实验用小型猪乙型脑炎病毒的分离鉴定

摘要

目的：了解小型猪感染乙型脑炎病毒株的特点. 方法：猪脑组织经过处理,接种BHK21细胞,进行病毒培养、间接免疫荧光试验、中和试验、电镜观察,及通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增新分离毒株E区段和PrM区段核苷酸序列,测序后进行基因型鉴定. 结果：25只猪脑组织接种BHK21细胞,有3个组织处理液能使BHK21细胞发生圆缩、集聚等病变;3个组织接种的BHK21病变细胞滴片进行免疫荧光试验,均产生强绿色荧光反应;中和实验结果显示3株新分离株中和效价均为1∶64;电镜下可见直径40nm左右球型病毒粒子;RT-PCR产物测序结果与疫苗株E区段核苷酸比较同源性均为95％;3株新分离株均为GⅢ型乙脑病毒. 结论：实验表明小型猪场存在乙型脑炎病毒感染,为GⅢ型乙型脑炎病毒.