脱氢酶

摘要： 【目的】探究嗜热菌高效降解聚乙烯醇(PVA)的作用机制,为提升PVA污染治理效率提供理论基础。【方法】采用凝胶渗透色谱、UV光谱和红外光谱研究嗜热菌(Brevibacillus aydinogluensis FAFU 038)对PVA的降解性能,并对降解过程中PVA降解酶进行鉴定分析,建立酶反应动力学方程。【结果】在初始PVA浓度为1.00 g/L的体系中,48 h内嗜热菌FAFU 038对PVA的降解率可达到78%,120 h后稳定在80%,且对于低浓度和低聚合度的PVA降解效率更高。菌株FAFU 038可以降低PVA的分子质量,断裂分子链,可能产生酮类或醛类等小分子物质。降解的主要原因可能是由于嗜热菌胞内及胞外分泌的脱氢酶和氧化酶,其中胞外酶活占比45.02%。酶动力学方程表明:PVA浓度接近4.00 g/L时,该PVA降解酶可达到最大反应速率(V=7.18 U/min),米氏常数为3.47×10^(-3) mol/L。【结论】嗜热艾登短芽孢杆菌FAFU 038能够高效降解PVA,脱氢酶和氧化酶是促进PVA降解的主要活性酶。

摘要： 为了缓解餐厨垃圾厌氧消化产沼气过程中酸化和氨氮抑制,提高其产甲烷潜力,采用向厌氧消化体系中添加硅藻土和磁化硅藻土,在中温(36±1)°C条件下进行批次产沼气试验,探究硅藻土及磁化硅藻土的添加量对餐厨垃圾厌氧消化产沼气特性的影响。结果表明:添加10 g/L磁化硅藻土的餐厨垃圾产甲烷量最高,达到428.25 mL CH4/g VS,比对照组提高了17.7%。添加硅藻土可以有效改善反应体系的稳定性,缓解挥发性脂肪酸(VFAs)和氨氮抑制,有效提升反应体系中脱氢酶的活性。本研究结果将有助于解决餐厨垃圾厌氧消化工程中酸化和氨氮抑制导致的消化失败,保证厌氧消化体系稳定运行。

摘要： 在本文探讨在南方贫瘠红壤定量施加发酵后鸡肥牛粪并养殖蚯蚓,对贫瘠红壤耕作层进行土壤肥力改良,主要从蚯蚓与红壤混合培养后土壤的部分理化性质、微生物及酶活性变化验证几个方面进行研究。综合各项观测指标来看,每平方米30cm厚耕作层农田红壤施用1000克鸡肥,3000克牛粪,引入太平2号爱胜蚯蚓150条的添加比例,可长期保证农田土壤耕作层中蚯蚓粪为5%-10%时,对红壤耕作层改良的效果最佳。当蚯蚓数量在150条/平方米·30cm时,SOM(土壤有机质)含量提高26.43%,有效P、速效K、碱解N分别提高22.39%、25.37%、23.48%。土壤pH及多种理化及生物学性状对种植植株处于最佳状态。农田红壤随着蚯蚓生长繁殖,蚯蚓粪在耕作层土壤发挥了重要作用,既减缓了土壤水的蒸发增加土壤含水率、同时改良土壤酸碱性。

摘要： 以四环素为研究对象,构建土壤微生物电化学系统(SMES),避光恒温培养58d后进行采样分析,研究了四环素降解、土壤理化性质、酶活性和三域微生物之间的内在联系,以揭示四环素在SMES中的生物降解机理.结果表明,采用SMES处理后,四环素降解率从52％显著提升至70％.与对照处理相比,脱氢酶活性在SMES中显著提升了144％,且与四环素降解率显著正相关.相比之下,在SMES中多酚氧化酶、过氧化氢酶和漆酶对四环素的降解效果微弱.pH值是影响土壤微生物群落的重要理化因子,且与四环素降解呈负相关关系.Network关联分析显示,真菌在四环素降解中起到关键作用,Geoalkalibacter、Microascus、Wardomyces和Scopulariopsis是四环素的潜在降解菌,其中Microascus和Scopulariopsis是脱氢酶的潜在分泌菌.

摘要： 维生素C是一种人体必需的维生素,在食品制药等领域拥有巨大的市场.工业上维生素C主要以微生物发酵生产的2-酮基-L-古龙酸为前体,然后通过内酯化反应获得.微生物发酵中,山梨糖途径和葡萄糖酸途径因为转化率高一直是研究的热点.文中从维生素C生物合成相关脱氢酶的角度阐述了:山梨糖途径和葡萄糖酸途径中关键脱氢酶在定位、底物谱、辅因子和电子传递上的特点;山梨糖途径和葡萄糖酸途径中面临的主要问题和改造策略等.最后讨论了维生素C生物合成中山梨糖途径和葡萄糖酸途径可能的研究方向.

摘要： 目的 探讨C反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)、铁蛋白(SF)预测小儿肺炎支原体肺炎(MPP)并发全身炎症反应综合征(SIRS)的效能.方法 选取2017年1月至2020年10月本院MPP患儿102例,根据是否并发SIRS分为SIRS组、无SIRS组,比较两组治疗前、治疗1、2 d后CRP、LDH、SF表达水平,分析并发SIRS影响因素及各指标预测效能.结果 两组组间、不同时间点CRP、LDH、SF比较,差异有统计学意义(P<0.05);SIRS组治疗1、2 d后CRP、LDH、SF较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05),无SIRS组治疗1、2 d后CRP、LDH、SF较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);SIRS组治疗1、2 d后CRP、LDH、SF较无SIRS组升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗1 d后、治疗2 d后CRP、LDH、SF升高均是并发SIRS影响因素(P<0.05);治疗1 d后、治疗2 d后CRP、LDH、SF联合预测MPP并发SIRS效能高于单一检测(P<0.05).结论 动态检测MPP患儿CRP、LDH、SF水平能判断病情程度,且能预测SIRS的发生,准确把握MPP发生发展,有助于临床治疗方案的制定与调整.

摘要： 采用序批式生物反应器(SBR)处理2,4,6-三氯苯酚(2,4,6-TCP)模拟废水,考察了2,4,6-TCP对污泥性能和菌群结构的影响.实验结果表明:进水质量浓度为10 mg/L的2,4,6-TCP显著抑制污泥活性;随着运行时间的延长,污泥活性逐渐恢复,COD和2,4,6-TCP均可被有效降解;活性污泥中的微生物分泌了大量的胞外聚合物.污泥中过氧化氢酶(CAT)和脱氢酶(DHA)活性显著升高,超氧化物歧化酶(SOD)活性在单个SBR周期的6.00 h达到最大值,而后随着有毒物质的降解,SOD活性降低.当SBR运行结束后,污泥中富集的优势菌属大都具有降解氯酚类污染物的能力.

摘要： 通过多隔层根际箱培养实验研究了磺胺类抗生素磺胺甲恶唑(SMZ)和磺胺甲基嘧啶(SM1)对油菜种植土壤不同根际微域的土壤脱氢酶(DHA)和过氧化氢酶(CAT)的影响.结果 显示,SMZ胁迫下,低浓度处理组促进了根际及近根际区的DHA活性,而高浓度处理组则抑制了其DHA活性.同时,各浓度处理组均抑制了主体土壤区及近主体土壤区中DHA的活性.各浓度处理组均诱导了根际及近根际区的CAT活性,却抑制了主体及近主体区的CAT的活性.SM1胁迫下,各浓度处理组均诱导了近根际区的DHA活性,却抑制了根际区及主体土壤区及近主体土壤区中的DHA活性,而各浓度处理组几乎均诱导了各分区的CAT活性.同时,随着SMZ染毒浓度增加,两种酶活性均降低,而随着SM1染毒浓度增加,DHA活性升高,CAT活性降低.两种土壤酶对两种磺胺类抗生素的响应不同,但整体上均为近根际区的响应值较高,其次才是根际区,然后为近主体土壤区和主体土壤区,并不是简单的随距离增加呈递减效应.

摘要： 细胞分裂素(cytokinin,CK)是参与植物生长发育过程中的关键激素,在植物生长、发育过程起着非常重要作用。细胞分裂素氧化酶/脱氢酶(cytokinin oxidase/dehydrogenase,CKX)是一种不可逆降解细胞分裂素为腺嘌呤/腺苷的黄素酶,作为细胞分裂素信号中降解分支的关键酶,对于维持植物体内的细胞分裂素平衡有着重要作用,有效的控制了植物内源细胞分裂素的水平。选取拟南芥CKX3为目标基因,通过含有拟南芥种皮重组启动子与荧光筛选标记基因mCherry的CRISPR/Cas9载体,来进行高效的拟南芥CKX3基因编辑载体构建并转化拟南芥。利用倒置荧光显微镜筛选具有红色荧光的T0代种子并种植培养获得T1代植株。提取T1代植株基因组进行PCR鉴定和测序分析,鉴定纯合突变后代的性状表型及激素测定。结果表明,本实验成功构建了编辑载体pHEE401E-mCherry-CKX3,拟南芥转化后代中目标基因成功被高效编辑,CKX3的纯合突变植株表型与野生型差异明显,内源激素含量差异达到显著水平。为研究CKX基因功能奠定了基础。

摘要： 本文从培养基配方、菌种来源、激活时间、菌液用量以及检测方式这几个方面对脱氢酶快速毒性检测法进行了改进，确定了整个体系的操作方法。并用HgCl2和NaN3验证了改进后方法的可行性。结果表明，以天然地表水作为菌种来源，转接培养1次后，混合细菌的脱氢酶活性基稳定性便可达到实验要求。样品液与菌液按照6：1的比例混合效果较好。混合体系在37°C恒温培养箱中激活50min以上细菌可完令活化，最终检测可用普通分光光度计进行。

摘要： 测定了Rac-异丙甲草胺及其S-对映体单独作用和与Cd的复合作用下对土壤过氧化氢酶和脱氢酶活性的影响,结果表明,单一和复合处理下,对过氧化氢酶表现先激活后抑制,对脱氢酶表现为激活-抑制-激活,异丙甲草胺和Cd复合污染对土壤过氧化氢酶和脱氢酶活性没有显著的协同效应。单一处理和复合处理下,Rac-和S-表现出手性差异,表明S-对土壤过氧化氢酶和脱氢酶的毒害小于Rac-。

摘要： 本报告首先介绍了蛋白质科学与工程的发展概况及在服务民生方面的技术瓶颈问题,并结合醇脱氢酶和胺脱氢酶等实例,展示了蛋白质工程技术在脱氢酶分子改造方面的巨大潜力;进一步以胺脱氢酶(AmDH)和羟基甾体脱氢酶(HSDH)的挖掘和改造为例,说明生物催化技术在绿色精准合成手性胺和熊去氧胆酸等医药及精细化学品过程中的环境友好特征和工业应用优势.

摘要： 本文以校园学生生活区高氨氮生活污水为研究对象，采用三级串联人工快渗系统研究其对COD去除效果和机理。试验结果表明，三级串联人工快渗系统对COD去除率为79.65%，较常规人工快渗系统提高了6%，且出水均能满足《城镇污水处理厂污染物综合排放标准》（GB18918-2002）一级A标准。总有机物的54%在一级子系统阶段得到去除，颗粒有机物83%的也是在一级子系统得到去除。系统中好氧氨化细菌数量从上到下逐渐降低，且明显多于常规快渗系统；脱氢酶的活性变化呈“M”型，出现了两个峰值。COD的去除率与好氧细菌的拟合相关系数r为0.97，相关性非常显著，与脱氢酶活性的相关系数r为0.64，相关性也比较明显。生物膜量和活性生物膜量变化也呈“M”型，数量明显多于常规快渗系统，COD的去除率与活性生物膜的重量相关性系数r为0.73，相关性也比较显著。

摘要： 分子生物电子器件，如生物燃料电池，通常由电子换能器和生物识别元件两 部分组成，而电子换能器需要将生物识别元件产生的化学信号转变为电子信号， 并有效的在固定化的生物材料和导电载体之间传输电子。因此，高导电性、大比 表面积、良好的生物兼容性、易于固定在导电载体上的新材料在新型高效分子生 物电子器件的研究中，具有潜在的应用前景。作为一种新型的碳纳米结构，石墨 烯由于其具有如下优良的性质，在电子换能器的应用中表现出特别诱人的应用价 值。首先，石墨烯具有大的比表面积和高的导电性，为石墨烯作为良好的电子换 能器奠定了基础；其次，由于石墨烯表面有丰富的π 电子和含氧官能团，因此石墨烯可以很容易的和各种功能分子集成；再次，相比于碳纳米管，石墨烯不但可 以简单的通过廉价的石墨大量合成，而并不需要复杂的步骤和设备，而且可以在多种溶剂中均匀分散，从而易于操作。在本研究中，我们成功地构建了基于石墨 烯的电子换能器，并以脱氢酶作为生物识别单元，发展了葡萄糖/O2 生物燃料电 池。

摘要： 共轭亚油酸CLA因具有如抗癌、抗动脉硬化及其提高免疫力等许多生物保健功能而成为动物营养学领域的研究热点。CLA主要存在于反刍动物的内及乳制品中,它主要由反刍动物瘤胃内微生物氢化多不饱和脂肪酸的中间产物或通过内源乳腺、脂肪组织经A9脱氢酶脱氢所形成。

摘要： 构建并比较了源于红平红球菌的手性醇脱氢酶(READH)与甲酸脱氢酶(FDH)的融合蛋白体系,为新型辅酶再生系统的开发提供基础性数据。结果表明：READH与MBP、FDH融合后较大地影响了READH的活性。在三种融合策略中,READH在N端融合FDH后活性最高,FDH的N端融合READH后的活性最高,相反FDH在C端融合READH后不具有活性。

摘要： 本文从Rhodococcus erythropolis DSM 43297(ATCC 17896)克隆ADH基因(1047bp )，用LA Taq聚合酶PCR扩增，直接与T载体pMD 19-T Simple Vector连接，构建TA克隆质粒。然后用限制性内切酶EcoR I和Hind III双酶切，目的片段纯化后连接到pET-28a表达载体上，成功构建了重组大肠杆菌E. coliBL21(DE3)/pET 28a-RE ADH。重组的E. coli BL21在LB培养基中经IPTG诱导后30°C，200 rpm继续培养14h收集菌体，提取粗酶液。以苯乙酮为底物，粗酶液的比酶活为127U/mg。经65°C热水浴处理15 min后去除80%的杂蛋白;再经亲和层析和凝胶过滤层析纯化最后获得冻干粉纯度达到90%以上，纯化倍数为8.0。 FDH由本实验室已构建的重组菌生产，将ADH和FDH按1:1比例混合，加入少量的NAD十，可以专一性催化4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原得到手性单体(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，对映体过量率(e.e.)较高，且FDH催化NADH再生的方式大大减少了成本，工业化应用潜力大大提高。

摘要： 为揭示不同阴离子在生物质发酵产氢中的作用规律,以混合菌群发酵产氢为研究对象,采用正交试验设计的方法考察了6种不同的阴离子及添加尿素对发酵产氢过程的影响。通过对不同阴离子浓度及相互关系对发酵产氢的影响的综合比较,获得以下结论:促进混合菌群发酵产氢的阴离子组成为(SO4)2-1.5g·L-1,Cl-0g·L-1,(NO3)-0g·L-1,(Mo7O24)6-0.1 g·L-1,(C2O4)2-1 g·L-1,(C6H5O7)3-5 g·L-1,(H2N)2CO0 g·L-1;以PDB(马铃薯水解液)为基质发酵原料,H2最高含量和平均含量分别比对照组提高了21.4%和24.1%；平均产氢速率由对照组的36.79 mL·L-1·h-1提高到96.25 mL·L-1.h-1；氢气产率由对照组的0.76 mol·moL-1提高到1.17 mol·moL-1。研究同时证明,尿素对H2的产生具有显著的抑制作用,(Mo7O24)6-则可促进混合微生物对原料的利用和转化；阴离子(C2O4)2-和(C6H5O7)3-的交互作用显著,说明两者同时使用可改善发酵产氢。从理论上对上述结果进行了分析探讨。

摘要： 为揭示不同阴离子在生物质发酵产氢中的作用规律,以混合菌群发酵产氢为研究对象,采用正交试验设计的方法考察了6种不同的阴离子及添加尿素对发酵产氢过程的影响。通过对不同阴离子浓度及相互关系对发酵产氢的影响的综合比较,获得以下结论:促进混合菌群发酵产氢的阴离子组成为(SO4)2-1.5g·L-1,Cl-0g·L-1,(NO3)-0g·L-1,(Mo7O24)6-0.1 g·L-1,(C2O4)2-1 g·L-1,(C6H5O7)3-5 g·L-1,(H2N)2CO0 g·L-1;以PDB(马铃薯水解液)为基质发酵原料,H2最高含量和平均含量分别比对照组提高了21.4%和24.1%；平均产氢速率由对照组的36.79 mL·L-1·h-1提高到96.25 mL·L-1.h-1；氢气产率由对照组的0.76 mol·moL-1提高到1.17 mol·moL-1。研究同时证明,尿素对H2的产生具有显著的抑制作用,(Mo7O24)6-则可促进混合微生物对原料的利用和转化；阴离子(C2O4)2-和(C6H5O7)3-的交互作用显著,说明两者同时使用可改善发酵产氢。从理论上对上述结果进行了分析探讨。

摘要： 本发明提供了一种乙醇脱氢酶和葡萄糖脱氢酶共交联酶聚集体的制备方法，具体的本发明通过高密度发酵破壁离心后的上清作为粗酶液，将粗酶液中的乙醇脱氢酶和葡萄糖脱氢酶经戊二醛交联制备共交联酶聚集体，而且通过添加吐温80将共交联酶聚集体的酶活回收率提高到82％。

摘要： 在此披露的是一种对于以下而言的新发现的问题和解决方案，利用木糖异构酶转化木糖为木酮糖用于经由木酮糖激酶进入戊糖磷酸途径，来将酿酒酵母进行工程化来发酵木糖制造乙醇。当生长在包含有木糖的一种培养基上时，木糖醇趋向于在细胞中积累，尽管在酿酒酵母中缺失木糖还原酶活性。木糖醇抑制木糖异构酶活性。一种描述的解决方案是同时表达一种外源木糖醇脱氢酶连同该外源木糖异构酶同时还任选地在缺失一种木糖还原酶表达情况下过表达木糖激酶。另一种解决方案是来自脆弱拟杆菌的一种木糖异构酶，与其他木糖异构酶（例如大肠杆菌木糖异构酶）相比更不受木糖醇抑制。该脆弱拟杆菌木糖异构酶的表达可以单独使用，或与木糖醇脱氢酶的表达以及任选地与木酮糖激酶的过表达组合使用以改进来自木糖的乙醇生产。

摘要： 本发明公开了一种活细胞存在下的脱氢酶及其基质浓度的测定方法，例如，下述构造式(Ⅰ)所示的，该测定方法的特征是使用难以被活细胞还原的电子中介，下述构造式(Ⅰ)所示的电子中介，包括该电子中介的脱氢酶及其基质用测定试剂。A―L―M (Ⅰ)(构造式(Ⅰ)中，A表示至少包含一种阴离子性基的构造部位，M表示进行电子授受的构造部位，L表示将所述A和M连结的连结部位)。

摘要： 本发明公开了一种利用亮氨酸脱氢酶偶联葡萄糖脱氢酶制备L‑叔亮氨酸的方法，属于酶工程和手性医药中间体制备技术领域。本发明方法包括向反应体系中添加底物三甲基丙酮酸，葡萄糖，调节体系的pH值在8.0‑9.0，加入经过外加烟酸等物质的培养基培养过的共表达菌株破碎的粗酶液(包含亮氨酸脱氢酶，葡萄糖脱氢酶及辅酶)之后开始反应，通过控制反应过程的温度在25‑30°C，pH值在8.0‑9.0，生产L‑叔亮氨酸。本发明通过采用亮氨酸脱氢酶偶联葡萄糖脱氢酶体系，利用菌体自身含有的辅酶，进行L‑叔亮氨酸制备，具有单批次反应底物浓度高，反应效率高，不需要辅酶添加等特点。

摘要： 本发明提供了一种乙醇脱氢酶和葡萄糖脱氢酶共交联酶聚集体的制备方法，具体的本发明通过高密度发酵破壁离心后的上清作为粗酶液，将粗酶液中的乙醇脱氢酶和葡萄糖脱氢酶经戊二醛交联制备共交联酶聚集体，而且通过添加吐温80将共交联酶聚集体的酶活回收率提高到82％。

摘要： 本发明披露的是一种对于以下而言的新发现的问题和解决方案，利用木糖异构酶转化木糖为木酮糖用于经由木酮糖激酶进入戊糖磷酸途径，来将酿酒酵母进行工程化来发酵木糖制造乙醇。当生长在包含有木糖的一种培养基上时，木糖醇趋向于在细胞中积累，尽管在酿酒酵母中缺失木糖还原酶活性。木糖醇抑制木糖异构酶活性。一种描述的解决方案是同时表达一种外源木糖醇脱氢酶连同该外源木糖异构酶同时还任选地在缺失一种木糖还原酶表达情况下过表达木糖激酶。另一种解决方案是来自脆弱拟杆菌的一种木糖异构酶，与其他木糖异构酶（例如大肠杆菌木糖异构酶）相比更不受木糖醇抑制。该脆弱拟杆菌木糖异构酶的表达可以单独使用，或与木糖醇脱氢酶的表达以及任选地与木酮糖激酶的过表达组合使用以改进来自木糖的乙醇生产。

摘要： 本发明涉及二氧化硅结合肽介导醇脱氢酶和胺脱氢酶共固定化级联反应制备手性胺的方法；采用重叠延伸PCR技术将二氧化硅结合肽的基因分别插入到介导醇脱氢酶和胺脱氢酶的基因序列的N末端并构建基因工程菌株；利用镍离子金属螯合亲和色谱柱及含高浓度的咪唑缓冲液纯化分离重组蛋白；利用二氧化硅纳米粒子作为固定化酶的载体，将重组蛋白共锚定在SNPs表面得到固定化酶CotB1p‑ADH&CotB1p‑AmDH@SNPs；将获得的固定化酶置于含有NAD+和外消旋醇的NH4Cl缓冲液中反应进行手性胺的制备。制得的双酶共固定化催化剂表现出较高的酶负载量和提高的催化活性与稳定性，在工业应用生产手性胺方面具有较大的潜力。

摘要： 本发明属于生物技术领域，特别涉及两个具有激活乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性的多肽及其应用。这两个同时具有激活乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性的多肽为：多肽ARMNV、多肽FDPSL；其能用于制备醒酒产品。

摘要： 本发明涉及一种由乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶组成的胃滞留缓释制剂及其制备方法。所述胃滞留缓释制剂包括活性物质和药用辅料，其中活性物质包括乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶，药用辅料包括基质骨架材料、溶胀材料、缓释材料和润滑剂。并且，所述胃滞留缓释制剂可以在胃内滞留4小时以上并长效的发挥解酒防醉作用。

摘要： 本发明涉及具有式(5)(11)的化合物或其药学上可接受的盐，可以同时抑制丙酮酸脱氢酶激酶和乳酸脱氢酶，可用于但不局限于治疗癌症疾病。其中，R1独立选自苯基，嘧啶基、吡啶基、杂环基、烯基、卤素取代的烷基、二苯甲基，其中苯基任选的被一个或多个独立选自以下的取代基取代：氟、氯、溴、烷基、烷氧基、硝基、三氟甲基。R2独立选自苯基，吡啶基、二氯乙酰基、呋喃基，其中苯基任选的被一个或多个独立选自以下的取代基取代：氟、氯、溴、烷基、烷氧基、硝基、三氟甲基。