牙龈成纤维细胞

摘要： 目的:探讨大黄素对内毒素(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞HGF-1炎性因子及活性氧/丝裂原活化蛋白激酶/活化蛋白1(ROS/MAPK/AP-1)通路的影响。方法:将HGF-1细胞分为对照组、LPS组(800μg/L)、大黄素组(60μmol/L)、ROS诱导剂组(ROS诱导剂)、大黄素+ROS诱导剂组。细胞经相应分组处理后,检测细胞活力、炎性因子及RPS/MAPK/AP-1通路蛋白表达水平。结果:与对照组相比,LPS组HGF-1细胞活力降低,炎症因子、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)表达水平、ROS含量、ROS/MAPK/AP-1通路相关蛋白表达水平升高,超氧化物歧化酶(SOD)表达水平降低;与LPS组相比,大黄素组HGF-1细胞活力升高,炎症因子、MDA、LDH表达水平、ROS含量、ROS/MAPK/AP-1通路相关蛋白表达水平降低,SOD表达水平显著升高。结论:大黄素可抑制LPS诱导的牙龈成纤维细胞炎性反应可能是通过抑制ROS/MAPK/AP-1通路实现的。

摘要： 目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin⁃3⁃gallate,EGCG)对牙龈卟啉单胞菌(Por⁃phyromonas gingivalis,P.gingivalis)体外抑菌活性及EGCG对P.gingivalis诱导人牙龈成纤维细胞(human gingi⁃val fibroblasts,HGFs)表达基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的抑制作用。方法采用微量稀释法分析EGCG对P.gingivalis浮游菌和生物膜的抑制作用。扫描电镜检测EGCG作用下P.gingivalis生物膜微观结构的变化。特异性人工合成显色多肽底物评价EGCG对牙龈素精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(argi⁃nine gingipain,Rgp)和赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(lysine gingipain,Kgp)蛋白水解活性的影响。P.gingi⁃valis刺激HGFs,与EGCG共培养,ELISA检测MMP⁃1和MMP⁃2的蛋白分泌水平,qRT⁃PCR检测MMP⁃1及MMP⁃2 mRNA的表达。结果EGCG对P.gingivalis浮游菌的最低抑菌浓度为62.5μg/mL,最低杀菌浓度为500μg/mL。EGCG可抑制P.gingivalis生物膜形成,并对成熟生物膜具有清除作用,且抑制成熟生物膜的代谢活性。10μg/mL及50μg/mL EGCG可有效抑制牙龈素的水解活性(P<0.05)。此外,50μg/mL EGCG对P.gingivalis刺激HGFs表达及分泌MMP⁃1、MMP⁃2均有抑制作用(P<0.05)。结论EGCG对P.gingivalis有抑菌作用,且可抑制HGFs表达MMPs。

摘要： 目的 探索二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)生物学活性及炎症因子表达的作用.方法 分别采用活死细胞染色法、荧光染色法、流式细胞术观察DHA对细胞活性、细胞形态、细胞周期的影响;DHA预处理HGFs后,利用牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)或热灭活P.gingivalis刺激细胞,定量PCR和ELISA观察白介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-8、IL-1β基因和蛋白表达的变化;通过定量PCR和Western blot检测DHA对血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)基因和蛋白表达的作用.结果 200μmol/L DHA可降低HGFs的细胞活性,但100μmol/L DHA不影响细胞活性及形态,对细胞周期也无明显影响(P>0.05);DHA可抑制P.gingivalis LPS或热灭活P.gingivalis诱导HGFs表达的IL-6、IL-8、IL-1βmRNA以及IL-6、IL-8蛋白(P<0.05),并可显著上调HGFs表达的HO-1 mRNA及蛋白(P<0.05).结论 DHA可显著抑制HGFs的炎症因子表达,并且不影响其生物学活性,其抗炎作用可能与HO-1上调相关.

摘要： 目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对牙龈卟啉单胞菌(Por-phyromonas gingivalis,P.gingivalis)体外抑菌活性及EGCG对P.gingivalis诱导人牙龈成纤维细胞(human gingi-val fibroblasts,HGFs)表达基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的抑制作用.方法 采用微量稀释法分析EGCG对P.gingivalis浮游菌和生物膜的抑制作用.扫描电镜检测EGCG作用下P.gingivalis生物膜微观结构的变化.特异性人工合成显色多肽底物评价EGCG对牙龈素精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(argi-nine gingipain,Rgp)和赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(lysine gingipain,Kgp)蛋白水解活性的影响.P.gingi-valis刺激HGFs,与EGCG共培养,ELISA检测MMP-1和MMP-2的蛋白分泌水平,qRT-PCR检测MMP-1及MMP-2 mRNA的表达.结果 EGCG对P.gingivalis浮游菌的最低抑菌浓度为62.5μg/mL,最低杀菌浓度为500μg/mL.EGCG可抑制P.gingivalis生物膜形成,并对成熟生物膜具有清除作用,且抑制成熟生物膜的代谢活性.10μg/mL及50μg/mL EGCG可有效抑制牙龈素的水解活性(P<0.05).此外,50μg/mL EGCG对P.gingivalis刺激HGFs表达及分泌MMP-1、MMP-2均有抑制作用(P<0.05).结论 EGCG对P.gingivalis有抑菌作用,且可抑制HGFs表达MMPs.

摘要： 发光二极管(LED)具有高效、光谱纯、安全稳定、环保等优点,已广泛地应用于照明、显示、农业、医疗等领域.牙周病是发生在牙龈、牙周膜等牙周支持组织的慢性炎症类疾病,牙周病患者常需要口服或局部使用抗生素来控制病情,易引发不良反应.本文主要研究LED红光照射对牙龈成纤维细胞抗炎反应的影响,分析在18 J/cm2剂量下,不同光强度的630 nm红光照射对已受脂多糖刺激的牙龈成纤维细胞内ROS和PGE2的产生的影响,发现630 nm LED红光照射可以有效抑制体外培养的牙龈成纤维细胞内炎症反应;同时发现强度为5 mW/cm2的红光对炎症的抑制效果最佳.实验结果希望可以为牙周病临床治疗提供参考.

摘要： 目的 比较不同粗糙度钛表面形貌对人牙龈成纤维细胞(HGF)黏附强度及整合素α5基因表达的影响.方法 应用梯度直径氧化铝颗粒(45μm、125μm及250μm)对相同规格钛片表面进行均匀喷砂及酸蚀处理,获得4组试件并分别标记为Ti组、Ti45组、Ti125组及Ti250组.将原代培养获得的牙龈成纤维细胞接种于四组钛试件中,通过细胞分离率测试各组细胞黏附强度差异,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞整合素α5的基因相对表达水平.结果 喷砂酸蚀后的试件具有四种梯度粗糙度的微米级表面形貌特征,4组试件粗糙度差异有统计学意义(P<0.05).Ti组表面牙龈成纤维细胞黏附强度更高(P<0.05),且整合素α5的基因表达水平更高(P<0.05).结论 控制氧化铝颗粒直径及酸液溶度可以获得不同粗糙度的微米级表面形貌钛试件,低粗糙度的Ti组更有利于牙龈成纤维细胞的黏附生长.

摘要： 目的:观察比格犬相对健康的牙周组织和实验性牙周炎的牙周组织标本中钙结合蛋白的表达分布和细胞定位,探讨其与牙周炎症的关系和可能发挥的作用.方法:结扎法诱导建立比格犬下颌第二磨牙实验性牙周炎模型,对侧同名牙作为健康对照,诱导12周后处死,组织脱矿后常规制作连续切片,免疫组织化学法检测钙结合蛋白在比格犬健康和实验性牙周炎的组织标本中的表达和分布,明确细胞定位;免疫细胞化学法检测体外培养的原代人牙周组织细胞中钙结合蛋白的表达.结果:在健康牙龈组织中,钙结合蛋白表达于牙龈上皮、中性粒细胞,且在结合上皮处呈强阳性表达;牙周炎症病损中,牙龈上皮细胞钙结合蛋白表达水平上调,存在强表达钙结合蛋白的中性粒细胞大量浸润,成纤维样细胞(牙龈结缔组织、牙周膜组织)、骨髓成纤维细胞、微血管内皮细胞存在钙结合蛋白的诱导表达;在体外培养的人牙周膜细胞、人牙龈成纤维细胞中均检测到钙结合蛋白的表达.结论:钙结合蛋白组成性表达于牙龈上皮细胞、中性粒细胞,可能对维持牙周组织内环境稳定和完整性发挥重要作用.牙周炎症诱导牙龈成纤维细胞、牙周膜细胞、骨髓成纤维细胞和血管内皮细胞表达的钙结合蛋白可能在抗微生物感染、促炎症细胞迁移等方面发挥作用.

摘要： 目的 探讨miRNA-146a在牙周组织的表达及其抗炎作用机制.方法 收集小鼠牙龈成纤维细胞和腹腔巨噬细胞,采用Transwell法将2 μg/mL脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激24 h的巨噬细胞与牙龈成纤维细胞共培养.分析LPS诱导对牙龈成纤维细胞和巨噬细胞miRNA-146a表达的影响,以及miRNA-146a对巨噬细胞炎症因子、白介素-1 受体相关激酶1(interleukin-1 receptor associated kinase 1,IRAK1)、TNF受体关联因子6(tnf receptor associated factor 6,TRAF6)表达和c-Jun N端激酶(c-jun n-terminal kinase,JNK)磷酸化水平的影响.采用SPSS 20.0软件包进行数据分析.结果 LPS刺激24h后,牙龈成纤维细胞和巨噬细胞miRNA-146a表达水平显著升高(P＜0.05);LPS刺激巨噬细胞源性上清液可诱导牙龈成纤维细胞mniRNA-146a表达增加(P＜0.05);LPS刺激24h后,miRNA-146a mimic转染的巨噬细胞IL-1β mRNA和MCP-1 mRNA表达水平显著低于转染miRNA-146a count的细胞(P＜0.05),TNF-α mRNA表达水平降低,但差异无统计学意义(P＞0.05);LPS刺激4h后,miRNA-146a mimic转染的巨噬细胞IRAK1和TRAF6表达水平显著低于转染miRNA-146a count的细胞(P＜0.05);LPS刺激90min后,miRNA-146a mimic转染的巨噬细胞p-JNK水平显著低于转染miRNA-146a count的细胞(P＜0.05).结论miRNA-146a可通过下调IRAK1和TRAF6表达水平、减少JNK磷酸化,抑制巨噬细胞源性炎症因子的产生,有可能成为慢性牙周炎的潜在治疗分子.

摘要： 目的；；探讨硝苯地平对牙龈成纤维细胞增殖的作用。rn 方法:用不同浓度硝苯地平作用体外培养的牙龈成纤维细胞并记数。rn 结果:硝苯地平1200μg·L-1组细胞计数明显高于低浓度组。rn 结论: 高浓度硝苯地平有刺激牙龈成纤维细胞增殖的作用。

摘要： 一种人成纤维细胞无血清培养基，包括基础培养基和无血清培养上清浓缩液，还包括如下组分及其浓度：维生素组合物为5‑100ng/mL，葡多酚为50‑200μg/mL，重组人表皮细胞生长因子为1～50ng/mL，重组人碱性成纤维细胞生长因子为50～200ng/mL，重组人转化生长因子β1为1～50ng/mL，重组血小板衍生生长因子‑C为1～10ng/mL，重组人胰岛素样生长因子‑1浓度为1～10ng/mL，β‑巯基乙醇为50～200μM，人血白蛋白浓度为1～100μg/mL，谷胱甘肽浓度为1‑100μg/mL，黄芪多糖为1‑50μg/mL，透明质酸0.1‑5μg/mL，碳酸氢钠为1.0‑3.7g/L。利用无血清培养基替代传统含动物血清的培养基来培养人成纤维细胞，避免了动物源性成分污染以及异种蛋白引起人体免疫反应等不安全因素。

摘要： 本发明公开了一种使用电磁射线治疗各种皮肤病的方法。尤其优选窄带、多色电磁射线发射器，该发射器的主发射波长对应于被对准治疗的哺乳动物组织的峰值吸收波长。还公开了一种局部成分，用于对被对准的组织进行预处理以改变该组织的峰值吸收波长。

摘要： 本发明公开了一种使用电磁射线治疗各种皮肤病的方法。尤其优选窄带、多色电磁射线发射器，该发射器的主发射波长对应于被对准治疗的哺乳动物组织的峰值吸收波长。还公开了一种局部成分，用于对被对准的组织进行预处理以改变该组织的峰值吸收波长。

摘要： 提供以新的作用机制为指标的成纤维细胞I型胶原产生促进剂的筛选方法。通过以神经激活作为指标，能够进行成纤维细胞I型胶原产生促进剂的筛选。

摘要： 本发明涉及对成纤维细胞激活蛋白(FAP)具有特异性的能够与犬、小鼠、和人FAP交叉反应的抗体、结合多肽、和scFv。

摘要： 本发明提供了一种成纤维细胞转化培养基及其应用、成纤维细胞的制备方法，涉及生物技术的技术领域。该成纤维细胞转化培养基中含有血小板活性因子(PRP)，用于诱导脐带间充质干细胞向成纤维细胞转化，可以使脐带间充质干细胞更好的向成纤维细胞转化，缓解了现有技术中存在的外源成纤维细胞获取困难的技术问题。

摘要： 提供制备CD106阳性和/或CD90阳性成纤维细胞的方法。此外，提供G‑CSF阳性成纤维细胞群。一种制备CD106阳性和/或CD90阳性成纤维细胞的方法，所述方法包括在选自于由TNF‑α和IL‑4组成的组中的一种以上的存在下培养成纤维细胞以使CD106阳性和/或CD90阳性成纤维细胞增加的步骤。

摘要： 本发明涉及一种成纤维细胞的培养基及利用其培养成纤维细胞的方法，包括基础培养基、NH

摘要： 本发明提供了一种诱导成纤维细胞分泌抗菌肽的诱导培养基和方法、成纤维细胞及应用，涉及细胞工程领域。该诱导培养基包含基础培养基、血小板裂解液和TGF‑β信号通路抑制剂。该诱导培养基能够激活皮肤成纤维细胞的脂肪分化潜能并在脂肪分化的过程中分泌抗菌肽。使用该诱导培养基诱导成纤维细胞分泌抗菌肽，操作简单，可操控性强，缓解了现有技术中存在的缺乏一种获得能够体外分泌抗菌肽的成纤维细胞的问题。

摘要： 一种人成纤维细胞无血清培养基，包括基础培养基和无血清培养上清浓缩液，还包括如下组分及其浓度：维生素组合物为5‑100ng/mL，葡多酚为50‑200μg/mL，重组人表皮细胞生长因子为1～50ng/mL，重组人碱性成纤维细胞生长因子为50～200ng/mL，重组人转化生长因子β1为1～50ng/mL，重组血小板衍生生长因子‑C为1～10ng/mL，重组人胰岛素样生长因子‑1浓度为1～10ng/mL，β‑巯基乙醇为50～200μM，人血白蛋白浓度为1～100μg/mL，谷胱甘肽浓度为1‑100μg/mL，黄芪多糖为1‑50μg/mL，透明质酸0.1‑5μg/mL，碳酸氢钠为1.0‑3.7g/L。利用无血清培养基替代传统含动物血清的培养基来培养人成纤维细胞，避免了动物源性成分污染以及异种蛋白引起人体免疫反应等不安全因素。