核蛋白质类

摘要： 目的 探究超声背向散射积分(IBS)技术及沉默信息调节因子2相关酶1(Sirt1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)联合诊断老年肝炎性脂肪肝的价值及意义。方法 选取2016年11月至2018年11月我院收治的142例老年肝炎性脂肪肝患者作为研究组,包含96例乙型肝炎脂肪肝,46例非乙型肝炎脂肪肝,同期纳入134名健康体检者作为正常对照组。比较2组及研究组不同疾病类型、不同脂肪肝程度近场/远场IBS参数[图像平均强度(AII)、图像强度标准差(SDI)、图像峰-峰强度(PPI)]、血清Sirt1、NLRP3水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析上述指标单一及联合诊断老年肝炎性脂肪肝价值,采用Pearson分析上述指标与肝功能指标[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白、总胆红素(TBIL)]相关性,采用Logistic回归模型分析老年肝炎性脂肪肝的影响因素。结果 研究组近场/远场AII、SDI、PPI及血清NLRP3高于对照组,血清Sirt1水平低于对照组(P中度患者>轻度患者,血清Sirt1水平<中度患者<轻度患者(P<0.05);AII、SDI、PPI、血清Sirt1、NLRP3联合诊断老年肝炎性脂肪肝的曲线下面积(AUC)为0.884,大于各指标单一诊断的AUC,各指标联合的最佳诊断敏感度及特异度分别为77%、90%;老年肝炎性脂肪肝患者AII、SDI、PPI与血清NLRP3间呈正相关,与血清Sirt1间呈负相关(P<0.05);Logistic回归分析显示,控制了年龄、性别、合并症、吸烟及饮酒情况等因素后,肝功能指标、IBS参数、血清Sirt1、NLRP3均是老年肝炎性脂肪肝发生的影响因素(P<0.05)。结论 IBS参数、血清Sirt1、NLRP3联合诊断老年肝炎性脂肪肝的价值较高,有助于临床评估患者肝功能、脂肪肝程度,可指导临床诊断和治疗老年肝炎性脂肪肝。

摘要： 目的探讨核糖体合成调控因子1(RRS1)对乳腺癌细胞阿霉素抗性的影响。方法通过Western blot方法检测MCF-7和耐阿霉素MCF-7/ADR细胞中RRS1的表达;构建携带绿色荧光蛋白的shRRS1慢病毒和阴性对照慢病毒,分别感染MCF-7/ADR细胞(实验组与对照组),荧光显微镜下观察慢病毒转染效率,采用Wes-tern blot检测实验组和对照组细胞中RRS1的表达量,确定沉默效率;采用CCK8法检测实验组和对照组细胞对阿霉素的敏感性差异;采用流式细胞术分析实验组和对照组细胞内阿霉素累积量的差异;采用平板克隆实验、流式细胞术检测实验组和对照组细胞增殖和凋亡情况。结果MCF-7/ADR细胞中RRS1的表达量明显高于MCF-7细胞(t=13.05,P<0.05);与对照组相比,实验组细胞中RRS1蛋白表达水平明显降低,阿霉素对MCF-7/ADR细胞的IC50值明显降低,细胞内阿霉素的累积量明显升高,细胞增殖能力明显降低,凋亡率明显升高(t=2.87~122.40,P<0.05)。结论RRS1在耐阿霉素乳腺癌MCF-7/ADR细胞中高表达,沉默RRS1表达可显著抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡,降低MCF-7/ADR细胞对阿霉素的抗性。

摘要： 目的 探讨核糖体合成调控因子1(RRS1)对乳腺癌细胞阿霉素抗性的影响.方法 通过Western blot方法检测MCF-7和耐阿霉素MCF-7/ADR细胞中RRS1的表达;构建携带绿色荧光蛋白的shRRS1慢病毒和阴性对照慢病毒,分别感染MCF-7/ADR细胞(实验组与对照组),荧光显微镜下观察慢病毒转染效率,采用Wes-tern blot检测实验组和对照组细胞中RRS1的表达量,确定沉默效率;采用CCK8法检测实验组和对照组细胞对阿霉素的敏感性差异;采用流式细胞术分析实验组和对照组细胞内阿霉素累积量的差异;采用平板克隆实验、流式细胞术检测实验组和对照组细胞增殖和凋亡情况.结果 MCF-7/ADR细胞中RRS1的表达量明显高于MCF-7细胞(t=13.05,P＜0.05);与对照组相比,实验组细胞中RRS1蛋白表达水平明显降低,阿霉素对MCF-7/ADR细胞的IC50值明显降低,细胞内阿霉素的累积量明显升高,细胞增殖能力明显降低,凋亡率明显升高(t=2.87～122.40,P＜0.05).结论 RRS1在耐阿霉素乳腺癌MCF-7/ADR细胞中高表达,沉默RRS1表达可显著抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡,降低MCF-7/ADR细胞对阿霉素的抗性.

摘要： 目的 评价沉默信息调节因子1(SIRT1)在电针减轻大鼠脑卒中后中枢性痛(CPSP)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的关系.方法 SPF级健康雄性SD大鼠50只,6周龄,体重180～220 g,采用随机数字表法分为5组(n=10):假手术组(Sham组)、CPSP组、CPSP+假电针组(SEA组)、CPSP+电针组(EA组)和CPSP+电针+SIRT1抑制剂EX527组(EX527组).除Sham组外,其余大鼠采用丘脑腹后外侧核内注射Ⅳ型胶原酶制备CPSP模型.于模型制备成功后24 h时EA组电针(2/15 Hz,30 min/d,持续5 d)刺激大鼠内关、人中和三阴交穴;SEA组电针刺激内关、人中和三阴交穴旁开5 mm处,其他处理同EA组;EX527组于电针刺激前30 min腹腔注射SIRT1抑制剂EX527 5 mg/kg,其他处理同EA组.于模型制备前1 d(T0)和模型制备后1、3和5 d(T1～3)时测定热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足反应阈(MWT),随后处死大鼠取脑组织,采用West-ern blot法检测SIRT1、NLRP3、IL-18和IL-1β的表达.结果 与Sham组比较,CPSP组、SEA组、EA组和EX527组大鼠T1～3时TWL和MWT降低,脑组织SIRT1表达下调,NLRP3、IL-18和IL-1β表达上调(P＜0.05);与CPSP组比较,EA组大鼠T1～3时TWL和MWT升高,脑组织SIRT1表达上调,NL-RP3、IL-18和IL-1β表达下调(P＜0.05),SEA组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05);与EA组比较,EX527组大鼠T1～3时TWL和MWT降低,脑组织SIRT1表达下调,NLRP3、IL-18和IL-1β表达上调(P＜0.05).结论 SIRT1参与了电针减轻大鼠CPSP的过程,与抑制NLRP3表达有关.

摘要： 目的探究核糖体合成调节因子1(RRS1)在1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^+)诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡过程中表达的变化及意义。方法以含有0、100、200、400μmol/L MPP^+的培养基培养SH-SY5Y细胞48 h,用CCK-8法检测各组细胞的增殖活力,用JC-1法检测细胞线粒体膜电位,采用Annexin V-APC/PI试剂盒检测细胞凋亡率,用Western blot检测细胞抑癌因子P53、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)与RRS1蛋白的表达。构建RRS1慢病毒过表达载体(Lv-RRS1)和慢病毒阴性对照载体,对细胞进行慢病毒转染后,用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测慢病毒转染效率;对转染细胞以400μmol/L MPP^+处理48 h,用CCK-8检测细胞增殖活力,用Annexin V-APC/PI试剂盒检测细胞凋亡率,用Western blot检测细胞RRS1、P53、Bcl-2和Bax蛋白的相对表达情况。结果细胞经MPP^+处理培养,SH-SY5Y细胞增殖活力、线粒体膜电位显著降低(F=95.63、69.90,P<0.05);细胞凋亡率明显升高(F=258.49,P<0.01);P53蛋白和Bax蛋白表达明显升高(F=40.47、20.78,P<0.05);RRS1蛋白和Bcl-2蛋白表达明显降低(F=28.44、42.43,P<0.05)。慢病毒转染后,与对照组相比较,Lv-RRS1组RRS1 mRNA和蛋白表达量均明显增加(t=15.59、6.05,P<0.01);对转染的细胞以400μmol/L MPP^+处理48 h后,与对照组相比较,Lv-RRS1组细胞增殖活力显著升高(t=4.76,P<0.01);细胞凋亡率明显降低(t=5.80,P<0.01);RRS1蛋白和Bcl-2蛋白表达明显升高(t=12.41、3.14,P<0.05);P53蛋白和Bax蛋白表达显著降低(t=5.20、4.77,P<0.05)。结论RRS1在MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡中低表达,RRS1可能通过影响凋亡相关因子P53、Bax和Bcl-2蛋白的表达参与MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡。

摘要： Objective To investigate expression of nucleolar protein 14(NOP14) and CD31 in pancreatic cancer mouse model and its correlation with tumor progression.Methods Clinicopathological data of 5 patients with pathologically confirmed pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC) and hepatic metastasis between January 2013 and December 2015 was collected in Department of General Surgery,Peking Union Medical College Hospital.Immunohistochemistry staining was employed to detect the expression of NOP14 in matched primary PDAC and relevant metastasis.Pancreatic cancer cells with NOP14 stably knocked down were established by transfecting lentivirus with NOP14 targeted silencing RNA.The inhibition efficacy was detected by quantitative real time PCR and western blot.Microvascular density(MVD) in pancreatic cancer transplantation mouse model was determined by CD31 immunohistochemistry staining analysis and correlated with NOP14 expression and tumor progression.Results NOP14 had a significant higher expression in liver metastasis than primary pancreatic adenocarcinoma (2.09±0.45 vs.1.31±0.27,P=0.028).NOP14 was knocked down 86 percent on mRNA level determined by qPCR and 78 percents on protein level detected by western blot.MVD was significantly decreased in NOP14-inhibited tumor from both pancreatic cancer cells subcutaneously and orthotopically grafted tumor mouse model with the value of 61.40±13.85 vs.85.53±14.59 (P=0.041) and 38.33±10.91 vs.59.33±15.37(P =0.037),respectively.Besides, MVD was positively associated with tumor volume(r=0.842,P<0.01) and metastasis (r=0.726, P=0.008).Conclusion NOP14 presents higher expression in hepatic metastasis of pancreatic adenocarcinoma and might promote tumor progression by increasing microvascular density.%目的 探讨胰腺癌小鼠模型中核仁蛋白14(NOP14)和CD31的表达水平与肿瘤进展的相关性.方法 收集2013年1月至2015年12月经北京协和医院病理学检查证实伴肝转移的5例胰腺导管腺癌患者的临床病理资料,通过免疫组化方法检测胰腺癌原发肿瘤和相应肝转移灶中NOP14的表达水平;利用慢病毒表达载体感染胰腺癌细胞株,构建NOP14稳定下调的细胞株,实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测NOP14抑制率;利用胰腺癌小鼠模型分析NOP14敲低组(n=8)和对照组(n=8)肿瘤组织中CD31标记的肿瘤微血管密度(MVD)及其与肿瘤大小和转移的关系.采用Mann Whitney U检验对组间数据进行统计学分析,应用Pearson 或Spearman相关系数分析变量间的相关性.结果 NOP14在胰腺癌肝转移灶中的表达水平较原发肿瘤明显升高(2.09±0.45比1.31±0.27,P=0.028);实时荧光定量PCR和免疫印迹法证实胰腺癌稳定转染细胞株中NOP14的表达水平分别下调了86%和78%;胰腺癌小鼠皮下和原位移植模型中NOP14敲低组MVD值(61.40±13.85和38.33±10.91)低于对照组(85.53±14.59和59.33±15.37)(P =0.041、P =0.037),且与肿瘤大小(r=0.842,P<0.01)和转移(r=0.726,P=0.008)呈正相关.结论 NOP14在胰腺癌肝转移灶中表达上调,可能通过促进肿瘤微血管形成导致胰腺癌的生长和转移.

摘要： 目的 探讨雌激素孕激素受体阳性与雌激素受体(FR)阳性孕激素受体(PR)阴性乳腺癌的临床病理特征及预后因素分析.方法 收集2012年1月至2015年12月山东省肿瘤医院收治的398例女性乳腺癌患者的临床资料,分析病理学特征.应用x2检验比较不同组的差异;应用COX回归模型分析疾病进展相关凶素.结果 低ER水平(HR 5.59,95％ CI:2.42～ 12.95,P ＜0.001)、低PR水半(HR0.19,95％ CI:0.04 ～0.90,P ＜0.05)和高Ki-67增殖指数(HR 5.84,95％CI:1.91～17.85,P＜0.05)的患者复发率更高.ER +/PR+患者与ER +/PR-患者在肿瘤体积(P ＜0.001)、病理分期(P＜0.001)、Ki-67水平(≥20％)(P＜0.001)、Her-2阳性表达(P＜0.05)等方面比较,差异有统计学意义.结论 ER +/PR-乳腺肿瘤比ElR +/PR+乳腺肿瘤具有更强的侵袭性.

摘要： 本发明涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，更具体地涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，所述方法包括使用一种固定有包含溶胶-凝胶材料与蛋白质的混合物的位点的蛋白质芯片。根据本发明，蛋白质芯片可以容易地用溶胶-凝胶材料在96孔板中制造，从而可以容易地从天然物质的文库中筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的抑制剂。

摘要： 由下述氟树脂形成了与蛋白质或包含蛋白质的组合物接触的表面的容器及用于制造蛋白质或包含蛋白质的组合物的器材具有显著的低蛋白质吸附性，其中，所述氟树脂为选自四氟乙烯‑六氟丙烯系共聚物及四氟乙烯‑全氟烷基乙烯基醚系共聚物中的至少1种氟树脂，并且，所述氟树脂的熔点为320°C以下，所述氟树脂中的相对于每1×10

摘要： 本发明提供能减小使用了特异性地结合的物质的测定中的由肝型脂肪酸结合蛋白质引起的测定值的变动幅度的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂、评价该制剂的方法、制作肝型脂肪酸结合蛋白质的校准曲线的方法、以及定量该蛋白质的方法。一种用使用了用10mM的氧化剂在25°C下进行1小时的氧化处理的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂的测定值与使用了未进行上述氧化处理的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂的测定值的比表示的氧化变动系数设定为1.4以下的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂、用于该制剂的肝型脂肪酸结合蛋白质、编码该蛋白质的DNA、由该DNA转化得到的细胞、该蛋白质的制造方法、评价该制剂的方法、抑制使用该制剂的测定中的测定值的变动幅度的方法、制作该蛋白质的校准曲线的方法、以及定量该蛋白质的方法。

摘要： 本发明提供一类能够携带生物活性蛋白分子穿透细胞膜的非肽类多胍有机小分子或其药学上可接受的盐，所述非肽类多胍有机小分子具有式I所示的结构：

摘要： 本发明提供一种糖化蛋白质测定试剂，其至少包含Trinder’s试剂、4‑氨基安替比林、蛋白酶、蛋白酶的稳定剂以及亚铁氰化物，其中，至少Trinder’s试剂包含在含有Trinder’s试剂的部分组合物中，至少4‑氨基安替比林包含在含有4‑氨基安替比林的部分组合物中，蛋白酶的稳定剂是使亚铁氰化物与该蛋白酶的稳定剂混合后的氧化还原电位大于0.058V的稳定剂，氧化还原电位是包含蛋白酶的稳定剂和亚铁氰化物、不包含糖化蛋白质的反应体系的氧化还原电位。

摘要： 本发明提供能够以优异的安全性将蛋白质导入到细胞中的蛋白质导入方法。通过使目标蛋白质承载在由粘土矿物构成的蛋白质导入用载体上并将其添加到细胞中，可以将所述目标蛋白质导入到所述细胞内中。所述粘土矿物优选为层状粘土矿物，可以使用蒙脱石、蛭石、伊利石等。

摘要： 本发明涉及与粉碎或切断洋葱等植物时发生催泪成分的生成有关的表现出将1－丙烯次磺酸转变为催泪成分的作用的蛋白质或多肽、编码该蛋白质或多肽的DNA(催泪成分合成酶基因)、使用用于属于葱属植物的催泪成分合成酶基因分离的引物以及使用该引物分离该基因的方法、含有上述DNA的重组载体、包含含有上述DNA的重组载体的转化体、对用含有上述DNA的重组载体转化的宿主细胞进行培养制造具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的方法、具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽、以及具有抑制具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的mRNA翻译的功能的核酸分子。

摘要： 本发明涉及一种与蛋白质类药用活性成分结合使用的配体，所述配体由牛磺胆酸和甘氨胆酸组成。本发明还提供一种口服蛋白质类药物制剂，具体为以所述配体与蛋白质类药用活性成分形成的结合物为中心、外侧包裹纳米脂质体的微粒；所述纳米脂质体包裹层可以增加对核心结构的保护，且当活性成分为胰岛素时可为胰岛素质粒接触受体时产生自磷酸化提供磷离子。本发明提供的以胰岛素为活性成分的口服蛋白质类药物制剂不但能调节血糖、血脂，主要的是能防治II型糖尿病的并发症；其生物利用度高于注射胰岛素，不会引起低血糖，更不会至低血糖引起脑死亡；采用口服方式，给药方便，给药后血糖平稳，对机体的内环境的稳定更有益，具有良好且广泛的应用前景。

摘要： 本文公开了至少一种低蛋白质酸奶组合物，其包括：至少一种乳制品成分、乳制品替代物成分或其混合物；以及调质剂，所述调质剂包括抑制淀粉和非粒状酶促脱支蜡质马铃薯淀粉，其中所述低蛋白质酸奶包括小于2.9％的乳制品蛋白质含量；并且公开了至少一种用于制备这些低蛋白质酸奶组合物的方法。本文还公开了一种调质剂，其包括抑制淀粉和非粒状酶促脱支蜡质马铃薯淀粉。

摘要： 本发明涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，更具体地涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，所述方法包括使用一种固定有包含溶胶-凝胶材料与蛋白质的混合物的位点的蛋白质芯片。根据本发明，蛋白质芯片可以容易地用溶胶-凝胶材料在96孔板中制造，从而可以容易地从天然物质的文库中筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的抑制剂。