VP1蛋白

摘要： 为制备抗A型塞内卡病毒(SVA)VP1蛋白的单克隆抗体,并初步应用于A型塞内卡病毒的检测,本研究构建了SVA VP1原核重组表达质粒pET30a-GST-VP1(528 bp)。将重组质粒转化大肠埃希菌BL21感受态细胞并大量表达VP1重组蛋白,利用纯化的VP1重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)进行融合,经过细胞亚克隆筛选,获得杂交瘤细胞。将其选为腹水生产细胞株,最后纯化单克隆抗体,通过Western blotting和间接免疫荧光试验对其进行鉴定。结果显示,本研究获得1株能够稳定分泌抗VP1重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,其亚型重链为IgG2a、轻链为Kappa链;Western blotting和间接免疫荧光检测显示,该单克隆抗体能够特异性识别SVA病毒粒子。本研究成功制备的抗SVA VP1蛋白单克隆抗体可为进一步研究A型塞内卡病毒VP1蛋白的生物学功能及A型塞内卡病毒致病机制提供有效途径。

摘要： 目的:分析2014-2018年吉林省长春市手足口病流行特征及肠道病毒71型(EV-A71)VP1基因特征,探讨其流行规律,为及时调整防控策略提供参考依据。方法:利用中国疾病预防控制信息系统中的数据,采用描述性流行病学方法对2014-2018年吉林省长春市手足口病疫情数据进行分析。收集2014-2018年吉林省长春市医疗机构报告手足口病临床诊断病例咽拭子标本,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测标本中总肠道病毒、肠道病毒71型(EV-A71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox-A16),确定型别。对EV-A71的VP1区扩增并测序,比对构建系统进化树,分析同源性和氨基酸变异位点。结果:2014-2018年吉林省长春市累计报告手足口病病例12685例,发病率呈现先降后升趋势,2016年达到高峰,之后呈逐年递降趋势。每年流行趋势基本相同,呈单峰分布,有明显的季节性。吉林省长春市14个县区均有病例报告,年均报告发病率前3位的地区为高新区(129.14/10万)、宽城区(102.17/10万)和经开区(100.98/10万)。病例中,男性比例明显高于女性,以5岁以下儿童为主。吉林省长春市EV-A71阳性样本各月份均有检出。2014年3-9月和2017年5月-2018年5月,手足口病毒型别以EV-A71为主,且呈逐渐上升趋势。测序获得EV-A71序列146条,其中除2017年3条序列和2018年7条序列属于EV-A71的B5亚型外,其余序列均属于C4亚型中的C4a亚型。VP1区145氨基酸位点为E,2018年2株检测到VP1104D,另外3株检测到VP1218R,其余各株主要毒理位点和抗原性位点未发生变异,EV-A71的B5亚型较C4亚型有VP143E、VP158T和VP1184T3个氨基酸位点差异。结论:吉林省长春市手足口病发病主要发生在5岁以下男性幼童,引发手足口病流行的肠道病毒以EV-A71为主,主要为C4a亚型,也有少部分B5亚型的流行,部分氨基酸变异位点需持续监测,以免造成大范围流行。

摘要： 【目的】实现A型塞内卡病毒(Seneca virus A,SVA)VP1蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达,以建立SVA抗体液相芯片技术检测方法。【方法】根据GenBank收录的SVA VP1基因序列(登录号:KY747514.1),基于大肠杆菌的密码子偏好性优化合成VP1基因,克隆到pCold TF载体,构建重组质粒pCold TF-VP1。将重组质粒pCold TF-VP1转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,进行IPTG诱导表达。通过优化诱导时间及IPTG浓度得出最佳诱导表达条件。采用His标签镍柱纯化VP1重组蛋白,将纯化后的SVA VP1蛋白与荧光微球进行偶联,偶联好的微球与阴阳性血清反应,利用Luminex 200系统上机检测背景及阴阳性血清的中值荧光强度(MFI),从而判断阴阳性,以用于猪血清中SVA抗体的检测。【结果】重组质粒pCold TF-VP1成功转入大肠杆菌BL21感受态细胞,并以可溶性蛋白形式表达。经诱导表达在约82 ku处出现阳性条带。当重组菌株诱导条件为16°C、IPTG终浓度为1.2 mmol/L、诱导时间为3 h时,VP1蛋白表达量最高;经Western blotting分析,可在82 ku处出现明显条带。将VP1蛋白与荧光微球偶联,阴性对照(背景)的平均荧光值为17(2000),证明SVA VP1蛋白与微球偶联成功,偶联成功的荧光微球可用于检测猪血清中SVA抗体的检测。【结论】本研究在大肠杆菌中成功表达并纯化了SVA VP1蛋白,初步建立了SVA抗体液相芯片检测方法,为后续研究奠定了基础。

摘要： 塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)感染猪可引起口鼻、蹄和冠状动脉带等部位出现水疱,严重危害猪的健康。VP1蛋白是SVA重要的结构蛋白,含有病毒主要的抗原表位并可诱导猪产生中和抗体。本研究采用原核表达系统,将VP1基因分别克隆入表达载体pET32a和pGEX6P1中构建重组质粒,通过优化诱导表达条件,利用亲和层析介质纯化,成功制备了重组蛋白VP1-His和VP1-GST。以纯化的VP1-His蛋白免疫BALB/c小鼠,以纯化的VP1-GST蛋白建立间接ELISA,成功筛选获得3株稳定分泌抗VP1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株3A2、5D12和6G10,经Western-blot及间接ELISA鉴定,3株单克隆抗体具有良好的特异性,其腹水效价分别为1∶51200、1∶25600、1∶12800。应用效价最高的3A2抗体初步建立了检测猪血清中抗SVA抗体的竞争ELISA。临床样品检测结果表明,建立的竞争ELISA具有高敏感性,高特异性和高准确性。VP1蛋白单克隆抗体的制备为SVA致病机制的研究提供了材料支撑;竞争ELISA的建立对于SVA感染的防控具有重要意义。

摘要： Nebovirus(NeV)是导致犊牛腹泻的重要病原,是国内的新发病毒.VP1是NeV主要结构蛋白,在病毒的感染与免疫中发挥重要作用.以国内NeV流行毒株VP1基因序列为模板,进行密码子偏好性优化、序列合成并插入到pET28a(+)的Nde I和XhoI酶切位点间,构建了表达VP1完整编码框的pET28a-VP1-BL21(DE3)表达载体.SDS-PAGE结果显示,表达的目的蛋白大小约60 kDa,与预期相符;Western-blot结果显示该重组蛋白可以特异地与NeV抗血清反应;家兔免疫试验结果显示该重组蛋白可以刺激兔体产生特异性抗体.本试验成功表达了NeV VP1重组蛋白,具有良好的免疫原性.为进一步研究NeVVP1蛋白的功能和血清学检测方法奠定了基础.

摘要： 目的:分析柯萨奇病毒B4型(coxsackievirus B4,CVB4)的结构蛋白VP1的分子结构,预测其生物学信息.方法:应用Bioedit、DNAstar、ABCpred软件,以及免疫表位数据库网站IEDB和生物信息学门户ExPASy提供的多种在线工具,对CVB4 VP1蛋白的氨基酸序列进行分析.结果:CVB4 VP1蛋白的等电点8.31,相对分子量32.1 kD,为亲水性、不稳定蛋白质;有36个可能的磷酸化位点,无信号肽和跨膜螺旋结构,二级结构以无规则卷曲为主;预测有5条优势线性B细胞表位.结论:通过对CVB4 VP1蛋白的生物信息学分析,得到了VP1蛋白的理化性质,相关结构的功能特征及线性B细胞表位等生物信息资料.

摘要： 为建立猪萨佩罗病毒(PSV)的快速检测方法,本试验以重组VP1蛋白为包被抗原建立了检测PSV Ig G的间接ELISA方法。RT-PCR从PSV分离株SHCM2019中扩增VP1基因,将其克隆到原核表达载体p ET28a,对重组质粒pET28a-VP1进行原核表达,经Western-blotting检测后,利用VP1重组蛋白建立检测猪血清中PSV Ig G抗体的间接ELISA方法。结果显示,表达的VP1蛋白分子质量约为40 ku,与预期大小相符,Western-blotting表明,重组蛋白与PSV抗体阳性血清具有良好反应原性。以VP1蛋白为抗原建立的ELISA方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的阳性血清均无交叉反应,特异性好;批内和批间的变异系数均小于10%,重复性好。利用建立的间接ELISA方法对95份猪临床血清样本进行检测,阳性率为44.21%。本研究建立的检测方法为PSV的血清学诊断提供了可靠手段。

摘要： 猪水泡病(swine vesicular disease,SVD)与口蹄疫临床症状相似,临床中很难对该病进行快速、有效的诊断,诊断方法的建立有助于SVD的预防和控制。猪水泡病病毒(SVDV)VP1蛋白是SVD诊断试剂最常用的抗原之一,有效制备VP1抗原是诊断方法建立的关键。本研究将SVDV的VP1基因插入载体pET32a(+),获得重组质粒pET32a(+)-VP1,转化大肠杆菌BL21(DE3)细胞后经诱导表达条件的摸索,确定了VP1蛋白可溶性表达的最佳条件为:16°C下以0.5 mmol/L的IPTG诱导16 h。通过该条件诱导表达纯化获得了可溶性表达的SVDV VP1蛋白,且经2次柱纯化后获得的蛋白的纯度在90%以上;经Western-blot鉴定,目标蛋白具有很好的反应原性。总之,本研究成功获得了高水平可溶性表达的SVDV VP1蛋白,为SVD检测方法的建立和亚单位疫苗的研发奠定了基础。

摘要： 为获得口蹄疫病毒(FMDV)O/PanAsia毒株VPl蛋白的抗原信息,从而为制备多肽疫苗提供理论依据,运用生物信息学软件,对O/PanAsia毒株的结构蛋白VP1理化性质、结构功能以及细胞表位进行分析,预测抗原表位以选择合适肽段.应用ProParam、TMHMM Server、ProScale和SignaIP等在线工具,分析VP1蛋白氨基酸序列,运用计算机技术和分子生物学软件,分析预测VP1蛋白的基本理化性质、结构功能以及可能的B细胞和T细胞抗原表位,筛选B细胞表位肽段并对VP1的两个主要T细胞表位CTL和Th细胞表位进行预测.结果显示:O/PanAsia毒株VP1蛋白的等电点为9.49,相对分子质量为23520.83;VP1蛋白的B细胞表位为8～23、135～149和193～205位氨基酸.预测该VP1有10个CTL和10个Th细胞抗原表位,表明其具有较好的免疫原性;最终筛选出VP1蛋白的5个CTL和5个Th优势表位.用生物信息学方法预测O/PanAsia毒株VPl蛋白为稳定性蛋白,含有T、B淋巴细胞抗原表位.本研究为FMDV的进一步研究和疫苗制备奠定了基础.

摘要： 猪萨佩罗病毒(PSV)是一种小RNA病毒,在临床上多与猪流行性腹泻病毒、捷申病毒等引起混合感染。近年来,我国多个省份报道在猪体内分离到该病毒,因而有必要加强对PSV的相关研究。参照PSV-HuN2株序列,将VP1基因插入pGEX-6p-1中进行重组蛋白表达。将蛋白质溶液与弗氏佐剂混合,按照标准程序免疫6~8周龄BALB/c小鼠,第3次免疫后,小鼠眼眶采血,IFA鉴定抗体水平,选取抗体水平高的小鼠脾细胞进行细胞融合。使用IFA法筛选阳性杂交瘤细胞,经过2次有限稀释法亚克隆,最终获得1株PSV VP1单克隆抗体,命名为33-2A。通过IFA、WB、IP试验,33-2A均可与PSV结合。同时对该单抗的B细胞抗原表位进行鉴定,其所识别的抗原表位在PSV VP1蛋白第40—46位氨基酸,多肽序列为^(40)PALTAAE^(46)。结果显示,该单抗与猪萨佩罗病毒VP1蛋白具有良好的反应特异性,并且将其抗原表位与NCBI中上传的PSV毒株序列进行分析,33-2A可识别大多数PSV毒株,具有一定的广谱性。这一研究为猪萨佩罗病毒病原学及其新型疫苗的研制奠定了基础。

摘要： 本研究旨在用杆状病毒表达系统表达鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)基因3型(DHAV-3)VP1蛋白.用RT-PCR扩增DHAV-3VP1基因,用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建重组杆粒(rBacmid-VP1),经转染SF9细胞,获得重组杆状病毒(rBac-VP1).Western Blot和间接免疫荧光鉴定结果显示,DHAV-3抗血清可特异性识别重组蛋白.结果表明,DHAV-3VP1重组蛋白在昆虫细胞中获得表达.

摘要： 本研究旨在用杆状病毒表达系统表达鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)基因3型(DHAV-3)VP1蛋白.用RT-PCR扩增DHAV-3VP1基因,用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建重组杆粒(rBacmid-VP1),经转染SF9细胞,获得重组杆状病毒(rBac-VP1).Western Blot和间接免疫荧光鉴定结果显示,DHAV-3抗血清可特异性识别重组蛋白.结果表明,DHAV-3VP1重组蛋白在昆虫细胞中获得表达.

摘要： 本研究旨在用杆状病毒表达系统表达鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)基因3型(DHAV-3)VP1蛋白.用RT-PCR扩增DHAV-3VP1基因,用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建重组杆粒(rBacmid-VP1),经转染SF9细胞,获得重组杆状病毒(rBac-VP1).Western Blot和间接免疫荧光鉴定结果显示,DHAV-3抗血清可特异性识别重组蛋白.结果表明,DHAV-3VP1重组蛋白在昆虫细胞中获得表达.

摘要： 本研究旨在用杆状病毒表达系统表达鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)基因3型(DHAV-3)VP1蛋白.用RT-PCR扩增DHAV-3VP1基因,用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建重组杆粒(rBacmid-VP1),经转染SF9细胞,获得重组杆状病毒(rBac-VP1).Western Blot和间接免疫荧光鉴定结果显示,DHAV-3抗血清可特异性识别重组蛋白.结果表明,DHAV-3VP1重组蛋白在昆虫细胞中获得表达.

摘要： 自发病犬中分离到1株细小病毒,提取CPV的基因组DNA为模板,经PCR扩增出VP1全基因并进行序列测定,与BR8155-00株VP1全基因序列和氨基酸序列相比较,它们的核苷酸同源性为99.47％,氨基酸同源性99.17％.将VP1基因克隆到真核表达质粒pcDNA3中,构建了CPV VP1基因的真核表达质粒pcDNA3-VP1.用制备的基因疫苗免疫Balb/c小鼠,免疫三次后,间接ELISA法检测免疫小鼠,结果表明,免疫小鼠可以产生免疫应答.免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA法筛选,获得三株稳定分泌抗犬细小病毒VP1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为A8、F4和D5,用间接ELISA方法测定杂交瘤细胞培养上清,效价为1∶16至1∶32之间.接种小鼠腹腔产生单抗腹水,腹水的ELISA效价为1∶2560至1∶5120之间.

摘要： 自发病犬中分离到1株细小病毒,提取CPV的基因组DNA为模板,经PCR扩增出VP1全基因并进行序列测定,与BR8155-00株VP1全基因序列和氨基酸序列相比较,它们的核苷酸同源性为99.47％,氨基酸同源性99.17％.将VP1基因克隆到真核表达质粒pcDNA3中,构建了CPV VP1基因的真核表达质粒pcDNA3-VP1.用制备的基因疫苗免疫Balb/c小鼠,免疫三次后,间接ELISA法检测免疫小鼠,结果表明,免疫小鼠可以产生免疫应答.免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA法筛选,获得三株稳定分泌抗犬细小病毒VP1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为A8、F4和D5,用间接ELISA方法测定杂交瘤细胞培养上清,效价为1∶16至1∶32之间.接种小鼠腹腔产生单抗腹水,腹水的ELISA效价为1∶2560至1∶5120之间.

摘要： 自发病犬中分离到1株细小病毒,提取CPV的基因组DNA为模板,经PCR扩增出VP1全基因并进行序列测定,与BR8155-00株VP1全基因序列和氨基酸序列相比较,它们的核苷酸同源性为99.47％,氨基酸同源性99.17％.将VP1基因克隆到真核表达质粒pcDNA3中,构建了CPV VP1基因的真核表达质粒pcDNA3-VP1.用制备的基因疫苗免疫Balb/c小鼠,免疫三次后,间接ELISA法检测免疫小鼠,结果表明,免疫小鼠可以产生免疫应答.免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA法筛选,获得三株稳定分泌抗犬细小病毒VP1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为A8、F4和D5,用间接ELISA方法测定杂交瘤细胞培养上清,效价为1∶16至1∶32之间.接种小鼠腹腔产生单抗腹水,腹水的ELISA效价为1∶2560至1∶5120之间.

摘要： 自发病犬中分离到1株细小病毒,提取CPV的基因组DNA为模板,经PCR扩增出VP1全基因并进行序列测定,与BR8155-00株VP1全基因序列和氨基酸序列相比较,它们的核苷酸同源性为99.47％,氨基酸同源性99.17％.将VP1基因克隆到真核表达质粒pcDNA3中,构建了CPV VP1基因的真核表达质粒pcDNA3-VP1.用制备的基因疫苗免疫Balb/c小鼠,免疫三次后,间接ELISA法检测免疫小鼠,结果表明,免疫小鼠可以产生免疫应答.免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA法筛选,获得三株稳定分泌抗犬细小病毒VP1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为A8、F4和D5,用间接ELISA方法测定杂交瘤细胞培养上清,效价为1∶16至1∶32之间.接种小鼠腹腔产生单抗腹水,腹水的ELISA效价为1∶2560至1∶5120之间.

摘要： 目的:在原核细胞中表达埃可病毒6型的表面蛋白VP1,制备其多克隆抗体.rn 方法:筛选VP1抗原表位富集区,优化基因序列,分别克隆至质粒pGEX-4T-2和pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pGEX-4T-2-vp1和pET-28a-vp1,分别转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,分别用High AffinityGST-NTA resin和High Affinity Ni-NTA resin进行纯化.以纯化后的VP1-His融合蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,以VP1-GST融合蛋白为检测抗原,采用间接ELISA法检测血清效价,Western blot法检测特异性.rn 结果:经双酶切及测序鉴定,证明质粒pGEX-4T-2-vp1和pET-28a-vp1构建正确;在相对分子质量约39000和20000处,分别可见VP1-GST和VP1-His融合蛋白的表达,表达量分别约占菌体总蛋白的25％和30％,发现VP1-GST为可溶性蛋白,而VP1-His主要以包涵体的形式存在,需对VP1-His蛋白进行透析复性,纯度均在90％以上;免疫新西兰大白兔后获得高效价的特异性兔抗血清.rn 结论:两种标签的融合蛋白均具有良好的免疫原性和抗原性,所制备的多克隆抗体具有较好的特异性,为埃可病毒检测方法的建立奠定了基础.

摘要： 目的:在原核细胞中表达埃可病毒6型的表面蛋白VP1,制备其多克隆抗体.rn 方法:筛选VP1抗原表位富集区,优化基因序列,分别克隆至质粒pGEX-4T-2和pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pGEX-4T-2-vp1和pET-28a-vp1,分别转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,分别用High AffinityGST-NTA resin和High Affinity Ni-NTA resin进行纯化.以纯化后的VP1-His融合蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,以VP1-GST融合蛋白为检测抗原,采用间接ELISA法检测血清效价,Western blot法检测特异性.rn 结果:经双酶切及测序鉴定,证明质粒pGEX-4T-2-vp1和pET-28a-vp1构建正确;在相对分子质量约39000和20000处,分别可见VP1-GST和VP1-His融合蛋白的表达,表达量分别约占菌体总蛋白的25％和30％,发现VP1-GST为可溶性蛋白,而VP1-His主要以包涵体的形式存在,需对VP1-His蛋白进行透析复性,纯度均在90％以上;免疫新西兰大白兔后获得高效价的特异性兔抗血清.rn 结论:两种标签的融合蛋白均具有良好的免疫原性和抗原性,所制备的多克隆抗体具有较好的特异性,为埃可病毒检测方法的建立奠定了基础.

摘要： 本发明提供了一种人轮状病毒VP8重组蛋白，所述VP8重组蛋白的氨基酸序列包括人轮状病毒VP8蛋白（以下简称为VP8蛋白）氨基酸序列和外源多肽氨基酸序列，所述外源多肽的等电点小于等于5。本发明还提供了基于该VP8重组蛋白制备的人轮状病毒疫苗。与现有技术相比，本申请提供的VP8重组蛋白通过VP8蛋白与破伤风毒素和/或白喉毒素蛋白中含负电荷的氨基酸的多肽片段融合表达，提高大肠杆菌表达的轮状病毒VP8蛋白的水溶性和产量，并且所得到的融合蛋白具有很好的免疫能力，所制备得到的疫苗具有很好的效果。

摘要： 本发明属于生物医药与生物检测技术领域，具体为一种口蹄疫病毒O型毒株(O/BY/CHA/2010)中VP1、VP2和VP4三个结构蛋白的表位最小基序肽及其应用。本发明提供的5个线性抗原表位最小基序肽可用作研发新的抗O型口蹄疫病毒重组多表位肽疫苗候选表位肽，其氨基酸序列分别为SEQ.ID NO.1～SEQ.ID NO.5。本发明还提供用作研制诊断口蹄疫病毒流行情况的高特异性和高敏感度的重组多表位肽的检测抗原的候选表位，其氨基酸序列如SEQ.ID NO.6～SEQ.ID NO.10所示。

摘要： 本发明提供了传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白的重组载体pCI-VP2/VP4/VP3，它比其它常规真核表达载体的表达能力强10-40倍，基因表达量高可以增强DNA疫苗的效果。本发明还提供了一种传染性法氏囊病病毒的DNA疫苗，包括上述真核表达质粒和免疫佐剂，其质量比为1∶1-5，它是一种安全、稳定、有效的传染性法氏囊病病毒(IBDV)DNA疫苗，有制备简单、贮运方便。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体公开了，一种共表达草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白VP4和VP35的重组杆状病毒的制备方法和应用。将SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.2所示序列顺序插入到pFastBacTMⅠ的BamHⅠ和EcoR I酶切位点之间，得到重组质粒pFastBac‑S11‑T2A‑S6，最终获得可表达草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白VP4和VP35的重组杆状病毒，该重组病毒表达量高，制备的蛋白适合用于草鱼呼肠孤病毒病疫苗的生产，具备广阔的应用前景。

摘要： 提供编码修饰后诺如病毒VP1蛋白的核酸，以及包括修饰后诺如病毒VP1蛋白中的一个或多个蛋白的VLP。还描述由植物、植物的部分或植物细胞产生修饰后诺如病毒VP1蛋白和诺如病毒VLP的方法。

摘要： 本发明提供了一种人轮状病毒VP8重组蛋白，所述VP8重组蛋白的氨基酸序列包括人轮状病毒VP8蛋白（以下简称为VP8蛋白）氨基酸序列和外源多肽氨基酸序列，所述外源多肽的等电点小于等于5。本发明还提供了基于该VP8重组蛋白制备的人轮状病毒疫苗。与现有技术相比，本申请提供的VP8重组蛋白通过VP8蛋白与破伤风毒素和/或白喉毒素蛋白中含负电荷的氨基酸的多肽片段融合表达，提高大肠杆菌表达的轮状病毒VP8蛋白的水溶性和产量，并且所得到的融合蛋白具有很好的免疫能力，所制备得到的疫苗具有很好的效果。

摘要： 本发明属于生物医药与生物检测技术领域，具体为一种口蹄疫病毒O型毒株(O/BY/CHA/2010)中VP1、VP2和VP4三个结构蛋白的表位最小基序肽及其应用。本发明提供的5个线性抗原表位最小基序肽可用作研发新的抗O型口蹄疫病毒重组多表位肽疫苗候选表位肽，其氨基酸序列分别为SEQ.ID NO.1～SEQ.ID NO.5。本发明还提供用作研制诊断口蹄疫病毒流行情况的高特异性和高敏感度的重组多表位肽的检测抗原的候选表位，其氨基酸序列如SEQ.ID NO.6～SEQ.ID NO.10所示。

摘要： 本发明提供了传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白(VP2/VP4/VP3)基因，它比病毒主要宿主保护性抗原VP2基因更能增强疫苗的免疫原性。本发明还提供了以pCI作为真核表达载体，含有上述编码序列的重组载体，它比其它常规真核表达载体的表达能力强10－40倍，基因表达量高可以增强DNA疫苗的效果。。本发明还提供了一种传染性法氏囊病病毒的DNA疫苗，包括上述真核表达质粒和免疫佐剂，其质量比为1∶1－5，它是一种安全、稳定、有效的传染性法氏囊病病毒(IBDV)DNA疫苗，制备简单、贮运方便。

摘要： 本发明公开了O型FMDV VP1蛋白‑铁蛋白融合蛋白、蛋白笼纳米颗粒及其制备方法。本发明将含有O型FMDV优势表位与铁蛋白片段的核苷酸序列串联，设计并合成了O型FMDV VP1蛋白表位‑铁蛋白片段；然后与促溶标签和亲和标签EW29相连，得到EW29/促溶标签/O型FMDV VP1蛋白表位‑铁蛋白片段，诱导、亲和纯化后即得O型FMDV VP1蛋白‑铁蛋白融合蛋白。电镜结果显示，该融合蛋白形成了20～25 nm的蛋白笼纳米颗粒。本发明为进一步研制安全、有效的O型FMDV VP1蛋白疫苗奠定了基础。

摘要： 本发明公开了重组猪肠病毒G型VP2、VP3蛋白，分别由序列表SEQ.ID.No.1、SEQ.ID.No.2的基因碱基序列编码或者具有SEQ.ID.No.3、SEQ.ID.No.4的氨基酸序列。据此，还制备了多克隆抗体，同时基于VP2、VP3蛋白建立了两种间接ELISA检测方法。所得重组蛋白具有抗原性好、免疫原性强的特点，ELISA检测方法操作简单，特异性强，重复性好，敏感度高，可用于检测并准确判断猪肠病毒G型的感染情况，应用前景良好。综上，本发明为猪肠病毒G型的流行病学调查提供技术手段，为猪肠病毒G型感染提供新型快速的血清学检测方法。