牙髓细胞

摘要： 背景:浓缩生长因子富含多种高浓度生长因子,可以诱导牙髓细胞增殖,促进局部牙本质的修复.目的:对比浓缩生长因子及生物陶瓷材料iRoot BP在体外对人牙髓细胞存活、增殖及矿化的作用,进而评估浓缩生长因子用作直接盖髓材料的可行性.方法:采集健康成年人外周血,离心提取浓缩生长因子.采用改良组织块酶消化法分离培养人牙髓细胞,分别采用浓缩生长因子膜片浸提液与iRoot BP材料浸提液处理细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖.将人牙髓细胞分别接种于浓缩生长因子膜片与iRoot BP材料表面,检测细胞的碱性磷酸酶活性、细胞周期分布、细胞凋亡与成牙相关基因表达.结果 与结论:①CCK-8检测显示,浓缩生长因子膜片浸提液组处理1,3,7 d的细胞增殖快于iRoot BP材料浸提液组(P0.05);③浓缩生长因子组处理1,3,7 d的S期细胞百分比均高于iRoot BP组(P<0.05),处理1,3,7 d的细胞凋亡率均低于iRoot BP组(P<0.05);④处理第7天的qRT-PCR检测显示,浓缩生长因子组Runx2、碱性磷酸酶、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA水平均高于iRoot BP组(P<0.05);⑤结果表明,浓缩生长因子可促进人牙髓细胞的存活、增殖及矿化,有望作为直接盖髓材料.

摘要： 目的:探讨AF4/FMR2家族成员4(AFF4)在年轻恒牙牙髓炎中的表达特征和对牙髓细胞(DPCs)成骨分化的影响。方法:荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法、免疫组织化学法检测AFF4的表达。培养DPCs,用AFF4过表达载体(pcDNA-AFF4组)和过表达载体对照(pcDNA-ctrl组)转染DPCs,CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞的凋亡,碱性磷酸酶(ALP)活性检测和茜素红S(ARS)染色分析细胞的成骨分化。qRT-PCR检测分化标志物骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、骨形成锌指转录因子(OSX)、肌节同源框基因2(MSX2)、远端同源框基因5(DLX5)和runt相关转录因子2(RUNX2)的表达。结果:年轻恒牙牙髓炎中AFF4表达下调(P<0.05)。与pcDNA-ctrl组比,pcDNA-AFF4组中细胞增殖率、ALP活性、矿化结构都增加,而凋亡率降低,且OCN、OPN、OSX、MSX2、DLX5、RUNX2的表达上调(均P<0.05)。结论:年轻恒牙牙髓炎中AFF4表达降低,过表达AFF4促进DPCs增殖和成骨分化,并抑制细胞凋亡。

摘要： 目的 探讨没食子水提取物对细菌在刮治牙本质小管渗透的影响,以及对牙根面刮治的保护作用。方法 选取中国人民解放军空军军医大学空军第九八六医院2020年6月至2021年6月收治患者拔除的正畸前磨牙55颗进行根管预备,分别暴露于链球菌、黏性放线菌或链球菌、牙龈卟啉单胞菌培养,检测细菌的侵袭性;将人牙髓细胞接种到牙髓腔中,暴露于菌群培养,采用实时逆转录聚合酶链式反应和免疫分析法检测白细胞介素8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的相对表达水平。结果 根面刮治可显著增加细菌的渗透性(P0.05)。结论 根面刮治去除牙骨质,会使细菌及其毒素从牙周袋渗透到牙本质小管系统,而没食子水提取物可降低细菌的渗透性,具有保护活髓牙牙髓细胞的潜力。

摘要： 目的:探讨人牙髓细胞(hDPCs)和人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)共培养系统对脂多糖(LPS)诱导的炎症微环境的调节作用.方法:用不同浓度LPS(1 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL、50 μg/mL)处理hDPCs和hUCMSCs,以获得诱导细胞炎症反应的适宜浓度.按1:1的比例建立hDPCs与hUCMSCs直接及间接共培养体系,MTT法检测细胞增殖,分别采用qRT-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测IL-6、IL-10和HGF mRNA相对表达量和蛋白分泌量.结果:10 μg/mL LPS可以诱导细胞炎症反应.与单培养hDPCs组相比,直接共培养系统可促进细胞增殖,提高IL-10和HGF mRNA表达量及蛋白分泌量,降低IL-6 mRNA表达量及蛋白分泌量(P＜0.05).在间接共培养系统中,IL-6、IL-10和HGF的蛋白分泌量也显示出相同的趋势.此外,与单培养组的hDPCs相比,来自共培养系统的hDPCs高表达IL-10和HGFmRNA,但低表达IL-6(P＜0.05).结论:与单培养hDPCs组相比,共培养系统在下调LPS诱导的牙髓细胞炎症方面表现出更强的能力.

摘要： 目的 探讨人根尖牙乳头干细胞(conditional medium of stem cells from apical papilla,SCAP-CM)条件培养基诱导牙髓细胞成牙分化的作用.方法 从人新鲜拔除的离体牙中,分离培养根尖牙乳头干细胞,收集其在常氧和低氧环境下培养的条件培养基[SCAP-CM(N)和SCAP-CM(H)].用浓缩后的SCAP-CM(N)、SCAP-CM(H)处理牙髓细胞,检测牙髓细胞的碱性磷酸酶活性,以qRT-PCR检测成牙相关基因Runx2、ALP、DSPP、OCN及DMP-1的表达,以WesternBlot检测牙本质涎蛋白的表达.结果 在加入成骨诱导培养基的前提下,7天后SCAP-CM(H)组的碱性磷酸酶活性明显提高,SCAP-CM(N)组其次,而空白对照组的碱性磷酸酶活性最低.在基因水平上,相比空白对照组,SCAP-CM(N)和SCAP-CM(H)组的成牙相关基因Runx2、ALP、DSPP在mRNA水平上的表达增加.在蛋白水平上,SCAP-CM (H)和SCAP-CM (N)组DSP表达较其他组有所增加.结论 SCAP-CM在体外具有一定的诱导成牙本质的能力,具有协同促进矿化的能力,在再生性牙髓治疗中具有潜在的应用价值.

摘要： 目的 探究转化生长因子β1(TGF-β1)调控胞外信号调节激酶/分裂原激活蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路对人牙髓细胞增殖和分化能力的影响.方法 采用蛋白质印迹法(Western blot)对各组牙髓组织中的TGF-β1表达进行检测,利用不同浓度TGF-β1对牙髓细胞进行7d的处理,Western blot检测ERK/MAPK信号通路中的关键蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和重组人ELK-1蛋白(ELK-1)水平.结果 U0126能够抑制牙髓细胞的增殖和碱性磷酸化酶的活性,TGF-β1能促进PPAR-,γ和ELK-1蛋白的表达,U0126能抑制TGF-β1对PPAR-γ和ELK-1蛋白表达的促进作用.结论 在人牙髓细胞的增殖和分化过程中,TGF-β1可能通过对ERK/MAPK信号通路的调控起到促进作用,其作用呈现出明显的时间依赖和浓度依赖效应.

摘要： 目的 探讨iRoot FS作为根尖诱导分化的潜在屏障材料对牙髓细胞迁移和成骨成牙作用的影响.方法 选取20周龄的雄性比格犬,拔取乳牙和恒牙,取冠根部牙髓经培养后按照1×105/mL的密度直接接种于iRoot FS材料表面.研究对象共分为3组:对照组(单独培养的乳牙牙髓)、恒牙牙髓+iRoot FS组(恒牙牙髓与iRoot材料共培养)、乳牙牙髓+iRoot FS组(乳牙牙髓与iRoot材料共培养).接种第1、4、7、11、14和21天后比较分析对照组、恒牙牙髓+iRoot FS和乳牙牙髓+iRoot FS细胞迁移和增殖能力;通过茜素红染色分析半定量水平;RT-PCR法分别测定成牙本质分化相关基因[牙本质涎磷蛋白(DSPP)和骨基质酸性蛋白(DMP1)]和成骨基因[碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、核心结合蛋白因子2(RUNX2)]mRNA表达水平,Western blotting法测定成骨基因蛋白表达水平.结果 与对照组相比,接种第4、7、11、14、21天,乳牙牙髓+iRoot FS组和恒牙牙髓+iRoot FS组牙髓细胞的迁移和增殖能力呈时间依赖性式升高,且乳牙牙髓+iRoot FS组迁移和增殖能力显著高于恒牙牙髓+iRoot FS组,差异有统计学意义(P0.05).与对照组相比,乳牙牙髓+iRoot FS组和恒牙牙髓+iRoot FS组的DSPP、DMP1、ALP、COL1、OCN、OPN、RUNX2mRNA和蛋白表达水平显著升高,且乳牙牙髓+iRoot FS组表达水平显著高于恒牙髓+iRoot FS组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 iRoot FS作为根尖诱导分化的潜在屏障材料能够显著促进牙髓细胞迁移,并诱导其成骨成牙,而且乳牙的诱导效果强于恒牙.

摘要： 目的:探讨miR-508-3p对缺氧牙髓细胞分化的影响及其机制.方法:用氯化钴(CoC12)诱导缺氧模型,记为实验组.用等量生理盐水处理的牙髓细胞为对照组.脂质体法将miR-NC、miR-508-3p、si-NC、si-AFF4、miR-508-3p+pcDNA、miR-508-3p+pcDNA-AFF4转染缺氧牙髓细胞.RT-qPCR法检测miR-508-3p、AFF4的表达及分化相关基因牙本质基质蛋白(DMPl)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)的表达.Westem blotting法检测细胞中AFF4、DMP1、DSPP、OCN、ALP、转化生长因子β1(TGFβ1)、Smad、骨形态发生蛋白(BMP)的表达.双荧光素酶报告实验检测miR-508-3p与AFF4的靶向关系.结果:与对照组相比,实验组牙髓细胞miR-508-3p表达显著升高,AFF4、DMP1、DSPP、OCN、ALP的表达均显著降低(均P＜0.01).过表达miR-508-3p可显著抑制DMP1、DSPP、OCN、ALP的表达,敲减AFF4具有相似的作用(均P＜0.01).双荧光素酶报告实验显示,miR-508-3p与AFF4存在互补的结合位点,且过表达AFF4逆转了过表达miR-508-3p对缺氧牙髓细胞的分化抑制作用(P＜0.01).上调miR-508-3p表达或下调AFF4表达能显著降低TGFβ1、Smad、BMP蛋白表达(P＜0.01).结论:miR-508-3p通过靶向AFF4抑制下游TGFβ1信号通路的活性发挥抑制缺氧牙髓细胞分化作用.

摘要： 目的:研究miR-140-5p对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导牙髓细胞炎症因子分泌的影响和机制.方法:分离培养人牙髓细胞,分为对照组、LPS组、miR-NC+LPS组、miR-140-5p+LPS组,Realtime PCR检测细胞中miR-140-5p表达水平,ELISA法检测细胞培养上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α含量,Western Blot检测细胞中p-IκBα、IκBα、NF-κBp65蛋白表达水平.用NF-κB信号通路激活剂处理LPS条件下转染miR-140-5p mimics的人牙髓细胞,ELISA法检测培养液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量,Western Blot检测细胞中p-IκBα、IκBα、NF-κBp65蛋白表达.结果:与对照组比较,LPS组细胞中miR-140-5p水平下降,细胞培养液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量升高,细胞中p-IκBα、NF-κBp65蛋白表达增多,IκBα蛋白表达没有变化.与miR-NC+LPS组比较,miR-140-5p+LPS组细胞中miR-140-5p水平升高,细胞培养液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量降低,细胞中p-IκBα、NF-κBp65蛋白表达减少,IκBα蛋白表达没有变化.与未经NF-κB信号通路激活剂处理的细胞比较,NF-κB信号通路激活剂可以促进上调miR-140-5p表达的LPS条件下牙髓细胞中p-IκBα、NF-κBp65蛋白表达和IL-6、IL-1β、TNF-α分泌.结论:miR-140-5p通过调控NF-κB信号通路降低LPS诱导的人牙髓细胞炎症因子的分泌.

摘要： 目的 探讨低能量He-Ne激光致人牙髓细胞损伤对转化生长因子β(TGF-β)和B-淋巴细胞白血病-2基因(Bcl-2)表达的影响.方法 4组牙髓细胞体外培养后,分别给予不同剂量的激光照射,A组为7.35 J/cm2,B组为14.70 J/cm2,C组为29.4 J/cm2,D组作为对照组,不行激光照射,照射时间均为15 min,共2次,每次间隔6h.在照射前(第0h)和照射后6、12h,分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测牙髓细胞相对活力,蛋白免疫印迹法测牙髓细胞TGF-β和Bcl-2的表达水平.结果 照射前,A、B、C组细胞相对活力均为100％;照射6、12h后,A、B组的相对活力均明显高于D组,而C组相对活力明显低于D组(P＜0.05).照射前,4组牙髓细胞中TGF-β和bcl-2的表达水平均无显著差异(P＞0.05);照射6、12h后,A、B组牙髓细胞中TGF-β和bcl-2的表达水平明显高于照射前,且高于D组,而C组牙髓细胞中TGF-β和bcl-2的表达水平明显低于照射前,且低于D组(P＜0.05).结论 适当剂量的低能量He-Ne激光照射,能够使牙髓细胞中TGF-β和Bcl-2的表达水平升高,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡.但如果照射剂量过大,则会使牙髓细胞中TGF-β和Bcl-2的表达水平降低.

摘要： 目的：探讨人牙髓细胞在体外传代过程中的生物学行为变化,为其在口腔材料生物相容性及牙髓损伤修复等研究中的应用提供依据.方法：选取第4、8、10和15代人牙髓细胞,从细胞形态及增殖能力、碱性磷酸酶活性、老化相关β-半乳糖苷酶的表达及p53基因的表达对牙髓细胞进行评价.结果：人牙髓细胞培养至第15代时,胞质增大、胞体扁平,增殖缓慢,第7天时A值仅为0.124±0.017,显著低于第4、8代(A值分别为0.391±0.030、0.317±0.049)(F=126.465,P =0.000);第15代细胞的碱性磷酸酶活性[(21.96±4.03) U/g蛋白]显著低于第4、8、10代细胞[分别为(85.67±4.64)、(84.22±2.99)、(29.64±3.53) U/g蛋白](P=0.000),并出现了大量β-半乳糖苷酶染色阳性细胞,p53基因表达显著上升,其相对表达量为(2.3±0.1),与第4代(设为1.0)比较差异有统计学意义(t=18.622,P=0.000).结论：人牙髓细胞在传代培养过程中细胞体积增大、代谢酶指标下降、细胞老化相关酶及p53基因表达升高.

摘要： 目的：探讨釉基质蛋白对人牙髓细胞(HDPC)成牙本质分化的影响,为牙本质的组织工程学研究提供有效的生物活性物质.方法：将HDPC接种于6孔板(2×105个/L)后分为5组,分别加入含1、10、100mg/L釉基质蛋白(EMP)、10-8mol/L地塞米松及100mg/L抗坏血酸(Dex-AA组)、单纯基础培养液(对照组).于培养1、5、10 d分别用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP活性,实时荧光定量反转录聚合酶链反应技术检测成牙本质相关基因牙本质基质蛋白1(DMP-1)及牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达,用茜素红染色检测并定量分析矿化情况.结果：各组ALP水平呈时间依赖性上调,培养1d后各组ALP活性与对照组相比差异均无统计学意义;5d后EMP 10、100mg/L组及Dex-AA组ALP活性显著增高,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);10d后10mg/L EMP组及Dex-AA组ALP活性增高更显著,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01).培养ld后各组DMP-1及DSPP mRNA水平均较对照组显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.01);培养10d后10mg/L EMP组DMP-1和DSPP表达水平均显著增高.培养10d后各组均有矿化,10mg/L EMP组钙离子浓度显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论：适当浓度的EMP对HDPC的成牙本质分化有一定的促进作用.

摘要： 目的：了解脉冲Ｎｄ：ＹＡＧ激光照射对牙髓细胞增殖的影响。方法：应用体外组织细胞培养技术，ＭＴＴ比色法测量不同能量参数的Ｎｄ：ＹＡＧ激光照射对细胞增殖的影响。结果：８０ｍＪ２０Ｈｚ的能量最有利于细胞生长，频率超过４０Ｈｚ，对细胞生长无促进作用。结论：合适的能量能够促进细胞生长，能量过大抑制细胞增长。

摘要： 研究人员应用ＡＣＡＳ－５７０型激光共聚焦扫描显微图象系统，动态观察激光照射体外培养的牙髓细胞内自由基含量的变化。结果：对照组细胞内自由基含量随时间延长逐渐增加；４０ｍＪ２０Ｈｚ、６０ｍＪ２０Ｈｚ、８０ｍＪ２０Ｈｚ的激光能量照射后，自由基水平立即下降，照射时间延长自由基无明显增加；激光能量增大至１００ｍＪ２０Ｈｚ时，照射后自由基含量立即下降，但随照射时间延长，自由基逐渐增加。结论：激光对牙髓细胞自由基含量的影响与能量设置有关。

摘要： 目的：观察无翅型MMTV整合位点家族成员10A(wingless-type MMTV integration site family,member 10A,Wnt1oA)及Wnt通路相关分子在人牙髓组织和牙髓细胞中的表达特征,为进一步研究Wnt10A在人牙髓细胞增殖分化中的作用提供分子生物学依据.方法：选取因正畸或治疗原因拔除的完整离体双尖牙和第三磨牙,免疫组化法观察Wnt1oA在牙髓组织中的定位表达,PCR法观察Wnt10A、Wnt通路下游分子及成牙本质细胞分化标志物(轴心抑制蛋白2、Dickkopf相关蛋白1、低密度脂蛋白受体相关蛋白4、淋巴增强因子1、骨钙蛋白、碱性磷酸酶、牙本质涎磷蛋白)在牙髓组织中的表达.采用酶组织块消化法体外培养人牙髓细胞并传代培养;PCR法分析第1～9代人牙髓细胞中Wnt10A、Wnt通路下游分子及成牙本质细胞分化标志物的表达水平.结果：免疫组化法和半定量PCR法结果显示Wnt10A和Wnt通路相关分子在牙髓组织中均有表达.体外培养的人牙髓细胞培养至第15天汇合并传代,传至第4代,细胞活跃增殖,细胞胞质清亮,伸展均一;至第9代,细胞增殖减缓,部分细胞死亡.Wnt10A和Wnt信号通路下游分子在整个牙髓细胞的体外传代培养中均有表达,牙本质涎磷蛋白在第4代牙髓细胞中表达水平最高(0.4178±0.0076),Wnt10A在第5、9代牙髓细胞中的表达水平[分别为(4.97 ±2.83)、(4.70±4.06)]均显著高于第2、4代[分别为(0.84±0.66)(0.70±0.45)](P＜0.05).结论：Wnt10A介导的Wnt信号通路在人牙髓组织和细胞中有表达激活,可能参与了成牙本质细胞的分化和牙本质的形成.

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了OPTN基因在鉴定牙髓干细胞中的应用和鉴定牙髓干细胞的方法与产品。发明人通过试验首次发现可以用于鉴定牙髓干细胞的生物标志物OPTN基因，通过该基因的差异表达，能够鉴定分离出高纯度的牙髓干细胞。

摘要： 一种牙髓干细胞复苏液及牙髓干细胞的复苏方法，通过在常规干细胞培养基中添加添加一定量的碱性成纤维细胞生长因子构建新的干细胞复苏液，并用这种复苏液应用于DPSCs的复苏过程，可以使DPSCs活力在短时间内快速恢复，并保持原有干细胞的干性和多向分化潜能，能够缩短干细胞复苏时间以及提高干细胞临床使用存活率，增殖速度超过常规培养基组，同时维持细胞干性和多向分化潜能，能够有效为临床干细胞治疗提供性能和状态较好的种子细胞，节省了大量的时间、人力以及物力成本。

摘要： 本发明的目的在于提供一种牙髓干细胞冻存保护液和牙髓干细胞冻存方法，属于干细胞冻存技术领域。本发明所提供的保护液包括如下组分：40%DMEM/F12，50%FBS，10%DMSO，2.5mg/ml‑10mg/ml海雹菜多糖。本发明的有益效果在于，使用本发明冻存保护液进行牙髓干细胞冻存时，不仅可以有效的维持牙髓干细胞的活性，而且可以使牙髓干细胞具有更好的干性和成骨能力。

摘要： 一种制备牙髓间充质干细胞及建立牙髓间充质干细胞库的方法及细胞复苏方法，它涉及一种制备干细胞库的方法及细胞复苏方法。本发明步骤如下：将牙齿的髓腔打开，经胰酶替代物半消化法对牙髓组织进行原代培养，经过传代培养即获得牙髓间充质干细胞，将制备的牙髓间充质干细胞进行生物特性检测，扩大培养，冻存，建立牙髓干细胞库。本发明采用了胰酶替代物半消化法对牙髓组织进行消化，这与传统的消化法不同，胰酶替代物价格便宜容易购买，半消化法有效防止了细胞的丢失，提高了细胞的冻存数量。本发明采用了牙齿作为制备间充质干细胞的组织材料来源，为储存牙间充质干细胞提供了机会。

摘要： 一种牙髓干细胞原代培养促贴壁基质及原代牙髓干细胞的培养方法，本发明提供了一种可促进细胞贴壁生长的材料，用其包被培养皿的培养方式，为牙髓干细胞原代制备建立成熟的体外培养体系并且为后续实验研究提供优质及丰富的细胞来源，本发明在牙髓干细胞原代培养时，使用多酚蛋白作为促贴壁试剂预包被培养皿，增加了组织块细胞爬出率及原代细胞的数量，缩短了原代制备时间，提升了原代培养的成功率。

摘要： 本发明的目的在于提供一种牙髓干细胞冻存保护液和牙髓干细胞冻存方法，属于干细胞冻存技术领域。本发明所提供的保护液包括如下组分：40% DMEM/F12，50% FBS，10% DMSO，2.5mg/ml‑10mg/ml海雹菜多糖。本发明的有益效果在于，使用本发明冻存保护液进行牙髓干细胞冻存时，不仅可以有效的维持牙髓干细胞的活性，而且可以使牙髓干细胞具有更好的干性和成骨能力。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了OPTN基因在鉴定牙髓干细胞中的应用和鉴定牙髓干细胞的方法与产品。发明人通过试验首次发现可以用于鉴定牙髓干细胞的生物标志物OPTN基因，通过该基因的差异表达，能够鉴定分离出高纯度的牙髓干细胞。

摘要： 一种原代牙髓干细胞的制备方法及构建牙髓干细胞库的方法，利用恒温摇床在特定温度和转速条件下，可以在几分钟时间内将牙髓组织消化好，提取到足够多的具有较好生物学活性的牙髓干细胞，既缩短了牙髓干细胞原代提取的时间，节约了时间成本，可以大规模生产，同时获得的足量牙髓干细胞，能够满足牙髓干细胞在干细胞库的构建以及后期干细胞临床治疗以及再生医学研究领域的使用需求，与常规条件下牙髓组织半消化30min或全消化1h左右对照组相比，DPSCs量无明显统计学差异，但细胞增殖活性明显高于对照组。因此，本方法在DPSCs库的构建过程中可以成批快速进行，缩短了DPSCs原代提取的时间，节约了时间成本，适合于大规模生产。

摘要： 一种牙髓干细胞复苏液及牙髓干细胞的复苏方法，通过在常规干细胞培养基中添加添加一定量的碱性成纤维细胞生长因子构建新的干细胞复苏液，并用这种复苏液应用于DPSCs的复苏过程，可以使DPSCs活力在短时间内快速恢复，并保持原有干细胞的干性和多向分化潜能，能够缩短干细胞复苏时间以及提高干细胞临床使用存活率，增殖速度超过常规培养基组，同时维持细胞干性和多向分化潜能，能够有效为临床干细胞治疗提供性能和状态较好的种子细胞，节省了大量的时间、人力以及物力成本。

摘要： [问题]本发明解决了提供一种用于从牙髓组织收集的牙髓细胞有效制备牙髓干细胞的方法的问题。[解决方案]根据本发明的用于从收集自牙髓组织的牙髓细胞制备牙髓干细胞的方法包括：(a)使用包含7％至13％(V/V)血清的培养液预培养牙髓细胞的步骤，牙髓细胞附着至培养皿；(b)用包含7％至13％(V/V)血清的培养液培养通过步骤(a)附着至培养皿的牙髓细胞至少一天的步骤；和(c)在步骤(b)之后在低血清条件下培养牙髓细胞的步骤。