曲格列酮

摘要： 目的 探讨曲格列酮对低氧状态下肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的作用机制.方法 人PASMCs在37°C5％CO2+94％N2+1％O2条件下分别加入20μmol/L的曲格列酮培养72 h.通过聚合酶链反应(PCR)法测定PASMCs内PTEN、Caspase-3和Caspase-8基因表达;Western blot法测定PTEN,p-Akt,Akt蛋白的表达.结果 曲格列酮抑制低氧条件下PASMCs的增殖;曲格列酮组PASMCs PTEN mRNA和蛋白表达水平升高,曲格列酮增加了PASMCs的Caspase-3及Caspase-8活性;PTEN抑制剂bpV(HOpic)和PPARγ抑制剂GW9662可通过下调PTEN基因表达而逆转曲格列酮对PASMCs的增殖抑制作用.结论 曲格列酮可增强PTEN的表达,促进低氧条件下PASMCs的凋亡,同时通过PPARγ途径增强PTEN表达.

摘要： 目的 探讨肝爽颗粒主要成分柚皮苷是否具有预防药物性肝损伤的功能以及保护作用的机制.方法 选取具有肝毒性的药物(曲格列酮和双氯芬酸钠)制造体外模型,预防性地应用不同浓度的柚皮苷,通过半数抑制率(IC50)、转氨酶水平、乳酸脱氢酶水平、Caspase3基因水平评价HL-7702细胞的损伤情况.评价不同浓度的柚皮苷对细胞色素P450(CYP450)家族基因的改变情况.结果 柚皮苷能够明显升高曲格列酮和双氯芬酸钠的IC50,具有降低转氨酶、Caspase3表达的作用.但这种改善具有剂量依赖性,其中100μmol/L柚皮苷的保护作用最明显,1μmol/L柚皮苷和10μmol/L柚皮苷的保护作用不明显.比较CYP代谢酶基因改变情况发现,100μmol/L柚皮苷能明显抑制其表达(P<0.05),1μmol/L柚皮苷和10μmol/L柚皮苷的抑制作用不明显.结论 肝爽颗粒主要成分柚皮苷能够通过抑制CYP450酶的功能,从而起到预防作用.

摘要： 目的 分离与鉴定肝癌细胞HepG2中CD133标记的肝癌干细胞(LCSC),初步探讨曲格列酮(Tro)对HepG2及CD133+LCSC的细胞毒性差异.方法 利用流式细胞仪分选纯化HepG2中的CD133+和CD133细胞,采用悬浮微球形成法、平板克隆形成法、Transwell侵袭和迁移实验检测HepG2、CD133+和CD133细胞的自我更新能力;BALB/c裸鼠体内成瘤实验检测HepG2和CD133 LCSC细胞的成瘤能力;流式细胞术检测HepG2、CD133+ LCSC细胞周期,MTT法测定其对索菲替尼的耐药性;MTT法检测Tro对HepG2、CD133+ LCSC的毒性情况,全自动生化分析仪测定其对细胞上清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)和总蛋白(TP)水平的影响,荧光法检测Tro对细胞CYP450总活性和ROS水平的影响.结果 CD133标记的CSC在HepG2中占(0.72±0.05)％,CD133+细胞分选后纯度为98.7％;CD133+细胞微球形成能力、克隆形成能力以及Transwell迁移与侵袭能力、肿瘤形成能力明显高于亲本(P＜0.05、0.01);CD133+细胞群大多处于G0/G1期,G2/M期未阻滞,并且对索菲替尼表现较大耐药性(P＜0.05、0.01);Tro处理12、24、48、72 h后,CD133+ LCSC半数抑制浓度(IC50)显著低于HepG2 (P＜0.05、0.01);80 μmol/LTro处理48 h时,LCSC上清AST、TP、LDH、ALB、BUN生化指标不同程度升高,CYP450总活性和ROS水平出现明显抑制(P＜0.05、0.01).结论 成功筛选和鉴定具有高增殖能力的CD133+ HepG2 CSC,其在Tro引起肝细胞毒性方面较HepG2细胞更敏感,细胞毒性差异显著,为Tro靶向CD133+ LCSC的细胞毒性研究提供新思路.%Objective To isolate and identify CD133 liver cancer stem cells (LCSC) in HepG2 cells,and to investigate the cytotoxicity oftroglitazone (Tro) on HepG2 and its liver stem cells.Methods The CD133+ and CD133 population in the HepG2 cell line were sorted by flow cytometry.Cells of CD133 sphere formation,colony formation assay,Transwell invasion migration assay,and BALB/c nude mice in vivo tumor formation were used to identify proliferative capacity of HepG2 cells and CD133 LCSC.Flow cytometry was used to detect the cell cycle of HepG2 and CD133+ LCSC,and LCSC drug resistance to sorafenlb was evaluated by MTT.The toxicity of Tro to CD133 LCSC was detected by MTT assay,automatic biochemical analyzer was used to detect the contents ofAST,LDH,TP,ALB and BUN changes in cell supematants after administration,and the effect of Tro on the total activity of CYP450 and level of ROS was examined by fluorescence method to compare the cytotoxicity differences.Results CD133 expression in LCSC were found to be (0.72 ± 0.05) ％ in HepG2 and 98.7％ in CD133+ cells.The ability of sphere formation,colony formation and Transwell invasion migration of CD 133+ cells were higher than those of parental cells (P ＜ 0.05 and 0.01).Compared with HepG2 cell,the ability of CD133+ cell tumor formation was significantly increased.At the same time,CD133+ cells were mostly in Go/G1 phase,G2/M phase was not blocked,and the drug resistance of sorafenlb was higher than HepG2 cell (P ＜ 0.05 and 0.01).IC50 of CD 133+ cell was significantly lower than that of HepG2 after treated with Tro for 12,24,48 and 72 h (P ＜ 0.01).TP,LDH,ALB and BUN in LCSC treated with 80 μmol/L Tro for 48 h increased significantly,and the total activity of CYP450 and ROS were significantly inhibited (P ＜ 0.05 and 0.01).Conclusion Highly proliferative CD133+ HepG2 tumor stem cells was successfully isolated and identified,which was more sensitive than HepG2 cells in liver cytotoxicity induced by Tro,showing significant cytotoxicity difference.This study provides a new idea for the study of CD 133+ HepG2 cells specific toxicity.

摘要： 目的：探讨曲格列酮对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导肾小球系膜细胞增殖的影响及机制。方法将体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分为空白组，TNF-α组、TNF-α+曲格列酮组，MTT法检测各组系膜细胞的增殖情况，ELISA法测定各组系膜细胞上清液中细胞间粘附分子1(ICAM-1)蛋白表达，免疫组化法测定各组系膜细胞核因子κB (NF-κB)的表达情况。结果 TNFα组肾小球系膜细胞6 h、12 h、24 h和48 h增殖的OD值分别为(0.198±0.025)、(0.241±0.028)、(0.286±0.030)、(0.267±0.042)，空白组分别为(0.159±0.021)、(0.161±0.019)、(0.164±0.023)、(0.170±0.020)，TTNF-α+曲格列酮组分别为(0.187±0.023)、(0.184±0.017)、(0.172±0.018)、(0.168±0.026)，TNF-α组肾小球系膜细胞增殖的OD值明显高于空白组，TNF-α+曲格列酮组明显低于TNF-α组，差异均有统计学意义(P<0.05)；TNF-α组肾小球系膜细胞NF-κB蛋白阳性率为(62.34±10.26)%，空白组为(29.97±4.88)%，TNF-α+曲格列酮组为(45.67±8.36)%，TNF-α组肾小球系膜细胞NF-κB蛋白阳性率明显高于空白组，而TNF-α+曲格列酮组则明显低于TNF a组，高于空白组，差异均有统计学意义(P<0.05)；TNF-α组肾小球系膜细胞ICAM-1蛋白浓度为(967.8±77.4) pg/mL，空白组为(571.2±69.6) pg/mL，TNFα+曲格列酮组为(787.5±81.2) pg/mL，TNF-α组肾小球系膜细胞ICAM-1蛋白浓度明显高于空白组，TNF-α+曲格列酮组明显低于TNF-α组，但仍高于空白组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α能够促进肾小球系膜细胞增殖，促进NF-κB蛋白和ICAM-1蛋白表达，曲格列酮能够抑制肾小球系膜细胞增殖，降低NF-κB蛋白和ICAM-1蛋白表达。%Objective To explore the effect of troglitazone on TNF-αinduced mesangial cells and its mecha-nism. Methods The cultured mouse glomerular mesangial cells were divided into the blank group, TNF-α group, TNF-α+troglitazone group. The proliferation of mesangial cells was detected by MTT assay. The expression of intercel-lular adhesion molecule-1 (ICAM-1) protein in the supernatants of mesangial cells was determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The expression of nuclear factor-κB (NF-κB) in mesangial cells of different groups was determined by immunohistochemistry. Results The proliferation OD values of the glomerular mesangial cells in the TNF-αgroup at 6 hours, 12 hours, 24 hours and 48 hours were (0.198 ± 0.025), (0.241 ± 0.028), (0.286 ± 0.030), and (0.267 ± 0.042), respectively; the proliferation OD values of the glomerular mesangial cells in the blank group were (0.159±0.021), (0.161±0.019), (0.164±0.023) and (0.170±0.020), respectively;the proliferation OD values of the glo-merular mesangial cells in the TNF-α+ troglitazone group were (0.187 ± 0.023), (0.184 ± 0.017), (0.172 ± 0.018) and (0.168±0.026), respectively. The proliferation OD values of the glomerular mesangial cells of the TNF-αgroup were sig-nificantly higher than those of the blank group, and the OD values of glomerular mesangial cell proliferation of the TNF-α+troglitazone group were significantly lower than those of the TNF-αgroup, with statistically significant differ-ences (P<0.05). The positive rate of NF-κB protein in glomerular mesangial cells in the TNF-αgroup, blank group and TNF-α+troglitazone group were respectively (62.34±10.26)%, (29.97±4.88)%and (45.67±8.36)%;the positive rate of NF-κB protein in glomerular mesangial cells in the TNF-αgroup was significantly higher than that in the blank group;the positive rate of NF-κB protein in glomerular mesangial cells in the TNF-α+troglitazone group was significantly lower than that in TNF-αgroup and significantly higher than that in blank group, and all of the above differences were statistically significant (P<0.05). The concentration of ICAM-1 protein in glomerular mesangial cells in the TNF-αgroup, blank group and TNF-α + troglitazone group were respectively (967.8 ± 77.4) pg/mL, (571.2 ± 69.6) pg/mL and (787.5±81.2) pg/mL;the concentration of ICAM-1 protein in glomerular mesangial cells in the TNF-αgroup was signifi-cantly higher than that in blank group;the concentration of ICAM-1 protein in glomerular mesangial cells in the TNF-α+troglitazone group was significantly lower than that in TNF-α group and significantly higher than that in blank group,and all of the above differences were statistically significant (P<0.05). Conclusion TNF-αcan promote the prolifera-tion of glomerular mesangial cells and the expression of NF-κB protein and ICAM-1 protein, while troglitazone can in-hibit the proliferation of glomerular mesangial cells and decrease the expression of NF-κB protein and ICAM-1 protein.

摘要： Objective To investigate the effects of Skp2 overexpression on the sensitivity of troglitazone (TRG) in breast cancer cells and to devote to develop a novel drug for increasing the patient survival rate and eventually reaching the cure goal .Methods The transcription activities of PPARγ were analyzed on peroxisome proliferators response element(PPRE) luciferase reporter .The flow cytometry analysis and CCK‐8 assay were adopted to study that overexpression of Skp2 was associated with resistance to TRG‐mediated inhibition growth and apoptosis of breast cancer cells .Results Our study found that overexpression of Skp2 inhibi‐ted the transcriptional activity of the endogenous PPARγ and resisted to TRG‐mediated inhibition growth and apoptosis of breast cancer cells .Conclusion Overexpressed Skp2 breast cancer cells is able to be resistant to TRG‐induced sensitivity of breast cancer cells .Furthermore down‐regulating Skp2 will significantly enhance the growth inhibition of TRG on breast cancer cells .%目的：本文主要研究过表达S期激酶相关蛋白2（Skp2）能否影响曲格列酮（TRG）对乳腺癌细胞的敏感性，致力于发展一种新的药物来提高患者的生存率，最终达到治愈的目的。方法荧光报告基因方法观察过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）γ型转录活性的变化；流式细胞和CCK‐8法研究Skp2过表达影响 TRG对乳腺癌细胞生长和凋亡的改变。结果 Skp2过表达能抑制PPARγ的活性，耐受TRG对乳腺癌细胞生长和凋亡的影响。结论 Skp2过表达的乳腺癌细胞能耐受TRG的敏感性，因此通过下调Skp2可能会增强TRG对乳腺癌细胞的生长抑制。

摘要： 目的 探讨曲格列酮能否通过上调PPARy抑制炎症状态下小胶质细胞iNOS表达,以及对细胞的保护作用.方法 将BV2细胞分为4组,即对照组(Control组)、LPS组、LPS+曲格列酮组(LPS+ Troglitazone组,LPS+ Tro组)和LPS+曲格列酮+GW9662组(LPS+Troglitazone+GW9662组,LPS+ Tro+ GW组),使用MTT法在0、24h对BV2细胞活性进行观察,并在干预24小时后使用RT-PCR法和western blot法对BV2细胞iNOS和PPARγ mRNA和蛋白的表达水平进行检测.结果 在给予LPS干预24小时后BV2细胞活性明显降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05);LPS+Tro组细胞活性较LPS组和LPS+ Tro+ GW组更高,差异均有统计学意义(均P＜0.05);同时LPS组和LPS+ Tro+ GW组细胞活性差异未见统计学意义(P＞0.05).在给予LPS干预24小时后BV2细胞iNOS mRNA和蛋白的表达水平较Control组细胞明显增加,PPARγ mRNA和蛋白的表达水平较Control组细胞明显下降,差异均有统计学意义(均P＜0.05);同时LPS+ Tro组细胞一氧化氮合成酶(iNOS)表达水平较LPS组和LPS+ Tro+ GW组降低,而PPARγ表达水平较LPS组和LPS+ Tro+ GW组升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05);同时LPS组和LPS+Tro+GW组细胞间iNOS和PPARγ表达水平差异未见统计学意义(均P＞0.05).结论 本实验结果表明,在LPS诱导的炎症状态下,曲格列酮可以通过促进PPARγ的表达下调BV2细胞iNOS的合成,并对BV2细胞具有保护作用.

摘要： 目的 观察曲格列酮对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响,并探讨S期激酶相关蛋白2(s-phase kinase associated protein 2,skp2)、p27在此过程中的作用. 方法 曲格列酮(0、100、200、400 μg/ml)处理人宫颈癌SiHa细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性,膜联蛋白-Ⅴ(Annexin Ⅴ)-FITC法检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期;倒置显微镜观察SiHa细胞形态学变化;构建skp2表达质粒并转染SiHa细胞,Western blot检测蛋白的表达. 结果 曲格列酮明显抑制宫颈癌SiHa细胞增殖,且呈明显时间及浓度依赖性(P＜0.05);曲格列酮增加SiHa细胞周期G1/S期阻滞,细胞凋亡率未见显著性变化(P＞0.05);曲格列酮上调SiHa细胞p27表达,下调skp2表达;过表达skp2可明显抑制曲格列酮对p27表达的升高作用,同时抵消曲格列酮对细胞周期抑制的作用. 结论 曲格列酮通过调节细胞周期而非凋亡途径,抑制宫颈癌SiHa细胞增殖,其机制可能与调节skp2、p27蛋白表达有关.%Objective To evaluate the effect and mechanisms of troglitazone on proliferation and apoptosis of SiHa cells.Methods SiHa cells were treated with a series of concentration of troglitazone (0,100,200,400 μg/ml).The inhibition rate of cell proliferation was detected at different periods by MTT method,and cell-cycle was analyzed by flow cytometry.S-phase kinase associated protein 2 (skp2) plasmid was transfected into SiHa cells and the effect of troglitazone on the expression of p27 and skp2 in SiHa cells was detected by Western blot analysis.Results Troglitazone inhibited the proliferation of SiHa cells at a time-and dose-dependent manner(P＜0.05),while showing no effect on apoptosis in SiHa cells (P＞0.05).Troglitazone attenuated skp2 expression,promoted p27 expression.Up-regulation of the expression of p27 and the inhibiting effect of the proliferation on SiHa cells by troglitazone were inhibited by over-expression of skp2.Conclusions By regulating the cell cycle rather than apoptotic pathways,troglitazone inhibits the proliferation of cervical cancer SiHa cell and its mechanism may be related to regulating skp2,p27 protein expression.

摘要： Objective To investigate the effect of troglitazone, a proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) agonist, on the expressions of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and matrix metalloproteainse-9 (MMP-9) and cell proliferation in HeLa cells. Methods MTT assay was used to measure the cell viability at different time points (0, 24, 48 and 72 h) after exposure to troglitazone. RT-PCR and Western blotting were employed to detect the mRNA and protein expressions of ICAM-1, MMP-9 and PPARγin the cells. Electrophoretic mobility shift assay (EMSA) was performed to assess the changes in DNA binding activity of PPARγ. Results The viability of HeLa cells were time-dependently inhibited by troglitazone, which also significantly reduced the mRNA and protein expressions of ICAM-1 and MMP-9 and increased PPARγexpression. The effects of troglitazone in inhibiting the cell viability and reducing ICAM-1 and MMP-9 expressions were antagonized by the application of the PPARγantagonist GW9662. The result of EMSA also showed significantly increased DNA binding activity of PPARγin the cells exposed to troglitazone. Conclusions The PPARγagonist troglitazone can inhibit the expression of ICAM-1 and MMP-9 in HeLa cells by up-regulating PPARγ.%目的：探讨PPARγ激动剂曲格列酮对于宫颈癌HeLa细胞增殖及ICAM-1和MMP-9表达的影响。方法使用曲格列酮和/或GW9662（PPARγ拮抗剂）对HeLa细胞进行干预。在不同时间点（0、24、48和72 h）使用MTT法对HeLa细胞活性进行测定。在干预48 h后，使用RT-PCR和western blot对HeLa细胞ICAM-1、MMP-9和PPARγmRNA和蛋白进行测定。并使用EMSA对HeLa细胞PPARγDNA结合能力（核转录水平）进行分析。结果 GW9662组、曲格列酮+GW9662组与空白对照组相比较各时间点细胞活性未见显著统计学差异（P>0.05）；但曲格列酮组与空白对照组相比较细胞活性呈时间依赖性降低，差异有显著统计学意义（P均0.05）。曲格列酮干预后HeLa细胞PPARγmRNA和蛋白表达水平和PPARγ核转位水平均显著增加，差异有显著统计学意义（P均<0.05）。结论本实验表明曲格列酮可以通过促进PPARγ表达和PPARγ的核转录水平下调HeLa细胞ICAM-1和MMP-9的合成，抑制HeLa细胞的增殖。

摘要： 目的 初步探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)激动剂对体外培养海马神经元轴突生长的作用及其机制.方法 通过向原代培养的胎鼠海马神经元中加入PPARγ激动剂曲格列酮(TGZ)及其抑制剂GW-9662 (GW)以及JNK特异性抑制剂SP 600125 (SP),以研究PPARγ激动剂对海马神经元轴突生长的作用,以及JNK通路的活化在此过程中的作用.结果 TGZ活化PPARγ后能明显促进海马神经元轴突的延长(P＜0.05).PPARr拮抗剂GW消除了TGZ的促轴突生长作用.PPARγ活化后激活了JNK通路,且JNK特异性抑制剂SP能明显阻断TGZ的促轴突生长作用(P＜0.05),表明TGZ诱导的促轴突生长作用依赖JNK通路的激活.结论 PPARr激动剂能促进海马神经元轴突的生长,且此作用依赖JNK通路的激活.

摘要： 目的：通过观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂干预对转化生长因子(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞细胞外基质合成的影响，探讨其抗肾间质纤维化的潜在作用。方法：将不同浓度曲格列酮预处理肾小管上皮细胞(HK-2细胞)，随后予以5mg/L TGF-β1刺激24h，利用LDH释放试剂盒检测曲格列酮对细胞的毒性作用，同时通过定量荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)方法观察PPARγ激动剂曲格列酮干预下TGF-β1诱导的HK-2细胞细胞外基质(EcM)主要成份Ⅰ型胶原(Col I)和纤维连接蛋白(FN)mRNA合成的量效关系。结果：在曲格列酬浓度10uM以下时，曲格列酮对HK-2细胞无显著的毒性作用。因此进一步分别以曲格列酮1μmol·L-1、2.5 μmol·L-1、5μmol·L-1、10 μmol·L-1预处理2h，再加入5mg/L TGF-β1作用24h后收获HK-2细胞，提取细胞总RNA，Real-time PCR检测细胞I型胶原(colI)和纤维连接蛋白(FN)mRNA表达量。单独曲格列酮作用下并没有增加HK-2细胞ECM的表达，而单纯TGF-β1刺激下Col I和FN表达明显上调，曲格列酮提前干预下 FN及Col T表达下降，曲格列酮在2.5 μmol·L-1浓度起可显著下调FNmRNA表达；而仅在5 μM以上浓度组可显著下调Ⅰ型胶原mRNA表达。结论：在mRNA水平PPARγ激动剂干预能抑制对TGF-β1诱导的HK-2细胞ECM的增加，具有拮抗肾间质纤维化的潜在作用。

摘要： 目的：通过观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisomeproliferator-activated receptor γ，PPARγ)激动剂干预对转化生长因子(transforming growthfactor-β1，TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞细胞外基质合成的影响，探讨其抗肾间质纤维化的潜在作用。方法：将不同浓度曲格列酮预处理肾小管上皮细胞(HK-2细胞)，随后予以.5mg/L，TGF-β1刺激24h，利用LDH释放试剂盒检测曲格列酮对细胞的毒性作用，同时通过定量荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)方法观察PPARy激动剂曲格列酮干预下’TGF-β1诱导的HK-2细胞细胞外基质(extracellular matrix，ECM)主要成份I型胶原(collagen type I，Col I)和纤维连接蛋白(fibronectin，FN)mRNA合成的晕效关系。结果：在曲格列酮浓度10uM以下时，曲格列酮对HK-2细胞无显著的毒性作用。因此进一步分别以曲格列酮1 μmol?L-1、2.5 μ mol·L-1、5 μ mol·L-1、10 μmol·L-1预处理2h，再加入5mg/L TGF-β1作用24h后收获HK.2细胞，提取细胞总RNA，Real-time PCR检测细胞I型胶原(Col I)和纤维连接蛋白(FN)mRNA表达量。单独曲格列酮作用下并没有增加HK-2细胞ECM的表达，而单纯TGF-β1刺激下Col I和FN表达明显上调，曲格列酮提前干预下FN及Col I表达下降，曲格列酮在2.5βmol·L-1浓度起可显著下调FN mRNA表达(p<0.05)；而仅在5μM以上浓度组可显著下调I型胶原mRNA表达(p<0.05 )。结论：在mRNA水平PPARγ激动剂干预能抑制对TGF-β1诱导的HK-2细胞ECM的增加，具有拮抗肾间质纤维化的潜在作用。

摘要： 目的：通过观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisomeproliferator-activated receptor γ，PPARγ)激动剂干预对转化生长因子(transforming growthfactor-β1，TCF-β1)诱导的肾小管上皮细胞细胞外基质合成的影响，探讨其抗肾间质纤维化的潜在作用。方法：将不同浓度曲格列酮预处理肾小管上皮细胞(HK-2细胞)，随后予以5 mg·L-1TGF·B1刺激24 h，利用LDH释放试剂盒检测曲格列酮对细胞的毒性作用，同时通过定量荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)方法，观察PPARγ激动剂曲格列酮干预下TGF-β1诱导的HK-2细胞外基质(extracellular matrix，ECM)主要成分I型胶原(collagentype I，Col I)和纤维连接蛋白(fibronectin，FN)mRNA合成的量效关系。结果：在曲格列酮浓度10μM以下时，曲格列酮对HK-2细胞无显著的毒性作用。进一步分别以曲格列酮1μmol·L-1、2.5μmol·L-1、5μmol·L-1、10μmol·L-1预处理2 h，再加入5 mg·L-1TGF—β1作用24h后收获HK-2细胞，提取细胞总RNA，Real-time PCR检测细胞I型胶原(Col I)和纤维连接蛋白(FN)mRNA表达量。单独曲格列酮作用下并没有增加HK-2细胞ECM的表达，而单纯TGF-β1刺激下Col I和FN表达明显上调，曲格列酮提前干预下FN及Col I表达下降，曲格列酮在2.5μmol·L-1浓度起可显著下调FN mRNA表达(P<0.05);而仅在5μM以上浓度组可显著下调I型胶原mRNA表达(P<0.05)。结论：在mRNA水平PPARγ激动剂干预能抑制对TGF-β1诱导的HK-2细胞ECM的增加，具有拮抗肾间质纤维化的潜在作用。

摘要： 目的:研究过氧化物酶增殖物激活受体(PPARγ)对肝癌细胞迁移的影响，并探讨其机制. 方法:应用伤口愈合实验观察PPARγ的合成配体曲格列酮和罗格列酮对肝癌细胞系BEL-7402迁移的影响；应用免疫荧光化学，RT-PCR和Western Blotting分析探讨其中的机制. 结果:曲格列酮和罗格列酮均能抑制肝癌细胞的迁移活动，其原因是由于该两种药物激活PPARγ通路且具有配体依赖性. 结论:PPARγ活化能够抑制肝癌细胞的迁移.

摘要： 本发明属于药物制备技术领域，尤其涉及一种结晶态曲格列汀及其制备方法和应用、曲格列汀琥珀酸盐晶体及其制备方法。本发明提供了一种结晶态曲格列汀，所述结晶态曲格列汀的结构式如式(I)所示，该结晶态曲格列汀可应用于无有机溶剂介导的制备方法进行曲格列汀琥珀酸的制备，避免了制备过程中有机试剂的危害，以及原料药有机溶剂残留对用药安全性的影响，能够保证药物制备和使用过程中的安全性，对环境友好。

摘要： 本发明属于药物领域，具体涉及一种曲格列汀二聚体的制备方法，制备方法包括如下步骤：曲格列汀与化合物Ⅱ在催化剂作用下于第一缚酸剂存在的第一反应溶剂和水中进行反应，得到中间体Ⅲ；中间体Ⅲ与溴化物于第二反应溶剂中进行反应，得到中间体Ⅳ；中间体Ⅳ与化合物Ⅴ于第二缚酸剂存在的第三反应溶剂中进行反应，得到中间体Ⅵ；中间体Ⅵ与化合物Ⅶ于第三缚酸剂存在的第四反应溶剂中进行反应，得到化合物Ⅰ。该制备方法制得的曲格列汀二聚体收率高、纯度好，对提高琥珀酸曲格列汀原料药或其制剂的质量具有重要的意义。

摘要： 本发明公开了一种曲格列汀的合成方法及由该方法合成的曲格列汀以及曲格列汀合成中间体。其中曲格列汀的合成方法包括以下步骤：S1、以2-羟甲基-4-氟苯甲腈为起始原料，经氯代反应得到2-氯甲基-4-氟苯甲腈；S2、将所述2-氯甲基-4-氟苯甲腈作为中间体，经缩合反应得到2-[(6-氯-3,4-二氢-3-甲基-2,4-二氧代-1(2H)-嘧啶基)甲基]-4-氟苯甲腈；S3、将2-[(6-氯-3,4-二氢-3-甲基-2,4-二氧代-1(2H)-嘧啶基)甲基]-4-氟苯甲腈作为中间体，经氨化反应得到曲格列汀碱。该方法避免了高毒的氰化铜的使用，不但提高了合成过程的安全性，友好了环境，而且所形成的氯代中间体更加稳定，且无刺激性。

摘要： 本发明属于药物制备技术领域，尤其涉及一种结晶态曲格列汀及其制备方法和应用、曲格列汀琥珀酸盐晶体及其制备方法。本发明提供了一种结晶态曲格列汀，所述结晶态曲格列汀的结构式如式(I)所示，该结晶态曲格列汀可应用于无有机溶剂介导的制备方法进行曲格列汀琥珀酸的制备，避免了制备过程中有机试剂的危害，以及原料药有机溶剂残留对用药安全性的影响，能够保证药物制备和使用过程中的安全性，对环境友好。

摘要： 本发明公开了一种曲格列汀杂质的制备方法，属于药物合成领域。该方法工艺设计合理，可操作性强，提纯方便；其以2‑[(6‑氯‑3,4‑二氢‑3‑甲基‑2,4‑二氧代‑1(2H)‑嘧啶基)甲基]‑4‑氟苯甲腈起始原料，经亲核取代和水解两步反应合成该杂质，本发明通过实验筛选出最优的制备步骤和反应条件，本发明制备得到的曲格列汀杂质，为曲格列汀的质量控制，安全性和临床药代动力学研究提供了分析测试的基准物质，具有重要应用价值。

摘要： 本发明属于药物合成技术领域，具体涉及一种曲格列汀杂质化合物K及其制备方法。本发明是以(R)‑3‑氨基‑1‑Boc‑哌啶、2‑氰基‑5‑氟溴苄为原料，在碱的作用下反应制得(R)‑3‑(双(2‑氰基‑5‑氟苄基))氨基‑1‑Boc‑哌啶，(R)‑3‑(双(2‑氰基‑5‑氟苄基))氨基‑1‑Boc‑哌啶进一步成盐后与2‑[[6‑氯‑3‑甲基‑2,4‑二氧代‑3,4‑二氢‑1(2H)‑嘧啶基]甲基]‑4‑氟苯甲腈在碱的作用下制得曲格列汀杂质化合物K。本发明提供的合成方法简单，且该方法所得曲格列汀杂质化合物K经重结晶析出纯度高，收率高，该杂质化合物可作为曲格列汀成品检测标准中的杂质对照品。

摘要： 本发明属于药物合成技术领域，具体涉及一种曲格列汀杂质化合物N。本发明是以曲格列汀及琥珀酸单异丙酯为原料，在缩合剂及碱的作用下反应得曲格列汀杂质化合物N。本发明提供的合成方法简单，且该方法所得曲格列汀杂质化合物N经重结晶析出纯度高，收率高，该杂质化合物可作为曲格列汀成品检测标准中的杂质对照品。

摘要： 本发明公开了琥珀酸曲格列汀片剂的制备工艺，将优选载体比例与API原料药混合并以喷雾干燥设备，在优选参数下制粒，该颗粒较较原研流化床具有更好的颗粒性质，其外观性状规则，相比单纯API，具有更小的堆体积，很好的流动性和可压性，避免了由于流化制粒和API的物理性质带来的压片中物料间隙空气难以排出、可压性差而导致的裂片风险，使工艺参数设计范围更宽，实现工艺过程更加可控、稳定，可以解决由API不良的物理属性、流化制粒后颗粒蓬松、可压性差等带来的种种工艺可行性问题，容易实现过程控制，保证产品质量属性，同时能够简化生产工艺，增加生产效率，节约生产成本。

摘要： 本发明公开了一种琥珀酸曲格列汀片及其制备方法，由65‑68份琥珀酸曲格列汀、14‑17份微晶纤维素、3‑5份乳糖、1.5‑3份交联羧甲纤维素钠、1‑2份羟丙甲纤维素、1‑2份硬脂富马酸钠、羟丙甲纤维素1.5‑3份、0.4‑0.7份聚乙二醇6000、0.1‑0.4份二氧化钛、0.01份氧化铁红、0.01份氧化铁黄组成。本发明方法制备的产品在不影响产品质量的前提下，优化了片芯及包衣组分的比例及种类，降低了产品的原料成本，在制备工艺上采用直接混合压片，省去了制粒及干燥程序，减少了产品制备工序及时间，节约了设备成本及人工成本。

摘要： 提供一种谷胱甘肽还原酶活性增强剂。解决手段:含有曲格列酮或其可药用盐的谷胱甘肽还原酶活性增强剂。