秦皮甲素

摘要： 目的 探讨秦皮甲素对鼻咽癌细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法 不同浓度的秦皮甲素处理人鼻咽癌细胞系HNE-3;并将si-NC、si-circ-ZNF609转染至HNE-3细胞,pcDNA、pcDNA-circ-ZNF609分别转染至HNE-3细胞后用秦皮甲素处理细胞;采用CCK-8法检测细胞增殖;采用试剂盒检测细胞内葡萄糖摄取水平与乳酸水平;采用酶活性试剂盒检测丙酮酸激酶和己糖激酶的活性;Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭;RT-qPCR检测circ-ZNF609的表达量;Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果 秦皮甲素以浓度依赖性的方式降低细胞存活率和MMP-2、MMP-9蛋白水平(P<0.001),降低葡萄糖摄取水平和乳酸水平(P<0.001),降低丙酮酸激酶和己糖激酶的活性(P<0.001),减少迁移及侵袭细胞数(P<0.001);秦皮甲素可降低circ-ZNF609的表达量(P<0.001),且呈剂量依赖性;转染si-circ-ZNF609后细胞存活率和MMP-2、MMP-9蛋白水平降低(P<0.001),葡萄糖摄取水平和乳酸水平降低(P<0.001),丙酮酸激酶和己糖激酶的活性降低(P<0.001),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.001);转染pcDNA-circ-ZNF609能够回复秦皮甲素对HNE-3细胞增殖、糖酵解、迁移及侵袭的抑制作用。结论 秦皮甲素可通过调控circ-ZNF609表达而抑制HNE-3细胞增殖、糖酵解、迁移及侵袭。

摘要： 菊苣酸、绿原酸、秦皮甲素、秦皮乙素、山莴苣素和山莴苣苦素是菊苣中6种具有特殊生物活性的物质,也是菊苣保健功能的重要指标之一。为建立高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)和超高效液相色谱法(ultra high-performance liquid chromatography,UPLC)测定菊苣及其相关产品中6种功能成分含量的分析方法,采用70%的甲醇水溶液超声提取样品中的功能成分,以0.1%的磷酸水溶液和乙腈作为流动相,在HPLC法中使用SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,UPLC法中采用填料粒径小的C18+色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.5μm),流速分别为1.0 mL/min和0.4 mL/min,山莴苣素和山莴苣苦素的检测波长为258 nm,菊苣酸、绿原酸、秦皮甲素和秦皮乙素的检测波长为330 nm。该方法测定结果的相对标准偏差均小于4%,平均回收率在97.0%~103.6%。6种功能成分在HPLC法中的检出限为0.49 mg/kg~2.14 mg/kg,定量限为1.65 mg/kg~7.14 mg/kg,在UPLC法中检出限为1.11 mg/kg~5.24 mg/kg,定量限为3.72 mg/kg~17.50 mg/kg。

摘要： 目的 探讨秦皮甲素对三阴性乳腺癌细胞增殖的影响及其分子机制.方法 分别以28、56、112、225、450和900 μmol/L的秦皮甲素处理三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞24、48和72 h,同时设空白对照组,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力.分别以225、450和900 μmol/L的秦皮甲素处理MDA-MB-231细胞48 h,同时设空白对照组,采用倒置显微镜观察细胞的形态变化,采用克隆形成实验检测克隆形成能力,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞中人类免疫缺陷病毒短转录诱导物连接因子1(FBI-1)、p53和p21 mRNA的表达水平,采用Western blot法检测细胞中FBI-1、p53、p21和Ki67蛋白的表达水平.结果 与空白对照组相比,经28、56、112、225、450和900μmol/L秦皮甲素处理后MDA-MB-231细胞活性均明显降低,并呈浓度依赖性和时间依赖性.225、450和900 μmol/L秦皮甲素处理后,MDA-MB-231细胞皱缩变扁,贴壁差,并出现不完整细胞,脱落,细胞间距变大,其中900 μmol/L秦皮甲素组细胞变化最明显;与空白对照组比较,225、450和900μmol/L秦皮甲素组细胞克隆形成率均降低[分别为(77.18±5.13)％、(65.94±4.98)％和(45.92±3.70)％,均P＜0.01],FBI-1 mRNA及蛋白表达增高(均P＜0.01),p53和p21 mRNA及蛋白表达降低(均P＜0.01),Ki67蛋白表达降低(P＜0.01),且均呈浓度依赖性.结论 秦皮甲素可能通过FBI-1调控细胞周期相关的p53-p21通路,影响DNA复制,从而抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖.

摘要： 目的 研究秦皮甲素对舌鳞癌干细胞体外侵袭能力的影响,并探讨其可能机制.方法 利用无血清培养基培养舌鳞癌细胞株Tca8113,富集高表达醛脱氢酶的舌鳞癌干细胞(ALDH br细胞),采用Western blotting检测舌鳞癌干细胞标志物ABCG2、Nanog的表达;使用秦皮甲素处理ALDH br细胞,并检测细胞体外迁移和侵袭能力,通过扫描电镜观察秦皮甲素对细胞超微结构的影响,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测Rac1/LIMK1/cofilin信号通路相关蛋白的表达.结果 秦皮甲素组舌鳞癌干细胞的迁移和侵袭能力均明显减弱;扫描电镜显示秦皮甲素组细胞明显缩小,未见明显的纤毛和伪足,且细胞间隙变大;不同浓度秦皮甲素组G1期细胞均明显少于空白对照组(P<0.05),S期细胞均明显多于空白对照组(P<0.05);不同浓度秦皮甲素作用48 h的细胞凋亡率均明显高于空白对照组(P<0.05);不同浓度秦皮甲素组舌鳞癌干细胞Rac1及磷酸化PAK1、LIMK1、Cofilin蛋白水平均显著低于空白对照组,并呈浓度依赖性(P<0.05).结论 秦皮甲素可能通过抑制Rac1/LIMK1/cofilin信号通路的激活,发挥抑制舌鳞癌干细胞迁移和侵袭,并促进其凋亡的作用.

摘要： 目的:基于分子对接技术,研究金银花降尿酸的物质基础.方法:通过Autodock4.2分子对接软件,从分子水平虚拟筛选出金银花中与黄嘌呤氧化酶(XOD)结合较好的化合物,并在此基础上,采用10％果糖水诱导大鼠高尿酸血症模型,从整体动物水平验证活性成分的降尿酸药效.结果:分子对接显示,异绿原酸B、异绿原酸A、绿原酸、秦皮甲素与XOD结合能大于阳性药非布司他,结合能分别为-12.16、-9.22、-10.15、-10.92 kcal/moL;整体动物实验显示,造模期间,与正常组相比,第7～21天,模型组大鼠血清尿酸水平显著升高(P0.05),其余各给药组大鼠血清XOD均显著降低(P<0.05).结论:异绿原酸B、秦皮甲素是金银花发挥降尿酸药效的物质基础.

摘要： 目的 探讨秦皮甲素(ESCL)对高糖(HG)诱导肾小球系膜细胞(GMCs)的影响,以及ESCL对糖尿病肾病(DNP)的保护作用与相关炎症机制.方法 选取GMCs建立DNP细胞模型,将细胞分为5组:NG组、HG组、ESCL-L、ESCL-M组和ESCL-H组.观察不同浓度ESCL对HG诱导GMCs总蛋白含量、体积和生存率的影响,并测定各组白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的水平,采用Western blot方法检测其作用是否通过影响蛋白激酶B(PKB)途径而实现.结果 与NG组比较,HG诱导的GMCs数量减少、存活率下降、体积增大、总蛋白含量增加,差异有统计学意义(P<0.05).与HG组相比,经不同浓度ESCL处理后的GMCs数量增多、体积缩小、存活率升高、总蛋白含量降低,差异有统计学意义(P<0.05).与HG组相比,不同浓度ESCL能降低IL-6、TNF-α和SDF-1水平,升高p-Akt并降低Akt表达,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ESCL可能是通过影响p-Akt-Akt信号通路,下调多种相关炎症因子和炎性趋化因子的表达,对DNP具有一定保护作用.

摘要： 目的制备秦皮甲素纳米混悬凝胶剂,以改善秦皮甲素的溶解度、提高其透过磷脂双分子层的能力。方法采用沉淀法和微射流高压均质法,以大豆卵磷脂和泊洛沙姆188为稳定剂,制备秦皮甲素纳米混悬剂,并采用中心复合设计—响应面法对处方加以优化,再以卡波姆940为基质制成凝胶剂,以粒径、多分散系数(polydispersity index,PDI)、Zeta电位、扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)、体外累积释放量等进行表征。结果秦皮甲素纳米混悬凝胶剂的平均粒径为(169.90±3.41)nm,PDI为0.180±0.037,Zeta电位为(-27.80±0.21)mV,体外累积释放量增加。根据差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)和X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)预测秦皮甲素在纳米转换过程由结晶状态转变为无定形状态。结论提高了秦皮甲素的溶解度和跨膜转运能力,有利于在体内发挥更好的治疗作用。

摘要： [目的]制备含有秦皮甲素、光甘草定、白藜芦醇3种药效成分的纳米乳凝胶,并考察制得的纳米乳凝胶对兔耳痤疮模型的治疗效果。[方法]采用滴加水法制备纳米乳,HPLC法检测纳米乳中各有效成分的含量。用涂抹油酸的方法建立兔耳痤疮模型,组织切片确定模型建立成功,将建模成功的新西兰大白兔分为含药纳米乳凝胶组、空白纳米乳凝胶组、阳性对照Va组及模型组,分别给药7天,观察各组痤疮的治疗效果。[结果]成功制备了含有秦皮甲素、白藜芦醇、光甘草定三种药效成分的纳米乳,该纳米乳的平均粒径为(11.5±0.26)nm,PDI为0.195±0.004,Zeta电位为(-11.9±0.1)mV,纳米乳中秦皮甲素、白藜芦醇、光甘草定的包封率分别为(91.53±0.72)%、(92.85±0.37)%与(91.26±1.15)%,直观与HE染色结果显示该凝胶对兔耳痤疮模型有良好的治疗效果。[结论]秦皮甲素、光甘草定及白藜芦醇组分配伍制备的纳米乳凝胶对痤疮有良好的治疗作用。

摘要： 通过试验筛选,确定以D101C大孔树脂为分离和纯化载体,以秦皮甲素的含量为指标,制做秦皮甲素和秦皮苷的动态吸附曲线和洗脱曲线.确定了宿柱白蜡树树皮提取液在D101C型树脂上的最大上样量以秦皮甲素计为14.5mg/ml树脂,最佳洗脱溶媒为30％乙醇,洗脱溶剂用量为2倍树脂体积.经重结晶可得到的质量分数分别为99.2％秦皮甲素和98.5％的秦皮苷.以上研究结果为宿柱白蜡树的开发利用及从秦皮中分离纯化秦皮甲素、秦皮苷等天然产物提供了方法学参考.

摘要： 目的：探讨秦皮甲素在人体肠道菌群及大鼠体内的转化规律。方法：将秦皮甲素与人体肠道菌群厌氧培养0-72h，利用TLC、HPLC测定培养液中代谢产物。以秦皮甲素灌胃12只大鼠(100mg/kg)，利用LC/ESI-MS检测检测6-48h小便中的代谢产物。结果：人体肠道菌群可将秦皮甲素转化为秦皮乙素，以8-12h为转化高峰，但不能进一步转化秦皮乙素。大鼠尿液中发现6种秦皮甲素的代谢产物；其中6-hydroxy-7-sulf-coumarin与6-O-methyl-7-sulf coumarin为新发现的代谢物，其硫酸化基团提示其抗病毒作用。结论：人体肠道菌将秦皮甲素转化为药理活性更强的秦皮乙素，生物赋活作用明显。大鼠可进一步转化秦皮甲素代谢产物，获得更多药效物质。提示肠道菌群与机体对秦皮甲素的协同转化作用。

摘要： 目的：建立九香止泻片中秦皮甲素和秦皮乙素含量的测定方法。rn 方法：采用高效液相色谱法，Thermo C18柱(250mm×4.6mm，5 μm)，以乙腈-0.1％磷酸溶液(12：88)为流动相，流速为1.0mL·min-1,检测波长为334nm，柱温为30°C。rn 结果：秦皮甲素在80～800ng范围内线性关系良好(r=0.9998)，平均回收率为100.1％(n=9)，RSD％为1.89％。秦皮乙素在32.96～329.6ng范围内线性关系良好(r=0.9995)，平均回收率为101.5％(n=9)，RSD％为2.42％。rn 结论:该法简单易行，结果准确可靠，可作为九香止泻片的含量测定方法.

摘要： 秦皮甲素和秦皮乙素是天然药材秦皮的主要成份.秦皮甲素又名七叶苷,具有清热燥湿抗炎、镇痛的作用;秦皮乙素又名七叶亭,具有抗炎作用,临床用作利尿剂.秦皮甲素在碱性条件下可以分解为秦皮乙素和葡萄糖苷.本文利用CE-AD法检测了秦皮甲素水解过程中峰高的变化,进而求得其水解的速率常数,方法简便、直观.

摘要： 本文首先对由秦皮甲素和秦皮乙素组成的人工合成样进行分析,秦皮甲素和秦皮乙素的激发、发射光谱重叠严重.如图1所示,用ATLD方法分辨所得的秦皮甲素和秦皮乙素的激发光谱和发射光谱曲线和其纯光谱曲线比较相似,存在差异的原因可能是由于仪器的噪声较大,实验的误差不具正态分布,造成曲线的波动;也可能由于空白样重现性问题,即其瑞利散射的重现性不好造成影响.从人工合成样实验得到这两种组分的回收率都较高.接近100％,相关系数也都接近1.

摘要： 目的:评价秦皮总香豆素制剂对原发性高尿酸血症降低血尿酸的效应.方法:随机、双盲、安慰剂平行组对照、剂量-反应研究设计,优效性检验.观察高尿酸血症证共96例,其中低剂量组33例,高剂量组33例,对照组30例.结果:秦皮总香豆素治疗2周及4周后,低剂量组、高剂量组与安慰剂组血尿酸变化的差别均无统计学意义.结论:秦皮总香豆素对原发性高尿酸血症没有降低血尿酸效应.

摘要： 目的:评价秦皮总香豆素制剂对原发性高尿酸血症降低血尿酸的效应.方法:随机、双盲、安慰剂平行组对照、剂量-反应研究设计,优效性检验.观察高尿酸血症证共96例,其中低剂量组33例,高剂量组33例,对照组30例.结果:秦皮总香豆素治疗2周及4周后,低剂量组、高剂量组与安慰剂组血尿酸变化的差别均无统计学意义.结论:秦皮总香豆素对原发性高尿酸血症没有降低血尿酸效应.

摘要： 目的:评价秦皮总香豆素制剂对原发性高尿酸血症降低血尿酸的效应.方法:随机、双盲、安慰剂平行组对照、剂量-反应研究设计,优效性检验.观察高尿酸血症证共96例,其中低剂量组33例,高剂量组33例,对照组30例.结果:秦皮总香豆素治疗2周及4周后,低剂量组、高剂量组与安慰剂组血尿酸变化的差别均无统计学意义.结论:秦皮总香豆素对原发性高尿酸血症没有降低血尿酸效应.

摘要： 目的:评价秦皮总香豆素制剂对原发性高尿酸血症降低血尿酸的效应.方法:随机、双盲、安慰剂平行组对照、剂量-反应研究设计,优效性检验.观察高尿酸血症证共96例,其中低剂量组33例,高剂量组33例,对照组30例.结果:秦皮总香豆素治疗2周及4周后,低剂量组、高剂量组与安慰剂组血尿酸变化的差别均无统计学意义.结论:秦皮总香豆素对原发性高尿酸血症没有降低血尿酸效应.

摘要： 目的:评价秦皮总香豆素制剂对原发性高尿酸血症降低血尿酸的效应.方法:随机、双盲、安慰剂平行组对照、剂量-反应研究设计,优效性检验.观察高尿酸血症证共96例,其中低剂量组33例,高剂量组33例,对照组30例.结果:秦皮总香豆素治疗2周及4周后,低剂量组、高剂量组与安慰剂组血尿酸变化的差别均无统计学意义.结论:秦皮总香豆素对原发性高尿酸血症没有降低血尿酸效应.

摘要： 本发明涉及一种高速逆流色谱分离纯化秦皮中秦皮素和秦皮乙素的方法，包括：(1)取秦皮药材粉碎，采用乙醇溶液加热提取，合并滤液，减压旋蒸，得到秦皮粗提物；(2)将步骤(1)获得的秦皮粗提物溶解，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液过滤，减压浓缩分别得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取段；(3)采用高速逆流色谱分离纯化乙酸乙酯萃取段，得到秦皮素和秦皮乙素。本发明克服了传统制备方法操作复杂，样品吸附损失，回收率低等缺点；本发明效率高，操作简单，制备量大，综合成本低，具有很好的推广使用价值。

摘要： 本发明公开了秦皮药材或其提取物中秦皮苷、秦皮甲素、秦皮素、秦皮乙素等4种有效成分的高效毛细管电泳(HPCE)快速定量方法。通过本发明的方法，4种秦皮香豆素在10min内得到良好分离和测定，同时各成分均具有良好的线性关系和回收率。本方法测定结果与HPLC法相比相关性良好，而分析时间则大大缩短，对环境污染显著降低，分析运行成本明显减少，为考察秦皮药材的有效成分分布和不同采收时期含量的变化规律提供了快速高效的分析手段，也可供秦皮提取物内在质量考察及新药开发研究参考。

摘要： 本发明提供了一种从秦皮中提取高纯度秦皮甲素和秦皮苷的方法。采用常规方法粉碎秦皮原料和热回流提取、制备双水相、溶解、萃取、浓缩、除盐、结晶步骤。主要步骤包括：1)制备双水相体系，分离上相和下相后备用，用上相溶剂溶解秦皮提取物；2)离心或过滤上述含有秦皮提取物的溶液后，加入适量下相溶剂，充分搅拌混合，静置，分离得到的上相溶液浓缩，可有效去除秦皮提取物中无机物、单糖、多糖及植物蛋白、叶绿素等固体杂质，提高秦皮甲素和秦皮苷的含量。上述步骤得到的溶液经过常规方法除盐等杂质后，浓缩至合适浓度，可先后得到秦皮甲素和秦皮苷结晶。本发明克服了目前从秦皮中制备秦皮甲素和秦皮苷存在的不易结晶或生产成本高、操作复杂等问题，具有生产设备简单、绿色环保等特点。

摘要： 一种具有抗氧化活性的秦皮甲素硫代二丙酸酯化合物及其合成方法。以秦皮甲素、硫代二丙酸为原料，在有机溶剂下通过酯化反应合成一种结构新颖的秦皮甲素硫代二丙酸酯化合物，合成方法原料易得，步骤简单，适用于工业化生产。该化合物可用于对食品的护色，防止食品氧化变色以及防止因氧化而降低食品的风味和质量，同时对添加在含水油脂或乳化食物中的脂溶性抗氧化剂具有辅助和加强的作用。抗氧化实验结果显示该化合物抗氧化活性优良，可作为新型抗氧化剂在食品、医药、保健品领域进行深入的开发应用。

摘要： 一种具有抗氧化活性的秦皮甲素鲟鱼鱼皮明胶薄膜及其制备方法，属于食品可食用包材领域。制备该抗氧化性秦皮甲素鲟鱼鱼皮明胶薄膜的方法操作简单，步骤少，成本低，可进行工业化生产，经济效益显著。所制得的秦皮甲素鲟鱼鱼皮明胶薄膜抗氧化性能强，可食用且可降解性好，有良好的机械性能，均匀透明，阻气性能比较强，可进一步应用于药品包材。

摘要： 本发明公开了秦皮药材或其提取物中秦皮苷、秦皮甲素、秦皮素、秦皮乙素等4种有效成分的高效毛细管电泳(HPCE)快速定量方法。通过本发明的方法，4种秦皮香豆素在10min内得到良好分离和测定，同时各成分均具有良好的线性关系和回收率。本方法测定结果与HPLC法相比相关性良好，而分析时间则大大缩短，对环境污染显著降低，分析运行成本明显减少，为考察秦皮药材的有效成分分布和不同采收时期含量的变化规律提供了快速高效的分析手段，也可供秦皮提取物内在质量考察及新药开发研究参考。

摘要： 本发明提供了一种从秦皮中提取高纯度秦皮甲素和秦皮苷的方法。采用常规方法粉碎秦皮原料和热回流提取、制备双水相、溶解、萃取、浓缩、除盐、结晶步骤。主要步骤包括：1)制备双水相体系，分离上相和下相后备用，用上相溶剂溶解秦皮提取物；2)离心或过滤上述含有秦皮提取物的溶液后，加入适量下相溶剂，充分搅拌混合，静置，分离得到的上相溶液浓缩，可有效去除秦皮提取物中无机物、单糖、多糖及植物蛋白、叶绿素等固体杂质，提高秦皮甲素和秦皮苷的含量。上述步骤得到的溶液经过常规方法除盐等杂质后，浓缩至合适浓度，可先后得到秦皮甲素和秦皮苷结晶。本发明克服了目前从秦皮中制备秦皮甲素和秦皮苷存在的不易结晶或生产成本高、操作复杂等问题，具有生产设备简单、绿色环保等特点。

摘要： 本发明公开了一种检测秦皮甲素和/或秦皮乙素的直接电化学法，是使用经过AuNPs和PtNPs修饰的碳纤维电极PtNPs/AuNPs/CFME，通过循环伏安法或差分脉冲伏安法对样品进行检测。该方法所用电极具有良好的电化学响应，在有其他杂质干扰，或者二者同时存在的样品中，都能够准确检测其中的一种成分或者二者同时进行检测，检测结果准确，检测限低，可以在复杂的生物基质中提高检测的灵敏度和选择性。

摘要： 本发明公开了一种白头翁散中秦皮甲素、秦皮乙素HPLC定量分析方法，具体包括以下步骤：步骤一：色谱条件的确立；步骤二：提取工艺：精密称取白头翁散，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，密塞，称定重量，超声提取，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液；步骤三：溶液的配制：包括对照品贮备溶液、对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液以及对照药材溶液的制备；步骤四：方法学考察：包括专属性试验、线性关系的考察、精密度试验和准确度试验；步骤五：样品测定：包括自制白头翁散样品含量测定和市售白头翁散含量测定。该发明的技术效果为能够实现对白头翁散中的有效成分秦皮甲素、秦皮乙素进行精确定量。

摘要： 本发明公开了一种秦皮甲素纯化方法，将秦皮根干燥粉碎，回流提取，合并提取液，料渣弃去；将上步所得的提取液浓缩至无醇，浓缩液放置结晶，过滤结晶，母液上大孔树脂，分别用不同醇度的甲醇洗脱，收集不同醇度的洗脱液，浓缩洗脱液，浓缩洗脱液放置结晶，将所有的结晶收集到一起，加新甲醇溶解60°C过硅胶氧化铝柱子，收集过滤液，浓缩放置结晶，过滤结晶，结晶烘干再加纯化水溶解95°C过滤，滤液放置结晶，结晶为秦皮甲素含量可以达到99％。本工艺与已有技术相比，具有收率高、纯度好、生产周期短、工艺过程简单、操作更加安全并且可以得到高纯度的秦皮甲素的优点。