BV2细胞

摘要： 目的筛选氧糖剥夺再灌注后BV2细胞中差异表达的基因。方法取小鼠小胶质细胞BV2分为正常组(control组)和氧糖剥夺再灌注组(OGD/R组),对两组细胞进行转录测序筛选差异表达基因,在线网站(https://www.xiantao.love/products)对差异表达基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能富集分析;数据库String(https://cn.string-db.org/)对差异表达基因进行蛋白质互作网络分析后,Cytoscape软件中选择cytoHubba插件筛选出评分较高的关键基因;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组关键基因的mRNA表达水平。结果与control组比较,OGD/R组有122个基因发生明显差异表达(P<0.01),其中108个基因表达上调,14个基因表达下调;GO分析显示,122个差异表达基因与受体配体激活、静脉曲张、正调控STAT信号通路等相关;KEGG分析显示,差异表达基因主要富集到白细胞介素-17(IL-17)信号通路中;蛋白质互作网络分析筛选出差异表达基因中10个评分较高的基因;qRT-PCR结果显示,与control组比较,OGD/R组中IL-6、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Csf 2)、IL-1β、丝氨酸(或半胱氨酸)肽酶抑制剂B分支成员2(Serpinb 2)mRNA表达增加(P<0.05),而粒细胞集落刺激因子(Csf 3)、Cd 40抗原(Cd 40)、前列腺素内过氧化物合酶2(Ptgs 2)、IL-10、CXC基序趋化因子配体2(Cxcl 2)以及IL-12 b mRNA表达降低(P<0.05)。结论OGD/R处理可诱导BV2细胞基因差异表达,生物信息学分析可筛选出差异表达基因中的关键基因,qRT-PCR可检测关键基因发生差异表达的情况。

摘要： 目的探讨没药甾酮(GS)下调Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)通路减轻脓毒症相关性脑病(SAE)神经炎症反应的机制。方法采用脂多糖(LPS)诱导小鼠小胶质细胞系(BV2细胞)制备脓毒症相关性脑病细胞模型。在此细胞模型中,通过CCK-8法检测BV2细胞的增殖凋亡情况,确定LPS和GS的最佳给药浓度,在此给药浓度基础上分为空白对照组(NC组)、LPS组及LPS+GS组,采用Western blotting法检测给药6、12、24 h后TLR4/NF-κB通路关键蛋白的表达情况,最后,采用ELISA法检测细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)的表达情况。结果当LPS浓度≥3μg/mL和GS浓度>30μg/mL时细胞增殖被显著抑制(P<0.01),选择LPS(3μg/mL)和GS(30μg/mL)作为联合给药浓度,在此浓度基础上联合给药最长至168 h,BV2细胞增殖仍稳定,故选择此浓度作为最佳给药浓度。与NC组相比,LPS诱导后各时间点TLR4/NF-κB通路蛋白表达均有不同程度的增加,差异有统计学意义(P<0.05)。LPS诱导后,促炎细胞因子TNF-α、IL-1β表达较NC组显著增加(P<0.05),与LPS组相比,GS干预后能在一定程度上下调TNF-α、IL-1β表达,并上调TGF-β、IL-10的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在LPS诱导的SAE细胞模型中,炎症通路TLR4/NF-κB被激活,没药甾酮能够下调此通路关键蛋白的表达,减轻脓毒症相关性脑病神经炎症反应。

摘要： 目的研究白藜芦醇对脂多糖诱导的BV2细胞炎症与凋亡反应的保护机制。方法脂多糖刺激BV2细胞建立炎症模型,随机分为对照组、脂多糖组、脂多糖+白藜芦醇组、白藜芦醇组。采用Western blot、RT-qPCR、荧光染色与细胞流式分析,检测白藜芦醇对BV2细胞的保护作用及分子机制。结果白藜芦醇可抑制脂多糖引起的细胞凋亡及IL-6、IL-1、TNF-αmRNA表达升高,增加LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,降低SQSTM1蛋白表达,减少脂多糖引起的溶酶体细胞器损伤,提高BV2细胞中溶酶体的荧光强度。结论白藜芦醇对脂多糖引起BV2细胞的炎症与凋亡反应有保护作用,其分子机制可能是通过调控TLR4-FOXO3信号通路影响细胞的自噬水平,从而减轻炎症因子的释放与细胞的凋亡反应。

摘要： 目的探讨中药复方F1(F1)对缺氧诱导的BV2细胞损伤的保护作用及机制。方法将BV2细胞分为对照组、缺氧组和不同浓度F1(0.005、0.01、0.02μg·μl^(-1))干预组。采用CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞内活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)、线粒体膜电位和凋亡水平;活细胞成像检测线粒体通透性转换孔道(mPTP)开放程度;Western blot检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白表达水平。结果与对照组比较,缺氧组细胞活力和线粒体膜电位下降;mPTP过度开放;细胞ROS和凋亡水平升高;HIF-1α和HO-1蛋白表达升高。给予F1干预后,与模型组相比,细胞活力和线粒体膜电位水平回升;mPTP开放受到抑制;ROS和凋亡水平降低;HIF-1α蛋白表达明显降低,HO-1蛋白表达升高。结论中药复方F1可减轻缺氧诱导的BV2细胞损伤,其机制可能与改善线粒体功能,激活HIF-1α/HO-1通路有关。

摘要： 目的:探讨Toll样受体(Toll like receptor,TLR)-E3泛素连接酶Pellino1 (Peli1)介导的炎性通路在甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)引起BV2小胶质细胞炎性反应中的作用.方法:利用Western blot观察Meth作用后Toll样家族中多种TLR的表达及其下游接头蛋白髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TIR-domain-containing adaptor inducing interferon-β,TRIF)水平的改变,同时观察上述接头蛋白下游Pelil蛋白的表达,利用ELISA、实时定量PCR (real time-PCR)及Western blot观察Peli1调节的下游炎性因子及信号通路的改变.结果:Meth作用于BV2细胞后,TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR11在特定时间内表达明显上调,同时下游MyD88及TRIF蛋白表达显著增加,其中TRIF具有浓度依赖效应.Meth作用后亦可引起泛素化蛋白Peli1的表达,而利用RNA干扰的方法将Peli1下调后,炎性因子诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin-6,IL)-6表达下降,核因子(nuclear factor,NF)-KB的激活明显缓解.结论:TLR介导的炎性信号在Meth引起BV2细胞炎性反应过程中发挥重要作用.因此,基于TLRs-Peli1靶信号轴的干预可能为Meth神经毒性的干预提供靶点,具有潜在的应用意义.

摘要： 目的:观察瓜子金皂苷己(Polygalasaponin F,PGSF)是否影响氧糖剥夺/复氧(Oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)处理的BV-2小胶质细胞炎性细胞因子及细胞因子信号抑制因子3(Suppressors of cytokine signaling3,SOCS3)表达,初步探讨PGSF对抗OGD/R炎症反应的机制.方法:构建BV-2小胶质细胞OGD/R体外模型,分为正常对照组、模型组、PGSF低剂量组、PGSF中剂量组及PGSF高剂量组.BV-2细胞氧糖剥夺2 h、复糖复氧6 h后提取总RNA,通过实时荧光定量多聚酶链式反应检测BV-2细胞炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及SOCS3的基因表达.结果:I/R后BV-2细胞中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及SOCS3的mRNA表达明显增加;给予PGSF处理可以逆转上述观察指标的改变.结论:PGSF在体外实验中具有抑制神经炎症的作用,SOCS3信号通路可能参与介导了PGSF的抗炎作用.

摘要： 目的研究肉苁蓉总苷(GCs)对脂多糖(LPS)诱导的BV2细胞炎症反应的机制。方法采用小鼠小胶质细胞BV2细胞株作为研究对象。将BV2细胞随机分为对照组、LPS组和GCs组。对照组正常培养。LPS组用LPS诱导BV2细胞建立炎症模型。GCs组加入不同浓度GCs与LPS共培养。CCK8检测各组细胞活性。qRT-PCR检测各组炎症因子IL-1β、COX-2m RNA的表达,WB检测SIRT1、NF-κB蛋白水平的变化。结果CCK8结果显示,GCs各组细胞活性与对照组之间无差异(P>0.05),LPS组细胞活性显著低于对照组和GCs各组(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,LPS组IL-1β、COX-2m RNA表达水平显著高于对照组和GCs与LPS共孵育组(P<0.05)。WB结果表明与对照组和GCs各组相比,LPS组SIRT1表达下调(P<0.05),磷酸化p65的表达上调(P<0.05)。结论GCs能够抑制LPS诱导的BV2细胞的炎症反应,其机制可能与SIRT1/NF-κB信号通路相关。

摘要： 目的 通过构建氯化钴(CoCl2)低氧模型,探究小胶质细胞在低氧条件下的活化状态,并探索其中机制.方法 将小胶质细胞系BV2细胞,根据处理方式不同分为常氧组、CoCl24 h组(CoCl2处理4 h)、CoCl26 h组(CoCl2处理6 h).采用DCFH-DA探针检测细胞中活性氧(ROS)的含量,运用Western Blot技术分析低氧诱导因子(HIF-1α)、TLR2/MyD88信号通路关键蛋白以及BV2细胞极化相关蛋白的表达变化.结果 与常氧组相比,CoCl24 h组与CoCl26 h组活性氧水平明显升高,并且CoCl26 h组高于CoCl24 h组(P<0.05).CoCl24 h组与CoCl26 h组的HIF-1α,TLR2/MyD88信号通路关键蛋白(TLR2、MyD88)表达量较常氧组明显升高(P<0.05).CoCl24 h组的Arg1/iNOS比值与常氧组相比,轻微升高;而CoCl26 h组的Arg1/iNOS比值较常氧组明显降低(P<0.05).结论 在低氧条件下,细胞活性氧水平升高,通过TLR2-MyD88信号通路诱导炎症反应,BV2细胞被激活并在炎症损伤期间动态转化,早期以有益的M2型为主,而后期以有害的M1型为主,这初步揭示了低氧条件下小胶质细胞极化的相关机制.

摘要： 目的 观察补肾益髓方药物血清对小鼠小胶质细胞BV2神经炎症的影响,探讨其可能的作用机制.方法 1μg/mL脂多糖(LPS)诱导建立BV2细胞炎症模型,将BV2细胞随机分为正常组、LPS组、补肾益髓方药物血清(5％、10％、20％)组和空白血清(5％、10％、20％)组,CCK-8法检测细胞活力;在此基础上,将细胞分为正常组、LPS组和20％补肾益髓方药物血清组,免疫荧光法和Western blot检测细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arginase-1)蛋白表达,RT-qPCR检测细胞内miRNA-155-5p表达;采用慢病毒转染制备miRNA-155-5p过表达模型,另设20％补肾益髓方药物血清组、阴性对照组和miRNA-155-5p过表达组,免疫荧光法和Western blot检测细胞内iNOS、Arginase-1及CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)蛋白表达.结果 与正常组比较,LPS组细胞活力显著降低(P<0.01),iNOS和miRNA-155-5p水平显著升高(P<0.01),Arginase-1表达显著降低(P<0.05);与LPS组比较,20％补肾益髓方药物血清组细胞活力显著升高(P<0.01),iNOS和miRNA-155-5p水平显著降低(P<0.01),Arginase-1表达显著升高(P<0.01).与20％补肾益髓方药物血清组比较,miRNA-155-5p过表达组iNOS表达显著升高(P<0.01),Arginase-1和C/EBPβ表达显著降低(P<0.01).结论 补肾益髓方可抑制LPS诱导的BV2细胞炎症反应,其作用机制与提高细胞活力、上调Arginase-1表达、下调iNOS表达、抑制miRNA-155信号通路有关.

摘要： 目的：研究针对TOLL样受体4(TOLL-Like receptor4,TLR4)基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对小鼠小胶质细胞系BV-2细胞被缺血再灌注诱导分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的抑制作用.rn 方法：将培养的BV-2细胞随机分为C组(正常培养组)和IR组(缺血再灌注组)两大组,其中IR组又分为N组(非转染组)、T组(TLR4-siRNA转染组,转染质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA)、TC组(对照siRNA转染组,转染含对照序列的质粒pEGFP-H1/对照-siRNA)和TB组(空白对照组,加入pEGFP-H1质粒)四个亚组.运用脂质体转染技术将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至培养的BV-2细胞,观察细胞系中荧光表达强度,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组BV-2细胞TLR4和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)基因的表达,ELISA方法检测各组BV-2细胞TNF-α含量变化.rn 结果：将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至BV-2细胞后,EGFP的表达率为(67.58±7.16)%;各组BV-2细胞经缺血再灌注处理后,TLR4、NF-kB mRNA水平以及TNF-α含量均较缺血再灌注前明显升高,而转染组中TLR4和NF-kB mRNA表达则得到部分的抑制,TNF-α含量(0.96±0.35 ng/ml)较未转染组明显减少,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论：针对TLR4mRNA的RNA干扰技术能够有效抑制BV-2细胞经缺血再灌注诱导的TLR4和NF-kB基因的表达,分泌TNF-α含量减少,表明针对TLR4 mRNA的RNAi技术可以有效的抑制缺血再灌注诱导的BV-2细胞的炎症反应.

摘要： 目的：研究针对TOLL样受体4(TOLL-Like receptor4,TLR4)基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对小鼠小胶质细胞系BV-2细胞被缺血再灌注诱导分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的抑制作用.rn 方法：将培养的BV-2细胞随机分为C组(正常培养组)和IR组(缺血再灌注组)两大组,其中IR组又分为N组(非转染组)、T组(TLR4-siRNA转染组,转染质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA)、TC组(对照siRNA转染组,转染含对照序列的质粒pEGFP-H1/对照-siRNA)和TB组(空白对照组,加入pEGFP-H1质粒)四个亚组.运用脂质体转染技术将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至培养的BV-2细胞,观察细胞系中荧光表达强度,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组BV-2细胞TLR4和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)基因的表达,ELISA方法检测各组BV-2细胞TNF-α含量变化.rn 结果：将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至BV-2细胞后,EGFP的表达率为(67.58±7.16)%;各组BV-2细胞经缺血再灌注处理后,TLR4、NF-kB mRNA水平以及TNF-α含量均较缺血再灌注前明显升高,而转染组中TLR4和NF-kB mRNA表达则得到部分的抑制,TNF-α含量(0.96±0.35 ng/ml)较未转染组明显减少,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论：针对TLR4mRNA的RNA干扰技术能够有效抑制BV-2细胞经缺血再灌注诱导的TLR4和NF-kB基因的表达,分泌TNF-α含量减少,表明针对TLR4 mRNA的RNAi技术可以有效的抑制缺血再灌注诱导的BV-2细胞的炎症反应.

摘要： 目的：研究针对TOLL样受体4(TOLL-Like receptor4,TLR4)基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对小鼠小胶质细胞系BV-2细胞被缺血再灌注诱导分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的抑制作用.rn 方法：将培养的BV-2细胞随机分为C组(正常培养组)和IR组(缺血再灌注组)两大组,其中IR组又分为N组(非转染组)、T组(TLR4-siRNA转染组,转染质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA)、TC组(对照siRNA转染组,转染含对照序列的质粒pEGFP-H1/对照-siRNA)和TB组(空白对照组,加入pEGFP-H1质粒)四个亚组.运用脂质体转染技术将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至培养的BV-2细胞,观察细胞系中荧光表达强度,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组BV-2细胞TLR4和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)基因的表达,ELISA方法检测各组BV-2细胞TNF-α含量变化.rn 结果：将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至BV-2细胞后,EGFP的表达率为(67.58±7.16)%;各组BV-2细胞经缺血再灌注处理后,TLR4、NF-kB mRNA水平以及TNF-α含量均较缺血再灌注前明显升高,而转染组中TLR4和NF-kB mRNA表达则得到部分的抑制,TNF-α含量(0.96±0.35 ng/ml)较未转染组明显减少,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论：针对TLR4mRNA的RNA干扰技术能够有效抑制BV-2细胞经缺血再灌注诱导的TLR4和NF-kB基因的表达,分泌TNF-α含量减少,表明针对TLR4 mRNA的RNAi技术可以有效的抑制缺血再灌注诱导的BV-2细胞的炎症反应.

摘要： 目的：研究针对TOLL样受体4(TOLL-Like receptor4,TLR4)基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对小鼠小胶质细胞系BV-2细胞被缺血再灌注诱导分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的抑制作用.rn 方法：将培养的BV-2细胞随机分为C组(正常培养组)和IR组(缺血再灌注组)两大组,其中IR组又分为N组(非转染组)、T组(TLR4-siRNA转染组,转染质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA)、TC组(对照siRNA转染组,转染含对照序列的质粒pEGFP-H1/对照-siRNA)和TB组(空白对照组,加入pEGFP-H1质粒)四个亚组.运用脂质体转染技术将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至培养的BV-2细胞,观察细胞系中荧光表达强度,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组BV-2细胞TLR4和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)基因的表达,ELISA方法检测各组BV-2细胞TNF-α含量变化.rn 结果：将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至BV-2细胞后,EGFP的表达率为(67.58±7.16)%;各组BV-2细胞经缺血再灌注处理后,TLR4、NF-kB mRNA水平以及TNF-α含量均较缺血再灌注前明显升高,而转染组中TLR4和NF-kB mRNA表达则得到部分的抑制,TNF-α含量(0.96±0.35 ng/ml)较未转染组明显减少,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论：针对TLR4mRNA的RNA干扰技术能够有效抑制BV-2细胞经缺血再灌注诱导的TLR4和NF-kB基因的表达,分泌TNF-α含量减少,表明针对TLR4 mRNA的RNAi技术可以有效的抑制缺血再灌注诱导的BV-2细胞的炎症反应.

摘要： 目的：研究针对TOLL样受体4(TOLL-Like receptor4,TLR4)基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对小鼠小胶质细胞系BV-2细胞被缺血再灌注诱导分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的抑制作用.rn 方法：将培养的BV-2细胞随机分为C组(正常培养组)和IR组(缺血再灌注组)两大组,其中IR组又分为N组(非转染组)、T组(TLR4-siRNA转染组,转染质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA)、TC组(对照siRNA转染组,转染含对照序列的质粒pEGFP-H1/对照-siRNA)和TB组(空白对照组,加入pEGFP-H1质粒)四个亚组.运用脂质体转染技术将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至培养的BV-2细胞,观察细胞系中荧光表达强度,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组BV-2细胞TLR4和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)基因的表达,ELISA方法检测各组BV-2细胞TNF-α含量变化.rn 结果：将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至BV-2细胞后,EGFP的表达率为(67.58±7.16)%;各组BV-2细胞经缺血再灌注处理后,TLR4、NF-kB mRNA水平以及TNF-α含量均较缺血再灌注前明显升高,而转染组中TLR4和NF-kB mRNA表达则得到部分的抑制,TNF-α含量(0.96±0.35 ng/ml)较未转染组明显减少,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论：针对TLR4mRNA的RNA干扰技术能够有效抑制BV-2细胞经缺血再灌注诱导的TLR4和NF-kB基因的表达,分泌TNF-α含量减少,表明针对TLR4 mRNA的RNAi技术可以有效的抑制缺血再灌注诱导的BV-2细胞的炎症反应.

摘要： 目的：研究针对TOLL样受体4(TOLL-Like receptor4,TLR4)基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对小鼠小胶质细胞系BV-2细胞被缺血再灌注诱导分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的抑制作用.rn 方法：将培养的BV-2细胞随机分为C组(正常培养组)和IR组(缺血再灌注组)两大组,其中IR组又分为N组(非转染组)、T组(TLR4-siRNA转染组,转染质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA)、TC组(对照siRNA转染组,转染含对照序列的质粒pEGFP-H1/对照-siRNA)和TB组(空白对照组,加入pEGFP-H1质粒)四个亚组.运用脂质体转染技术将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至培养的BV-2细胞,观察细胞系中荧光表达强度,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组BV-2细胞TLR4和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)基因的表达,ELISA方法检测各组BV-2细胞TNF-α含量变化.rn 结果：将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至BV-2细胞后,EGFP的表达率为(67.58±7.16)%;各组BV-2细胞经缺血再灌注处理后,TLR4、NF-kB mRNA水平以及TNF-α含量均较缺血再灌注前明显升高,而转染组中TLR4和NF-kB mRNA表达则得到部分的抑制,TNF-α含量(0.96±0.35 ng/ml)较未转染组明显减少,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论：针对TLR4mRNA的RNA干扰技术能够有效抑制BV-2细胞经缺血再灌注诱导的TLR4和NF-kB基因的表达,分泌TNF-α含量减少,表明针对TLR4 mRNA的RNAi技术可以有效的抑制缺血再灌注诱导的BV-2细胞的炎症反应.

摘要： 目的：研究针对TOLL样受体4(TOLL-Like receptor4,TLR4)基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对小鼠小胶质细胞系BV-2细胞被缺血再灌注诱导分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的抑制作用.rn 方法：将培养的BV-2细胞随机分为C组(正常培养组)和IR组(缺血再灌注组)两大组,其中IR组又分为N组(非转染组)、T组(TLR4-siRNA转染组,转染质粒pEGFP-H1/TLR4-siRNA)、TC组(对照siRNA转染组,转染含对照序列的质粒pEGFP-H1/对照-siRNA)和TB组(空白对照组,加入pEGFP-H1质粒)四个亚组.运用脂质体转染技术将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至培养的BV-2细胞,观察细胞系中荧光表达强度,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组BV-2细胞TLR4和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)基因的表达,ELISA方法检测各组BV-2细胞TNF-α含量变化.rn 结果：将pEGFP-H1/TLR4-siRNA转染至BV-2细胞后,EGFP的表达率为(67.58±7.16)%;各组BV-2细胞经缺血再灌注处理后,TLR4、NF-kB mRNA水平以及TNF-α含量均较缺血再灌注前明显升高,而转染组中TLR4和NF-kB mRNA表达则得到部分的抑制,TNF-α含量(0.96±0.35 ng/ml)较未转染组明显减少,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论：针对TLR4mRNA的RNA干扰技术能够有效抑制BV-2细胞经缺血再灌注诱导的TLR4和NF-kB基因的表达,分泌TNF-α含量减少,表明针对TLR4 mRNA的RNAi技术可以有效的抑制缺血再灌注诱导的BV-2细胞的炎症反应.

摘要： 本发明属于荧光纳米材料技术领域，具体提供了一种纳米荧光探针的制备方法，包括如下步骤：将碳源用水完全溶解，向溶液中加入小分子配体进行掺杂；超声溶解，加热即得目标产物。所述的碳源为天然氨基酸中的一种或多种。所述的小分子配体为尿素或氨水。按摩尔比，碳源：小分子配体＝1:1‑5。本发明所制备的纳米荧光探针，是以碳原子为骨架结构，具有荧光性能的类球形的纳米颗粒。该纳米荧光探针不仅可以鉴别不同活化状态的BV2细胞，而且还具有生物相容性好、安全无毒、作用效果稳定等特点。它主要特异性识别BV2细胞膜蛋白及细胞因子；其制备方法工艺简单、易于操作，制备成本低，易于推广。

摘要： 本发明涉及具有促细胞分裂活性的Bv8的核酸和多肽，更具体地本发明提供了用Bv8多肽诱导内皮细胞增生和促进内皮细胞存活的方法。本发明还提供了筛选Bv8活性调节物的方法。本发明还提供了利用Bv8多肽进行治疗的方法。

摘要： 本发明提供了用Bv8多肽诱导内皮细胞增生和促进内皮细胞存活的方法。本发明还提供了筛选Bv8活性调节物的方法。本发明还提供了利用Bv8多肽进行治疗的方法。

摘要： 一种检测克隆特异性T淋巴细胞TCR BV CDR3基因组成的方法，包括：抽提外周血单个核细胞或组织样本中总RNA并逆转录成cDNA。根据TCR BV基因设计TCR BV 24个家族上游引物和共同下游引物BC，染料法实时荧光定量PCR扩增cDNA。熔解曲线分析PCR产物，对PCR产物的荧光强度变化负一次导数(-dF/dT)与温度(Tm)间作图，获BV各家族峰形图，对只出现单峰的BV家族PCR产物纯化后作序列分析，测序结果与TCRβ链标准基因序列比对。根据单峰在BV各家族峰形图上出现情况判断克隆特异性T淋巴细胞在组织或外周血中的分布，结合测序结果确定克隆特异性TCR BV CDR3基因组成。本发明在评价与特异性克隆T细胞相关疾病中有着重要意义。

摘要： 本发明公开了一种对光敏感的BV2工具细胞及其构建方法和应用，所述构建方法通过慢病毒工具为载体，将带有光感基因ChETA和荧光基因EYFP的质粒整合在BV2细胞的基因组内，使用蓝光(450‑490nm)刺激，即可特异性激活光刺激区域的BV2工具细胞，BV2工具细胞相关离子通道开放，产生去极化现象。本发明的对光敏感的BV2工具细胞可以在体外特异性的光激活，灵敏性高，在体外研究小胶质细胞的发育、行为和功能方面具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种荧光BV2工具细胞及其构建方法和应用，所述构建方法通过慢病毒工具为载体，将带有荧光基因EGFP的质粒整合在BV2细胞的基因组内，当使用蓝光激发时，在荧光显微镜下可观察到细胞发出清晰的绿色荧光。本发明的转基因BV2工具细胞可以自发荧光，荧光强度高，无需染色即可方便观察，在体外研究小胶质细胞的发育、行为和功能方面具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种荧光BV2工具细胞及其构建方法和应用，所述构建方法通过慢病毒工具为载体，将带有荧光基因EYFP的质粒整合在BV2细胞的基因组内，当使用蓝光激发时，在荧光显微镜下可观察到细胞发出清晰的绿色荧光。本发明的转基因BV2工具细胞可以自发荧光，荧光强度高，无需染色即可方便观察，在体外研究小胶质细胞的发育、行为和功能方面具有重要意义。

摘要： 本发明属于荧光纳米材料技术领域，具体提供了一种纳米荧光探针的制备方法，包括如下步骤：将碳源用水完全溶解，向溶液中加入小分子配体进行掺杂；超声溶解，加热即得目标产物。所述的碳源为天然氨基酸中的一种或多种。所述的小分子配体为尿素或氨水。按摩尔比，碳源：小分子配体＝1:1‑5。本发明所制备的纳米荧光探针，是以碳原子为骨架结构，具有荧光性能的类球形的纳米颗粒。该纳米荧光探针不仅可以鉴别不同活化状态的BV2细胞，而且还具有生物相容性好、安全无毒、作用效果稳定等特点。它主要特异性识别BV2细胞膜蛋白及细胞因子；其制备方法工艺简单、易于操作，制备成本低，易于推广。

摘要： 本发明涉及具有促细胞分裂活性的Bv8的核酸和多肽，更具体地本发明提供了用Bv8多肽诱导内皮细胞增生和促进内皮细胞存活的方法。本发明还提供了筛选Bv8活性调节物的方法。本发明还提供了利用Bv8多肽进行治疗的方法。

摘要： 一种检测克隆特异性T淋巴细胞TCR BV CDR3基因组成的方法，包括：抽提外周血单个核细胞或组织样本中总RNA并逆转录成cDNA。根据TCR BV基因设计TCR BV 24个家族上游引物和共同下游引物BC，染料法实时荧光定量PCR扩增cDNA。熔解曲线分析PCR产物，对PCR产物的荧光强度变化负一次导数(－dF/dT)与温度(Tm)间作图，获BV各家族峰形图，对只出现单峰的BV家族PCR产物纯化后作序列分析，测序结果与TCRβ链标准基因序列比对。根据单峰在BV各家族峰形图上出现情况判断克隆特异性T淋巴细胞在组织或外周血中的分布，结合测序结果确定克隆特异性TCR BV CDR3基因组成。本发明在评价与特异性克隆T细胞相关疾病中有着重要意义。