牙周膜细胞

摘要： 背景:正畸牙移动骨重塑的机械力信号转导通路及其调控机制是正畸生物力学和生物学研究的热点。目前正畸牙移动过程中张力侧牙周膜细胞对机械刺激反应的复杂分子信号网络机制尚不太明确。目的:探究正畸牙移动过程中张应力作用下高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein 1,HMGB1)和ERK1/2通路对人牙周膜细胞自噬的影响。方法:选取第3-5代生长状态良好的人牙周膜细胞,施加周期性张应力,利用免疫荧光观察HMGB1在细胞中的分布情况,RT-qPCR及Westernblot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1和HMGB1的表达水平,完成张应力加载后分别提取胞核蛋白和胞浆蛋白,Westernblot分别检测胞核及胞浆中HMGB1蛋白水平。为探究HMGB1通过何种机制参与调控细胞自噬,使用丙酮酸乙酯(HMGB1胞浆抑制剂)进行细胞处理,通过免疫荧光、RT-qPCR和Western blot检测细胞自噬水平。最后,选用PD98059抑制ERK1/2通路,通过RT-qPCR以及Western blot检测自噬水平变化,探讨HMGB1通过ERK1/2通路调控自噬的机制。结果与结论:(1)通过体外张应力加载,诱导了人牙周膜细胞内自噬水平升高,HMGB1的表达增加,同时HMGB1发生了由胞核到胞质的转位;(2)人牙周膜细胞通过HMGB1核质转位机制参与张应力作用下自噬的调控;(3)使用ERK1/2通路抑制剂PD98059显著抑制了张应力作用下HMGB1引起的细胞自噬;(4)结果表明,张应力作用下HMGB1从细胞核转移到细胞质,并通过ERK1/2途径调节自噬,维持人牙周膜细胞的稳态和牙周动态平衡。

摘要： 目的:研究外源性硫化氢(H2S)对牙周炎大鼠正畸牙移动中骨形成和炎症微环境中人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨分化的影响。方法:将48只SD大鼠随机分为对照组、正畸治疗(OT)组、牙周炎正畸治疗(P+OT)组、牙周炎正畸+硫氢化钠(NaHS,H2S供体)(P+OT+NaHS)组,通过显微CT扫描、骨钙素(OCN)免疫组化染色和碱性磷酸酶(ALP)染色观察牙周炎状态下正畸牙张力侧的骨形成,通过实时定量RT-PCR检测牙周炎状态下正畸张力侧牙周组织中成骨相关因子的表达。体外实验分为对照组、张力(T)组、脂多糖(LPS)+T组、LPS+T+NaHS组,通过ALP和茜素红染色观察LPS诱导的hPDLCs在张力下的成骨分化,通过实时定量RT-PCR检测炎症环境中张力作用下hPDLCs成骨相关因子的表达。结果:体内实验发现P+OT+NaHS组张力侧骨组织参数高于P+OT组(P<0.05);与P+OT组相比,P+OT+NaHS组中Col1、Alp和Ocn成骨相关基因及蛋白表达也显著增加(P<0.05)。体外实验表明,与LPS+T组相比,LPS+T+NaHS组的ALP和茜素红染色较深,OD值较高(P<0.05),COL1、ALP、OCN表达均显著增加(P<0.05)。结论:NaHS可维持牙周组织中的骨矿物质密度,且上调受炎症抑制的成骨因子的mRNA表达,促进炎症微环境下正畸力诱导的骨形成。H2S可能在促进牙周炎环境下正畸牙的骨形成方面具有重要意义。

摘要： 牙周炎是发生在牙周组织的慢性炎症,临床主要表现为牙龈红肿、出血、牙周袋溢脓、牙齿松动等[1],严重时牙龈萎缩、牙槽骨吸收、牙齿松动脱落甚至激发全身炎症反应[2]。数据统计我国居民牙周炎发病率高达70%~85%,随着年龄增长,发病率随之增高。目前西医治疗主要以清除菌斑牙石、抑制感染等牙周基础治疗为主。然而牙周基础治疗易导致病情复发,长期应用抗生素易致体内菌群失调,产生耐药性[3]。研究显示中药及复方制剂治疗牙周炎具有抗炎、抑制牙周致病菌、杀灭微生物、抑制牙周膜细胞、控制菌斑、促组织再生、调节骨组织代谢等作用[4]。基于此,笔者自拟补肾固齿清胃汤治疗牙周炎病人,现总结如下。

摘要： 目的:研究三甲基化组蛋白H3赖氨酸K27(histone 3 lysine 27 trimethylation,H3K27me3)的去甲基化酶Jumonji结构域蛋白3(Jumonji domain-containing protein 3,Jmjd3)在人牙周膜细胞炎症反应中的调节作用。方法:分别使用牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,p.g)的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激人牙周膜细胞,建立炎症模型。通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,Q-PCR)和免疫荧光检测Jmjd3的表达情况。后通过沉默Jmjd3,在Q-PCR和Western blot确定沉默效果后对其可能的下游靶基因进行初步筛选。结果:Jmjd3在炎症的人牙周膜细胞中表达会上调。沉默Jmjd3后,炎症介导的白细胞介素-6和白细胞介素-12b的上调受到抑制。结论:Jmjd3参与人牙周膜细胞炎症反应,并能够调节白细胞介素-6、白细胞介素-12b的表达。

摘要： 目的:探讨长链非编码RNA LINC00963是否通过靶向miR-525-5p调控LPS诱导的牙周膜细胞损伤。方法:分离培养牙周膜细胞,分别转染si-LINC00963、miR-525-5p和anti-miR-525-5p,用LPS处理形成炎性损伤细胞模型。采用RT-qPCR、ELISA、流式细胞术、Western blot检测牙周膜细胞中LINC00963、miR-525-5p表达、炎症因子TNF-α、IL-1β水平、细胞凋亡率。双荧光素酶报告实验分析LINC00963对miR-525-5p的靶向调控。结果:转染si-LINC00963或miR-525-5p过表达降低了LPS诱导的牙周膜细胞中TNF-α、IL-1β水平、凋亡率、Bax蛋白水平,提高了Bcl-2蛋白水平(P<0.05)。LINC00963靶向调控miR-525-5p的表达。下调miR-525-5p表达逆转了si-LINC00963表达对LPS诱导的牙周膜细胞损伤的作用。结论:干扰LINC00963通过靶向miR-525-5p,抑制LPS诱导的牙周膜细胞凋亡和炎症因子表达。

摘要： 目的 探究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)预处理牙囊细胞(dental folic cells,DFCs)外泌体(exo?somes,Exos)在不同浓度条件下对牙周炎患者的牙周膜细胞(periodontal ligament cells of periodontitis,p?PDLCs)成骨分化能力的影响,为牙周病的防治提供基础.方法 组织块酶消化法培养DFCs及p?PDLCs,提取经250 ng/mL LPS刺激DFCs 24 h后的Exos,Exos的表征通过透射电镜扫描、粒径分析以及蛋白印记法进行鉴定;通过逆转录?聚合酶链反应(reverse transcription?polymerase chain reaction,RT?PCR)、茜素红染色等方法检测10μg/mL以及100μg/mL浓度的Exos对p?PDLCs成骨向分化能力的影响.结果 LPS预处理的DFCs外泌体(L?Exos)为直径30～100 nm之间的囊泡样结构,高表达CD63和相互作用蛋白X(ALG?2 interacting protein?X,Alix).100μg/mL L?Exos上调p?PDLCs骨膜蛋白、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因的表达(P<0.05);而10μg/mL L?Exos仅上调p?PDLCs的转化生长因子?β1(transforming growth factor?β1,TGF?β1)基因的表达(P<0.01).在成骨诱导7 d后,L?Exos组的矿化结节明显多于对照组(P<0.01),并且100μg/mL L?Exos组的矿化效果更佳(P<0.01).结论 100μg/mL L?Exos较10μg/mL L?Exos更有利于增强p?PDLCs成骨向分化能力.

摘要： 目的探究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)预处理牙囊细胞(dental folic cells,DFCs)外泌体(exo⁃somes,Exos)在不同浓度条件下对牙周炎患者的牙周膜细胞(periodontal ligament cells of periodontitis,p⁃PDLCs)成骨分化能力的影响,为牙周病的防治提供基础。方法组织块酶消化法培养DFCs及p⁃PDLCs,提取经250 ng/mL LPS刺激DFCs 24 h后的Exos,Exos的表征通过透射电镜扫描、粒径分析以及蛋白印记法进行鉴定;通过逆转录⁃聚合酶链反应(reverse transcription⁃polymerase chain reaction,RT⁃PCR)、茜素红染色等方法检测10μg/mL以及100μg/mL浓度的Exos对p⁃PDLCs成骨向分化能力的影响。结果LPS预处理的DFCs外泌体(L⁃Exos)为直径30~100 nm之间的囊泡样结构,高表达CD63和相互作用蛋白X(ALG⁃2 interacting protein⁃X,Alix)。100μg/mL L⁃Exos上调p⁃PDLCs骨膜蛋白、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因的表达(P<0.05);而10μg/mL L⁃Exos仅上调p⁃PDLCs的转化生长因子⁃β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)基因的表达(P<0.01)。在成骨诱导7 d后,L⁃Exos组的矿化结节明显多于对照组(P<0.01),并且100μg/mL L⁃Exos组的矿化效果更佳(P<0.01)。结论100μg/mL L⁃Exos较10μg/mL L⁃Exos更有利于增强p⁃PDLCs成骨向分化能力。

摘要： 目的:探讨miR-34a靶向STAT1基因调控牙周膜细胞增殖及凋亡的分子机制.方法:将PDLCs细胞分成Pm、Py、Pz三组,Pz组(PDLCs细胞不做任何处理),Pm组(转染miR-34a模拟物)、Py组(转染miR-34a抑制物),RT-PCR检测STAT1、miR-34a水平,Westernblot法检测STAT1蛋白表达,流式细胞仪、MTT法分别检测PDLCs细胞凋亡、增殖情况.结果:RT-PCR检测STAT1、miR-34a水平结果显示,与Pz组对比,Py组STAT1、miR-34a水平有显著下降,Pm组STAT1、miR-34a水平最高,Pz组STAT1、miR-34a水平其次,Py组STAT1、miR-34a水平最低(均P<0.05).Westernblot法检测STAT1蛋白发现,与Pz组对比,Py组STAT1蛋白较Pm组有显著下降,Pm组STAT1蛋白表达最高,Pz组蛋白表达其次,Py组STAT1蛋白表达最低(均P<0.05).流式细胞术检测发现,与Pz组对比,Pm组PDLCs细胞凋亡明显增加,与Pm组对比,Py组细胞凋亡明显降低(均P<0.05),Pm组细胞凋亡呈三组最高,Pz组其次,Py组最低.MTT检测结果显示:Pz组PDLCs细胞在24h、48h、72h时均缓慢增长,Py组PDLCs细胞24h、48h增殖变化较平稳,72h时增殖速度明显加快,Pm组受miR-34a模拟物影响,PDLCs细胞数量增殖缓慢(均P<0.05).结论:miR-34a低表达能够抑制PDLCs细胞凋亡,促进其生长,这一作用机制可能与降低STAT1蛋白表达有关.

摘要： 目的:观察比格犬相对健康的牙周组织和实验性牙周炎的牙周组织标本中钙结合蛋白的表达分布和细胞定位,探讨其与牙周炎症的关系和可能发挥的作用.方法:结扎法诱导建立比格犬下颌第二磨牙实验性牙周炎模型,对侧同名牙作为健康对照,诱导12周后处死,组织脱矿后常规制作连续切片,免疫组织化学法检测钙结合蛋白在比格犬健康和实验性牙周炎的组织标本中的表达和分布,明确细胞定位;免疫细胞化学法检测体外培养的原代人牙周组织细胞中钙结合蛋白的表达.结果:在健康牙龈组织中,钙结合蛋白表达于牙龈上皮、中性粒细胞,且在结合上皮处呈强阳性表达;牙周炎症病损中,牙龈上皮细胞钙结合蛋白表达水平上调,存在强表达钙结合蛋白的中性粒细胞大量浸润,成纤维样细胞(牙龈结缔组织、牙周膜组织)、骨髓成纤维细胞、微血管内皮细胞存在钙结合蛋白的诱导表达;在体外培养的人牙周膜细胞、人牙龈成纤维细胞中均检测到钙结合蛋白的表达.结论:钙结合蛋白组成性表达于牙龈上皮细胞、中性粒细胞,可能对维持牙周组织内环境稳定和完整性发挥重要作用.牙周炎症诱导牙龈成纤维细胞、牙周膜细胞、骨髓成纤维细胞和血管内皮细胞表达的钙结合蛋白可能在抗微生物感染、促炎症细胞迁移等方面发挥作用.

摘要： 目的 探究Rho蛋白激酶抑制剂在细胞外基质(ECM)介导的牙周膜细胞(PDL细胞)增殖、迁移、愈合和成骨分化过程中的作用.方法 收集西北妇女儿童医院口腔科的5名牙周组织健康提供者的牙周膜组织样本,通过消化获取PDL细胞,并分为4组:无ECM包被的PDL细胞对照组(PDL组),ECM包被的PDL细胞组(PDL+ECM组),ECM包被的PDL细胞含盐酸土根碱(EmD)组(PDL+ECM+EmD组),无ECM包被的PDL细胞含EmD组(PDL+EmD组).通过细胞增殖检测(MTS)分析PDL细胞活力及增殖能力;通过ALP试剂盒测定PDL细胞中碱性磷酸酶(ALP)的活性;通过实时RT-PCR测定ALP的mRNA表达水平;免疫荧光和蛋白质印迹实验分析PDL细胞的Ⅰ型胶原和纤连蛋白的免疫原性及表达水平;Transwell实验和伤口愈合实验分析PDL细胞迁移和愈合能力.结果 MTS检测结果表明,10μmol/L EmD对PDL细胞的活力无显著影响.与PDL组相比,PDL+EmD组PDL细胞中ALP的mRNA表达水平和活性均显著降低(P<0.05).免疫荧光分析结果表明,与PDL组相比,PDL+EmD组细胞出现更细的肌动蛋白丝,Procollagen-Ⅰ和Fibronectin蛋白的免疫反应性和表达水平均显著降低(P<0.05).与PDL组相比,PDL+ECM组ALP活性、细胞增殖、迁移及愈合能力显著升高(P<0.01).与PDL+ECM组相比,PDL+ECM+EmD组ALP阳性菌落及活性、细胞增殖、迁移及愈合能力显著降低(P<0.05).结论 牙周ECM可能通过依赖于Rho蛋白激酶(ROCK)并影响ECM相关基因表达的机制来介导PDL细胞的成骨分化,并保证细胞正常的增殖及愈合.

摘要： 牙周炎是以牙周组织包括牙龈、牙骨质、牙周膜、牙槽骨的破坏为特征的慢性炎症，是引起成人失牙的首要原因。过氧化物酶体增殖物激活型受体 (Peroxisomeproliferator activated receptors, PPARs)是一类配体依赖型转录因子，属II型核受体超家族，参与炎症及骨代谢调控。PPARγ可抑制炎症进程，但是对成骨的影响存在争议，对炎症状态下牙周膜细胞的成骨调控仍不清楚。本研究的目的是探究PPARγ对炎症状态下人牙周膜细胞分化的影响及调控作用。

摘要： 验证高糖对牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)脂多糖(LPS)致人牙周膜细胞(hPDLCs)炎症的增强作用,探讨组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET7在高糖和P.gingivalis LPS致hPDLCs胞炎症中的作用,探索治疗合并有糖尿病的牙周炎可能的药物靶点.

摘要： 在正畸治疗过程中，牙移动的速度由正畸力引起牙周组织改建的速度来决定。牙周膜细胞(PDLCs)是正畸力的直接效应细胞，其在牵张力下的成骨特性和影响因素是正畸牙周改建机理研究的热点。临床上成人正畸矫治比青少年牙移动慢，疗程长，且早期更易引发牙周炎症。本项目拟通过体外模拟正畸张力侧人PDLCs的受力环境，比较牵张力下成人与青少年PDLCs成骨分化和炎症响应的差异，为正畸牙周重建机理研究提供新思路，并为临床成人正畸患者制定合理的矫治方案以获得理想的牙周重建提供理论依据。

摘要： 研究低强度脉冲超声(LIPUS)是否通过TWIST1-SDF1信号通路促进牙周膜细胞(PDLCs)迁移,从而参与牙周组织再生.

摘要： 目的：探讨芦荟提取物对脂多糖(LPS)诱导人牙周膜细胞(hPDLCs)炎症的作用. 方法：将hPDLCs分为对照组,模型组(1μg/ml LPS),芦荟提取物低、中、高剂量组(0.05,0.1,0.2mg/ml);采用MTT法测定各组细胞存活率;ELISA法检测细胞上清中IL-6含量;用免疫细胞化学染色检测TLR4的表达情况：免疫荧光染色检测NF-κB-p65的核转情况. 结果：与对照组相比,各组细胞存活率没有显著性差异,模型组上清液中的IL-6含量显著升高,TLR4表达及NF-κB-p65的核转均明显上调;与模型组相比,芦荟提取物低中高剂量组均能剂量依赖性抑制细胞上清液中IL-6的分泌,TLR4表达及NF-κB-p65的核转均下调. 结论：芦荟提取物能有效抑制人牙周膜细胞的炎症反应,其机制与TLR4/NF-κB-p65信号通路有关.

摘要： 目的:本研究通过体外细胞实验,观察牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)主要毒力因子牙龈素K(Lys-gingipain,Kgp)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)增殖、凋亡的影响,以及凋亡过程中相关蛋白的表达和活化情况.rn 方法:原代培养牙周膜细胞,MTT法检测Kgp对hPDLCs增殖的影响;流式细胞仪检测Kgp对hPDLCs凋亡率情况;Western-blot和caspase-3活性试剂盒检测caspase-3表达及活化.rn 结果:与对照组相比,不同浓度Kgp对hPDLCs的增殖抑制率随着Kgp浓度的增加而升高.浓度为12.5、25ug/ml的Kgp,hPDLCs凋亡率升高(P＜0.01).浓度为25ug/ml的Kgp作用于hPDLCs24h、48h后,凋亡率升高(P＜0.01).rn 结论:P.gingivalis毒力因子Kgp在诱导凋亡方面可能发挥了重要作用.细胞凋亡参与了慢性牙周炎的发病过程,可能通过caspase依赖型途径.

摘要： 目的：比较1α,25-羟基维生素D3对幼稚和衰老的牙周膜细胞Ⅰ型白介素1受体mRNA表达的影响,以探讨增龄因素影响牙槽骨改建的可能机制.方法：小鼠骨髓细胞和成骨细胞共存培养,检测VD3刺激下破骨细胞的生成;半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠成骨细胞和骨髓细胞、第3～5代和第17～20代人牙周膜细胞在VD3刺激下IL-1RⅠmRNA的表达.结果：VD3能刺激小鼠骨髓细胞和成骨细胞共存培养系形成不规则形态的多核巨细胞,抗酒石酸酸性磷酸酶活性染色阳性;受VD3刺激共存培养系中成骨细胞表达IL-1RⅠmRNA.VD3能刺激幼稚人牙周膜细胞表达IL-1RⅠmRNA,其与甘油醛-3-磷酸脱氢酶的表达比为41％,而VD3刺激下衰老的人牙周膜细胞依旧不表达IL-1RⅠ.结论：衰老的牙周膜细胞在骨代谢调节因子VD3刺激下仍不表达IL-1RⅠ,推测是成年牙周组织改建迟缓的可能机制.

摘要： 目的：通过研究釉基质蛋白(EMP)对人牙周膜细胞增殖及牙骨质相关蛋白基因表达的影响,探讨EMP促进牙骨质形成的机制.方法：分别用质量浓度为0(对照组)、50、100、200、300mg/L的EMP作用于培养的人牙周膜细胞(PDLC),在培养的第1、3、5、7天用甲基噻唑基四唑法检测细胞增殖活性;在培养的第7天用荧光实时定量反转录聚合酶链反应法检测各组细胞牙骨质附着蛋白(CAP)和牙骨质蛋白23(CP-23)mRNA表达量.结果：EMP质量浓度在50～200mg/L范围内可以促进人PDLC增殖,在300mg/L时抑制细胞增殖;EMP质量浓度为100、200mg/L时可以显著促进CAP mRNA和CP-23mRNA的表达，与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05),且以200mg/L EMP的促表达效果最佳.结论：EMP在一定浓度范围内能促进人PDLC增殖及CAP和CP-23基因表达,提示EMP可能通过促进细胞增殖和牙骨质相关蛋白的表达促进牙骨质的形成.

摘要： 牙周膜细胞是牙周组织的主要组成部分，具有一系列重要的功能，在牙周组织的正常代谢和修复再生过程中起重要作用。在牙周致病菌的刺激下，牙周膜细胞生长受到抑制，不能行使正常功能。因此研究牙周致病菌刺激前后牙周膜细胞基因表达谱对了解牙周致病菌的致病机制、寻找防治措施具有重要意义。但以往的研究多限于一个或几个基因，难以从基因的整体表达谱全面地观察牙周膜细胞对细菌刺激的反应模式，近年来发展起来的基因芯片(gene chip)技术打破了这种限制。

摘要： 通过激活与追踪BMP-Smad蛋白信号通路,探讨低强度脉冲超声促进人类牙周膜细胞成骨分化效应的分子机制.

摘要： 本发明提供了一种HS90A作为鉴别牙髓干细胞和牙周膜干细胞的标志物的应用、鉴别二者的试剂盒及方法，涉及生物技术领域，本发明的发明人通过实验发现，HS90A基因和/或HS90A蛋白在牙髓干细胞和牙周膜干细胞中的表达存在差异，其在牙髓干细胞中显著高表达，在牙周膜干细胞中显著低表达，因此可以作为两种干细胞的特殊标志物用于细胞的区分，具有较高的灵敏度和特异性。

摘要： 本发明涉及干细胞培养技术领域，尤其涉及一种细胞培养液及其应用和诱导牙周膜干细胞向神经样细胞分化的方法。本发明提供的培养液中包括基础培养液、FBS、B27、EGF、bFGF和NGF。本发明提供的培养液能够提高牙周膜干细胞向神经样细胞分化的比例并缩短分化的时间。实验表明，以本发明提供的培养液诱导牙周膜干细胞，12小时后即可见部分细胞贴壁并有短小突起伸出，3天后可见大部分细胞贴壁生长，形态不规则，突起不断增粗和伸长，1周后分化成形态不一的、分散成片的多突起星状细胞和神经元样细胞，突起互相交织成网状。

摘要： 本发明涉及干细胞培养技术领域，尤其涉及一种细胞培养液及其应用和诱导牙周膜干细胞向心肌样细胞分化的方法。本发明提供的培养液中包括基础培养液、FBS、5‑aza和Ang‑II。本发明提供的培养液能够提高牙周膜干细胞向心肌样细胞分化的分化率并缩短分化的时间。对各组细胞的分化率进行计算，结果显示实验组细胞的分化率显著高于对照组，(p<0.01)。

摘要： 本发明提供了一种HS90A作为鉴别牙髓干细胞和牙周膜干细胞的标志物的应用、鉴别二者的试剂盒及方法，涉及生物技术领域，本发明的发明人通过实验发现，HS90A基因和/或HS90A蛋白在牙髓干细胞和牙周膜干细胞中的表达存在差异，其在牙髓干细胞中显著高表达，在牙周膜干细胞中显著低表达，因此可以作为两种干细胞的特殊标志物用于细胞的区分，具有较高的灵敏度和特异性。

摘要： 本发明公开了一种基于单细胞测序筛选牙周膜特异性干细胞新亚群的方法及其应用，筛选到的新亚群特异性表达FBLN2及膜蛋白CADM3，同时公开了牙周膜特异性干细胞新亚群用于制备牙周病治疗的药物的应用。本发明通过单细胞测序、获得牙周膜特异性干细胞亚群，并通过标记基因进行体外流式分选及细胞亚群性能的验证；本发明筛选的细胞亚群利于寻找牙周稳态失衡的干预靶点，为新药物的开发创造可能；以牙周膜特异性干细胞为种子细胞形成类器官，为医疗器械新材料的研究和验证提供科学依据；进一步探索牙周膜干细胞自体/异体移植可行性，为治疗牙周病提供重塑新思路。

摘要： 本发明主要涉及一种细胞表面标记特异性富集的人牙周膜干细胞微胶囊及其制备方法，所述微胶囊包括微球内核及外壳。发明还涉及其制备方法、生物学效力检测方法。本发明也涉及将通过本发明制备的细胞微胶囊用于再生医学的用途。

摘要： 本发明提供了一种特异的人牙周膜干细胞亚群及其富集方法。本方法包含牙组织样品的采集运输，牙周膜干细胞的分离，及表达CD18干细胞的富集。本发明还提供了一种富集的牙周膜干细胞亚群生物学特性的检测方法。包括与干性相关的集落形成能力检测，增殖能力检测，体外成骨分化能力检测，体内成骨分化能力检测。

摘要： 本发明提供一种补肾益气活血组合物及其在人牙周膜干细胞增殖分化中的应用，属于医药和分子生物学技术领域。本发明研究发现补肾益气活血方能有效提升体外培养的人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的能力，且效果较当归和补骨脂单味药更佳。这一结果从细胞生物学和牙周组织工程的角度为中医药相关组方药应用于慢性牙周炎的临床治疗提供了实验支撑，对补肾益气活血方剂用于临床上治疗慢性牙周炎具有指导意义，具有良好的实际应用之价值。

摘要： 一种基于细胞外基质的调控牙周膜干细胞成骨分化的方法，包括以下步骤：1）骨髓细胞BMCs和牙周膜细胞PDLCs的分离与鉴定；2）制备脱细胞骨髓来源的细胞外基质B‑dECM和脱细胞牙周膜来源的细胞外基质P‑dECM；3）对步骤2）获得的脱细胞骨髓来源的细胞外基质B‑dECM和脱细胞牙周膜来源的细胞外基质P‑dECM，用Ⅳ型胶原α2链COL4A2对组织培养板TCP和脱细胞牙周膜来源的细胞外基质P‑dECM进行包被；4）分别采用小干扰RNA和慢病毒转染对Ⅳ型胶原α2链COL4A2下调和上调；具有精准调控ECM中COL4A2的特点。

摘要： 本发明提供一种应用基因芯片分析牙周膜干细胞向成骨细胞分化的方法，制备牙周膜干细胞得单细胞悬液，从单细胞悬液中分选对数生长期的牙周膜细胞，并采用STRO-1-PE标记，经FACS流式细胞仪分选收集STRO-1阳性细胞即为所需的牙周膜干细胞，接着克隆培养收集到的牙周膜干细胞，待其生长至80％的汇集度时，其中的胰酶也被消化后，即得种子液，将种子液接种在6孔板或者是24孔板中，24小时后改用诱导液培养。本发明通过利用基因芯片分析牙周炎治疗情况，对于检测PDLSC向成骨细胞分化过程中miRNA表达谱的变化，具有深远的意义。