一种检测克隆特异性T淋巴细胞TCR BV CDR3基因组成的方法

摘要

一种检测克隆特异性T淋巴细胞TCR BV CDR3基因组成的方法，包括：抽提外周血单个核细胞或组织样本中总RNA并逆转录成cDNA。根据TCR BV基因设计TCR BV 24个家族上游引物和共同下游引物BC，染料法实时荧光定量PCR扩增cDNA。熔解曲线分析PCR产物，对PCR产物的荧光强度变化负一次导数(-dF/dT)与温度(Tm)间作图，获BV各家族峰形图，对只出现单峰的BV家族PCR产物纯化后作序列分析，测序结果与TCRβ链标准基因序列比对。根据单峰在BV各家族峰形图上出现情况判断克隆特异性T淋巴细胞在组织或外周血中的分布，结合测序结果确定克隆特异性TCR BV CDR3基因组成。本发明在评价与特异性克隆T细胞相关疾病中有着重要意义。