乙型脑炎病毒

摘要： 目的:研究由慢病毒介导的RNA干扰对乙型脑炎病毒(JEV)感染细胞与小鼠的抑制作用。方法:以JEV的C、NS3、NS4A和NS5基因为靶点,设计特异性siRNA序列,并构建重组传导慢病毒。对慢病毒预处理的BHK21细胞接种JEV,并通过相对定量PCR、病毒蚀斑和间接免疫荧光实验检测慢病毒对JEV的抑制作用。对慢病毒预处理的7日龄乳鼠脑内接种JEV,5 d后测定其脑组织中的病毒滴度;选取3周龄小鼠做攻毒保护实验。结果:在细胞中,4种重组慢病毒均使JEV的RNA载量与病毒滴度降低(P<0.05),其中LV-C组的RNA载量降低了89.7%,病毒滴度下降约1200倍。4组乳鼠的脑组织中,JEV病毒滴度均降低(P<0.05),其中LV-C组病毒滴度下降约1700倍;4种重组慢病毒对3周龄小鼠的攻毒保护率为50%~70%。结论:由慢病毒介导的靶向JEV的C、NS3、NS4A与NS5基因的RNAi对JEV感染细胞与小鼠具有抑制作用,且有一定持续性,其中靶向C基因的RNAi的抗病毒效果最强。

摘要： 旨在分析乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)感染猪肾上皮细胞PK15后的lncRNA差异表达谱,探究宿主lncRNA在JEV感染和宿主防御中的潜在功能。本研究中利用JEV感染PK15细胞,感染36 h,收集细胞,同时设立未感染对照组,每组3个生物学重复。提取细胞总RNA,构建cDNA文库后进行高通量测序,筛选出差异表达lncRNA。通过对差异表达lncRNA与mRNA的位置关系以及序列相似性预测顺式和反式作用的靶基因,将预测的靶基因进行GO和KEGG分析。最后随机选出9个差异表达lncRNAs,利用实时荧光定量PCR(quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)技术进行表达验证。结果表明,本研究中共鉴定出856个差异表达lncRNAs,其中452个lncRNAs显著上调表达,404个lncRNAs显著下调表达。GO分析发现,lncRNA的靶基因主要富集于先天性免疫反应;KEGG通路分析发现lncRNA的靶基因显著富集于肿瘤坏死因子、Toll样受体和NF-κB等信号通路。通过qRT-PCR验证发现,定量结果和测序结果基本一致。本研究为进一步探究lncRNA参与宿主免疫反应调控JEV复制奠定了理论基础。

摘要： 为建立可表现重症日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)感染中枢神经系统损害症状及病理表现的小鼠模型,以1日龄ICR乳鼠为试验对象,通过皮下注射及腹腔注射方式感染JEV SA14株,观察记录乳鼠体重、临床表现、存活情况。感染第5天处死所有乳鼠,采集脑、肺、脾、肝等4种组织,荧光定量PCR(qRT-PCR)结合核酸电泳分析病毒感染情况,通过苏木精-伊红染色及免疫组化检测组织病理变化。结果发现,皮下感染和腹腔感染乳鼠均于注射后第3天出现精神萎靡、嗜睡、运动功能障碍,症状逐渐加重,皮下注射感染模型临床状更明显。病理结果显示,乳鼠脑组织出现神经元坏死、炎症浸润现象,肺组织存在水肿充血、结构破坏。qRT-PCR产物核酸电泳显示,两种模型脑、肺、脾存在JEV复制,皮下注射感染模型肝组织存在病毒复制。本试验成功建立通过皮下注射感染JEV的ICR乳鼠模型,为研究JEV感染途径及发病机制奠定基础。

摘要： 为了研究驱动蛋白Kif5B对乙型脑炎病毒(JEV)复制的影响,根据GenBank数据库中猪Kif5B基因的mRNA序列,采用RT-PCR扩增Kif5B基因片段并连接到pCAGGS-Flag载体中,经双酶切鉴定结合基因测序结果,成功构建真核表达重组载体pFlag-Kif5B。间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白印迹试验(Western blot)结果证实,pFlag-Kif5B在猪肾细胞-15(PK-15)和猪肺泡巨噬细胞3D4/21中成功表达。JEV感染成功转染pFlag-Kif5B的2种细胞后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blot和IFA证实Kif5B能够明显促进JEV的复制。结果表明:Kif5B真核表达质粒构建成功,且过表达的Kif5B蛋白显著促进JEV在PK-15和3D4/21细胞中的复制,为深入研究Kif5B蛋白促进JEV感染的分子机制提供了理论依据。

摘要： 乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的一种人畜共患病,严重威胁人畜中枢神经系统,是亚洲西太平洋国家和澳大利亚北部病毒性脑炎最常见的病因。乙型脑炎目前仍无有效药物治疗,灭活疫苗、减毒活疫苗仍是预防该病的主要疫苗。近年来,随着基因工程和蛋白质工程的发展,以及对病毒分子结构和功能的深入研究,嵌合减毒活疫苗,基于重组蛋白、重组病毒的乙型脑炎病毒疫苗,DNA疫苗等应运而生,为乙型脑炎病毒疫苗的研发提供了新的策略与研究方向。

摘要： 乙型脑炎病毒(JEV)属于黄病毒科黄病毒属,是一种重要的人畜共患病原体。JEV于1924年在日本首次被发现,至今已成为东南亚国家人类健康的主要威胁之一。JEV主要通过蚊媒传播,禽类是JEV的主要扩增宿主之一。本研究为了调查JEV在鸭群的流行情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对江苏省某地部分鸭群进行JEV的血清抗体检测,同时对疑似病例进行了JEV的PCR检测。结果显示,在被检测的20份产蛋种鸭血清样本中JEV抗体阳性率为75%(15/20);PCR检测结果显示,在所检测的19份病死雏鸭样本中,有1份为JEV阳性,2份为JEV弱阳性,20份产蛋种鸭抗凝血样本均为阴性。该项研究结果表明了该地鸭群中存在JEV感染,对当地养殖业构成潜在的威胁,同时提醒需要加强JEV在鸭群中的监测并采取有效的防控措施。

摘要： 猪乙型脑炎病,简称为乙脑,是一种由乙型脑炎病毒引起的急性人畜共患病,主要通过蚊虫叮咬传播,夏末秋初高发,呈散发性流行,控制难度较大,使养猪户经济效益严重下降。对此,应积极采用各种防控措施,减少猪乙型脑炎病的传播,减少经济损失。一、流行病学猪乙型脑炎病毒属于黄病毒科黄病毒属,本病主要通过蚊虫叮咬传播。

摘要： 目的 建立乙型脑炎病毒微滴式数字PCR (droplet digital PCR,ddPCR)检测方法.方法 根据乙型脑炎病毒基因的NS3序列设计特异性引物和TaqMan探针,用于ddPCR和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR).优化ddPCR的退火温度、引物和探针浓度后,比较ddPCR和qPCR灵敏度和重复性,并用多种虫媒病毒进行特异性验证.结果 该方法特异性良好,灵敏度可以达到16.1 copies/μL,重复性良好.结论 本研究建立的ddRT-PCR能够高度敏感地检测乙型脑炎病毒核酸,将该方法用于临床乙型脑炎病毒感染的检测,可提高检测的准确性.

摘要： 乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的人畜共患病,在自然界中主要是通过蚊虫叮咬进行传播,能够引起人的中枢神经系统损伤和猪的繁殖障碍等疾病,对公共卫生安全造成了严重威胁.由于乙型脑炎病毒在水禽宿主中的适应性差异,导致了病毒优势基因型由GⅢ型逐渐向GⅠ型转变.乙型脑炎病毒优势基因型的转换和流行范围的扩大给疾病防控带来了新挑战,本文对我国乙型脑炎病毒优势基因型转换及其风险和对策进行了综述.

摘要： 乙型脑炎又称流行性乙型脑炎、日本乙型脑炎,简称乙脑,是由乙型脑炎病毒引起的一种严重的人畜共患传染病。蚊虫是该病的主要传播媒介,猪是本病最重要的传染源和储存宿主。各种年龄、品种、性别的猪均易感染此病,但6月龄以前的更易感,病愈后不再复发。本病的发生与气候环境有着密切的关系,呈明显的季节性,秋季多发。近年来,随着人类活动及全球气候变暖,乙脑的流行频率有不断增强的趋势,养猪场(户)应提高警惕,做好预防工作。

摘要： 目的：了解小型猪感染乙型脑炎病毒株的特点. 方法：猪脑组织经过处理,接种BHK21细胞,进行病毒培养、间接免疫荧光试验、中和试验、电镜观察,及通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增新分离毒株E区段和PrM区段核苷酸序列,测序后进行基因型鉴定. 结果：25只猪脑组织接种BHK21细胞,有3个组织处理液能使BHK21细胞发生圆缩、集聚等病变;3个组织接种的BHK21病变细胞滴片进行免疫荧光试验,均产生强绿色荧光反应;中和实验结果显示3株新分离株中和效价均为1∶64;电镜下可见直径40nm左右球型病毒粒子;RT-PCR产物测序结果与疫苗株E区段核苷酸比较同源性均为95％;3株新分离株均为GⅢ型乙脑病毒. 结论：实验表明小型猪场存在乙型脑炎病毒感染,为GⅢ型乙型脑炎病毒.

摘要： 通过分析乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因组中核糖体移码序列,在对NS2A基因实施同义突变基础上,设计2组引物,通过PCR突变方法,依次删除移码后NS1'基因开放阅读框的终止密码子,并将突变片段替换JEV感染性克隆pJEHEN中相应片段,获得了2株突变全长克隆.经体外转录合成RNA,再以RNA转染细胞,拯救出两株突变病毒vJET1和vJET2.通过RT-PCR扩增突变病毒中含突变位点的基因组片段,测序证实了vJET1基因组3690位核苷酸存在由T向A的突变,vJET2基因组3690位和3819位核苷酸均存在由T向A的突变.将vJET1和vJET2感染Vero细胞后,western blot检测显示,两株突变病毒表达的NS1'蛋白均出现延长现象.生长曲线显示,与亲本病毒vTHen相比,突变病毒增殖速度均出现下降.动物实验显示,与vTHen相比,vJET1和vJET2对小鼠的神经毒力与神经侵袭力也出现下降.上述结果表明,NS1'编码框的延伸降低病毒在体外培养细胞上的增值速度,也减弱了病毒对小鼠的毒力.

摘要： 黄病毒基因组cDNA克隆在大肠杆菌中易于出现碱基替换、核苷酸缺失和外源序列插入等不能稳定遗传现象.为探求病毒基因组中原核启动子和相关序列对该现象的影响,以猪源乙型脑炎病毒HEN0701株基因组nt l.2913克隆pTHENCI为研究对象,利用软件寻找影响病毒cDNA稳定性的相关序列,验证该序列对病毒cDNA克隆稳定性的影响,并对其进行定点突变和启动子活性的测定.结果表明,基因组E蛋白编码区和5 'UTR音13分序列对cDNA克隆稳定性有重要影响,于基因组nt 1275与nt 1600之间截断E基因可以稳定cDNA克隆,且基因组nt 54-120序列具有原核启动子活性,于nt 90做A-C突变可降低启动子活性,但不能稳定克隆;于基因组转录起始密码子处(nt97-99)做ATG-GCG突变显著降低启动子活性,并使cDNA克隆在宿主菌中稳定传代.

摘要： 乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)及其同血清群病毒在复制过程中存在核糖体-l移码表达NSI’蛋白的现象,但NSI’蛋白的功能目前仍不明确.本研究通过分析乙型脑炎病毒基因组中核糖体移码元件序列,在对NS2A基因实施同义突变基础上,根据JEV HEN0701株序列,设计合成5对引物,通过PCR定点突变方法改变核糖体移码元件中的序列,以构建不表达或表达不同大小NSI’蛋白的突变病毒.将PCR突变片段替换JEV HEN0701株感染性克隆pjEHEN中相应片段,获得了5株突变全长克隆.经体外转录合成RNA,再以RNA转染细胞,拯救出5株突变病毒vJETA、vJESGA、vjE2R、vJETI和vJET20通过RT-PCR扩增突变病毒中含突变位点的基因组片段,测序证实了vJETA株于3558bp处存在T-A突变;vJESGA株于3600bp处存在G-A突变;vJE2R株于3607bp-3609bp存在CGC-AGG突变;vJETI株于3690bp处存在T-A突变;vJET2株于3690bp和3819bp处存在T-A突变,突变碱基均位于各相应毒株设计突变位点.将突变病毒vJETA、vJESGA、vJE2R、vJET1和vjET2感染Vero细胞后,Westem Blot检测显示,vJETA株和vJESGA株仅能表达NSI蛋白,不能表达NSl’蛋白;vJE2R株、vJET1株和vJET2株均能表达NSI蛋白,同时,vJE2R株能表达蛋白分子量减小的NSI’蛋白,vJET1株与vJET2株分别表达蛋白分子量不同程度增加的NSI’蛋白.病毒生长曲线显示,在BHK-21细胞上,vJESGA株和vJE2R株具有与亲本病毒vTHen株相同的复制能力,而vJETA、vJET1和vJET2的生长速度出现明显下降.将5株突变病毒及其亲本病毒vTHen株通过脑内或皮下接种3周龄昆明小鼠,以检测病毒的神经毒力和神经侵袭力.动物实验结果显示,vJESGA株和vJE2R株具有与vTHen相近的神经毒力和神经侵袭力,而vJETA株、vJET1株和vJET2株的神经毒力和神经侵袭力均出现显著下降. 在本文的研究中,vJETA和vJESGA均不表达NSl’蛋白,但二者在体外的生长特性和对小鼠的毒力出现加大的差异:vJESGA具有与亲本病毒相同的生长速度和毒力,而vJETA的生长速度下降,毒力也显著下降.vJE2R、vJETI株和vJET2的NS1’蛋白都出现改变.NS1’蛋白截短的vJE2R株,具有与亲本病毒相同的生长速度和毒力;NSI’蛋白延长的vJETI株和vJET2,体外生长速度出现下降,毒力也出现显著下降.上述研究结果,特别是vJESGA的结果显示,NSI’蛋白与JEV对小鼠的毒力没有关系,这与西尼罗河病毒中NS1'蛋白影响病毒对小鼠的毒力不同.

摘要： 为了研究乙型脑炎病毒(JEV)对宿主细胞miRNA表达谱的影响，进一步挖掘出参与到病毒生命周期调节或抗病毒免疫的miRNA，本研究中采用JEV感染宿主细胞，通过solexa高通量测序技术展示了宿主细胞应对病毒感染所呈现出的miRNA表达谱，并发现宿主miR-487b能够通过靶向JEV基因组进而抑制JEV的复制。本研究将为揭示宿主通过miRNA调控病毒复制机制提供科学依据。

摘要： 本研究选取猪源乙型脑炎病毒基因Ⅰ型HEN070I株为研究对象，探讨了潜在启动子活性以及毒性相关蛋白表达对JEV cDNA克隆在大肠杆菌中稳定性的影响，以期找到稳定繁殖JEV重组质粒的方法，从而排除由于其不稳定所造成的难以构建JEV反向遗传操作系统的障碍。

摘要： 目的：构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定。方法：以JEV SA14-14-2株Total RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增JEV C蛋白编码基因,基因两侧加入起始密码子以及终止密码子.免疫荧光检测转染的CHO细胞中JEV C蛋白分布与表达。结果：以流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株Total RNA为模板，RT-PCR法获得含有FLAG片段的JEV C蛋白编码基因重组子，测序分析与发表的基因序列相符合。单纯载体传染或未进行转染的CHO细胞中未见特异性绿色荧光标记，仅见散在的无特异性绿色荧光杂质。结论：pJC成功构建，转染的CHO细胞可表达JEV C蛋白.

摘要： MicroRNAs是一类小的非编码RNA，可通过靶向目标mRNA引起目标mRNA降解或翻译抑制直接或间接参与多种生物学进程。然而，JEV感染的情况下，宿主细胞的MicroRNAs是如何被调控以及它们的生物学功能并不清楚。本研究中，发现JEV感染可以下调细胞口源miR-33a-5p的表达，而人为转染miR-33a-5p的化学模拟物则可以显著抑制病毒的复制。双荧光素酶实验检测结果显示真核翻译延伸因子lAl(EEFIA1)是miR-33a-5p的一个靶基园。进一步研究发现，EEF1Al可以与JEV复制复合体中的NS3和NS5蛋白相互作用，通过这种相互作用，EEFIAl可以帮助稳定病毒复制复合体的组份，从而促进病毒复制。

摘要： 乙型脑炎病毒靶向中枢神经系统,引发神经炎症.miRNAs是一类具有重要调控功能的小RNA分子,目前有关miRNAs对JEV诱导产生的神经炎症的调控知之甚少.本研究中,miR-15b在JEV感染的星形胶质细胞U251中表达上调,在灭活病毒感染的细胞中变化不明显.过表达miR-15b能促进JEV诱导产生的炎症反应,而抑制内源性miR-15b能减少炎症因子的表达.荧光素酶报告系统及western blot结果显示RNF125是miR-15b的一个潜在靶标,miR-15b可以直接下调RNF125的表达.进一步研究发现miR-15b通过靶向RNF125来调控炎症反应.综上所述,miR-15b在JEV诱导产生神经炎症的过程中具有重要的意义,可以作为治疗神经炎症潜在的新靶点.

摘要： 为研制针对目前猪场中流行的JEV GI株更有效的疫苗，本文对从流产猪胎儿中分离的JEV GI株HEN0701进行了致弱研究。也可能是进入细胞的10S3比HEN0701少，导致12h时感染上清中HEN0701比10S3滴度高。10S3与HEN0701进人细胞的能力及在细胞中的复制能力还需进一步试验确定。10S3由HEN0701传代纯化而来，HEN0701全长基因组已经测定，因此，测定10S3基因组序列进行比较分析，有助于寻找致弱突变相关位点及改变生长特性的突变位点。为将弱毒株10S3开发成疫苗，10S3的免疫保护能力是下一步的研究重点。

摘要： 本发明公开了一种嵌合型基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明的嵌合型病毒样颗粒为基于基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒的重组猪瘟病毒中和表位嵌合抗原蛋白，编码该病毒样颗粒的DNA片段的核苷酸序列如SEQ#ID#NO.1所示，其氨基酸序列如SEQ#ID#NO.2所示；将SEQ#ID#NO.1所示DNA片段克隆到真核表达载体pVAX1中构建重组表达质粒；将重组表达质粒转染BHK‑21细胞，收集转染细胞的细胞培养上清，浓缩纯化后获得递呈猪瘟病毒中和抗原表位的嵌合型基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒。本发明的病毒样颗粒能诱导机体产生特异性体液和细胞免疫应答，可用于猪场猪瘟病毒和流行性乙型脑炎病毒感染的免疫预防，用于制备猪瘟病毒和流行性乙型脑炎病毒疫苗。

摘要： 本发明公开了一种检测猪流行性乙型脑炎病毒和/或猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测猪流行性乙型脑炎病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公布了一种乙型脑炎病毒荧光定量PCR检测新方法及乙型脑炎病毒检测PCR体系，由引物和探针、Premix Ex Taq反应液、灭菌Tris水组成，该引物和探针检测特异性好，灵敏度高，非常适用于乙脑病毒，与登革热病毒、黄热病毒无交叉反应。

摘要： 本发明公开了一种检测猪流行性乙型脑炎病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的试剂盒，它包括猪流行性乙型脑炎病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因扩增试剂以及检测用基因芯片。本发明检测试剂盒可以准确、有效的检测繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒和猪流行性乙型脑炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种检测猪流行性乙型脑炎病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的可视化基因芯片和试剂盒。本发明特定方法制备的可视化基因芯片，可以用肉眼直观地看到检测结果，不需要价格昂贵的激光共聚扫描仪，成本低廉，同时，灵敏度较高，与现有荧光标记方法的灵敏度相当，特异性强，耗时短，检测快速，临床应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种检测猪流行性乙型脑炎病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测猪流行性乙型脑炎病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明涉及一种联合快速检测流行性乙型脑炎病毒、登革病毒和西尼罗病毒试剂盒，由主反应液和特异性引物组成。主反应液包括反应缓冲液、禽类成髓细胞瘤病毒反转录酶、核酸酶抑制剂、Bst DNA聚合酶、dNTP、硫酸镁、酣菜碱、焦碳酸二乙脂和处理水；特异性引物包括特异性扩增乙脑病毒引物、特异性扩增登革病毒引物和特异性扩增西尼罗病毒引物。本发明用环介导等温扩增技术，设计高度特异性引物，快速检测3种黄病毒，达到高效特异性扩增的目的。本发明提供了检测方法，利用紫外－可见光分光光度计检测反应体系的吸光度值，间接反应目的基因的DNA扩增情况。适于基层和现场快速检测，有较大的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种嵌合型基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明的嵌合型病毒样颗粒为基于基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒的重组猪瘟病毒中和表位嵌合抗原蛋白，编码该病毒样颗粒的DNA片段的核苷酸序列如SEQ#ID#NO.1所示，其氨基酸序列如SEQ#ID#NO.2所示；将SEQ#ID#NO.1所示DNA片段克隆到真核表达载体pVAX1中构建重组表达质粒；将重组表达质粒转染BHK‑21细胞，收集转染细胞的细胞培养上清，浓缩纯化后获得递呈猪瘟病毒中和抗原表位的嵌合型基因I型乙型脑炎病毒病毒样颗粒。本发明的病毒样颗粒能诱导机体产生特异性体液和细胞免疫应答，可用于猪场猪瘟病毒和流行性乙型脑炎病毒感染的免疫预防，用于制备猪瘟病毒和流行性乙型脑炎病毒疫苗。

摘要： 本发明公开了一种检测猪流行性乙型脑炎病毒和/或猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测猪流行性乙型脑炎病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种检测猪流行性乙型脑炎病毒和/或猪瘟病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体上的探针；所述探针包括SEQ ID NO：1或2所示任意一个或者两个寡核苷酸片段，和/或SEQ ID NO：3或4所示任意一个或者两个寡核苷酸片段。本发明试剂盒包括前述基因芯片与扩增猪流行性乙型脑炎病毒和/或猪瘟病毒的基因的试剂。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测猪流行性乙型脑炎病毒和猪瘟病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。