胶原酶

摘要： 目的 建立并比较新生SD大鼠心肌细胞的原代培养方法.方法 采用胰酶法和胰酶+Ⅱ型胶原酶法分别消化心肌组织,两次90 min差速贴壁纯化心肌细胞,倒置显微镜下观察细胞形态变化,分别采用台盼蓝和免疫荧光染色评估心肌细胞的存活率和纯度.结果 与胰酶法相比,胰酶+Ⅱ型胶原酶法可以获得形态良好且结构完整的心肌细胞;胰酶+Ⅱ型胶原酶法分离心肌细胞的获得率[(1.21±0.03)×106 vs(0.65±0.02)×106,P<0.01]和心肌细胞存活率[(93.37±0.40)％vs(86.40±0.36)％,P<0.01]明显高于胰酶法;两种方法获得的心肌细胞纯度均达到95％以上,但是胰酶+Ⅱ型胶原酶法获得心肌细胞所耗时间明显多于胰酶法[(14.00±0.40)h vs(4.59±0.10)h,P<0.01].结论 胰酶+Ⅱ型胶原酶法比胰酶法分离心肌细胞耗时长,但胰酶+Ⅱ型胶原酶法分离的心肌细胞获得率高、存活率高、细胞结构完整,是一种简单易行且高效的培养方法.

摘要： 胰岛移植是供者的胰腺组织在体外通过一系列处理后形成胰岛细胞团,经穿刺、注射、介入等方法移植到受者体内,是治疗胰岛素依赖型糖尿病的方法之一。与胰腺移植相比,该方法具有手术简单、安全、并发症少的优点。近年来尽管胰岛制备程序有了改进和标准化,但人类胰岛分离的结果个体化差异较大,移植胰岛的数量和质量是移植成功的关键,其中胰岛制备的各个环节起重要作用。本文从供体筛选、胰岛分离过程、移植前培养等方面进行阐述影响胰岛制备的因素,以期为临床胰岛制备提供参考。

摘要： 目的比较不同方法分离培养人胎盘绒毛膜间充质干细胞(MSC)的差异,并鉴定其生物学特性。方法选取健康孕妇胎盘绒毛膜组织分别采用组织块贴壁法、胶原酶消化法、胰酶消化法进行分离培养,流式细胞仪分析细胞表面标志物的表达,台盼蓝染色计数方法绘制细胞生长曲线并计算群体倍增时间,逆转录聚合酶链反应和成脂诱导分化试剂盒分别检测细胞多能性相关基因及分化潜能。结果胶原酶消化法原代培养周期均明显短于组织块贴壁法和胰酶消化法,培养相同时间内获得的活细胞数量均明显高于组织块贴壁法和胰酶消化法,差异均有统计学意义(P0.05);3种方法获得细胞均表达多能性相关基因——Oct4、Nanog,且具有成脂分化能力。结论组织块贴壁法、胶原酶消化法、胰酶消化法均可分离培养获得绒毛膜MSC,但结合培养时间及细胞纯度等因素认为,胶原酶消化法更具有优势。

摘要： 目的 探讨胶原酶诱发脑出血联合慢性不可预知温和刺激(CUMS)建立卒中后抑郁(PSD)模型及其各行为学的相关性分析。方法 采用尾壳核注射胶原酶诱导脑出血联合CUMS建立脑出血后抑郁模型,将大鼠随机分为空白组、脑出血组、模型组、氟西汀组。连续灌胃4周。在灌胃的第0、1、2、4周分别测定各组大鼠的体重,在灌胃开始和结束行旷场实验(OFT)和测量蔗糖水消耗量。结果 1)与空白组、脑出血组比较,模型组的蔗糖水消耗量、体重和OFT的总路程明显下降(P 0.05)。3)相关性分析结果,蔗糖水消耗量与OFT的总路程呈正相关(r=0.686,P=0.000),与静止时间百分比呈负相关(r=-0.499, P=0.005),与体重呈正相关(r=0.686,P=0.000)。结论 胶原酶诱发脑出血联合CUMS可以较好地模拟PSD的抑郁症状。蔗糖水消耗量与大鼠体重、OFT的总路程呈正相关。蔗糖水消耗试验可作为评价PSD模型的主要行为学指标。

摘要： 目的通过CiteSpace软件分析国内胶原酶治疗腰椎间盘突出症的研究历史和现状。方法检索1984年至2022年中国知网(CNKI)数据库中关于胶原酶治疗腰椎间盘突出症的文献,应用CiteSpace5.8.R3软件建立可视化科学知识图谱。结果纳入符合主题的文献1022篇,1994年后发文量逐渐增长,在2005年和2006年年发文量达到最高;发文量排名前3的作者是刘延青、王执民、宋文阁;发文排名前2的省份是山东省和广东省;排名前4的关键词聚类标签是“#0胶原酶,#1盘内注射,#2靶点,#3臭氧”,关键词突现分析表明“臭氧”具有最大突现强度,“等离子、射频热凝、靶点”突现强度持续至2022年;胶原酶治疗腰椎间盘突出症相关研究经历了持续增长、相对稳定、逐年下降3个阶段;胶原酶的注射方式曾是研究重点,近些年研究热点集中于胶原酶的联合治疗。结论胶原酶在老年或者难治性腰椎间盘突出症中仍具有研究价值,胶原酶与其他微创介入联合治疗是今后研究热点。

摘要： 为实现废弃茶叶资源中咖啡碱的高效提取,并促进茶叶咖啡碱的开发利用,以液液萃取工艺提取茶多酚后的萃余液为原料,采用升华法分离纯化其中的咖啡碱,考察不同前处理剂和升华条件对咖啡碱得率的影响,并运用响应面分析法优化升华工艺参数,最后分析了茶叶咖啡碱对胶原酶和弹性蛋白酶的体外抑制能力.结果表明,升华法分离纯化茶叶咖啡碱的最佳工艺条件为:升华前使用碳酸钠处理萃余液,碳酸钠添加量与萃余液固形物质量比为2.3:1,升华温度214°C、升华时间28 min,在此条件下咖啡碱得率为76.21％,咖啡碱纯度>98.5％.另外,茶叶咖啡碱对胶原酶和弹性蛋白酶具有良好的抑制作用,质量浓度为1 mg/mL时对胶原酶和弹性蛋白酶的抑制率分别达到46.72％和38.43％.该工艺较传统工艺较大地提高了咖啡碱得率,更加经济安全,具有较好的工业运用前景,同时得到的茶叶咖啡碱可作为天然的胶原酶和弹性蛋白酶抑制剂,在相关护肤产品中可被进一步运用.

摘要： 目的 分析胶原酶对经胸骨正中切口开胸术后切口难愈合患者创面的清创作用及其对愈合的促进作用.方法 选择自2017年1月至2020年8月,沈阳友谊美容医院收治的30例经胸骨正中切口开胸术后切口不愈合的患者,根据是否应用胶原酶治疗,将患者分为传统治疗组和胶原酶治疗组,每组15例.记录患者年龄、性别、清创后创面面积.统计对比分析两组患者的清创率、创面愈合时间、住院时间、疼痛程度及满意度.结果 应用胶原酶后在3、7、14 d因胶原酶治疗组的清创率分别为21.56±0.70、30.05±0.78和62.30±1.94,均显著优于常规治疗组的16.58±0.44、22.71±0.42和52.35±1.74,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).常规治疗组创面愈合时间也明显长于胶原酶治疗组(P<0.05).传统治疗组的平均住院时间显著长于胶原酶治疗组(P<0.05).治疗3、7、14 d时,VAS评分显示,胶原酶治疗能够缓解常规治疗过程中的疼痛,组间比较其差异有统计学意义(P<0.05),胶原酶治疗组满意度明显高于常规治疗组.结论 胶原酶治疗经胸骨正中切口开胸术后切口不愈合的患者,能够促进创面肉芽组织生长、加速愈合、降低疼痛程度,提高了患者满意度.

摘要： 目的:观察臭氧联合胶原酶注射治疗腰椎间盘突出症(LDH)患者的效果.方法:选取60例LDH患者作为研究对象,按随机数字表法将其分为研究组和对照组各30例.对照组采用胶原酶注射治疗,研究组采用臭氧联合胶原酶注射治疗,比较两组治疗优良率、疼痛评分、椎间盘突出指数(IDH)水平和不良反应发生率.结果:研究组治疗优良率为93.33％,高于对照组的66.67％,差异有统计学意义(P＜0.05);术后1、3、6个月时,研究组视觉模拟评分和IDH水平均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(PP＞0.05).结论:臭氧联合胶原酶注射治疗LDH患者可提高治疗优良率,降低疼痛评分和IDH水平,其效果优于单纯胶原酶注射治疗.

摘要： 目的 探讨CT引导下经椎间孔外侧口入路法胶原酶注射对神经根型颈椎间盘突出症的安全性及有效性,比较不同剂量胶原酶注射对根型颈椎间盘突出症患者的临床疗效.方法 选择神经根型颈椎间盘突出症患者90例(ASA Ⅰ～Ⅱ级)为研究对象,根据用药剂量的不同随机分为3组,A组:胶原酶600 U/节组(n=30);B组:胶原酶900 U/节组(n=30)及;C组:胶原酶1200 U/节组(n=30);年龄25～68岁,性别不限,观察治疗后早期3 d VAS评分疼痛缓解情况及不良反应;随访治疗后7d及1、3、6、12个月远期临床疗效,采用改良MacNab标准和视觉模拟评分法(VAS)进行评估.随机对每组10例患者行颈椎核磁共振复查.结果 3组治疗后12、24、48和72 h的VAS评分降低,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05),3组均未出现不良反应.随访治疗后7d3组患者改良MacNab标准疗效评定优良率分别为A组63％、B组67％及C组63％.3组治疗后1、3、6及12个月,优良率逐渐增加(P＜0.05),其中,B组和C组在治疗6个月后,优良率与7d比较差异有统计学意义(P＜0.05),12个月时,3组与7d比较差异有统计学意义(P＜0.05).3组治疗后1、3、6及12个月VAS评分较治疗前逐渐降低(P＜0.01),且B组降低更明显(P＜0.01).结论 CT引导下经椎间孔外侧口入路法胶原酶注射对神经根型颈椎间盘突出症治疗安全有效,且以每节椎间孔外侧口注射胶原酶剂量900 U临床疗效更佳,值得临床选用.

摘要： 目的 探讨负压封闭引流术(VSD)联合胶原酶清创治疗糖尿病足溃疡的效果.方法 选取2016年1月至2020年12月北部战区总医院烧伤整形科收治的40例糖尿病足溃疡患者,男24例,女16例,年龄(67.45±2.06)岁,年龄范围为49～85岁,对其临床资料进行回顾性分析.采用随机数表法将患者随机分为VSD组和胶原酶组,每组20例.VSD组采用负压封闭引流术治疗,胶原酶组在VSD组的基础上联合胶原酶清创治疗,比较两组患者换药次数、坏死组织清除面积百分比、细菌清除率、视觉模拟评分法(VAS)评分及满意度.结果 胶原酶组患者换药次数[(1.43±0.03)次]少于VSD组[(3.14±0.17)次],差异有统计学意义(P＜0.05).治疗14 d后,胶原酶组患者坏死组织清除百分比[(89.21±2.01)％]高于VSD组[(78.46±1.49)％];细菌清除率[(95.51±0.65)％]高于 VSD 组[(83.96±0.69)％];VAS 评分[(2.09±0.22)分]低于 VSD 组[(3.11±0.17)分],差异有统计学意义(P＜0.05).胶原酶组患者满意度高于VSD组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 胶原酶能够促进VSD对于糖尿病足溃疡的治疗作用,加速创面愈合,降低患者疼痛,提高患者满意度.

摘要： 临床应用臭氧胶原酶治疗椎间盘突出症我国已10余年,机理是通过臭氧氧化溶解椎间盘髓核中的粘多糖蛋白及胶原酶溶解胶原蛋白,达到解除或降低椎间盘突出物髓核对神经根的压迫,从而缓解及消除神经根受压而引起的不良临床症状.已被诸多临床所证实,在实际工作中,仍不被骨科界所认同,甚至否认该治疗方法,因此本文针对臭氧胶原酶对椎间盘突出症的治疗进行浅漏的分析,旨在为广大椎间盘突出症患者提供些借鉴.同时也让同道明确臭氧胶原酶对椎间盘突出症之微创诊疗技术是先进的、科学的、实用的,值得临床推广运用的微创诊疗技术.

摘要： 目的：比较胶原酶脑出血模型与自体血脑出血模型的稳定性.方法：分别采用胶原酶和自体血注入大鼠尾状核建立脑出血(ICH)模型,比较两组模型死亡率、神经功能缺损评分、脑组织水含量、血肿大小、神经元细胞凋亡的差异.结果：假手术组术后神经功能缺损评分、脑水含量、血肿体积、神经元细胞凋亡未见明显变化;胶原酶组成功率高于自体血组,差异有统计学意义(P＜0.05),两组死亡率无统计学差异(P＞0.05);胶原酶模型组24h、3d、7d时间点神经功能缺损评分、脑水含量、血肿体积、神经元细胞凋亡与自体血组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论：胶原酶脑出血模型较自体血脑出血模型稳定.

摘要： 近年来,随着胶原酶髓核溶解技术的发展,盘外注射方法得到了有效临床应用,本院在实际工作中,应用C臂下椎间孔盘外置管技术,将胶原酶注入突出的髓核周围,通过该酶催化降解髓核的胶原成分,降低髓核内的压力,使突出的椎间盘缩小或回复,减轻或解除对神经根的压迫,达到缓解或消除症状的目的.临床治疗腰椎间盘突出症患者70例,操作安全简便,直达病变部位,充分发挥了胶原酶的的溶盘作用,达到了微创介入治疗的最大疗效.

摘要： 目的:通过针刀松解术加胶原酶治疗腰椎间盘突出症合并椎管外软组织损害并观察疗效.方法:针刀松解棘突间点、横突间韧带与横突间肌、椎间孔外上角、横突间韧带、腰臀部其他软组织压痛点;影像引导下穿刺至突出物点注射胶原酶.结果:治疗后3h患肢明显减轻的52例,症状明显缓解的6例;其中2例感足拇指轻度麻木,5例术后48h感针眼处疼痛,一年疗效观察,有效率达96％,治愈无复发的49例.结论:针刀松解术加胶原酶治疗腰椎间盘突出症合并椎管外软组织损害具有显效快、远期疗效好、无明显并发症的特点,不愧为一种行之有效的保守治疗的好方法。

摘要： 目的：通过针刀松解术加胶原酶治疗腰椎间盘突出症合并椎管外软组织损害并观察疗效.方法：针刀松解棘突间点、横突间韧带与横突间肌、椎间孔外上角、横突间韧带、腰臀部其他软组织压痛点;影像引导下穿刺至突出物点注射胶原酶.结果：治疗后3h患肢明显减轻的52例,症状明显缓解的6例;其中2例感足拇指轻度麻木,5例术后48h感针眼处疼痛,一年疗效观察,有效率达96％,治愈无复发的49例.结论：针刀松解术加胶原酶治疗腰椎间盘突出症合并椎管外软组织损害具有显效快、远期疗效好、无明显并发症 的特点,不愧为一种行之有效的保守治疗的好方法.

摘要： 本文于海洋污泥中筛选得到的Aeromonas sp.F3所产的胞外酶对胶原蛋白有水解作用,采用单因素试验法对Aeromonas sp.F3的发酵条件及培养基组分进行全面优化,提高该胶原酶生产菌的产酶效率.优化试验结果表明,该菌株最佳发酵条件为:培养时间24h,温度40°C,初始pH为8,装瓶量80～100mL/250mL；培养基组分为:葡萄糖3g/L,酵母浸粉9g/L,NaCl 5g/L,MnSO4 10mg/L.经优化试验明显提升了该菌株的产酶能力.

摘要： 糖尿病是以持续高血糖为基本生化特征的综合症。各种原因造成胰岛素相对或绝对缺乏，以及不同程度的胰岛素抵抗，使体内碳水化台物、脂肪及蛋白质代谢紊乱。通过对糖尿病病因的分析认为糖尿病是一种胰岛信息障碍疾病，糖尿病的防治目标是长期稳定血糖，接近正常水平，防止并发症。通过分析糖尿病与胶原酶之间的密切关系，在理论的指导下，用中草药，甚至蔬菜瓜果，给糖尿病患者治疗和预防糖尿病的并发症，收到很好的效果。

摘要： [目的]总结经骶管裂孔穿刺硬膜囊前间隙置管注射胶原酶治疗脱出型腰椎间盘突出症的疗效及安全性。[方法]局麻下经骶管裂孔穿刺,置入带钢丝导管,C臂X线机透视确认导管进入突出节段硬膜囊前间隙后退出钢丝,注入注射用胶原酶。[结果] 65例均穿刺注射成功,其中58例经6个月以上随访,优良率87．9％,总有效率94．8％。[结论]经骶管裂孔穿刺硬膜囊前间隙置管注射胶原酶治疗脱出型腰椎间盘突出症具有操作简单、成功率高、并发症少、患者住院时间短等特点。

摘要： 目的：通过低温等离子射频消融、胶原酶和臭氧靶点消融治疗颈椎间盘突出症.探索微创治疗颈椎间盘突出症的新技术新疗法,减少不必要的开放性手术,提高临床治愈率.方法：在C臂机准确定位下,通过穿刺针在盘内行低温等离子射频消融,再分别将胶原酶和臭氧注射到颈椎间盘突出部位盘内外(靶点),直接对病灶产生毁损破坏和溶解作用.结果：一次治愈320例,二次治愈20例,三次以上治愈10例,效果差10例.总有效率达97.2％.结论：本疗法简单、安全、疗效确切,值得大小医院推广应用.

摘要： 目的:研究龙鳖胶囊对胶原酶诱导的膝骨关节炎(KOA)的治疗作用,并探讨其作用机制.rn 方法:建立KOA大鼠模型,于造模后开始给予低、中、高剂量的龙鳖胶囊灌胃(0.3125,0.6250,0.9375g/kg),连续4周,观察龙鳖胶囊对KOA大鼠的膝关节肿胀度及血清白细胞介素-1β (IL-1β3)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10 (IL-10)水平的影响.rn 结果:造模后,造模组的膝关节肿胀度和IL-1 β、IL-6水平均高于对照组(P＜0.0),而IL-10水平低于对照组(P＜0.01).给药2周后,与造模组及龙鳖低、高剂量组比较,龙鳖中剂量组的膝关节肿胀度消退较快(P＜0.01).给药3周后,龙鳖低、中、高剂量组的膝关节肿胀度消退均快于造模组(P＜0.01),其中,龙鳖中剂量组的膝关节肿胀已消退至对照组水平.给药4周后,与对照组比较,龙鳖低、中、高剂量组的膝关节肿胀度均已消退.给药2、4周后,造模组的IL-1 β水平均高于同期对照组及龙鳖低、中、高剂量组(P＜0.05);龙鳖低、中、高剂量组的IL-1β水平均高于同期对照组(P＜0.05);龙鳖中剂量组IL-1β水平均低于同期龙鳖低、高剂量组(P＜0.05);造模组IL-6水平均高于同期对照组及龙鳖低、中、高剂量组(P＜0.01,P＜0.05);龙鳖低剂量组IL-6水平均低于同期龙鳖中、高剂量组(P＜0.05);龙鳖低、中、高剂量组IL-10水平均高于同期对照组和造模组(P＜0.01),而其中龙鳖中剂量组IL-10水平均高于同期龙鳖低、高剂量组(P＜0.01).给药2周后,龙鳖低、中、高剂量组IL-6水平均高于对照组(P＜0.01);给药4周后,龙鳖胶囊低剂量组IL-6水平与对照组比较,无统计学差异.rn 结论:龙鳖胶囊能消除KOA大鼠的膝关节肿胀,其作用机制与降低KOA大鼠血清IL-1 β、IL-6水平及升高IL-10水平有关.

摘要： 本发明涉及一种将选自I型胶原酶、II型胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶构成的组的至少一种酶从物质的混合物中纯化出来的方法，作为方法步骤，所述方法包括至少一个疏水作用色谱过程，其特征在于，疏水作用色谱过程中的固定相包括从聚丙二醇和丁基琼脂糖构成的组中选出的材料。本发明还涉及以这种方法纯化的酶用于制药、化妆品和/或生化目的的用途。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂以及含有胶原酶抑制剂的保湿晶露及其制备方法。所述胶原酶抑制剂包括：铁皮石斛提取物和洋甘菊提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述铁皮石斛提取物的加入量为17‑65％，所述洋甘菊提取物的加入量为35‑83％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明涉及一种胶原酶抑制剂及其制备方法和包含该胶原酶抑制剂的透肌水。所述胶原酶抑制剂包括：野菊花提取物和金盏花提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述野菊花提取物的加入量为26.2‑73.8％，所述金盏花提取物的加入量为26.2‑73.8％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，含该胶原酶抑制剂的睡眠面膜及其制备方法。所述胶原酶抑制剂包括：茯苓提取物和苦参根提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述茯苓提取物的加入量为51‑83％，所述苦参根提取物的加入量为17‑49％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，含该胶原酶抑制剂的修护霜及其制备方法。所述胶原酶抑制剂包括：人参提取物和苦参根提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述人参提取物的加入量为51‑97％，所述苦参根提取物的加入量为3‑49％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，含该胶原酶抑制剂的补水面膜和制备方法。所述胶原酶抑制剂包括茯苓提取物和辣木籽提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述茯苓提取物的加入量为12‑49％，所述辣木籽提取物的加入量为51‑88％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，包含该胶原酶抑制剂的眼部精华及其制备方法。所述胶原酶抑制剂包括大花红景天提取物和洋甘菊提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述大花红景天提取物的加入量为3‑30％，所述洋甘菊提取物的加入量为70‑97％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明提供一种胶原酶抑制剂，包含该胶原酶抑制剂的抗衰亮肤水和制备方法。该胶原酶抑制剂包括：红石榴皮提取物和马齿苋提取物，以所述胶原酶抑制剂的总质量计，所述红石榴皮提取物的加入量为26‑74％，所述马齿苋提取物的加入量为26‑74％。本发明的胶原酶抑制剂对胶原酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

摘要： 本发明涉及一株产胶原酶蜡样芽胞杆菌

摘要： 本发明公开了一种表达胶原酶的大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明一种蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus R75E分泌的一种胶原酶的氨基酸序列(如SEQ ID NO:1所示)与核苷酸序列(如SEQ ID NO:2所示)。本发明提供含有上述胶原酶基因在大肠杆菌中的表达菌。本发明提供一种含有表达所述DNA分子的重组大肠杆菌，所述重组大肠杆菌是在宿主菌中导入所述的大肠杆菌重组表达载体得到的大肠杆菌菌株。本发明提供一种纯化所述重组胶原酶的方法及在降解鱼鳞中Ⅰ型胶原蛋白方面的应用。本发明的重组胶原酶，能够高效降解天然的Ⅰ型胶原蛋白纤维，效果显著，可应用于农副产品中胶原蛋白的开发利用、水产品胶原蛋白的加工与利用、医疗以及食品工业生产中胶原酶的应用。