少1000个或多于1000个RNA‑RNA相互作用。

摘要： 本发明涉及新型的亚磷酰胺，制备了HPLC纯度大于98％以及

摘要： 本发明提供一种RNA病毒感染抑制剂，其能够有效地抑制RNA病毒对人的感染，防止出现症状，或即使表现出症状也能够减轻症状，而且不易发生难以预料的变色以及在日常使用条件下的变色。本发明的RNA病毒感染抑制剂含有在线性高分子的侧链上具有通式(1)～(3)所示结构式(各通式中所示R

摘要： 本发明涉及一种以基本依赖或不依赖方式，RNA扩增和/或RNA标记用的RNA依赖的RNA聚合酶，方法及试剂盒，特别是，应用于生物技术和医药领域的病毒RNA、真核RNA、原核RNA和双链核糖核酸(RNA)。所述的RNA依赖的RNA聚合酶具有右手螺旋构象，并由以下序列部分的氨基酸序列组成：a.XXDYS、b.GXPSG、c.YGDD、d.XXYGL、e.XXXXFLXRXX，含义如下：D：天冬氨酸、Y：酪氨酸、S：丝氨酸、G：甘氨酸、P：脯氨酸、L：亮氨酸、F：苯丙氨酸、R：精氨酸、X：任一氨基酸。本发明所涉及的扩增方法尤其适用于微阵列技术、siRNA的制备和通过检测病人样品中的病毒RNA的病毒性感染的诊断。本发明所涉及的标记方法尤其适用于通过亲和连接进行RNA的纯化，及适用于病毒RNA、真核RNA、原核RNA和双链核糖核酸(RNA)的功能和/或结构特征的分子生物学研究中。

摘要： 本发明提供一种在RNA建库过程中封闭核糖体RNA或球蛋白RNA的探针，探针长度为35‑60 nt，探针与核糖体RNA或球蛋白RNA通过互补配对形成三元封闭复合物。探针的后半区域与靶RNA严格互补配对，探针配对区域的5’端5‑9个碱基被修饰碱基代替；探针的前半区域是嘧啶碱基，用于嵌合到DNA/RNA双链的大沟中形成三元复合物。探针的3’‑OH利用MGB进行封闭，用于防止探针作为引物进行延伸；同时MGB可嵌合到DNA/RNA双链的小沟，提高三元复合物的稳定性。并公开了其在RNA建库中快速去除核糖体RNA或球蛋白RNA的应用。本发明具有操作简单、耗时极短、特异性强、适用性广、去除效率高和基因检出数高等优点，适合用于工业自动化建库和疾病快速诊断领域。

摘要： 本发明涉及缺少帽分子的信使核糖核酸(mRNA)分子，因其在体外转录合成的成本大大降低，其从5'至3'端包含：至少一个拷贝的对Xrn1外切核酸酶具有抗性的GUCAGRYC(N7‑19)GCCA(N2‑19)UGCNRYCUG共有序列、一个拷贝的内部核糖体进入位点(IRES)RNA序列、以及开放阅读相(une phase)。

摘要： 本发明属于肿瘤干细胞研究技术领域，具体涉及一种非编码RNA和编码RNA、包含非编码RNA的RNA序列及其应用。该非编码RNA的序列如Sequence NO.1所示，该非编码RNA与与所述PLA2G16基因的mRNA的3'‑UTR‑1区结合增强PLA2G16基因的表达，从而促进细胞的干性特征，在肿瘤干细胞中，可以通过敲除所述非编码RNA抑制PLA2G16基因的表达，从而抑制肿瘤干细胞的发生/发展。本发明通过有效敲除所述非编码RNA抑制PLA2G16基因的表达可以有效的抑制乳腺癌干细胞/肿瘤的发生/发展。

摘要： 本发明公开了一种RNA提取溶液和RNA提取溶液制备方法及RNA试剂提取方法，包括包含以下各组分的质量分数或摩尔浓度：相对于溶液的总量30‑50％体积的酚；相对于溶液的总量3‑10％体积的多元醇；相对于溶液的总量0.5‑2M浓度的胍盐；相对于溶液总量0.1‑1％体积的十二烷基肌氨酸钠；相对于溶液的总量0.05‑0.2M浓度的醋酸；相对于溶液的总量0.05‑0.2M的醋酸钠，所述剩余组分为超纯水，本发明中通过醋酸和醋酸钠的比例来实现控制缓冲液的pH值环境，既可以实现DNA和RNA彻底的分离，又可以避免RNA在过酸性条件下发生解体，且还结合了硅胶膜吸附柱的便捷性，简化了RNA提取后续的操作步骤，相比于之前长达一个小时以上，可以缩短至10分钟左右即可完成RNA的提取。

摘要： 本发明的目的是一种具有氨基酸序列的Mini‑III RNA酶，所述氨基酸序列包含受体部分以及在Mini‑III RNA酶结构中分别形成α4螺旋和α5b‑α6环的结构的可移植的α4螺旋和可移植的α5b‑α6环，其中分别形成α4螺旋和α5b‑α6环的结构的片段在结构上对应于分别由SEQ ID NO：1所示的来自枯草芽孢杆菌(

摘要： 提供了用于产生包含在细胞中彼此相互作用的RNA的嵌合RNA的方法和组合物。在一些实施方案中，嵌合RNA可用于鉴定细胞中至少100个、至少500个、至少1000个或多于1000个RNA‑RNA相互作用。