基因分型

摘要： 目的研究自动核酸分子杂交鉴别女性人乳头状瘤病毒(HPV)感染患者基因分型的临床价值。方法回顾性分析2019年3月至2021年3月于本院进行HPV分型检测的71例女性患者临床资料。患者均接受自动核酸分子杂交、反向斑点杂交(RDB)进行HPV基因分型检测。以RDB检测结果作为参照,计算自动核酸分子杂交诊断高危型HPV感染敏感度、特异度及准确率,并计算自动核酸分子杂交诊断结果与RDB诊断结果的一致性。结果以RDB检测结果作为参照,自动核酸分子杂交诊断高危型HPV感染敏感度、特异度及准确率分别为85.71%(18/21)、96.00%(48/50)、92.96%(66/71);自动核酸分子杂交诊断结果与RDB检测结果一致性极好(Kappa值=0.829);RDB检测、自动核酸分子杂交分别检测15种高危型HPV,自动核酸分子杂交诊断1种及2种HPV型别与RDB检测完全一致共16例,分型符合率为76.19%(16/21);其中1种型别完全相同13例,占比为81.25%(13/16),2种型别完全相同3例,占比为18.75%(3/16)。结论自动核酸分子杂交诊断高危型HPV感染与RDB检测结果一致性极好,诊断敏感度及特异度、准确率较高,能够提高HPV感染基因分型鉴别效能,有利于早期发现宫颈癌,为临床早期诊治提供参考。

摘要： 目的:探讨上海长宁地区女性宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及基因亚型分布研究。方法:收集2018年1月-2020年12月上海市长宁区妇幼保健院就诊妇女58217例患者的宫颈生物脱落细胞为研究样本,采用多重PCR和毛细管电泳技术进行25种HPV-DNA亚型分型分析。结果:58217份检测标本中,检测出阳性标本14330份,阳性率为24.61%,其中,单一亚型感染9457例,阳性率65.99%(9457/14330);双重感染3003例,阳性率20.96%(3003/14330);多重感染1870例,阳性率13.05%(1870/14330);此外,高危型HPV阳性12569例,感染率为21.59%;低危型HPV阳性3648例,感染率为6.27%。女性HPV感染存在一定年龄特征,60岁组感染率排第2,为36.57%(1259/3443)。长宁地区妇女感染的最常见的高危型HPV亚型为:HPV52、HPV53、HPV16、HPV58和HPV56;最常见的低危型HPV亚型为:HPV81、HPV43、HPV42。结论:上海长宁区妇女宫颈HPV感染以单一型和高危型感染为主,并具有一定的年龄特征和地区差异。

摘要： 近期山东省青岛市即墨区某蛋鸡场内350日龄的海兰褐蛋鸡出现了鸡只消瘦、精神沉郁、腹泻、便血等症状。根据其发病突然死亡快及刨检后肠管明显肿胀,肠壁变薄,肠道内容物为混有血液的褐色和黑色稀粪等特点确诊为鸡坏死性肠炎病。产气荚膜梭菌作为该病的主要病原菌,可导致蛋鸡死淘率增加,经济效益降低及产蛋率下降。为了探究产气荚膜梭菌的生物学特性,试验收集了该鸡场20只病鸡的肠道内容物。通过稀释培养、生理生化试验、16S rRNA测序及多重PCR等方法进行产气荚膜梭菌的分离鉴定。结果表明:试验中分离出的产气荚膜梭菌(H1~H7)同源性均在99.86%~100%之间,且均为A型,因此认为导致该鸡场发生的坏死性肠炎的产气荚膜梭菌可能是A型产气荚膜梭菌。研究可为蛋鸡坏死性肠炎的诊断及鸡场的免疫防治提供理论依据,促进蛋鸡养殖业的经济发展。

摘要： 目的探讨邵阳地区孕晚期女性阴道定植B族链球菌(GBS)的血清型和基因分型与新生儿发生早发型GBS感染性疾病(GBS-EOD)的关系。方法选取2016年1月至2020年9月在邵阳学院附属第一医院孕检、分娩的孕妇1945例为研究对象。分析孕晚期女性阴道感染GBS血清型、基因分型与新生儿GBS-EOD发生的关系。结果1945例孕妇中检出234例GBS阳性,GBS定植率为12.03%,检出7个血清型,其中Ⅲ型、Ⅰb型、Ⅴ型占比较高,分别为52.14%、21.37%、10.26%;25例新生儿GBS-EOD中鉴定出5种GBS血清型,其中Ⅲ型、Ⅰa型GBS发病率较高,分别为56.00%、24.00%,且Ⅲ型GBS引起的新生儿脑膜炎、败血症、肺炎占比较高,分别为100.00%、45.45%、54.55%。25例孕晚期女性阴道定植GBS鉴定出8种基因型,其中ST19型(36.00%)、ST17型(28.00%)、ST12型(16.00%)占比较高;ST19基因型GBS引起的新生儿脑膜炎(66.67%)、肺炎(54.55%)占比最高,ST17、ST12基因型GBS引起的新生儿败血症(36.36%、27.27%)占比较高。结论孕晚期女性阴道定植GBS血清型、基因分型与新生儿GBS-EOD关系密切,其中以Ⅲ型血清型、ST19基因型最为常见,确定GBS血清型、基因型可用于指导针对性的GBS疫苗研制。

摘要： 目的:了解基于索磷布韦的直接抗病毒药物(DAAs)方案治疗中国成年慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染非1型患者的真实世界疗效及安全性。方法:选取2018年4月—2020年1月佛山市第一人民医院门诊就诊并使用基于索磷布韦的DAAs方案联合或不联合利巴韦林治疗12周的40例非1型慢性HCV感染者的临床资料,其中丙型肝炎后肝硬化7例,慢性丙型肝炎33例。检测患者基线、治疗2周或4周、疗程结束、随访12周的丙型肝炎病毒核糖酸(HCVRNA)、肝功能、血常规、肾功能、凝血功能、腹部彩超及肝脏弹性硬度值,记录治疗过程中的不良事件和实验室异常。结果:与治疗前对比,治疗2周慢性丙型肝炎和丙型肝炎后肝硬化患者的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)水平明显下降,治疗4周、12周以及停药12周的AST、ALT、TBIL水平较治疗前均有所下降;2a、3a、3b、6a慢性丙型肝炎以及3a、3b、6a丙型肝炎肝硬化患者的病毒学应答(SVR)12均为100.00%。结论:基于索磷布韦的DAAs方案治疗中国成年慢性HCV感染非1型患者疗效显著,治疗阶段无明显不良反应。

摘要： 目的:了解芜湖市某医院就诊女性患者人乳头瘤病毒(HPV)感染率、亚型以及年龄分布特点,为该地区宫颈癌防治提供依据。方法:收集2018年11月1日~2019年11月1日,在芜湖市某医院接受HPV检测的女性患者宫颈脱落细胞样本,采用HPV-DNA基因分型进行检测,并统计不同年龄组患者HPV感染情况。结果:4473例标本中,HPV感染1096例,感染率为24.5%,其中单一感染率为18.98%,复合感染率为5.52%。HPV感染前4位亚型为HPV52、16、58和51,26~30岁感染率最高。结论:芜湖市HPV感染率较以往呈现升高趋势,需加强预防宫颈癌健康知识的宣传教育和筛查工作,降低宫颈癌的高危因素。

摘要： 目的分析杭州地区22454例人乳头瘤病毒(HPV)感染患者的感染情况及基因分型。方法选取2013年7月至2019年12月在杭州市第三人民医院皮肤科､妇科､泌尿外科等科室就诊的22454例患者作为研究对象,取其泌尿生殖道分泌物,使用聚合酶链反应(PCR)-反向点扩增法进行23种HPV基因分型检测。结果22454例患者中,检测出HPV阳性患者9816例,阳性率为43.7%;高危型-HPV(HR-HPV)中最常见的基因型是HPV52,其次是16､58､53,低危型-HPV(LR-HPV)中最常见的基因型是HPV6,其次是11､81､43;10~19岁女性患者HPV感染率显著高于男性,30~89岁男性患者感染率显著高于女性(P<0.05);单一和多重HPV感染率分别为25.5%和18.3%,单一感染率明显高于多重感染率(P<0.001),男性患者单一､多重感染率均显著高于女性(P<0.001)。结论杭州地区HR-HPV中HPV52､16及58感染率最高,LR-HPV中HPV6､11及81感染率最高;女性HPV感染率呈“U”型双高峰,男性感染率总体呈持续上升趋势;单一HPV感染率显著高于多重感染,男性单一及多重感染率均显著高于女性。

摘要： 目的采用基因分型方法对30株分离自西北三省的牛源分枝杆菌分离株进行鉴定。方法从西北三省的规模化奶牛场采集结核菌素(PPD)阳性奶牛的咽拭子和鼻拭子,经分离培养后,采用16S rRNA、MPT64以及多位点PCR进行菌株分型鉴定,利用数目可变串联重复序列分析(variable-number of tandem repeats,VNTR)和分枝杆菌散在分布重复单元(Mycobacterial interspersed repetitive unit,MIRU)连用的方法对其基因型进行了分析。结果菌株分型鉴定结果表明,30株牛源临床分离株全部为分枝杆菌属,其中,12株属于结核分枝杆菌复合群,18株属于非结核分枝杆菌;12株结核分枝杆菌中10株为牛分枝杆菌,2株为人型结核分枝杆菌。MIRU-VNTR分析结果表明,12株结核分枝杆菌呈现10种VNTR基因型,4株聚集为2个基因簇。结论30株分离株均属于分枝杆菌属,且结核分枝杆菌中以牛分枝杆菌为主。

摘要： 为探讨细菌全基因组测序(whole genome sequencing,WGS)技术在基层沙门氏菌防控中的优势与可行性,对前期分离的9株沙门氏菌进行细菌全基因组测序,并进行血清型预测、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和耐药基因分析,将全基因组测序结果与传统血清分型和耐药性分析结果进行对比。结果显示:基于全基因组测序数据的血清分型结果与传统血清分型结果符合率为100%,两种方法对9株沙门氏菌血清分型结果完全一致;两种方法分析出的β-内酰胺类、氯霉素类、喹诺酮类和氨基糖苷类药物的耐药基因与耐药表型符合率为100%,即耐药菌株中均含有4大类抗菌药物的耐药基因;用全基因组测序检测到利福平、磺胺类和四环素3大类抗菌药物的7个耐药基因,表明9株沙门氏菌可能对这3大类抗菌药物耐药。结果表明:全基因组测序结果与传统实验室诊断结果完全一致,且具有快速、低成本、操作简单等优势,并且随着测序技术的发展,其检测成本和周期将进一步缩减,因此基于细菌全基因组测序开发沙门氏菌快速分型和耐药性分析方法有一定的应用价值和可行性。

摘要： 目的了解宁夏2019-2020年分离的炭疽芽胞杆菌菌株致病力及基因分型特征,为宁夏皮肤炭疽疫情判定与分子溯源提供实验室依据。方法收集2019-2020年宁夏各地区分离的炭疽芽胞杆菌,对其进行毒力鉴定,并运用MLVA-15和canSNP分型技术进行基因分型研究。结果2019-2020年宁夏分离到的炭疽芽胞杆菌均为强毒株,MLVA-15分型为同一种群,canSNP分型为A.Br.001/002组。结论2019-2020年宁夏分离到的炭疽芽胞杆菌致病力较强,且菌株呈现相同的基因分型特征,提示菌株间存在流行病学关联。此研究结果填补了宁夏炭疽芽胞杆菌实验室检测中菌株致病力及基因分型的空白。

摘要： 目的：在目的初步探讨评价多位点可变数目串联重复序列(MLVA)在新疆结核分枝杆菌基因分型效果中的应用. 方法：新疆耐药监测获得的99株结核分支杆菌菌株,常规培养、收集菌体、提取基因组DNA,采用聚合酶反应(PCR)和琼脂凝胶电泳技术,对结核分枝杆菌24个VNTR经典位点进行检测分析,基因分型聚类分析采用BioNumerics5.0软件进行DNA指纹图谱多态性分析. 结果：经基因聚类分析,分2个基因群(Ⅰ群、Ⅱ群),其中Ⅰ群占66.7％(66/99),Ⅱ群占33.3％(33/99),仅基因群Ⅰ中有2株为同一簇,成簇率为1.5％,99株菌株中有97株呈现"唯一"基因型. 结论：初步证实新疆结核分枝杆菌菌株存在明显的基因多态性,以Ⅰ群菌株为主,应加强对此型菌株流行的监控.

摘要： 目的：探讨腺苷酸环化酶2(ADCY2)基因单核苷酸多态性(SNPs)与苏皖地区汉族人群由尘螨致敏的持续性变应性鼻炎(PER)的遗传相关性. 方法：采用病例-对照研究,共纳入571例尘螨致敏的PER患者和677例健康对照者.采集所有受试者外周静脉血进行血清总IgE和特异性IgE测定,同时EDTA存储管采集抗凝血以提取DNA.预测、筛选ADCY2基因内含子区5个SNPs位点,进行基因分型. 结果：校正年龄、性别后，ADCY2基因rs1864071位点的基因型频数在病例组和对照组的差异有统计学意义，且该位点在病例组和对照组中的相加模型(OR=1.226,95%CI=1.045-1.439;P=0.013)及显性模型(OR=1.343,95%CI=1.039-1.736;P=0.024)发生。 结论：PER的风险明显增加。在苏皖汉族人群中，ADCY2基因rs1864071位点与PER显著关联，该基因可能影响尘蜗致敏PER的遗传易感性。

摘要： 在案例中，龚某某左侧头面部出血反应较明显，组织病理示左面部皮肤皮下组织出血，分析左侧颅面颈部的损伤属生前伤，同时死者胃内见大量凝血块，胃粘膜未见出血，十二指肠腔内亦见凝血块，分析当时死者吞咽反射尚存;头面颈部残存组织边缘不整齐，呈小锯齿状，上下领骨表面见细小凹痕，结合龚某某家狗的胃内提取的疑似人体组织DNA检验基因分型与死者一致，综合分析龚某某颅面颈部的损伤系狗撕咬造成。

摘要： 目的：在规范化的结核分枝杆菌数目可变串联重复序列多态性(15-VNTR)基因分型的基础上,构建涵盖我国31个省的VNTR数据库,每个省份优化出一套(VNTR)位点组合,为我国结核病预防控制提供科学依据. 方法：对2007-2008年全国结核病耐药性基线调查的结核分枝杆菌4116株行第15位点VNTR(15-VNTR)基因分型.采用分辨率指数(Hunter-Gaston Index,HGI)分析每个位点的分辨率.据此,依据谱系流行特征,以分辨率高和稳定性强为原则,为31个省设计一套12-VNTR、10-VNTR、8-VNTR、5-VNTR组合并加以评价. 结果：完成了3966株结核分枝杆菌完整的15-VNTR图谱,涵盖率为96.36％(3966/4116).通过各个位点HGI的中值比较发现,Qub-11b、MIRU26、Mtub21、Mtub04、QuB26、MIRU31、MIRU10属于高分辨率位点;Qub26、MIRU16、Mtub21、Qub-11b在部分地区呈现较差遗传稳定性.内蒙古,重庆,黑龙江地区的最优组合为10-VNTR,其他地区用8-VNTR作为最优组合. 结论：该数据库的建立,推动了结核分枝杆菌传染源全国范围的追踪和簇调查;一系列优化VNTR组合的推出助推各省通过分析成簇率实现当地疫情的监测和进行群体遗传学的研究.

摘要： 目的：基于重测序的基因组序列开发高质量的多态性微卫星标记,应用于藏酋猴种群遗传学研究. 方法：利用高通量测序平台获取藏酋猴重测序序列,经过初步组装,使用MSDB软件筛选微卫星位点.应用荧光标记和基因分型进一步开发具有多态性且在低质量样本中高度敏感且稳定的分子标记. 结果：经过组装后共获得31,994,325条序列,N50长度为4700bp,GC含量为41.5％.共获得完美型微卫星位点1,202,651个,四碱基微卫星共有217,630个,占比达到18.10％,其中侧翼序列大于200bp且核心重复类型次数大于10次的有9303个位点.基于9303个完美型四碱基微卫星数据库,随机选择50个位点进行验证,结果有27个位点的引物进行荧光标记,最终得到16个多态性的微卫星标记.其期望杂合度和观测杂合度分别为0.421～0.921和0.24～0.86.等位基因数目为5～18,平均为10.5.平均多态信息含量为0.755. 结论：明确了从基因组的短序列中开发核基因标记是一种可行且高效的方法.建立了藏酋猴四碱基微卫星分子标记数据库,并得到16个多态性的微卫星位点,为藏酋猴的遗传背景和群体遗传学研究提供了基础数据.

摘要： 文中分析了HPV与宫颈癌的相关性，介绍了HPV分型+整合位点研究进展。P16蛋白检测可预示宫颈癌变风险，握供宫颈癌术后辅助治疗方案的依据，评估宫颈癌术后复发风险。

摘要： 文中分析了HPV与宫颈癌的相关性，介绍了HPV分型+整合位点研究进展。P16蛋白检测可预示宫颈癌变风险，握供宫颈癌术后辅助治疗方案的依据，评估宫颈癌术后复发风险。

摘要： 文中分析了HPV与宫颈癌的相关性，介绍了HPV分型+整合位点研究进展。P16蛋白检测可预示宫颈癌变风险，握供宫颈癌术后辅助治疗方案的依据，评估宫颈癌术后复发风险。

摘要： 文中分析了HPV与宫颈癌的相关性，介绍了HPV分型+整合位点研究进展。P16蛋白检测可预示宫颈癌变风险，握供宫颈癌术后辅助治疗方案的依据，评估宫颈癌术后复发风险。

摘要： 文中分析了HPV与宫颈癌的相关性，介绍了HPV分型+整合位点研究进展。P16蛋白检测可预示宫颈癌变风险，握供宫颈癌术后辅助治疗方案的依据，评估宫颈癌术后复发风险。

摘要： 本发明涉及用于确定UDP-葡萄糖醛酸基转移酶1A(UGT1A)基因的基因型的单倍型标签单核苷酸多态性(htSNP)和使用所述htSNP的基因芯片，更具体而言，涉及用于确定人类UGT1A基因的单倍型的htSNP的选择方法、使用所述htSNP确定所述基因的基因型的方法和用于所述方法的基因芯片。

摘要： 本发明涉及用于确定细胞色素P450 2D6(CYP2D6)基因的基因型的单倍型标签单核苷酸多态性(htSNP)和使用所述htSNP的基因芯片，更具体而言，涉及用于确定人类CYP2D6基因的单倍型的htSNP的选择方法、使用所述htSNP确定所述基因的基因型的方法和用于所述方法的基因芯片。

摘要： 本发明涉及用于确定细胞色素P450 1A2(CYP1A2)、2A6(CYP2A6)和2D6(CYP2D6)、PXR和UDP-葡萄糖醛酸基转移酶1A(UGT1A)基因的基因型的单倍型标签单核苷酸多态性(htSNP)和使用所述htSNP的基因芯片，更具体而言，涉及用于确定人类CYP1A2、CYP2A6、CYP2D6、PXR和UGT1A基因的单倍型的htSNP的选择方法、使用所述htSNP确定所述基因的基因型的方法和用于所述方法的基因芯片。

摘要： 本发明公开了用于在使受血者和预期供血者的次要血型基因型交叉匹配的基础上(在指定的严紧性规则下)建立两种血型之间的相容性的方法。为了确定相容性，血型基因型根据与基本单倍型的集合相关联的表达状态来与相应的表现型比对，并通过建立构造为组成表现型的组合的血型的相容性来建立相容性。优选地使用算法表达式来匹配位串。在比对基因型与表现型中存在模糊度的情况，模糊度可根据样本群体中单倍型的出现频率来减小或通过配子定相求解。模糊度的这样的减小或求解在被组成单倍型表达的抗原中的错配有较大的临床重要性的情况中是特别期望的。

摘要： 本发明涉及用于确定细胞色素P450 2D6(CYP2D6)基因的基因型的单倍型标签单核苷酸多态性(htSNP)和使用所述htSNP的基因芯片，更具体而言，涉及用于确定人类CYP2D6基因的单倍型的htSNP的选择方法、使用所述htSNP确定所述基因的基因型的方法和用于所述方法的基因芯片。

摘要： 本发明提供了一种血细胞抗原基因分型的方法，其包括对来自一哺乳动物物种的个体的DNA进行多重聚合酶链反应(PCR)以便扩增并以可检测方式标记至少两种不同的血细胞抗原的基因座的含有血细胞抗原的核苷酸多态性位点的区域，并用如此扩增并标记的DNA片段来确定每一种所述血细胞抗原的基因型。多重PCR包括使用针对每一种待进行基因分型的血细胞抗原的至少一对血细胞抗原特异性嵌合引物和至少一种以可检测方式标记的通用引物，优选地为一对以可检测方式标记的通用引物。通用引物具有不存在于所述哺乳动物物种的DNA中的独特序列。每一嵌合引物对包括左侧嵌合引物和右侧嵌合引物，各引物包括3′端的血细胞抗原特异性部分和5′端的通用部分。嵌合引物的通用部分的碱基序列对应于所述至少一种通用引物的碱基序列。嵌合引物对的血细胞抗原特异性部分包含所述血细胞抗原的基因座的含有血细胞抗原的核苷酸多态性位点的区域。本发明还提供了用于通过此方法进行血细胞抗原基因分型的试剂盒，一组血细胞抗原特异性嵌合引物对和一组血细胞抗原等位基因特异性寡核苷酸探针。

摘要： 本发明公开了检测ABO血型基因型的方法和ABO血型基因座的等位基因分型标准物的模板。本发明所提供的方法，包括如下步骤：以待测样本的基因组DNA或总DNA为模板，采用引物组合进行PCR扩增，得到PCR扩增产物，然后确定含有哪几种等位基因，进一步确定待测样本的ABO血型基因型。引物组合由6条引物组成，核苷酸序列依次为序列表中的序列1至序列6。实验证明，采用本发明提供的方法检测ABO血型基因型，准确率为100％；采用本发明提供的重组质粒组合物作为ABO血型基因座的等位基因分型标准物的模板，可扩增获得ABO血型基因座的等位基因分型标准物，并可在多种商业试剂盒中使用。本发明具有重要的应用价值。

摘要： 本发明提供了同时检测幽门螺旋杆菌耐药位点、毒力基因分型及质子泵抑制剂代谢基因分型的试剂盒，具体的本发明基于多重PCR‑飞行时间质谱检测6种常用的幽门螺杆菌抗生素的16个耐药基因位点变异、2种毒力基因5个位点、及2种质子泵药物代谢基因的3个位点，并提供了配套引物、探针组合及试剂盒。

摘要： 本发明提供了一种血细胞抗原基因分型的方法，其包括对来自一哺乳动物物种的个体的DNA进行多重聚合酶链反应(PCR)以便扩增并以可检测方式标记至少两种不同的血细胞抗原的基因座的含有血细胞抗原的核苷酸多态性位点的区域，并用如此扩增并标记的DNA片段来确定每一种所述血细胞抗原的基因型。多重PCR包括使用针对每一种待进行基因分型的血细胞抗原的至少一对血细胞抗原特异性嵌合引物和至少一种以可检测方式标记的通用引物，优选地为一对以可检测方式标记的通用引物。通用引物具有不存在于所述哺乳动物物种的DNA中的独特序列。每一嵌合引物对包括左侧嵌合引物和右侧嵌合引物，各引物包括3′端的血细胞抗原特异性部分和5′端的通用部分。嵌合引物的通用部分的碱基序列对应于所述至少一种通用引物的碱基序列。嵌合引物对的血细胞抗原特异性部分包含所述血细胞抗原的基因座的含有血细胞抗原的核苷酸多态性位点的区域。本发明还提供了用于通过此方法进行血细胞抗原基因分型的试剂盒，一组血细胞抗原特异性嵌合引物对和一组血细胞抗原等位基因特异性寡核苷酸探针。

摘要： 本发明公开了检测ABO血型基因型的方法和ABO血型基因座的等位基因分型标准物的模板。本发明所提供的方法，包括如下步骤：以待测样本的基因组DNA或总DNA为模板，采用引物组合进行PCR扩增，得到PCR扩增产物，然后确定含有哪几种等位基因，进一步确定待测样本的ABO血型基因型。引物组合由6条引物组成，核苷酸序列依次为序列表中的序列1至序列6。实验证明，采用本发明提供的方法检测ABO血型基因型，准确率为100％；采用本发明提供的重组质粒组合物作为ABO血型基因座的等位基因分型标准物的模板，可扩增获得ABO血型基因座的等位基因分型标准物，并可在多种商业试剂盒中使用。本发明具有重要的应用价值。