肠道病毒71型

摘要： 目的探索锌指抗病毒蛋白(ZAP)在肠道病毒71型(EV71)感染小鼠中的表达水平及其调节作用,为EV71抗病毒治疗提供数据基础。方法首将C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为空白对照组(Control组)、感染组(EV71组)、感染+ZAP质粒组(ZAP组)、感染+空质粒组(Mock组)。后3组腹腔注射EV71建立感染小鼠模型,ZAP组小鼠通过眼眶后静脉丛注射质粒构建ZAP过表达小鼠模型。采用苏木精-伊红(HE)染色、蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)等方法,检测小鼠不同组织病毒载量、各组织病变情况、ZAP和VP1表达水平。结果EV71感染后小鼠组织中,ZAP的表达显著增加;EV71感染后,ZAP过表达小鼠病理损伤减轻,组织中病毒载量降低,与野生型小鼠相比表现出更轻的症状。结论ZAP在抗EV71感染的免疫过程中扮演重要角色,提示ZAP过表达可以提高小鼠对EV71病毒的敏感性,并提高对病毒性炎症反应的抵抗力。这一发现为ZAP在病毒诱导的炎症性疾病中的作用提供了新的思路。

摘要： 目的:探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)在肠道病毒(EV)感染导致的神经损伤中的作用。方法:30只BALB/c小鼠分为对照组、肠道病毒(EV)71组和柯萨奇病毒A组2型(CVA2)组,每组10只。EV71组和CVA2组小鼠分别经腹腔注射EV71或经肌内注射CVA2,观察临床症状和生存情况。感染后第7天,采用HE和尼氏染色观察脑组织病理变化,采用免疫荧光对NLRP3和EV71/CVA2进行共定位观察。使用qRT-PCR法检测小鼠脑组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA的表达,Western blot法检测NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白的表达。结果:EV71和CVA2感染后小鼠出现明显的嗜睡、昏迷、共济失调、肢体麻痹等神经系统受累症状。与对照组比较,EV71组和CVA2组小鼠脑组织出现炎细胞浸润、血管袖套、胶质细胞聚集和神经元退行性病变。EV71组和CVA2组小鼠脑组织病毒抗原蛋白与NLRP3存在共定位。与对照组比较,EV71组和CVA2组小鼠脑组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA的表达升高,NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白的表达升高(P<0.05)。结论:NLRP3炎性小体活化可能参与EV71或CVA2感染所致的神经系统损伤。

摘要： 目的:对金莲花抗肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)物质基础进行研究。方法:通过建立超高效液相色谱-串联二极管阵列检测器-飞行时间质谱(UPLC-DAD-TOF/MS)指纹图谱对金莲花物质基础进行表征,通过噻唑蓝(MTT)法对金莲花抗EV71病毒抑制率进行检测,通过正交偏最小二乘法(OPLS)和灰色关联分析法(GRA)对金莲花物质基础和病毒抑制率进行谱效相关关联分析。结果:建立了20批次金莲花样品的指纹图谱,标定了31个共有峰,并进行了质谱解析;建立了金莲花对EV71抑制率检测方法,20批次金莲花的病毒抑制率为49.64%~73.69%;OPLS和GRA分析结果表明,共有峰12、13、14、18可能为金莲花抗EV71物质基础。结论:共有峰12(番石榴酸)、13(未鉴定的生物碱成分)、14(对羟基苯甲苹果酸)和18(2″-O-乙酰基荭草苷)可能为金莲花抗EV71物质基础,此可为金莲花质量标准的建立和金莲花抗病毒研究提供借鉴和数据支持。

摘要： 手足口病是一种全球性传染病,但在亚太地区特别是中国尤为高发。自2008年手足口病在我国大范围流行已过去10多年,手足口病仍是我国发病率最高、死亡病例数最多的丙类传染病,严重影响儿童健康^([1])。20多种肠道病毒均可引发手足口病,其中柯萨奇病毒A组16型(CA-16)和肠道病毒71型(EV-71)是引起全球多次大规模手足口病暴发流行的重要病原;EV-71也是引起重症病例死亡的绝对优势病原^([2-3]),手足口病已成为我国儿童重要的公共卫生问题。

摘要： 目的 研究不同病原体所致重症手足口病(HFMD)患儿T细胞亚群的变化及脾胺肽的干预影响。方法 选取2016年6月-2019年6月收治的96例重症HFMD患儿作为研究对象,根据患儿入院后留取的大便核酸检测结果,分为柯萨奇病毒A组16型病毒(CoxA16)阳性组(22例),肠道病毒71型(EV71)阳性组(74例)^(+)另选取同期体检的健康儿童102例作为健康对照组。根据家长意愿,采用常规治疗(56例),脾胺肽治疗(40例)^(+)比较CoxA16阳性组和EV71阳性组患儿一般临床资料^(+)流式细胞仪测定受试者T淋巴细胞亚群,分析经不同方案治疗后各组HFMD患儿T细胞亚群的变化情况及对预后的影响。结果 CoxA16阳性组和EV71阳性组患儿最高体温、血糖、白细胞计数、中性粒细胞、免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM水平相比,差异无统计学意义(P>0.05),EV71阳性组患儿肢体抖动发生率显著高于CoxA16阳性组患儿(P0.05)^(+)EV71阳性组和和CoxA16阳性组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平相比,差异无统计学意义(P>0.05)^(+)与EV71阳性组、CoxA16阳性组治疗前相比,经治疗后,HFMD患儿外周血组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)水平显著升高(P0.05)^(+)行常规治疗和脾胺肽治疗后,HFMD患儿外周血组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平相比,差异无统计学意义(P>0.05)。HFMD患儿行常规治疗和脾胺肽治疗后的预后情况相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CoxA16阳性和EV71阳性HFMD患儿CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)水平无差异,脾胺肽治疗可上调其水平。

摘要： 目的:分析2014-2018年吉林省长春市手足口病流行特征及肠道病毒71型(EV-A71)VP1基因特征,探讨其流行规律,为及时调整防控策略提供参考依据。方法:利用中国疾病预防控制信息系统中的数据,采用描述性流行病学方法对2014-2018年吉林省长春市手足口病疫情数据进行分析。收集2014-2018年吉林省长春市医疗机构报告手足口病临床诊断病例咽拭子标本,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测标本中总肠道病毒、肠道病毒71型(EV-A71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox-A16),确定型别。对EV-A71的VP1区扩增并测序,比对构建系统进化树,分析同源性和氨基酸变异位点。结果:2014-2018年吉林省长春市累计报告手足口病病例12685例,发病率呈现先降后升趋势,2016年达到高峰,之后呈逐年递降趋势。每年流行趋势基本相同,呈单峰分布,有明显的季节性。吉林省长春市14个县区均有病例报告,年均报告发病率前3位的地区为高新区(129.14/10万)、宽城区(102.17/10万)和经开区(100.98/10万)。病例中,男性比例明显高于女性,以5岁以下儿童为主。吉林省长春市EV-A71阳性样本各月份均有检出。2014年3-9月和2017年5月-2018年5月,手足口病毒型别以EV-A71为主,且呈逐渐上升趋势。测序获得EV-A71序列146条,其中除2017年3条序列和2018年7条序列属于EV-A71的B5亚型外,其余序列均属于C4亚型中的C4a亚型。VP1区145氨基酸位点为E,2018年2株检测到VP1104D,另外3株检测到VP1218R,其余各株主要毒理位点和抗原性位点未发生变异,EV-A71的B5亚型较C4亚型有VP143E、VP158T和VP1184T3个氨基酸位点差异。结论:吉林省长春市手足口病发病主要发生在5岁以下男性幼童,引发手足口病流行的肠道病毒以EV-A71为主,主要为C4a亚型,也有少部分B5亚型的流行,部分氨基酸变异位点需持续监测,以免造成大范围流行。

摘要： 目的探讨肠道病毒71型(EV71)感染手足口病(HFMD)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中信号转导和转录激活因子3(STAT3)表达水平、血清白介素-22(IL-22)水平及其临床意义。方法选取2019年1月至2021年3月本院收治的92例EV71感染HFMD患儿为HFMD组,另选取92例同期体检健康儿童为健康组。比较健康组与HFMD组一般资料;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测PBMC中STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清IL-22水平;按EV71感染HFMD严重程度将HFMD患儿分为轻症组(64例)、重症组(28例),比较不同严重程度HFMD患儿PBMC中STAT3及血清IL-22水平;Pearson法分析EV71感染HFMD患儿PBMC中p-STAT3表达水平、血清IL-22水平与白细胞计数的相关性。结果HFMD组EV71感染HFMD患儿白细胞水平、PBMC中p-STAT3表达水平及血清IL-22水平明显高于健康组(t=11.479、22.625、13.464,P<0.05),年龄、男/女比例、PBMC中STAT3水平与健康组差异无统计学意义(t/χ^(2)=0.761、0.359、0.631,P=0.448、0.549、0.529);重症组EV71感染HFMD患儿PBMC中p-STAT3及血清IL-22水平明显高于轻症组(t=8.887、8.482,P<0.05),PBMC中STAT3水平与轻症组差异无统计学意义(t=1.475,P=0.144);EV71感染HFMD患儿PBMC中p-STAT3表达水平、血清IL-22水平与白细胞计数均呈正相关(r=0.452、0.476,P<0.05)。结论EV71感染HFMD患儿外周血中p-STAT3、IL-22水平较高,二者有望成为判断EV71感染HFMD患儿病情严重程度的指标。

摘要： 人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)能够引起儿童的手足口病,并且具有嗜神经毒性。该病症在全球范围内的传播逐渐引起科研和医务人员的重视。动物模型是研究传染病的重要手段,现阶段对EV71易感动物模型研究有了多方面成果。本文对EV71动物模型近期的研究进行整理总结,并对后续研究方向进行展望。

摘要： 目的探讨短视频联合情景模拟健康宣教对肠道病毒71型(EV-A71)感染的手足口病(HFMD)患儿家属照护能力的影响。方法选取2019年1月至2020年12月焦作市人民医院收治的108例EV-A71感染的HFMD患儿作为研究对象,按照随机数表法分为观察组(54例)和对照组(54例)。给予对照组家属常规健康宣教,观察组在对照组基础上加用短视频联合情景模拟健康宣教。比较两组患儿症状改善情况、家属健康知识掌握度以及干预前、干预1周后中文版家属照顾者照顾能力量表(FCTI)、生活质量综合评定问卷(GQOL-74)评分及家属护理满意度。结果观察组口腔溃疡愈合时间、皮疹消失时间均短于对照组(P0.05)。观察组健康知识掌握度高于对照组(P<0.05)。干预后,两组FCTI评分低于干预前,观察组FCTI评分低于对照组(P<0.05)。干预后,两组GQOL-74评分高于干预前,观察组GQOL-74评分高于对照组(P<0.05)。观察组家属护理满意度高于对照组(P<0.05)。结论将短视频联合情景模拟健康宣教应用于EV-A71感染HFMD患儿家属中,可促使患儿症状的改善,提高家属知识掌握度,从而提升照护能力和护理满意度。

摘要： 目的制备肠道病毒71型(EV71)外壳蛋白表位肽多克隆抗血清。方法利用5种B细胞表位预测软件对EV71外壳蛋白进行分析,设计针对病毒蛋白(VP)的4种表位肽,即VP1(aa.204-223)、VP2(aa.133-163)、VP3(aa.139-148+aa.173-191)和VP4(aa.1-23),化学合成后与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联得到相应肽。然后,分别联合MF59/CpGC274佐剂皮下免疫BALB/c小鼠6次,间隔2周,采集血清,用ELISA和Western blot对其抗体活性进行分析。结果4种抗血清均可有效结合EV71病毒和其变性病毒,VP2抗血清与变性病毒的结合活性较高,其余3种与病毒及变性病毒的结合力相当;而且4种抗血清均可与病毒样颗粒(VLP)及变性VLP结合。VP1和VP2抗血清分别与EV71 VLP中的组成蛋白VP1和VP0(VP2和VP4前体蛋白)结合,其中VP2抗血清的结合活性最好,VP1抗血清次之;同时,VP1和VP2抗血清还可与EV71病毒特异性高效结合,且VP2抗血清可同时结合EV71病毒的空心颗粒的VP0及实心颗粒的VP2。VP3和VP4抗血清与VLP和病毒未显示明显的结合活性。结论成功制备了4种EV71表位肽多克隆抗血清,为ELISA和Western blot提供检测工具,并可用于EV71疫苗质控(QC)研究。

摘要： 目的：观察EV71病毒感染引起的手足口病死亡病例组织器官病理变化,探讨病理发生机制,为临床诊断、治疗和预防提供科学依据.方法：采集手足口病死亡病例组织、胸腔积液和粪便等标本,实时荧光RT-PCR检测胸腔积液和粪便标本中手足口病病原核酸,并进一步分离病毒,进行基因组测序和序列分析;对组织标本进行HE染色病理学检查.结果：胸腔积液和粪便标本EV71病毒核酸检测阳性,细胞培养分离到5株EV71毒株,基因型为C4基因亚型;病理组织学检查发现肺、肾脏、胸髓和肝脏组织病理变化.结论：EV71病毒感染是引起手足口病病人死亡的主要原因.

摘要： 目的：观察EV71病毒感染引起的手足口病死亡病例组织器官病理变化,探讨病理发生机制,为临床诊断、治疗和预防提供科学依据.方法：采集手足口病死亡病例组织、胸腔积液和粪便等标本,实时荧光RT-PCR检测胸腔积液和粪便标本中手足口病病原核酸,并进一步分离病毒,进行基因组测序和序列分析;对组织标本进行HE染色病理学检查.结果：胸腔积液和粪便标本EV71病毒核酸检测阳性,细胞培养分离到5株EV71毒株,基因型为C4基因亚型;病理组织学检查发现肺、肾脏、胸髓和肝脏组织病理变化.结论：EV71病毒感染是引起手足口病病人死亡的主要原因.

摘要： 目的：观察EV71病毒感染引起的手足口病死亡病例组织器官病理变化,探讨病理发生机制,为临床诊断、治疗和预防提供科学依据.方法：采集手足口病死亡病例组织、胸腔积液和粪便等标本,实时荧光RT-PCR检测胸腔积液和粪便标本中手足口病病原核酸,并进一步分离病毒,进行基因组测序和序列分析;对组织标本进行HE染色病理学检查.结果：胸腔积液和粪便标本EV71病毒核酸检测阳性,细胞培养分离到5株EV71毒株,基因型为C4基因亚型;病理组织学检查发现肺、肾脏、胸髓和肝脏组织病理变化.结论：EV71病毒感染是引起手足口病病人死亡的主要原因.

摘要： 目的：观察EV71病毒感染引起的手足口病死亡病例组织器官病理变化,探讨病理发生机制,为临床诊断、治疗和预防提供科学依据.方法：采集手足口病死亡病例组织、胸腔积液和粪便等标本,实时荧光RT-PCR检测胸腔积液和粪便标本中手足口病病原核酸,并进一步分离病毒,进行基因组测序和序列分析;对组织标本进行HE染色病理学检查.结果：胸腔积液和粪便标本EV71病毒核酸检测阳性,细胞培养分离到5株EV71毒株,基因型为C4基因亚型;病理组织学检查发现肺、肾脏、胸髓和肝脏组织病理变化.结论：EV71病毒感染是引起手足口病病人死亡的主要原因.

摘要： 目的：了解渭南市手足口病病原学特征和肠道病毒71型(EV71)基因特征. 方法：应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-qPCR)法,对1019份疑似手足口病标本进行核酸分型检测.对2例EV71型标本VP1片段进行同源性及系统进化分析. 结果：1019份疑似手足口病标本中,其它HEV阳性率最高,为26.89％(274/1019),流行时间以5月-10月为主,年龄以5岁以下儿童为主,HEV阳性病例男女比例为1.26∶1(384/305),托幼儿童EV71阳性率(23.38％)高于散居儿童(15.58％),重症病例EV71阳性率(72.22％)高于普通病例(22.32％).渭南市EV71VP1区序列与C4a基因亚型核苷酸和氨基酸同源性最高,分别为96.6％～96.7％和99.3％. 结论：2016年渭南市手足口病主要病原体是其它HEV,EV71是引起渭南市手足口重症病例的优势病毒型.渭南市EV71属于C4a基因亚型,轻型病例和重症病例EV71VP1氨基酸序列无差异.

摘要： 目的：了解渭南市手足口病病原学特征和肠道病毒71型(EV71)基因特征. 方法：应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-qPCR)法,对1019份疑似手足口病标本进行核酸分型检测.对2例EV71型标本VP1片段进行同源性及系统进化分析. 结果：1019份疑似手足口病标本中,其它HEV阳性率最高,为26.89％(274/1019),流行时间以5月-10月为主,年龄以5岁以下儿童为主,HEV阳性病例男女比例为1.26∶1(384/305),托幼儿童EV71阳性率(23.38％)高于散居儿童(15.58％),重症病例EV71阳性率(72.22％)高于普通病例(22.32％).渭南市EV71VP1区序列与C4a基因亚型核苷酸和氨基酸同源性最高,分别为96.6％～96.7％和99.3％. 结论：2016年渭南市手足口病主要病原体是其它HEV,EV71是引起渭南市手足口重症病例的优势病毒型.渭南市EV71属于C4a基因亚型,轻型病例和重症病例EV71VP1氨基酸序列无差异.

摘要： 目的：了解渭南市手足口病病原学特征和肠道病毒71型(EV71)基因特征. 方法：应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-qPCR)法,对1019份疑似手足口病标本进行核酸分型检测.对2例EV71型标本VP1片段进行同源性及系统进化分析. 结果：1019份疑似手足口病标本中,其它HEV阳性率最高,为26.89％(274/1019),流行时间以5月-10月为主,年龄以5岁以下儿童为主,HEV阳性病例男女比例为1.26∶1(384/305),托幼儿童EV71阳性率(23.38％)高于散居儿童(15.58％),重症病例EV71阳性率(72.22％)高于普通病例(22.32％).渭南市EV71VP1区序列与C4a基因亚型核苷酸和氨基酸同源性最高,分别为96.6％～96.7％和99.3％. 结论：2016年渭南市手足口病主要病原体是其它HEV,EV71是引起渭南市手足口重症病例的优势病毒型.渭南市EV71属于C4a基因亚型,轻型病例和重症病例EV71VP1氨基酸序列无差异.

摘要： 目的：了解渭南市手足口病病原学特征和肠道病毒71型(EV71)基因特征. 方法：应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-qPCR)法,对1019份疑似手足口病标本进行核酸分型检测.对2例EV71型标本VP1片段进行同源性及系统进化分析. 结果：1019份疑似手足口病标本中,其它HEV阳性率最高,为26.89％(274/1019),流行时间以5月-10月为主,年龄以5岁以下儿童为主,HEV阳性病例男女比例为1.26∶1(384/305),托幼儿童EV71阳性率(23.38％)高于散居儿童(15.58％),重症病例EV71阳性率(72.22％)高于普通病例(22.32％).渭南市EV71VP1区序列与C4a基因亚型核苷酸和氨基酸同源性最高,分别为96.6％～96.7％和99.3％. 结论：2016年渭南市手足口病主要病原体是其它HEV,EV71是引起渭南市手足口重症病例的优势病毒型.渭南市EV71属于C4a基因亚型,轻型病例和重症病例EV71VP1氨基酸序列无差异.

摘要： 目的：了解濮阳地区手足口病患者标本中分离的肠道病毒71型(EV71)病毒全基因组特征. 方法：选取市辖区内部分手足口病肠道病毒EV71型核酸阳性标本,使用RD(human rhabdomyosarcom人横纹肌肉瘤)细胞进行病毒培养,RT-PCR型别鉴定,对分离得到的7株EV71型毒株通过12对引物进行分段扩增,扩增产物进行EV71型全基因组序列测定和基因进化特性分析,利用生物信息学软件对序列进行分析并构建EV71病毒在濮阳地区的分类和发育图谱. 结果：对7株EV71病毒进行系统发育树构建,7株EV71病毒在分类上均属于C4亚型C4a分支.在发育相似度上主要分为两大类,其中的PY464与宁波2010年的NINGBO.CHN/065/2010EV71分离株相似度最高,而其他6株呈现聚类,与山东临沂的EV71SDLY107分离株相似度最高.在同一时期、同一地区,轻重症病例分离到的毒株VP1区段没有差别,而全基因区段存在一定的差别,这些位置的变异很可能是导致轻重症病例的关键. 结论：在同一地区,手足口病毒在同一时期亦呈现出某一种病毒为主的流行趋势.

摘要： 目的：了解濮阳地区手足口病患者标本中分离的肠道病毒71型(EV71)病毒全基因组特征. 方法：选取市辖区内部分手足口病肠道病毒EV71型核酸阳性标本,使用RD(human rhabdomyosarcom人横纹肌肉瘤)细胞进行病毒培养,RT-PCR型别鉴定,对分离得到的7株EV71型毒株通过12对引物进行分段扩增,扩增产物进行EV71型全基因组序列测定和基因进化特性分析,利用生物信息学软件对序列进行分析并构建EV71病毒在濮阳地区的分类和发育图谱. 结果：对7株EV71病毒进行系统发育树构建,7株EV71病毒在分类上均属于C4亚型C4a分支.在发育相似度上主要分为两大类,其中的PY464与宁波2010年的NINGBO.CHN/065/2010EV71分离株相似度最高,而其他6株呈现聚类,与山东临沂的EV71SDLY107分离株相似度最高.在同一时期、同一地区,轻重症病例分离到的毒株VP1区段没有差别,而全基因区段存在一定的差别,这些位置的变异很可能是导致轻重症病例的关键. 结论：在同一地区,手足口病毒在同一时期亦呈现出某一种病毒为主的流行趋势.

摘要： 本发明提供了新的肠道病毒71毒株以及芒柄花素或其盐在该毒株中的应用。具体地，本发明人发现芒柄花素特异性地对肠道病毒71(EV‑A71或EV71)在早期感染阶段具有强大的抑制作用。通过病毒效价减少实验发现，芒柄花素对其他种的肠道病毒均不具有抑制效果。机制研究发现它作用于病毒感染细胞的进入阶段，而不抑制病毒基因组复制阶段。此外，本发明还通过耐药株的筛选鉴定出芒柄花素的作用靶点位于结构蛋白VP1第7位缬氨酸和VP4第58位赖氨酸，含有这两个突变位点的EV71对芒柄花素具有耐药性。

摘要： 本发明首先提供一种肠道病毒RNA提取试剂盒，它包含如下组分，①RNA提取溶液Ⅰ：含十二烷基硫酸钠、曲拉通、异硫氰酸胍和100~400μg/ml的磁珠；②RNA提取溶液Ⅱ：含4-羟乙基哌嗪乙磺酸和氯化钠；③RNA提取溶液Ⅲ：含曲拉通和氯化钠；和④RNA提取溶液Ⅳ：硅油。本发明提供的提取试剂盒能配合自动化仪器使用，进行肠道病毒RNA定量检测；该试剂盒RNA提取得率高、检测灵敏度高；能对各样本中的RNA浓度进行快速、准确测定，为早期诊断各类病原体感染提供可靠的实验依据。本发明还提供一种包含RNA洗脱液的磁珠法RNA提取试剂盒和一种一步法提取RNA的试剂盒。本发明提供的三种试剂盒都能有效提取含有各种抑制物的肛拭子、粪便、咽拭子等不同类型样本的肠道病毒RNA。

摘要： 本发明实施例公开了一种肠道病毒通用型、柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型核酸荧光PCR检测试剂盒，包括RNA提取溶液、RNA洗脱液、内标、PCR反应液、EV/CA16/EV71酶混合液、EV/CA16/EV71阳性对照品、EV/CA16/EV71阴性对照品；本试剂盒在同一样本中同时检测肠道病毒通用型、柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型三种肠道病毒，而不能检测出其他病原体RNA并且检测灵敏度可达400copie/ml，检测范围为4.0E+02～4.0E+08copies/ml，为早期诊断肠道病毒通用型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型感染提供可靠的实验证据。

摘要： 本发明实施例公开了一种表达重组肠道病毒71型病毒样颗粒的发酵诱导工艺、肠道病毒71型疫苗及其制备方法。所述诱导工艺包括有在诱导阶段流加甲醇步骤，所述流加甲醇步骤包括：在第一阶段，添加甲醇的浓度为0‑0.90g/L；在第二阶段，添加甲醇的浓度为0.90‑3.0g/L。实施本发明，可在诱导阶段促进酵母生长，使发酵罐的细胞密度损失较小，提高诱导效率，减少死细胞比例，并显著提高抗原表达量。

摘要： 本发明提供一种检测肠道病毒并区分柯萨奇病毒A16型和肠道病毒71型的试剂盒，利用TaqMan探针多色荧光PCR技术，选择在病毒序列相对保守序列设计肠道病毒通用引物，并通过特异性探针检测肠道病毒通用型、肠道病毒71型以及柯萨奇病毒A16型。本发明试剂盒检测过程无需荧光PCR后的熔解曲线分析而仅凭不同荧光标记的探针检测就能检测肠道病毒，并区分肠道病毒71型以及柯萨奇病毒A16型；同时本发明还引入了人工构建的内参照系统，用于避免检测结果的假阴性；试剂盒检测灵敏度高、结果稳定可靠、使用方便，适合于环境、疾控以及临床中肠道病毒、柯萨奇病毒A16型、肠道病毒71型的快速检测。

摘要： 本公开涉及一种多重PCR检测柯萨奇病毒A6型/A10型/A16型/肠道病毒71型/肠道病毒通用型用引物探针组。本公开还提供了一种多重荧光定量PCR检测柯萨奇病毒A6型/A10型/A16型/肠道病毒71型/肠道病毒通用型的试剂盒，所述试剂盒包括本公开所述的引物探针组。通过上述技术方案本公开为食品中柯萨奇病毒A6型、A10型、A16型、肠道病毒71型及肠道病毒通用型的快速筛查提供了完备的解决方案，能够进一步提升手足口病的应急处置和综合防控能力，为降低手足口病在人群大范围传播提供必要的技术保障，进而消除传染病暴发造成的社会影响和经济损失。

摘要： 本发明提供了肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒其它各亚型三色荧光RT-PCR联合检测方法及其试剂盒，快速准确的检测出样品中肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒其它各亚型核酸的方法。该方法包括：(1)采集和运送感染或疑似病人样本；(2)样本预处理和提取RNA；(3)一步PCR-三色荧光探针体外扩增法对样本进行检测；(4)扩增反应结束后根据每个扩增反应的荧光强度对相应样本进行分析，从而判断所采集的样本中肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒其它各亚型核酸的存在，并能够对对其进行准确定量(图3)，实现了对该类病毒实时快速精确联合检测之目的。

摘要： 本发明属于生物医药领域，具体涉及一种靶向肠道病毒2C蛋白的多肽抑制剂及应用。本发明涉及到的多肽抑制剂的核心序列为SEQ ID NO.1所示，包含有穿膜肽的序列为SEQ ID NO.2所示。本发明提供的多肽与其他靶向肠道病毒2C蛋白的抑制剂相比，抑制效率更高，且安全性好，为肠道病毒的防控提供了一种新的策略，同时也为加快抗人肠道病毒多肽小分子药物的研发提供了新的理论依据。

摘要： 本发明提供了适应vero细胞的肠道病毒D68、肠道病毒D68疫苗及其用途，其中包含适应vero细胞的肠道病毒D68的疫苗，在适应之前在基本上不含血清的培养基中培养所述vero细胞。本发明还公开了在受试者中诱导针对肠道病毒D68感染的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者给药有效量的所述疫苗。

摘要： 本发明提供了新的肠道病毒71毒株以及芒柄花素或其盐在该毒株中的应用。具体地，本发明人发现芒柄花素特异性地对肠道病毒71(EV-A71或EV71)在早期感染阶段具有强大的抑制作用。通过病毒效价减少实验发现，芒柄花素对其他种的肠道病毒均不具有抑制效果。机制研究发现它作用于病毒感染细胞的进入阶段，而不抑制病毒基因组复制阶段。此外，本发明还通过耐药株的筛选鉴定出芒柄花素的作用靶点位于结构蛋白VP1第7位缬氨酸和VP4第58位赖氨酸，含有这两个突变位点的EV71对芒柄花素具有耐药性。