弹性蛋白酶

摘要： 背景:髌腱是维持膝关节稳定的重要结构,在拉伸作用下表现出特有的非线性力学特性,但是弹性蛋白在拉伸载荷下对髌腱力学行为的影响尚不清楚。目的:通过弹性蛋白的靶向酶处理,研究弹性蛋白对髌腱力学性能的影响。方法:(1)将30个40-50 mg新鲜猪髌腱平均分配到5种不同弹性蛋白酶浓度(0,1,5,10,20 U/m L)中孵育以及在5个不同的时间(0,1,4,6,12h)的弹性蛋白酶溶液中孵育,最后检测弹性蛋白含量。(2)将髌腱分别在PBS溶液、5 U/m L弹性蛋白酶溶液中处理8h,进行Verhoeff VanGieson(VVG)染色和Masson染色。(3)将20个新鲜猪髌腱随机分为PBS对照组和弹性蛋白酶处理组(弹性蛋白酶组),在试样表面标记9个点后进行纵向拉伸及应力松弛实验,使用光学非接触法计算标记点的位移用于后续应变分析并计算应力;然后将试样分别在PBS溶液、5 U/m L弹性蛋白酶溶液中孵育8 h,再次进行同样的力学测试。结果与结论:(1)在5 U/m L弹性蛋白酶溶液中孵育8 h可以满足此次实验要求;(2)与处理前相比,PBS组和酶处理组的组织拉伸应力显著降低,均降低约40%(P<0.001,P<0.01);与处理前相比,处理后的松弛百分比显著增加,前后相差约12%(P<0.05);在归一化的平均应力-时间曲线上,酶处理组比PBS组应力降低更大,两者相差约16%(P<0.0001);(3)以上结果表明,弹性蛋白在髌腱的拉伸力学特性及黏弹性特性中起到重要作用,进一步补充了对多尺度肌腱结构-功能关系的理解,这有利于未来对微观结构本构模型的发展和改进,以模拟髌腱病变及手术干预。

摘要： 考察不同汉麻提取物,即CBD(大麻二酚)晶体、CBD广谱油和86.69%CBD油在皮肤衰老过程对透明质酸酶、胶原蛋白酶和弹性蛋白酶的抑制作用,实现天然植物对皮肤抗衰老活性的初步探究。实验中以EGCG(茶多酚)作为阳性对照,使用酶标仪测定样品的吸光度,利用公式计算不同汉麻提取物对酶的抑制率。结果表明,与EGCG阳性曲线对照相比,发现汉麻提取物对透明质酸酶、胶原蛋白酶和弹性蛋白酶抑制作用明显,具有良好的皮肤抗衰老功效。其中86.69%CBD油对透明质酸酶的抑制效果较好,CBD广谱油对胶原蛋白酶的抑制效果明显,CBD晶体和CBD广谱油对弹性蛋白酶抑制作用显著,以上结果为汉麻提取物在医药和化妆品行业的产品研究提供了一定的数据参考和科学依据。

摘要： 天然产物芦丁(Rutin)可以抑制弹性蛋白酶的活性,采用多光谱法与分子对接技术研究芦丁与弹性蛋白酶(PPE)的相互作用。研究结果表明,Rutin对PPE存在荧光猝灭效应,且为静态猝灭。Rutin与PPE能形成1∶1复合物,在298 K下其结合常数为4.90×10^(4) L/mol,主要结合力为氢键和范德华力。根据Forster′s非辐射能量转移理论,计算得到Rutin与PPE的结合距离r为4.55 nm。紫外光谱与同步荧光光谱结果表明,Rutin可使PPE周围微环境发生改变,极性增加、亲水性增加和疏水性减弱。傅里叶变换红外光谱与圆二色光谱分析表明,Rutin使PPE的α-螺旋、β-折叠含量降低,酶结构变得松散,改变了PPE的二级结构。分子对接模拟表明,Rutin与PPE距离在0.4 nm之内的氨基酸残基共有11个,共形成5条氢键,同时还有强大的范德华力与π-阳离子相互作用,多种作用力使Rutin与PPE形成稳定的复合物,抑制了弹性蛋白酶的活性。

摘要： 采用多种光谱法及分子对接技术对西维来司钠(ONO-5046)与弹性蛋白酶的相互作用进行研究,利用荧光光谱法判断出ONO-5046的加入对弹性蛋白酶产生荧光猝灭作用,与弹性蛋白酶相互作用的猝灭类型为静态猝灭,ONO-5046与弹性蛋白酶以结合比为1∶1的比例构成复合物。经计算,ONO-5046与弹性蛋白酶体系的ΔH<0和ΔS<0,判断出氢键与范德华力为其主要结合作用力,由ΔG<0可知该反应可以自发进行。同步荧光光谱法、紫外-可见分光光谱法和圆二色光谱法探讨了ONO-5046的加入使弹性蛋白酶中氨基酸残基周围环境的疏水性降低,二级结构发生改变,α-螺旋结构的比例减少,无规则卷曲的比例增多;分子对接模拟结果表明:在与弹性蛋白酶相互作用过程中,ONO-5046分子骨架上的多个酰基结构、2个苯环以及较长的共轭结构能提供氢键与范德华力的作用位点,同时,端碳上的3个甲基结构有利于疏水作用,ONO-5046上的氧负离子与弹性蛋白酶的精氨酸存在盐桥作用。以上结果表明,ONO-5046与弹性蛋白酶的结合存在多种作用力,能形成稳定的复合物,从而抑制了弹性蛋白酶的活性。

摘要： 目的 研究过敏性紫癜(HSP)患儿血清免疫球蛋白1免疫复合物(IgA1-1C)对中性粒细胞激活的影响,探讨HSP微血管损伤的病因以及紫癜性肾炎(HSPN)的发病机制.方法 选取2016年8月-2017年8月在兰州大学第一医院收治入院的初诊HSP患儿,4周内未接受激素治疗,同时排外患风湿免疫系统疾病、过敏性疾病或其他肾脏疾病.对照组为60例非感染因素入院,并排外自身免疫性疾病,且无肾脏器质性病变者.所有入选对象均在入院当日收集血样,酶联免疫吸附法测定血清IgA1-IC、髓过氧化物酶(MPO)和弹性蛋白酶(NE)的质量浓度,血液常规分析获得白细胞及中性粒细胞计数,流式细胞术检测IgA Fc受体(CD89+)百分比,实时荧光定量多聚核苷酸链式反应法检测CD89mRNA的表达量.为观察HSPN的发病情况,在数据统计阶段依据有无肾脏受累分为HSP组(76例)和HSPN组(32例).结果 HSP组血清中IgA1-IC、MPO、NE质量浓度与对照组相比均明显升高(P＜0.05);HSPN组IgA1-IC质量浓度高于HSP组(P＜0.05);MPO、NE质量浓度在HSPN组与HSP组之间的差异无统计学意义.HSP组与对照组比较,白细胞计数、中性粒细胞绝对值、CD89+百分比均明显升高,差异有统计学意义;HSPN组白细胞计数、中性粒细胞绝对值、CD89+百分比均高于HSP组;在mRNA水平上,HSP组CD89 mRNA的表达明显高于对照组(P＜0.05),但HSPN组患儿CD89mRNA表达量与HSP组、对照组之间的差异无统计学意义(P＞0.05).Person相关分析结果显示,HSPN组IgA1-IC与NE质量浓度呈正相关关系(r=0.454,P＜0.009),MPO和IgA1-IC质量浓度在总体趋势上有一致性,但相关性不显著(r=0.277,P＜0.125).结论 HSP患儿IgA1-IC质量浓度明显升高,与CD89结合激活中性粒细胞,致使中性粒细胞释放MPO及弹性蛋白酶损伤血管内皮细胞,在HSP发病过程中发挥重要作用;HSPN的发病与中性粒细胞的过度活化有关,同时受到个体差异的影响.

摘要： 研究表明弹性蛋白酶(elastase,Ela)参与调控嗜水气单胞菌引起的细菌性溃疡病,对控制鱼类养殖中免疫疾病有重要作用.本研究根据已报道脊椎动物的Elas基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR和RACE技术克隆获得黄鳍鲷Ela基因(AlEla)cDNA序列全长,并对其进行生物信息学分析.结果显示,AlEla基因全长为946bp,包含807 bp的开放阅读框,编码269个氨基酸,含有16个氨基酸信号肽的亲水性稳定膜外蛋白,定位于细胞外基质,具有3个O-糖基化和15个磷酸化的潜在位点.编码的成熟AlEla蛋白预测相对分子质量27 509u,等电点为6.05.氨基酸序列同源性比对发现,AlEla与鲷和鲆的Elas2的同源性为84.76％～99.26％,处于系统进化树上同一分支,表明它们的亲缘性相近.AlEla具有Elas的保守结构,如Tryp-SPc结构域、丝氨酸蛋白酶催化三联体、保守的半胱氨酸残基以及在C端含有GDSGGPL序列等,揭示该酶有丝氨酸蛋白酶的催化活性.对AlEla蛋白的二级结构分析显示,α-螺旋、β-转角、β-折叠和无规则卷曲所占的比例分别为17.84％、7.06％、24.54％和50.56％.三级结构分析推测α-螺旋和β-折叠对于AlEla蛋白的空间构象可能有着重要作用.本研究从黄鳍鲷肌肉中成功克隆AlEla基因并分析其生物信息学特征,为后续研究AlEla参与调控鱼类免疫疾病的机制提供理论基础.

摘要： 为实现废弃茶叶资源中咖啡碱的高效提取,并促进茶叶咖啡碱的开发利用,以液液萃取工艺提取茶多酚后的萃余液为原料,采用升华法分离纯化其中的咖啡碱,考察不同前处理剂和升华条件对咖啡碱得率的影响,并运用响应面分析法优化升华工艺参数,最后分析了茶叶咖啡碱对胶原酶和弹性蛋白酶的体外抑制能力.结果表明,升华法分离纯化茶叶咖啡碱的最佳工艺条件为:升华前使用碳酸钠处理萃余液,碳酸钠添加量与萃余液固形物质量比为2.3:1,升华温度214°C、升华时间28 min,在此条件下咖啡碱得率为76.21％,咖啡碱纯度>98.5％.另外,茶叶咖啡碱对胶原酶和弹性蛋白酶具有良好的抑制作用,质量浓度为1 mg/mL时对胶原酶和弹性蛋白酶的抑制率分别达到46.72％和38.43％.该工艺较传统工艺较大地提高了咖啡碱得率,更加经济安全,具有较好的工业运用前景,同时得到的茶叶咖啡碱可作为天然的胶原酶和弹性蛋白酶抑制剂,在相关护肤产品中可被进一步运用.

摘要： 以毛豆为研究对象,采用超声波辅助水提取法对其进行提取,通过ABTS+·清除能力测试、DPPH·清除能力测试、胶原蛋白酶抑制能力测试、弹性蛋白酶抑制能力测试和晚期糖基化终产物AGEs的清除能力测试等方法,对毛豆提取物的体外抗衰老活性进行考察评估.结果显示,毛豆提取物具有良好的体外抗氧化和抗糖化活性:清除ABTS+·的IC50值为11.16mg/mL,清除DPPH·的IC50值为11.77 mg/mL,清除AGEs的IC50值为3.21mg/mL;对与皮肤衰老紧密相关的多种蛋白酶显示出很好的体外抑制活性:抑制胶原蛋白酶的IC50值为12.91 mg/mL,50 mg/mL的毛豆提取物具有与阳性对照药物西维来司钠(50μmol/L)相当的抑制弹性蛋白酶的能力.以上结果表明,毛豆提取物具有较好的体外抗衰老活性.

摘要： 目的:探讨牙周炎患者正畸治疗前后龈沟液中弹性蛋白酶的变化价值,希望为早期预测患者预后提供参考.方法:2016年12月到2019年10月选择在本院就诊的牙周炎患者68例作为研究对象,所有患者都给予正畸治疗,检测正畸治疗前后弹性蛋白酶、探诊深度(probing depth,PD)、出血指数(bleeding on probing,BOP)、附着丧失(attachment loss,AL)的变化,记录患者的病情变化、判定预后并进行相关性分析、影响因素分析.结果:所有患者完成治疗,对于正畸治疗的美观、固位、稳定性均满意.治疗后1个月与治疗后3个月患者的PD、BOP、AL都低于治疗前(P＜0.05),治疗后3个月也低于治疗后1个月(P＜0.05).治疗后1个月与治疗后3个月患者的龈沟液弹性蛋白酶值都低于治疗前(P＜0.05),治疗后3个月也低于治疗后1个月(P＜0.05).Spearman分析显示治疗前与治疗后3个月的龈沟液弹性蛋白酶变化差值与PD、BOP、AL变化差值存在显著正相关性(P＜0.05).多因素Logistic回归显示PD、BOP、AL变化差值作为影响龈沟液弹性蛋白酶变化差值的主要因素(P＜0.05).结论:牙周炎患者正畸治疗前后龈沟液中弹性蛋白酶水平显著下降,与患者的病情变化显著相关,也是反映与预测患者预后的重要指标.

摘要： 目的：通过检测不育男性精浆弹性蛋白酶的水平探讨其与精液主要参数和精浆生化的关系. 方法：用酶联免疫吸附法(ELISA)检测精浆中的弹性蛋白酶,按照WHO人类精液实验室手册(第四版)要求进行精液常规分析、精浆生化等检测,分析精浆弹性蛋白酶与男性不育相关因素的关系. 结果：206例男性不育患者中,31例患者290ng/ml≤精浆弹性蛋白酶＜1000ng/ml,设为隐性感染组;15例患者精浆弹性蛋白酶≥1000ng/ml,设为显性感染组;160例患者的精浆弹性蛋白酶＜290ng/ml,设为正常组.按精浆弹性蛋白酶水平分组比较显示精浆弹性蛋白酶与男性不育症患者精液PH值呈正相关(P＜0.05);与精子浓度、精子活力呈负相关(P＜0.05);与精液量、精子畸形率无明显相关性(P＞0.05);精浆弹性蛋白酶与酸性磷酸酶和精浆锌呈负相关(P＜0.05);与精浆a-糖苷酶、果糖无明显相关性(P＞0.05). 结论：精浆弹性蛋白酶水平与精液质量有密切的关系,生殖道感染是导致男性不育的重要原因.精液的感染主要是前列腺炎引起的,与精囊腺、附睾关系不大.

摘要： 本文主要研究了虎杖提取物对弹性蛋白酶的抑制作用.实验利用热水浸渍法提取虎杖得到粗提取物1(CE1),聚酰胺柱层析后得到粗提取物2(CE2),并进行一系列的定性及定量分析.分别用紫外分光光度法和荧光光谱法研究了提取物对弹性蛋白酶的抑制作用和荧光猝灭作用.实验结果表明CE1、CE2和虎杖苷对弹性蛋白酶有一定的抑制作用,当浓度为2.0mg/mL时,它们对弹性蛋白酶的抑制率分别为53.56％、61.27％和82.53％.CE1、CE2和虎杖苷对弹性蛋白酶均有明显的内源荧光猝灭作用,猝灭类型为静态猝灭,并分别能与弹性蛋白酶形成1∶1的络合物.根据热力学参数可知,虎杖苷与弹性蛋白酶之间的反应属于自发的放热反应,推测疏水力和氢键可能是虎杖苷与弹性蛋白酶之间的作用力.

摘要： 目的：探讨清热燥湿方对细菌脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)诱导的急性肺损伤大鼠支气管肺泡灌洗液(Bronchoalueolar lavage fluid，BALF)中弹性蛋白酶(Neutrophil elastasc，NE)和肺组织肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)蛋白及其mRNA表达的影响。rn 方法：40只雄性Wistar大鼠随机分为4组：正常对照组、LPS模型组、地塞米松组、清热燥湿方组，每组再分为4小时和8小时两个亚组。分别用地塞米松和清热燥湿方在LPS诱导ALI模型前预处理大鼠。分别采用酶联免疫吸附法、免疫组化法及实时荧光定量PCR检测NE和TNF-α蛋白及其mRNA的表达。rn 结果：两个时相点中，与模型组相比，清热燥湿方组BALF中NE含量均显著降低(P＜0.01)。与模型组相比，4h组中，清热燥湿方组TNF-α蛋白及其mRNA表达均显著降低(P＜0.01)。病理学观察，模型组大鼠肺组织出现大片出血及坏死，清热燥湿方组大鼠肺组织病理损伤程度较模型组减轻。rn 结论：清热燥湿方能减轻内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织损伤，对内毒素致急性肺损伤大鼠有保护作用，其机理可能与其能降低内毒素致急性肺损伤BALF中NE和肺组织TNF-α蛋白及其mRNA的表达有关。

摘要： 本文研究了弹性蛋白酶的酶学性质与酶促反应动力学.研究表明,弹性蛋白酶的作用最适pH值与所用缓冲体系有关,在硼砂-硼酸缓冲体系中,最适pH值为7.8,而在Tris缓冲体系中,最适pH值为8.48;酶的作用最适温度为50°C,当温度高于60°C时,酶活性下降辐度较大,差异极显著.

摘要： 热碱法从牛颈韧带中制取弹性蛋白粉末，以活性染料Rcmazol brmiant bluc R染色制成染色弹性蛋白(Elastin-RBB)。以弹性蛋白-RBB为底物，建立了一种在广谱pH范围內测定皮革用酶制剂的弹性蛋白水解活力的方法。该底物与刚果红弹性蛋白的洗脱情况对比，结果表明：相对刚果红弹性蛋白，弹性蛋白-RBB不易洗脱，稳定性良好，可以在广谱pH条件下测定弹性蛋白酶活力的变化情况。确定了酶活测定条件：反应时间为30min，温度为40°C，弹性蛋白酶活力范围在18-36U。方法的重现性较好，并与弹性蛋白-RBB(来源于牛心管)和刚果红弹性蛋白(Sigma公司)等底物测定的结果趋势基本一致。

摘要： 目的:研究密度感知信号系统在铜绿假单胞菌(PA)致大鼠肺部感染中的作用.方法:应用锐孔喷射装置将PA的藻酸盐混悬液制成PA藻酸盐包裹体凝胶小珠,接种至大鼠肺部,建立大鼠肺部感染模型;比较野生型PA菌株PAO1及QS基因缺失的PA变异株PAO1-JP2大鼠呼吸道感染模型中细菌学、病理学及感染性指标的不同,从而评价两株菌在大鼠呼吸道感染中的致病差异性.用刚果红法测定该两株细菌弹性蛋白酶的活性;用免疫印迹法检测外毒素A的表达,结果:与野生型PA感染组相比,PAO1-JP2感染组大鼠表现出明显降低的死亡率;PAO1-JP2感染组大鼠肺部大体病理变化指数(LIMP)及肺组织大体病理评分、肺部脓肿/肉芽肿的平均直径及肺组织显微病理评分均显著低于PAO1组;PAO1-JP2组肺组织匀浆菌落计数显著地低于PAO1组;体外实验表明,PAO1-JP2株则表现出弹性蛋白酶活性较PAO1显著降低、未能检出有外毒素A表达.结论:应用锐孔喷射装置将PA藻酸盐混悬液制成PA藻酸盐包裹体凝胶小珠,接种至大鼠肺部,可以成功地建立大鼠慢性肺部感染模型;QS系统缺损后由于某些致病因子如弹性蛋白酶、外毒素不能表达,其导致的肺部感染程度有所减低.

摘要： 本实验对弹性蛋白酶诱导形成的动脉瘤模型进行一定改进,建立一种与自然动脉瘤更相近、更适合血流动力学研究的动物实验模型,并通过该模型研究bFGF在血压促囊性动脉瘤增大中的作用及其病理机制。

摘要： 本发明公开了一种基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶及其制备方法和该弹性蛋白酶的医药用途，属于基因工程领域。本发明利用人中性粒细胞裂解液，取含有基因组DNA的上清液，扩增获得中性粒细胞弹性蛋白酶的基因片段ELA2，连接克隆质粒转化大肠杆菌，构建弹性蛋白酶的PET-28a-ELA2表达质粒，在大肠杆菌中表达弹性蛋白酶，收集菌体，超声裂解菌液，镍柱洗脱后获得纯化的弹性蛋白酶。这样设计的本发明，利用弹性蛋白酶的表达基因，获得足量稳定的基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶，为临床检测和试验研究提供弹性蛋白酶原料，并为制备弹性蛋白酶高效抗体提供特异性抗原。

摘要： 本发明提供了用于评估哺乳动物受试者中自身免疫糖尿病的风险和进程的方法。所述方法包括测量受试者中嗜中性粒细胞弹性蛋白酶和蛋白酶3的酶活性和/或蛋白浓度，和将这些蛋白酶的测量水平与各自的参考水平比较。

摘要： 提供一种用于抑制弹性蛋白酶的口服组合物及其应用、弹性蛋白酶抑制剂、以及口服摄入弹性蛋白酶抑制剂的弹性蛋白酶活性抑制方法，所述口服组合物用于使因紫外线、活性氧等外在因素、生物体的代谢功能降低等而产生的生物体组织中的弹性蛋白的降低恢复、改善皮肤的衰老症状等。一种用于抑制弹性蛋白酶的组合物，其特征在于，含有咖啡黄葵(Abelmoschusesculentus)的种子的加工物或来源于咖啡黄葵的种子的特定化合物作为有效成分。

摘要： 本发明涉及弹性蛋白酶活性抑制剂、弹性蛋白酶活性抑制外用剂及弹性蛋白酶活性抑制饮食用组合物，其中，以担子菌X(Basidiomycetes‑X)FERM BP‑10011的干燥粉末或其提取组合物为有效成分。

摘要： 本发明的目的在于，提供可抑制弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成的弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制剂、弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制用组合物、具有弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制作用的物质的筛选方法、抑制弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体的形成的方法、抑制变性弹性蛋白的分解降低的方法及维持正常的弹性蛋白纤维的方法等。本发明涉及一种变性弹性蛋白的分解降低的抑制剂等，其特征在于，含有选自西番莲萃取物、金盏菊萃取物、白芥萃取物、药蜀葵萃取物、白柳萃取物、菖蒲萃取物、桃仁萃取物及大豆萃取物中的1种以上的植物萃取物作为有效成分。

摘要： 本发明公开了一种基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶及其制备方法和该弹性蛋白酶的医药用途，属于基因工程领域。本发明利用人中性粒细胞裂解液，取含有基因组DNA的上清液，扩增获得中性粒细胞弹性蛋白酶的基因片段ELA2，连接克隆质粒转化大肠杆菌，构建弹性蛋白酶的PET-28a-ELA2表达质粒，在大肠杆菌中表达弹性蛋白酶，收集菌体，超声裂解菌液，镍柱洗脱后获得纯化的弹性蛋白酶。这样设计的本发明，利用弹性蛋白酶的表达基因，获得足量稳定的基因重组人中性粒细胞弹性蛋白酶，为临床检测和试验研究提供弹性蛋白酶原料，并为制备弹性蛋白酶高效抗体提供特异性抗原。

摘要： 本发明公开了一种测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的方法，本发明以酪蛋白为底物，分别加入各酶催化，用三氯乙酸终止酶催化反应并与剩余底物相互作用形成缔合微粒使得共振散射强度急剧加强，据此建立了一个测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的方法，酶活力浓度——共振散射校正值曲线算出。本发明的优点在于：与现有的方法相比，本方法将酶催化反应与共振散射光谱结合起来，分析灵敏度高，选择性好，检测限低，操作简便，并且所用试剂无毒安全。

摘要： 本发明的目的在于提供可抑制弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成的弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制剂及弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制用组合物等。本发明涉及一种变性弹性蛋白的分解降低的抑制剂，其特征在于，含有下述通式(I)所表示的化合物及/或其衍生物作为有效成分。(式(I)中，R1～R4相同或不同，为氢原子或羟基，R1为氢原子时R2为羟基，R1为羟基时R2为氢原子，R3为氢原子时R4为羟基，R3为羟基时R4为氢原子。)

摘要： 本发明提供了用于评估哺乳动物受试者中自身免疫糖尿病的风险和进程的方法。所述方法包括测量受试者中嗜中性粒细胞弹性蛋白酶和蛋白酶3的酶活性和/或蛋白浓度，和将这些蛋白酶的测量水平与各自的参考水平比较。

摘要： 本发明提供了人α-1-抗胰凝乳蛋白酶的类似物，其中第358位的氨基酸选自由蛋氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、苏氨酸和谷氨酸组成的组。本发明的α-1-抗胰凝乳蛋白酶是人嗜中性弹性蛋白酶的有效抑制剂。本发明还提供了编码所述类似物的核酸序列、表达载体、转化的宿主细胞，及生产该类似物的方法。