DNA错配修复

摘要： 核酸外切酶(EXO)1兼有5'端-3'端外切酶及5'端结构特异性内切酶活性[1],属于皮瓣结构特异性内切酶(Rad)2/着色性干皮病(XP)G组蛋白家族的成员。EXO1蛋白具有EXO1a及EXO1b两种异构体,其中EXO1b的C端额外具有48个氨基酸,因而活性明显优于EXO1a[1],但两者的功能并无区别。

摘要： 传统治疗对晚期/复发妇科肿瘤的效果较差,以程序性死亡受体1及其配体(PD-1/PD-L1)抑制剂为主的免疫治疗为这些患者提供了新的治疗选择,甚至为一些原来没有治疗希望的患者带来了治愈的可能,因此成为近年研究的热点。但是,PD-1/PD-L1抑制剂对大多数晚期/复发妇科肿瘤患者无效(原发耐药),或者疗效持续时间短(继发耐药),成为免疫治疗的瓶颈。目前,临床上关注的问题主要有以下几个:①PD-1/PD-L1抑制剂单药的总体治疗效果欠佳,为了提高治疗效果,与其他药物联合应用成为新趋势;②目前临床常用的预测药物疗效的分子标志物的预测价值有限,因此,找到更为有效的分子标志物,将对免疫治疗可能有效的患者分流出来,具有重要的临床意义;③应用PD-1/PD-L1抑制剂后可能存在超进展、假性超进展等问题,因此对免疫治疗的疗效进行及时准确的评估也非常重要。此外,PD-1/PD-L1抑制剂相关不良事件的评估以及治疗等问题也备受关注。

摘要： 背景子宫内膜癌是女性常见恶性肿瘤之一,近年来微卫星不稳定性在子宫内膜癌进展中的作用逐渐受到重视,但关于微卫星不稳定与子宫内膜癌患者临床病理特征及预后的关系研究较少见。目的分析子宫内膜癌患者微卫星不稳定性及其临床意义。方法选取2015年1月至2020年12月在湖北医药学院附属十堰市人民医院进行手术治疗的子宫内膜癌患者248例,收集其癌组织标本,采用免疫组织化学法检测MutL同源物1(MLH1)、MutS同源物2(MSH2)、MutS同源物6(MSH6)、减数分裂后分离蛋白(PMS2)表达情况。分析微卫星不稳定性与子宫内膜癌患者临床病理特征及预后的关系。结果子宫内膜样腺癌患者MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失率分别为32.6%(78/239)、22.2%(53/239)、2.9%(7/239)、65.7%(157/239);子宫内膜鳞癌患者MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失率分别为5/5、3/5、5/5、4/5;子宫内膜透明细胞癌患者MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失率分别为4/4、2/4、3/4、2/4。不同病理类型子宫内膜癌患者MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失率比较,差异有统计学意义(P0.05);不同肌层侵犯深度子宫内膜癌患者MSI-H、MSI-L、MSS发生频率比较,差异有统计学意义(P0.05)。Cox比例风险模型分析结果显示,错配修复蛋白(MMRP)表达情况是子宫内膜癌患者总体生存情况的独立影响因素(P0.05)。结论微卫星不稳定性与子宫内膜癌患者病变进展及预后有关,检测微卫星不稳定性对子宫内膜癌的临床防治有一定参考价值。

摘要： 目的不同错配修复蛋白(MMR)检测组合对子宫内膜癌预后判断的价值及经济学意义。方法通过免疫组化方法检测子宫内膜癌组织中MMR的表达,按照MMR不同检测组合进行分组,将检测MLH1、MSH2定义为A组,检测MSH6、PMS2定义为B组,检测MLH1、MSH2、MSH6和PMS2定义为C组,根据各蛋白阳性结果不同,将患者分为微卫星稳定性(MSS)与微卫星不稳定性(MSI),分析各组MSI与患者临床病理特征及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的关系,评估不同MMR检测组合对子宫内膜癌患者预后预测效果。结果A组患者MSI与ER、PR的表达有关(χ^(2)=7.587、6.935,P<0.05);B组患者MSI与肿瘤组织分化程度、ER、PR的表达有关(χ^(2)=6.566~8.765,P<0.05);C组患者MSI与肿瘤组织分化程度、ER、PR的表达有关(χ^(2)=6.774~11.600,P<0.05)。结论通过对4种MMR中两种MMR的检测,也可对子宫内膜癌患者的预后进行判断,此种方法具有一定的临床意义和经济价值。

摘要： 目的:观察Polo样激酶1(PLK1)在卵巢癌(OC)细胞和组织中的表达情况,以及抑制PLK1表达对耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的OC细胞活力和凋亡的影响.方法:在2011年4月～2018年12月的126名OC患者纳入本研究.采用免疫组化法检测PLK1在OC组织及邻近正常卵巢组织中的表达水平.体外构建耐5-FU的OC细胞系(OVCAR3-5FUres和SKOV3-FUres).将PLK1重组质粒和PLK1-shRNA慢病毒载体(sh-PLK1)分别转染到OVCAR3、SKOV3、OVCAR3-5FUres和SKOV3-5FUres细胞中.采用CCK-8法检测细胞活力;通过串联亲和纯化和质谱分析确定PLK1在OC细胞中的结合蛋白;流式细胞术检测细胞凋亡.结果:在OC细胞系中,PLK1水平显著上调(P<0.05);并且在大多数OC组织中,PLK1表达较癌旁组织显著上调(P<0.05).Kaplan-Meier分析显示,PLK1高表达OC患者的平均存活时间显著短于PLK1低表达OC患者(P<0.001).OC中PLK1水平的升高与FIGO分期、肿瘤分级和错配修复缺陷等临床病理特征显著相关(P<0.05).与阴性对照细胞相比,转染sh-PLK1的细胞活力显著降低(P<0.05);而转染PLK1重组质粒的OVCAR3和SKOV3细胞的活力显著高于对照细胞.通过串联亲和纯化和质谱分析确定人MutS蛋白同系物2(hMSH2)是PLK1在OC细胞中的结合蛋白,并且hMSH2基因敲除使sh-PLK1转染的OVCAR3-5FUres细胞的凋亡率降低(P<0.01).结论:抑制PLK1表达通过靶向hMSH2提高了OC细胞对5-FU的敏感性.

摘要： 目的 探讨免疫组织化学检测在结直肠癌中分析错配修复(mismatch repair,MMR)蛋白表达的意义及注意事项.方法 收集2014年7月至2018年10月天津医科大学肿瘤医院具有MMR检测结果的、术前未经新辅助治疗的手术切除结直肠癌3428例,复读MMR免疫组织化学切片,对判读有问题的病例重新染色、评估,并检测微卫星不稳定性(MSI),分析MMR表达与MSI状态及临床病理参数的关系.结果 (1)3428例结直肠癌中,28例(0.8％)因当初免疫组织化学染色不佳进行重新染色,119例(3.5％)的复诊MMR结果与原判断不一致,主要集中在PMS2和MLH1.最终,261例(7.6％)为错配修复缺陷(dMMR),以MLH1、PMS2联合缺失(43.3％,113/261)为主.(2)在当初诊断时进行MSI检测的14例中,MSI与MMR结果一致的有13例;在29例进行二代测序的dMMR病例中,高度微卫星不稳定(MSI-H)与dMMR的一致率为93.1％(27/29).其中,MSI与MMR结果不一致的病例为MSH6或PMS2单独缺失.(3)21例结直肠癌呈MLH1或MSH2单独阴性,而PMS2或MSH6呈少部分或部分(弱)阳性.其中能进行MSI检测的19例中,16例为MSI-H,2例为低度微卫星不稳定,1例为微卫星稳定.(4)与错配修复完整(pMMR)的病例相比,dMMR组女性、＜50岁、具有肿瘤家族史、早期患者更多见,肿瘤更好发于右半结肠,病理类型以低分化腺癌、黏液腺癌和印戒细胞癌多见(均P＜0.05).结论 免疫组织化学检测MMR蛋白表达是一种比较有效、方便的方法,但是操作流程及结果评估需要标准化,对于特殊病例需要进行MSI检测,进而指导临床治疗和评估预后.

摘要： 目的:探讨错配修复基因hMSH2表达与上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)患者临床预后的相关性.方法:采用实时荧光定量PCR法检测150例EOC患者肿瘤组织中hMSH2 mRNA的表达水平,免疫组织化学法检测86例肿瘤组织中hMSH2蛋白的表达水平.分析hMSH2 mRNA表达与EOC患者临床病理特征的相关性;Wilcoxon秩和检验比较铂耐药组患者和铂敏感组患者肿瘤组织中hMSH2 mRNA表达水平的差异;Kaplan-Meier法和COX回归模型分析hMSH2 mRNA表达与EOC患者预后的相关性.结果:EOC患者肿瘤组织中hMSH2mRNA表达水平与临床分期、组织学分级和淋巴结转移明显相关(P＜0.05).铂耐药患者肿瘤组织中hMSH2 mRNA表达水平明显低于铂敏感患者(P=0.004);hMSH2 mRNA低表达可能明显降低EOC患者的无进展生存期(progression free survival,PFS)和总生存时间(overall survival,OS)(P 值均＜0.05);COX 回归模型显示,hMSH2 mRNA表达水平可能是预测EOC患者OS的独立危险因素[风险比(hazard ratio,HR)=1.91,95％可信区间(confidence interval,CI)为 1.85～2.31,P=0.033].结论:肿瘤组织中hMSH2mRNA表达水平与EOC患者的临床分期、组织学分级、淋巴结转移、铂类耐药以及预后密切相关.

摘要： 目的 分析免疫组织化学法检测结直肠癌四种DNA错配修复蛋白表达缺失在肿瘤微卫星状态判断中的价值.方法 选择云南省红河州第三人民医院2018年9月～2019年9月收治的37例结直肠癌患者,对其病灶组织行切片处理,所有患者先行免疫组织化学法检测,后行PCR-毛细管电泳法检测,观察两种方式的诊断结果.结果 常规切片免疫组织化学法检测结果:31例患者四种MMR蛋白呈现出弥漫强阳性表达,5例患者至少存在一种蛋白阴性表达,1例患者至少存在一种蛋白局灶阳性表达.组织芯片PCR-毛细管电泳法检测结果:30例患者四种MMR蛋白呈现出弥漫强阳性表达,6例患者至少存在一种蛋白阴性表达,1例患者至少存在一种蛋白局灶阳性表达.两种检测方式准确度、敏感度及特异度未有明显的组间差异(P>0.05).结论 通过免疫组织化学法检测结直肠癌四种DNA蛋白表达情况,在结直肠癌肿瘤微卫星状态的预测中敏感度和特异度较高,且具有一定的经济性,可有效筛选出结直肠癌,其较高的准确性能对优化治疗方案有关键作用.

摘要： 目的 了解免疫组织化学(IHC)结果为错配修复缺陷(dMMR)的子宫内膜样腺癌(EEC)中微卫星不稳定(MSI)状态,探讨在EEC中MMR/MSI不同检测方法间一致性及各自的优缺点.方法 选取2017年11月至2019年2月北京协和医院病理科错配修复(MMR)蛋白IHC检测结果为dMMR的EEC病例60例,由2名病理医师对IHC结果进行复核.利用二代测序(NGS)技术对60例样本进行MSI状态及MMR基因胚系/体细胞突变状态的检测.MLH1蛋白表达缺失的病例用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测MLH1启动子甲基化状态.在MMR IHC和MSI NGS检测结果不相符的样本中,用PCR法再次检测MSI状态,并结合基因突变及MLH1启动子甲基化检测探讨结果不一致的原因.结果 在IHC结果为dMMR的60例EEC样本中,3例IHC结果经复核为MMR蛋白表达完整/正常(pMMR),相应NGS检测结果均为MSS;另有3例肿瘤细胞含量不足,NGS检测结果为MSI状态不能确定(MSI-U).其余54例中,dMMR与MSI-H的符合率为87％(47/54).对7例不符合样本进一步分析发现:(1)5例为MLH1/PMS2蛋白表达共缺失病例.除1例样本量过少外,4例经PCR法再次检测MSI状态,其中1例为MSI-H,余3例为MSS;5例均为MLH1启动子高甲基化状态,其中2例MSS病例还存在MSH2基因的体细胞突变.(2)2例为MSH6蛋白表达单独缺失病例.2例PCR法检测结果均为MSS,其中1例存在MSH6基因胚系突变,考虑为Lynch综合征.结论 在IHC检测结果为dMMR的EEC中,除去IHC判读以及肿瘤含量不足的因素外,绝大多数病例NGS/PCR检测结果为MSI-H,一致性较高.但的确存在少数IHC结果为dMMR EEC的病例表现为MSS,多见于MLH1启动子高甲基化状态造成的MLH1/PMS2蛋白表达共缺失病例,罕见于Lynch综合征相关病例.MMR IHC和MSI NGS/PCR检测方法各有优缺点,必要时可以互为补充.

摘要： 子宫内膜癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,子宫腺肌病亦是常见的良性妇科疾病,均病因不明.两者既是两种独立的妇科疾病,又存在着错综复杂的联系.从流行病学以及临床病理特征来看,子宫腺肌病可能是子宫内膜癌发生的危险因素,但同时又是抑制子宫内膜癌进展的保护性因素.在疾病发生发展中,两者在分子信号通路、雌激素及其受体作用以及错配修复基因缺陷等方面存在着共同机制,并且因子宫腺肌病自身特征对子宫内膜癌产生了分子及机械阻断作用,阻碍了子宫内膜癌的进展.明确两者的相互关系,探究其潜在机制,能够为子宫内膜癌和子宫腺肌病的发病机制研究提供新的思路和方向,有助于子宫内膜癌和子宫腺肌病的临床精准诊疗及随访,提高疾病诊治效果.

摘要： 目的：奥沙利铂联合5-Fu术后辅助治疗改善Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌根治术患者5年无复发生存(DFS)和6年总生存(OS).先前多项研究提示MMR状态和5-Fu辅助治疗获益相关,而对于MMR状态和奥沙利铂为基础化疗方案获益情况的研究较少.本研究来评估MMR状态与高危因素Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础化疗方案对DFS影响. 方法：对321例高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者,使用免疫组化方法检测MMR状态.根据MMR状态,采用Kaplan-Meier生存曲线进行无复发生存(DFS)和总生存(OS)分析比较;Cox风险回归模型分析不同因素与预后的关系. 结果：321例患者中,79例接受单纯手术治疗,242例患者接受奥沙利铂为基础术后辅助治疗.对于pMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗改善5年DFS率(69.3％VS52.4％,HR：1.789,95％CI1.160-2.755;P=0.008);然而对于dMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗未能改善DFS(83.7％VS81.3％,HR：1.218,95％CI0.315-4.717,P=0.775). 结论：MMR状态可以作为高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础辅助治疗方案能否获益的预测因子.

摘要： 目的：奥沙利铂联合5-Fu术后辅助治疗改善Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌根治术患者5年无复发生存(DFS)和6年总生存(OS).先前多项研究提示MMR状态和5-Fu辅助治疗获益相关,而对于MMR状态和奥沙利铂为基础化疗方案获益情况的研究较少.本研究来评估MMR状态与高危因素Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础化疗方案对DFS影响. 方法：对321例高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者,使用免疫组化方法检测MMR状态.根据MMR状态,采用Kaplan-Meier生存曲线进行无复发生存(DFS)和总生存(OS)分析比较;Cox风险回归模型分析不同因素与预后的关系. 结果：321例患者中,79例接受单纯手术治疗,242例患者接受奥沙利铂为基础术后辅助治疗.对于pMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗改善5年DFS率(69.3％VS52.4％,HR：1.789,95％CI1.160-2.755;P=0.008);然而对于dMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗未能改善DFS(83.7％VS81.3％,HR：1.218,95％CI0.315-4.717,P=0.775). 结论：MMR状态可以作为高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础辅助治疗方案能否获益的预测因子.

摘要： 目的：奥沙利铂联合5-Fu术后辅助治疗改善Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌根治术患者5年无复发生存(DFS)和6年总生存(OS).先前多项研究提示MMR状态和5-Fu辅助治疗获益相关,而对于MMR状态和奥沙利铂为基础化疗方案获益情况的研究较少.本研究来评估MMR状态与高危因素Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础化疗方案对DFS影响. 方法：对321例高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者,使用免疫组化方法检测MMR状态.根据MMR状态,采用Kaplan-Meier生存曲线进行无复发生存(DFS)和总生存(OS)分析比较;Cox风险回归模型分析不同因素与预后的关系. 结果：321例患者中,79例接受单纯手术治疗,242例患者接受奥沙利铂为基础术后辅助治疗.对于pMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗改善5年DFS率(69.3％VS52.4％,HR：1.789,95％CI1.160-2.755;P=0.008);然而对于dMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗未能改善DFS(83.7％VS81.3％,HR：1.218,95％CI0.315-4.717,P=0.775). 结论：MMR状态可以作为高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础辅助治疗方案能否获益的预测因子.

摘要： 目的：奥沙利铂联合5-Fu术后辅助治疗改善Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌根治术患者5年无复发生存(DFS)和6年总生存(OS).先前多项研究提示MMR状态和5-Fu辅助治疗获益相关,而对于MMR状态和奥沙利铂为基础化疗方案获益情况的研究较少.本研究来评估MMR状态与高危因素Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础化疗方案对DFS影响. 方法：对321例高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者,使用免疫组化方法检测MMR状态.根据MMR状态,采用Kaplan-Meier生存曲线进行无复发生存(DFS)和总生存(OS)分析比较;Cox风险回归模型分析不同因素与预后的关系. 结果：321例患者中,79例接受单纯手术治疗,242例患者接受奥沙利铂为基础术后辅助治疗.对于pMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗改善5年DFS率(69.3％VS52.4％,HR：1.789,95％CI1.160-2.755;P=0.008);然而对于dMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗未能改善DFS(83.7％VS81.3％,HR：1.218,95％CI0.315-4.717,P=0.775). 结论：MMR状态可以作为高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础辅助治疗方案能否获益的预测因子.

摘要： 目的：奥沙利铂联合5-Fu术后辅助治疗改善Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌根治术患者5年无复发生存(DFS)和6年总生存(OS).先前多项研究提示MMR状态和5-Fu辅助治疗获益相关,而对于MMR状态和奥沙利铂为基础化疗方案获益情况的研究较少.本研究来评估MMR状态与高危因素Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础化疗方案对DFS影响. 方法：对321例高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者,使用免疫组化方法检测MMR状态.根据MMR状态,采用Kaplan-Meier生存曲线进行无复发生存(DFS)和总生存(OS)分析比较;Cox风险回归模型分析不同因素与预后的关系. 结果：321例患者中,79例接受单纯手术治疗,242例患者接受奥沙利铂为基础术后辅助治疗.对于pMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗改善5年DFS率(69.3％VS52.4％,HR：1.789,95％CI1.160-2.755;P=0.008);然而对于dMMR患者,和单纯手术相比,术后奥沙利铂为基础辅助治疗未能改善DFS(83.7％VS81.3％,HR：1.218,95％CI0.315-4.717,P=0.775). 结论：MMR状态可以作为高危Ⅱ期和Ⅲ期结肠癌患者术后接受奥沙利铂为基础辅助治疗方案能否获益的预测因子.

摘要： 大量研究表明,癌症是由基因突变引起的,基因突变可由致癌剂引起,也可由DNA代谢过程中产生的碱基错配引起.为确保遗传物质的完整和稳定,细胞有许多防止基因突变的系统,其中包括切除修复、损伤碱基的直接修复、重组修复和错配修复(Mismatchrepair,MMR).DNA错配修复是细胞复制后的一种修复机制,具有维持DNA复制保真度,控制基因变异的作用.该系统首先是在原核生物中发现的,随后在真核生物及人类细胞中也相继发现与错配修复密切相关的同源基因.本文探讨DNA错配修复与癌症的关系。

摘要： 大量研究表明,癌症是由基因突变引起的,基因突变可由致癌剂引起,也可由DNA代谢过程中产生的碱基错配引起.为确保遗传物质的完整和稳定,细胞有许多防止基因突变的系统,其中包括切除修复、损伤碱基的直接修复、重组修复和错配修复(Mismatchrepair,MMR).DNA错配修复是细胞复制后的一种修复机制,具有维持DNA复制保真度,控制基因变异的作用.该系统首先是在原核生物中发现的,随后在真核生物及人类细胞中也相继发现与错配修复密切相关的同源基因.本文探讨DNA错配修复与癌症的关系。

摘要： 大量研究表明,癌症是由基因突变引起的,基因突变可由致癌剂引起,也可由DNA代谢过程中产生的碱基错配引起.为确保遗传物质的完整和稳定,细胞有许多防止基因突变的系统,其中包括切除修复、损伤碱基的直接修复、重组修复和错配修复(Mismatchrepair,MMR).DNA错配修复是细胞复制后的一种修复机制,具有维持DNA复制保真度,控制基因变异的作用.该系统首先是在原核生物中发现的,随后在真核生物及人类细胞中也相继发现与错配修复密切相关的同源基因.本文探讨DNA错配修复与癌症的关系。

摘要： 大量研究表明,癌症是由基因突变引起的,基因突变可由致癌剂引起,也可由DNA代谢过程中产生的碱基错配引起.为确保遗传物质的完整和稳定,细胞有许多防止基因突变的系统,其中包括切除修复、损伤碱基的直接修复、重组修复和错配修复(Mismatchrepair,MMR).DNA错配修复是细胞复制后的一种修复机制,具有维持DNA复制保真度,控制基因变异的作用.该系统首先是在原核生物中发现的,随后在真核生物及人类细胞中也相继发现与错配修复密切相关的同源基因.本文探讨DNA错配修复与癌症的关系。

摘要： 大量研究表明,癌症是由基因突变引起的,基因突变可由致癌剂引起,也可由DNA代谢过程中产生的碱基错配引起.为确保遗传物质的完整和稳定,细胞有许多防止基因突变的系统,其中包括切除修复、损伤碱基的直接修复、重组修复和错配修复(Mismatchrepair,MMR).DNA错配修复是细胞复制后的一种修复机制,具有维持DNA复制保真度,控制基因变异的作用.该系统首先是在原核生物中发现的,随后在真核生物及人类细胞中也相继发现与错配修复密切相关的同源基因.本文探讨DNA错配修复与癌症的关系。

摘要： 本发明涉及用于测定人受试者是否具有损伤的DNA错配修复功能的定量方法；提供取自所述人的诊断样品及自所述样品产生核提取物；提供MMR充足的和MMR的缺陷核提取物分别作为阳性和阴性对照；组合各核提取物与至少一个带有错配的底物DNA分子；实施错配修复测定；及测定所述样品核提取物是否能修复所述底物DNA分子；其中所述样品包含正常、非恶性的组成性细胞，诸如成纤维细胞。本发明还涉及试剂盒，其提供用于所述方法的必需试剂。

摘要： 本发明公开了一种化合物52在制备DNA错配修复产品中的应用；本发明上述化合物52能够与DNA错位修复蛋白相互作用，且化合物52与1E3M之间的结合作用模式稳定可靠，进而化合物52能够作为DNA错配修复先导化合物，可以实现DNA错配修复。

摘要： 本发明提供了一种检测DNA错配修复通路有效性的探针库、检测方法和试剂盒，所述探针库由SEQ ID NO.1～140所示探针组成，将该探针库制备成检测试剂盒可用于与DNA错配修复通路相关的基因的检测。使用该探针库对待分析的目标DNA片段进行富集，然后再对富集后的DNA片段通过测序手段进行测序，从而实现对基因检测的有效性。与DNA错配修复通路相关的基因可用于预测肿瘤发生的倾向性、评估肿瘤恶性程度和临床预后、指导新药筛选与研发，因此，本发明对基因功能性的研究方向起到重要的指导意义。

摘要： 本发明公开了一种N端特异的人DNA错配修复蛋白MLH1多肽及其抗体的制备方法，属于以抗体为特征的体外试验用的生物制品。N端特异的人MLH1多肽的氨基酸序列为：EVIQRPANAIKEMIE。抗人MLH1多肽抗体按以下方法制备：(1)人MLH1抗原表位的分析；(2)人MLH1 N端多肽的合成；(3)合成多肽与载体蛋白交联；(4)制备兔抗人MLH1多肽抗体；(5)收集、分离得到含有抗体的血清，纯化抗体，即得到抗人MLH1多肽抗体。本发明制备的N端特异的抗人MLH1合成多肽抗体效价高、亲和力强、特异性好，可与天然人MLH1发生特异性结合反应；制备成本低；纯化后的抗体可完全用于免疫印迹和酶联免疫吸附实验，以及建立体外免疫分析方法。该抗体为研究人MLH1的生物学功能及其与相关疾病的关系提供了较为有用的工具。

摘要： 本发明公开了一种用于检测DNA错配修复系统的试剂盒及其用途，该试剂盒包含一扩增体系，该扩增体系包含PCR引物混合液和PCR反应液；所述的PCR引物混合液包含微卫星位点。本发明的试剂盒的微卫星位点具有更高的灵敏度和准确度，可以适用于检测不同的癌症，包括结肠直肠癌，子宫内膜癌，胃癌，胰腺癌，肺癌以及乳腺癌。本发明的含有用于检测DNA错配修复系统的微卫星位点的试剂盒的重复性更好，能够同时检测多个微卫星位点，提高了检测效率。

摘要： 本发明涉及用于测定人受试者是否具有损伤的DNA错配修复功能的定量方法；提供取自所述人的诊断样品及自所述样品产生核提取物；提供MMR充足的和MMR的缺陷核提取物分别作为阳性和阴性对照；组合各核提取物与至少一个带有错配的底物DNA分子；实施错配修复测定；及测定所述样品核提取物是否能修复所述底物DNA分子；其中所述样品包含正常、非恶性的组成性细胞，诸如成纤维细胞。本发明还涉及试剂盒，其提供用于所述方法的必需试剂。

摘要： 本发明涉及一种斑马鱼胚胎DNA错配修复功能活性的分析方法，以及此分析方法在环境化合物DNA错配修复功能毒性评价上的应用。该方法包括：以质粒pGEM-EGFP制备单链DNA分子；用单链DNA分子同线性化的质粒pGEM-EGFP以及质粒pGEM-(mt)EGFP分别制备同源和异源双链核酸分子；将同源和异源双链核酸分子分别显微注射至1-细胞期的斑马鱼胚胎中；对胚胎DNA错配修复功能活性进行定量。该发明首次在斑马鱼胚胎水平上建立了DNA错配修复功能活性分析方法，并且成功地将其应用于环境化合物DNA错配修复功能毒性评价，这对于环境化合物人群健康风险以及致癌风险评价具有重大意义。同时，应用斑马鱼评价化合物DNA错配修复功能毒性，兼具操作简单、直观快捷、受试化合物给药简单、用量少等优点。

摘要： 本发明公开了一种双荧光质粒，携带有EGFP和RFP基因，其中，EGFP和RFP基因位于同一阅读框。本发明所构建的双荧光质粒，通过将两种荧光蛋白基因放置在同一阅读框中，很好的实现了两种荧光蛋白的共表达。同时，将上述双荧光质粒应用于活细胞内DNA错配修复功能活性分析，提高了单细胞水平上校验的准确性，方法简单，指示参数灵敏度高，准确性高，为活细胞内DNA错配修复功能活性检测提供一套新的有效的检测方法。同时，本发明中还提供了该双荧光质粒在制备用于检测活细胞内DNA错配修复功能活性试剂中的应用。

摘要： 本发明公开了一种C端特异的人DNA错配修复蛋白MLH1多肽及其抗体的制备方法，属于生物医学技术领域。C端特异的人MLH1多肽的氨基酸序列为：SLEGDTTKGTSEMSE。抗人MLH1多肽抗体按以下方法制备：(1)人MLH1抗原表位的分析；(2)人MLH1 C端多肽的合成；(3)合成多肽与载体蛋白交联；(4)制备兔抗人MLH1多肽抗体；(5)收集、分离得到含有抗体的血清，纯化抗体，即得到抗人MLH1多肽抗体。本发明制备的C端特异的抗人MLH1合成多肽抗体效价高、亲和力强、特异性好，可与天然人DNA错配修复蛋白MLH1发生特异性结合反应；制备成本低；纯化后的抗体可完全用于免疫印迹和酶联免疫吸附实验，以及建立体外免疫分析方法。该抗体为研究人MLH1的生物学功能及其与相关疾病的关系提供了有用的工具。

摘要： 本发明涉及编码具有活性或其功能等同变异体的分离的DNA和利用重组DNA技术以所述分离的DNA生产具有耐高温DNA错配修复酶活性的多肽或其功能等同变异体。以腾冲嗜热厌氧菌全基因组测序与分析为基础，克隆分离了耐高温DNA错配修复酶基因。该基因对于制备用于生产耐高温DNA错配修复酶的转基因微生物或动植物，并回收获得该基因编码的酶有用。另外，本发明还提供了具有耐高温DNA错配修复酶活性的多肽的氨基酸序列及功能等同体。同时，本发明还提供了制备，分离，纯化具有耐高温DNA错配修复酶活性的多肽的方法。