血管内皮祖细胞

摘要： 目的探讨血清微量元素及血管内皮祖细胞(EPCs)与妊娠期高血压疾病的关系。方法选取2018年1月—2020年12月河北省人民医院产科收治的176例妊娠期高血压疾病孕妇作为妊娠期高血压疾病组,选取同期120例健康孕晚期孕妇作为健康孕晚期组,妊娠期高血压疾病组又根据病情的严重程度分为妊娠期高血压组48例、子痫前期轻度组72例、子痫前期重度组56例。比较各组血清锌、铜、锰、铁水平以及外周血EPCs所占比例,采用Spearman等级相关分析各微量元素水平以及外周血EPCs所占比例与妊娠期高血压疾病病情严重程度的相关性,采用Pearson直线相关分析各微量元素水平与外周血EPCs所占比例的相关性。结果妊娠期高血压疾病组血清锌、铜、锰水平均明显低于健康孕晚期组(P均<0.05),血清铁水平明显高于健康孕晚期组(P均<0.05);妊娠期高血压组、子痫前期轻度组和子痫前期重度组血清锌、铜、锰、铁水平比较差异均有统计学意义(P均<0.05),且子痫前期重度组血清锌、铜、锰水平均明显低于妊娠期高血压组(P均<0.05),血清铁水平明显高于妊娠期高血压组(P<0.05)。妊娠期高血压疾病组外周血EPCs所占比例明显低于健康孕晚期组(P<0.05),妊娠期高血压组、子痫前期轻度组和子痫前期重度组外周血EPCs所占比例依次降低,3组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。相关性分析显示,血清锌、铜、锰水平及外周血EPCs所占比例与妊娠期高血压疾病病情严重程度均呈负相关(r=-0.535,-0.502,-0.614,-0.644,P均<0.05),血清铁水平与妊娠期高血压疾病病情严重程度呈正相关(r=0.521,P<0.05),血清锌、铜、锰水平与外周血EPCs所占比例呈正相关(r=0.567,0.552,0.623,P均<0.05)。结论微量元素锌、铜、锰、铁水平及外周血EPCs所占比例与妊娠期高血压疾病的发生有关,且可评价疾病严重程度。

摘要： 目的:观察血管内皮祖细胞(EPC)在正畸实验大鼠牙周组织改建区的分布,探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)对其趋化的影响。方法:建立实验性大鼠牙移动模型,分离、培养并鉴定大鼠外周血EPC。在体外实验中以VEGF干预EPC,观察其增殖、迁移能力。将BrdU标记的EPC通过尾静脉注入模型大鼠体内,观察EPC在牙周组织中的分布情况及VEGF的表达。结果:分离培养的大鼠EPC,在牙周移动大鼠外周血富集,完成细胞表型鉴定。VEGF可促进EPC体外增殖能力(P<0.05),对EPC的趋化、迁移有促进作用。经BrdU标记的EPC注入模型大鼠体内后,牙周组织BrdU EPC阳性数目增加;VEGF在实验组(尾静脉注射EPC细胞)的张力侧的表达高于对照组(注射生理盐水)。结论:正畸牙移动时外周血EPC可趋化聚集于牙周组织,并在VEGF的调控下参与牙周组织改建。

摘要： 目的 初步探讨E-钙黏蛋白(E-cad)在内皮祖细胞(EPCs)和间充质干细胞(MSCs)之间的黏附作用.方法 体外C57BL/6J小鼠骨髓腔分离培养EPCs和MSCs,使用Mito Tracker Red标记EPCs,DAPI标记MSCs;采用免疫荧光的方法观察E-cad在细胞内的表达情况;细胞黏附实验观察EPCs与MSCs体外黏附现象;使用E-cad siRNA干扰EPCs和MSCs中E-cad的表达,RT-qPCR和Western blot检测siRNA转染效率;转染成功后在成血管的凝胶上进一步观察二者黏附现象.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较使用LSD-t检验.结果 (1)与MSCs、EPCs比较,体外共培养MSCs和EPCs上清液中E-cad表达(378.26±34.47、564.72±41.58比1087.28±101.92)升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);(2)与Control-siRNA、Mock、Negative相比,E-cad siRNA转染MSCs 48 h后E-cad mRNA表达(0.97±0.07、0.93±0.06、1.00±0.03比0.30±0.05)、E-cad蛋白表达(252.19±11.62、223.70±13.66、257.50±12.08比31.74±4.08)均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与Control-siRNA、Mock、Negative比较,E-cad siRNA转染EPCs 48 h后E-cad mRNA表达(0.93±0.07、0.88±0.08、1.00±0.02比0.36±0.07)、E-cad蛋白表达(429.46±31.87、409.13±26.97、436.80±34.69比54.03±15.05)均降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)E-cad siRNA成功转染MSCs和EPCs后,二者黏附现象受到抑制;(4)沉默EPCs和MSCs的E-cad后,二者在成血管凝胶上的黏附及成管现象均受到抑制.结论 E-cad介导EPCs和MSCs之间的黏附.

摘要： 目的:分析注射用丹参多酚酸盐辅助治疗高血压患者的临床疗效,并探究其可能的机制.方法:选取2017年1月至2018年5月昆明医科大学附属延安医院老年病科收治的高血压患者86例作为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组43例.2组患者均予以高血压常规治疗,观察组在此基础上辅以注射用丹参多酚酸盐,比较2组血压控制效果、治疗前后血压变化水平、肱动脉内径、实验室检查结果和安全性的差异.结果:观察组血压控制有效率高于对照组(98.67％比81.40％),差异有统计学意义(P0.05).2组治疗后内皮祖细胞(EPCs)数量、增殖细胞、迁移细胞、血管内皮生长因子(VEGF)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及一氧化氮(NO)均较治疗前均明显提升,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P0.05).结论:高血压患者常规治疗辅以注射用丹参多酚酸盐疗效确切,可改善血管内皮功能,且无明显的不良反应.

摘要： 目的 探讨兔外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells derived from peripheral blood,EPCs)外泌体(Exosomes)调控骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,MSCs)差异基因表达情况.方法 将EPC-Exos和MSCs共培养作为实验组,单独MSCs作为对照组,各培养14d后进行基因芯片送检,筛选出分子网络模块和关键基因.结果 从高通量芯片数据中共筛选到差异基因表达共1772个,其中表达上调基因664个,下调基因1108个.基因表达差异主要与染色体、着丝粒等细胞器定位、细胞增殖、细胞周期等密切相关;EPC-exos调控MSCs显著富集的通路中P53通路、MARK通路及酮体合成和降解途径差异明显.结论 利用基因芯片方法筛选的相关基因可能在EPC-Exos调控MSCs生物学功能中发挥重要作用,并可作为外泌体修复糖尿病创面的的理论依据.

摘要： 目的探讨兔外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells derived from peripheral blood,EPCs)外泌体(Exosomes)调控骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,MSCs)差异基因表达情况。方法将EPC-Exos和MSCs共培养作为实验组,单独MSCs作为对照组,各培养14d后进行基因芯片送检,筛选出分子网络模块和关键基因。结果从高通量芯片数据中共筛选到差异基因表达共1772个,其中表达上调基因664个,下调基因1108个。基因表达差异主要与染色体、着丝粒等细胞器定位、细胞增殖、细胞周期等密切相关;EPC-exos调控MSCs显著富集的通路中P53通路、MARK通路及酮体合成和降解途径差异明显。结论利用基因芯片方法筛选的相关基因可能在EPC-Exos调控MSCs生物学功能中发挥重要作用,并可作为外泌体修复糖尿病创面的的理论依据。

摘要： 血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)既往被认为在出生后血管新生中发挥主要作用.1997年Asahara等从外周血分离出表达CD34抗原的单个核细胞,即血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs).EPCs是一类具有促血管生成能力的干细胞总称,尚未发现特异性免疫表型,故主要根据具有形成血管的功能鉴定.目前一般认为,EPCs来源于骨髓和外周血管壁,其中能分化为ECs者被称为内皮集落形成细胞(endothelial colony forming cells,ECFCs).当组织缺血或损伤时,来自骨髓的EPCs被组织释放的损伤信号动员后进行迁移和归巢.活化的EPCs通过旁分泌作用招募更多的局部ECFCs和ECs来形成微血管,进而促进组织修复.因此,对EPCs的深入研究有助于临床上治疗性血管新生相关研究的进行和方法的发展.

摘要： 目的:探讨三维联合培养牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs)和血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)对成牙本质向/成骨向分化的影响.方法:取单独培养DPCs及联合培养的DPCs和EPCs进行三维培养后成牙本质向/成骨向诱导,使用茜素红染色及半定量分析、RT-PCR和细胞免疫荧光检测成牙本质向/成骨向分化能力.采用SPSS 23.0统计软件对数据进行统计学分析.结果:茜素红染色显示联合培养组和单独培养组之间未见显著差异.RT-PCR和细胞免疫荧光显示成牙本质向/成骨向相关基因mRNAs和蛋白表达水平联合培养组显著高于单独培养组.结论:三维联合培养的DPCs和EPCs促进成牙本质向/成骨向分化,为牙髓再生提供可能实验依据.

摘要： 归纳总结当归补血汤促进血管新生作用的研究进展。当归补血汤可以通过多种途径影响与血管新生相关的基因表达;当归补血汤可提高缺血组织血清和组织液中的低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的浓度,进一步调节内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的功能,达到促进血管新生的效果。

摘要： 目的 探讨采用密度梯度离心法和差速贴壁法分离兔骨髓源性血管内皮祖细胞,并对分离细胞进行培养及鉴定.方法 通过细胞形态观察、免疫荧光染色、管腔形成实验以及低密度脂蛋白吞噬和植物凝集素贴附实验进行鉴定.结果 分离培养的细胞呈多角形生长,细胞能够形成放射样克隆集落,细胞表达血管假性血友病因子(vWF),在基质胶呈管腔样生长,吞噬低密度脂蛋白并能够黏附植物凝集素.结论 采用密度梯度离心法和差速贴壁法分离兔骨髓源性干细胞,在一定条件下能分化成为血管内皮祖细胞.

摘要： 糖尿病是由多种病因引起的以高血糖为特征的代谢异常综合征。随着病程延长，其代谢紊乱可导致大血管、微血管的慢性进行性病变，是糖尿病患者致死、致残的主要原因。血管内皮功能障碍是糖尿病血管病变的始发因素，骨髓、外周血和脐血中存在一种细胞，被称为血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，它能进一步分化为内皮细胞而参与受损血管内皮的修复与血管新生，在修复心梗患者心脏血管的病变，改善冠心病、肢体缺血、脑中风、糖尿病患者血管损伤等方面有独特的功能。近年来的研究表明，许多因素参与了糖尿病EPCs功能失调，包括高血糖、eN0S/N0、氧化应激、IR、p53信号途径和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)作用及一些细胞因子等，从而导致了糖尿病血管病变的发生。本文就糖尿病患者EPCs生物学特性、数量和功能的改变及其影响因素、发生机制进行综述，并就参与糖尿病EPCs功能失调的因素进行详细的阐述。

摘要： 下肢缺血性疾病是指因动脉狭窄或闭塞而引起的一系列疾病，其最典型的症状为间歇性跛行，严重者会出现缺血性静息痛、肢端缺血性溃疡和坏疽，甚至导致截肢，严重影响患者生活质量。现代研究表明。血管内皮祖细胞(endothelial progenitorcell，EPC)可以通过释放血管生长因子(vascular endothelialgrowth factor， VEGF)等细胞因子，促进缺血组织的血管新生和侧枝血管形成，进而促进缺血组织的修复，这为缺血性疾病的深入研究提供了新的思路。在长期的临床实践中发现，中医疏肝活血法对治疗下肢缺血性疾病有着良好的疗效，但其治疗机理目前尚不明确。本研究通过建立大鼠下肢缺血模型，采用中药干预，观察其外周血EPC的变化，并尝试从血管新生的角度探讨中医疏肝活血法对促进缺血肢体修复的可能作用机制。

摘要： 血管内皮祖细胞（EPCs）是一种能直接分化为血管内皮的前体细胞。大量研究证实EPCs可定向迁移到受损组织，参与血管新生和内皮损伤修复。EPCs移植可能为缺血性脑血管病的治疗提供全新策略。本文对EPCs的来源、特性、作用、表面标志、影响因素，及其在缺血性脑血管病中应用进行综述。

摘要： 血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)是血管内皮细胞的前体细胞,不仅参与人胚胎血管生成,也参与出生后的血管新生过程及机体、器官损伤后的血管再生与修复,又称血管母细胞(an-gioblast)。1997年,Asaharal等首次证明循环外周血中存在能分化为血管内皮细胞的前体细胞,并将其命名为血管内皮祖细胞。近年来的研究显示,内皮祖细胞在心脑血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用。本文介绍了内皮祖细胞生物学的相关内容，分析了内皮祖细胞的分离培养与体外扩增，并对内皮祖细胞的临床与实验研究进行简述。

摘要： 下肢缺血性疾病是指因动脉狭窄或闭塞而引起的一系列疾病，其最典型的症状为间歇性跛行，严重者会出现缺血性静息痛、肢端缺血性溃疡和坏疽，甚至导致截肢，严重影响患者生活质量。

摘要： 血管内皮祖细胞(EPCs)是血管内皮细胞的前体细胞，EPC不仅参与胚胎期的血管生成，也存在于成体骨髓、外周血及脐血中，参与出生后血管形成。大量研究显示EPC在肿瘤血管新生中也起重要作用，这一发现可能为抗肿瘤治疗提供一个新的靶点。本文从骨髓提取单个核细胞(MNCs)，诱导其定向分化为EPCs，氧化铁纳米颗粒标记、7.0T MR扫描标记细胞，研究MR对Resovist标记细胞的标记效率及活体示踪的可行性，以期为小鼠EPCs移植治疗肿瘤的进一步研究打下基础。

摘要： @@下肢缺血性疾病是指因动脉狭窄或闭塞而引起的一系列疾病，其最典型的症状为间歇性跛行。严重者会出现缺血性静息痛、肢端缺血性溃疡和坏疽，甚至导致截肢，严重影响患者生活质量。

摘要： 本文设想构建携带VEGF165基因的复制缺陷型腺病毒Ad-VEGFl65，同时诱导培养大鼠骨髓内皮祖细胞，用PAd-VEGF165在体外转染骨髓内皮祖细胞，然后将转染Ad-VEGF165的内皮祖细胞移到慢性深静脉血栓内，通过EPCs(内皮祖细胞)的治疗性血管生成作用，协同VEGF(血管内皮生长因子)基因治疗所发挥的治疗性血管形成作用，共同促使血栓内血管新生，加速血栓的机化和再通，有效缓解静脉血栓形成后下肢静脉高压症状或者为后续介入治疗构建平台，从而为亚急性、慢性深静脉血栓的治疗开辟新的思路。

摘要： 目的：观察人外周血EPCs培养生长的特征，探讨改进人外周血EPCs分离和体外培养的技术，探索人外周血EPCs体外诱导培养和扩增的方法，为人外周血EPCs的研究奠定基础。同时，研究通心络对体外培养的人外周EPCs黏附、增殖功能的影响，为临床冠心病的治疗中通心络的合理应用提供参考。方法：无菌条件下采集冠心病患者外周血10ml，分离培养出EPCs，研究通心络对内皮祖细胞黏附增殖功能的影响，应用SPSS软件进行统计分析。结果：在合适的条件下，可以良好的分离培养出EPCs;通心络在100μg/ml浓度时EPCs黏附、增殖能力开始较对照组明显增强(P<0.05)，于500gμg/ml时达最大效应(P<0.05)。500μg/ml作用24h后，EPCs黏附、增殖能力开始明显增强(P<0.05)，48h达到高峰(P<0.05)。结论：通心络能显著改善外周血内皮祖细胞黏附、增殖能力，呈一定的量效和时效关系，这可能是通心络防治心脑血管疾病的新机制。

摘要： 本发明提供了CD34阴性祖细胞，用于保护处在血管炎症疾病风险或患有血管炎症疾病的受试者的血管内皮细胞避免免疫介导的细胞毒性反应。也提供了人CD34阴性祖细胞的制造方法，和测定CD34阴性祖细胞保护血管内皮细胞避免免疫介导的细胞毒性反应的能力的方法。

摘要： 本发明公开了一种血管内皮细胞祖细胞的培养方法，包括：1)将多能干细胞于培养基A中诱导分化形成中内胚层前体细胞；2)将中内胚层前体细胞于培养基B中诱导分化形成血管内皮细胞祖细胞；培养基A含DMEM培养基、F12培养基、硒酸钠、碳酸氢钠、维生素C、胰岛素、激活素A、骨形成蛋白4、糖原合成酶激酶‑3抑制剂；培养基B含DMEM培养基、F12培养基、维生素C、胰岛素、血管内皮生长因子和转化生长因子β信号通路抑制剂。该培养方法中使用的未含有动物源成分，能够为培养细胞提供足够的营养物质和稳定的生存环境，从而能够高效地将人类多能干细胞诱导分化形成具有高度类似于人类脐带血管内皮细胞的血管状网格的血管内皮细胞祖细胞。

摘要： 本发明提供了CD34阴性祖细胞，用于保护处在血管炎症疾病风险或患有血管炎症疾病的受试者的血管内皮细胞避免免疫介导的细胞毒性反应。也提供了人CD34阴性祖细胞的制造方法，和测定CD34阴性祖细胞保护血管内皮细胞避免免疫介导的细胞毒性反应的能力的方法。

摘要： 本发明公开了一种血管内皮细胞祖细胞的培养方法，包括：1)将多能干细胞于培养基A中诱导分化形成中内胚层前体细胞；2)将中内胚层前体细胞于培养基B中诱导分化形成血管内皮细胞祖细胞；培养基A含DMEM培养基、F12培养基、硒酸钠、碳酸氢钠、维生素C、胰岛素、激活素A、骨形成蛋白4、糖原合成酶激酶-3抑制剂；培养基B含DMEM培养基、F12培养基、维生素C、胰岛素、血管内皮生长因子和转化生长因子β信号通路抑制剂。该培养方法中使用的未含有动物源成分，能够为培养细胞提供足够的营养物质和稳定的生存环境，从而能够高效地将人类多能干细胞诱导分化形成具有高度类似于人类脐带血管内皮细胞的血管状网格的血管内皮细胞祖细胞。

摘要： 本发明涉及体外快速而稳定的调节细胞移植源性血管内皮祖细胞CD59的方法，特别涉及一种增强移植源性血管内皮祖细胞补体调节蛋白表达的方法及应用。采用力学‑化学双重技术方案，能够安全有效的提高在高血糖环境下内皮祖细胞补体调节蛋白CD59的表达，促进内皮祖细胞规避膜攻击复合物的损伤作用，提高体内内皮祖细胞的数量和质量。提供了一种细胞外基质的配比组份方案，该配伍的细胞外基质可激活内皮祖细胞对外界力学刺激易发生特有的细胞生物学响应。提供小分子化合物Jasplakinolide的应用技术方案，能够在高糖环境下，高效促进内皮祖细胞补体调节蛋白CD59的表达。

摘要： 本发明涉及一种非人灵长类动物血管内皮祖细胞的高效扩增培养体系。提供了一种新型的非人灵长类动物血管内皮祖细胞高效扩增培养方法，该方法可以高效地获得具有内皮活性功能的内皮祖细胞/内皮细胞，从而满足在灵长类动物自体回输移植的临床前研究中所需要的细胞数量，为内皮祖细胞扩增培养技术应用于临床上治疗提供了有效途径。

摘要： 本发明提供了一种长期保存过表达VEGF的血管内皮祖细胞的保存液，包括以下组分：白蛋白、葡萄糖、乙二醇、二甲基亚砜、表皮生长因子、硫酸镁、L‑谷氨酰胺和倍他米松。本发明还提供了该保存液的使用方法，通过本发明提供的使用方法，应用该保存液来保存过表达VEGF的血管内皮祖细胞，能够长期保存过表达VEGF的血管内皮祖细胞，并使复苏后的细胞很好地维持增殖功能和血管内皮祖细胞的生物学特性。

摘要： 本发明提供血管内皮祖细胞的分离培养方法，包括分离和培养，分离步骤为：收集、稀释样品，叠加到Ficoll细胞分离液上；离心；加入阻断剂，混匀；加入磁珠耦联的CD133单克隆抗体,充分混匀，孵育；用PBS洗涤细胞，以去除未结合的抗体；用PBS缓冲液重悬细胞以备用；将分离柱置于磁场中，以分离缓冲液冲洗分离柱；将标记CD133单抗的细胞悬液缓慢贴壁加入分离柱，避免产生气泡，细胞悬液从分离柱下端自然流出；用分离缓冲液洗涤分离柱，洗掉不能结合到柱上的细胞；将分离柱移除磁场，加分离缓冲液加压洗脱吸附细胞，即得CD133阳性的血管内皮祖细胞。本发明分离培养得到的血管内皮祖细胞纯度高、活力强、增殖快。

摘要： 本发明涉及体外快速而稳定的调节细胞移植源性血管内皮祖细胞CD59的方法，特别涉及一种增强移植源性血管内皮祖细胞补体调节蛋白表达的方法及应用。采用力学‑化学双重技术方案，能够安全有效的提高在高血糖环境下内皮祖细胞补体调节蛋白CD59的表达，促进内皮祖细胞规避膜攻击复合物的损伤作用，提高体内内皮祖细胞的数量和质量。提供了一种细胞外基质的配比组份方案，该配伍的细胞外基质可激活内皮祖细胞对外界力学刺激易发生特有的细胞生物学响应。提供小分子化合物Jasplakinolide的应用技术方案，能够在高糖环境下，高效促进内皮祖细胞补体调节蛋白CD59的表达。

摘要： 本发明涉及细胞技术领域，尤其是涉及一种利用血管内皮祖细胞提升脂肪移植成功率的方法，所述的方法包括，血管内皮祖细胞的分离培养，移植用脂肪细胞的分离，联合自体血管内皮细胞的脂肪移植物的制备，该发明首创性地将血管内皮祖细胞应用于脂肪移植，通过重建移植脂肪组织的血管系统提升移植脂肪细胞存活，并在动物模型上得到了验证，证明了该发明的有效性，本发明提升了自体脂肪移植的成功率，且相比较利用血管基质（SVF）或自体脂肪干细胞等提升自体脂肪移植成功率的方法，不需要通过抽取大量脂肪来分离需要的血管基质（SVF）或自体脂肪干细胞以提升脂肪移植成功率，因而应用于自体脂肪移植临床上，更具有操作的可行性。