微卫星不稳定

摘要： 目的探讨结直肠癌(CRC)组织中TGFβR2的表达与微卫星不稳定性(MSI)的相关性,以及两者与CRC患者临床病理参数的关系。方法收集2019年1月1日-9月30日昆明医科大学第二附属医院收治的184例CRC患者的CRC组织及癌旁组织,采用多重荧光PCR毛细管电泳法(CE)检测MSI,免疫组化染色(IHC)检测MMR和TGFβR2蛋白的表达情况。采用Kappa一致性检验分析IHC与CE检测MSI结果的一致性。qRT-PCR检测TGFβR2 mRNA的表达情况。采用秩和检验分析TGFβR2基因突变与MSI的相关性以及TGFβR2 mRNA相对表达量与临床病理参数的关系。结果184例CRC组织样本中,152例(82.6%,152/184)为微卫星低度不稳定(MSI-L)/微卫星稳定(MSS),32例(17.4%,32/184)为微卫星高度不稳定(MSI-H)。CE与IHC检测MSI的主体结果具有高度一致性,Kappa一致性系数为0.922(P<0.001)。与MSI-L/MSS相比,MSI-H多发生于无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ-Ⅱ期的CRC(P<0.05)。TGFβR2 mRNA和蛋白在CRC组织中的表达低于癌旁组织(P<0.01)。TGFβR2基因在MSI-H CRC组织中的突变率高于MSI-L/MSS CRC组织[93.3%(28/30)vs.14.9%(23/154),P<0.01]。TGFβR2 mRNA相对表达量在MSI-H肿瘤中高于MSI-L/MSS肿瘤(7.93±0.36 vs.4.47±1.31,P<0.01),在癌旁组织中高于CRC组织(9.38±0.82 vs.4.76±1.63,P<0.01)。在无远处转移、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ-Ⅱ期的CRC组织中,TGFβR2 mRNA相对表达量较高(P<0.05)。结论MSI与TGFβR2的表达在肿瘤发生部位、是否发生淋巴结转移及TNM分期方面存在一致性及协同性。

摘要： 目的探讨微卫星不稳定Ⅲ期结肠癌患者术后单纯辅助化疗复发及转移危险因素。方法将82例Ⅲ期结肠癌患者术后通过免疫组化检测病灶组织的hMLH1、hMSH2及hMSH6抗体表达,分为高频组和普通组,对两组病理、化疗效果及生存预后等进行相关性分析。结果应用hMLH1、hMSH2及hMSH检测82例Ⅲ期术后结肠癌患者发现:高频组有18例(21.95%),普通组中有21例(25.61%)为不稳定微卫星(MSI)-低频(L),43例(52.44%)为微卫星稳定(MSS);高频组与普通组在年龄超过65岁、肿瘤位于左侧回肠、结肠癌分期程度具有相关性(P<0.05);随访2年,高频组结肠癌复发率为[5例(27.78%)]少于普通组[29例(45.31%)],两组相比具有统计学意义(χ^(2)=4.310,P<0.05);随访24个月,高频组与普通组生存率差异有统计学意义(P<0.05);多因素回归显示,以随访死亡为因变量,年龄<65岁和高频MSI为Ⅲ期结肠癌患者预后的保护因素(P<0.05),复发是Ⅲ期结肠癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论Ⅲ期结肠癌患者的微卫星不稳定与病理关系相关,可以作为Ⅲ其结肠癌患者预后指标之一,高频MSI患者生存率较佳。

摘要： 目的探讨卡瑞利珠单抗联合阿帕替尼在不同微卫星状态的晚期结直肠癌(CRC)中的疗效。方法回顾性分析2019年5月至2020年12月郑州大学第一附属医院肿瘤科收治的36例晚期CRC患者的临床资料。根据患者微卫星状态分为微卫星高度不稳定(MSI-H)组(17例)和微卫星稳定(MSS)组(19例)。给予所有患者卡瑞利珠单抗联合阿帕替尼治疗。比较两组中位无进展生存时间(PFS)、客观有效率(ORR)、疾病控制率(DCR)和不良反应。结果治疗后,MSI-H组ORR、DCR分别为41.2%(7/17)、88.2%(15/17)、MSS组ORR、DCR分别为21.1%(4/19)、63.2%(12/19)。MSS组中位PFS(6.2个月)较MSI-H组(8.8个月)短(P0.05)。结论卡瑞利珠单抗联合阿帕替尼方案在二线及以上方案治疗失败的晚期CRC患者中具有潜在的疗效和可控的不良反应,且MSI-H型较MSS型CRC患者获益明显。

摘要： 目的 研究结直肠癌微卫星不稳定性(MSI)与程序性死亡配体1(PD-L1)表达的临床病理特征及其临床意义。方法 收集在宁夏医科大学总医院接受结直肠癌切除术、术后病理确诊为结直肠癌的患者共116例,采用多重荧光PCR结合毛细管电泳方法检测6个单核苷酸重复位点(NR-21、NR-24、NR-27、BAT-25、BAT-26、MONO-27)以鉴定微卫星状态。采用免疫组化(IHC)方法检测PD-L1和错配修复(MMR)蛋白(MLH1、MSH2、MSH6和PMS2)。通过分析研究结直肠癌MSI与PD-L1表达的临床病理特征和相关临床意义,并分析PCR与IHC两种方法检测结果的一致性。结果 在MSI-L/MSS与MSI-H的结直肠癌患者间肿瘤部位、肿瘤直径、分化程度差异均具有统计学意义(P均0.05);免疫组化和PCR毛细管电泳法的检测结果经Kappa一致性检验,结果一致性较好(Kappa=0.674);结直肠癌组织中PD-L1表达在结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤位置、分化程度、浸润深度、pTNM分期、有无神经或脉管侵犯、有无淋巴结转移之间的差异均无统计学意义(P均>0.05);在MSI-L/MSS的结直肠癌患者中,PD-L1阳性率为28.3%,低于MSI-H的结直肠癌患者的70.0%(P<0.05)。结论 PMSI-H可以作为免疫检查点抑制剂(ICI)PD-L1的阳性预测标志物。

摘要： 胃癌是一种异质性较强的肿瘤,基于精准分型指导下的个体化治疗是目前的研究热点之一。微卫星不稳定性(MSI)是由于DNA错配修复系统缺陷导致微卫星片段出现的碱基对插入或丢失的现象,是肿瘤的发生机制之一。截至目前,有限证据表明高度MSI(MSI-H)胃癌展现出特定的临床特征、独特的肿瘤微环境、良好的预后以及对综合治疗的特殊反应,因此MSI状态可能是评估胃癌预后和预测治疗反应的良好标记物之一。近年来,免疫治疗在胃癌中的研究和获批给胃癌患者带来了新的治疗希望,而MSI-H患者也逐步被定义为胃癌免疫治疗的优势人群。本研究就MSI-H胃癌的基础及临床研究现状进行总结和讨论,旨在为胃癌的精准治疗提供参考依据。

摘要： 目的探讨微卫星状态对结直肠癌(CRC)患者外周血淋巴细胞亚群的影响。方法选取2019年1月至2020年12月该院收治的825例CRC患者,根据微卫星状态分为微卫星高度不稳定(MSI-H)组(90例)和微卫星稳定/微卫星低度不稳定(MSS/MSI-L)组(735例)。比较2组临床病理特征及外周血淋巴细胞亚群水平。结果2组在年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤病理类型、肿瘤分化程度、肿瘤TNM分期及淋巴结检出数方面比较,差异均有统计学意义(P0.05)。2组外周血CD3^(+)T、CD4^(+)T、CD8^(+)T淋巴细胞水平比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论MSI-H的CRC患者术前外周血T淋巴细胞亚群水平高于MSS/MSI-L患者,外周血T淋巴细胞亚群水平可作为MSI-H的CRC患者预后指标。

摘要： 目的探究增强CT术前预测结直肠癌错配修复蛋白(mismatch repair protein,MRP)表达状态的价值。方法选取161例结直肠癌术前CT平扫及增强图像,评估13个形态学特征及8个定量参数。形态学特征采用2检验,单组内样本量<5时,采用Fisher精确性检验,定量参数采用Mann-Whitney U检验,应用ROC曲线分析CT参数预测MRP表达状态的诊断效能。结果多个CT参数在结直肠癌微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)及MRP不同状态组间有显著差异(P<0.05)。ROC曲线分析表明平扫CT值预测MSH2阴性状态效能最佳(AUC=0.838)。结论多个CT形态学特征或定量参数在结直肠癌MSI、MSH2和PMS2不同状态组间有显著差异。增强CT形态学特征联合定量参数也许可以为术前预测MSI及相关MRP表达状态提供帮助。

摘要： 回顾1例滨州医学院附属医院收治的Lynch综合征患者诊断过程并对其家系进行分析。Lynch综合征是一种由错配修复基因突变导致的常染色体显性遗传肿瘤综合征,其导致罹患结直肠癌、子宫内膜癌等风险显著升高。本例患者同时罹患子宫内膜癌与结肠癌,且病理免疫组化提示错配修复蛋白缺失,经基因测序证实MSH2胚系突变并最终确诊Lynch综合征。同时,患者家族成员调查发现一级亲属有两人患有Lynch综合征相关肿瘤。本文旨在提高对Lynch综合征的认识并在日常医疗工作中加强对患者整个家系的管理,以便对其家系成员进行适当干预并降低患癌风险。

摘要： 目的:探讨MSI胃癌亚型的研究进展。方法:查阅国内外相关文献并进行综述。结论:MSI胃癌是一组具有独特临床病理学和生物学特征的分子亚型,是一个积极的预后因素,并可能在免疫治疗中获益。

摘要： 胰腺癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤,恶性程度高,预后极差。胰腺癌的治疗方式包括手术切除、化疗、放疗,其手术切除率低,对放化疗敏感性较差,导致5年生存率较低。免疫治疗是一种新型的治疗方式,部分恶性实体肿瘤实施免疫治疗联合其他治疗方式后获得了一定程度的缓解,降期后获得了手术机会,延长了患者总生存期,为胰腺癌的综合治疗带来了希望。本文对胰腺癌免疫治疗联合其他治疗方式的现状与进展进行综述,为胰腺癌的治疗提供参考。

摘要： 文章介绍了微卫星不稳定(MSI)，阐述了MSI的产生及其对临床影响，并从人群中高度变异、肿瘤中高突变两方面探讨了微卫星及微卫星不稳定的应用价值，就其临床应用进行了论述。

摘要： 目的：探索消痰散结方对MKN-45人胃癌细胞微卫星不稳定的作用及其机制. 方法：采用CCK-8法检测消痰散结方对MKN-45入胃癌细胞增值的影响,采用STRGenotyping分析法检测5个微卫星不稳定位点(D17S250、D2S123、D5S346、Bat-25和BAT26),并同时采用western blot及RT-PCR分析消痰散结方对微卫星相关蛋白(hMLH1、TGFβRⅡ、IGFRⅡ、Bax)表达的影响. 结果：消痰散结方能抑制MKN-45人胃癌细胞的增值,并呈时间依赖性,MKN-45人胃癌细胞中扩增到5个微卫星位点,其中微卫星位点D2S123、D5S346出现某些延长和缩短,消痰散结方中药血清干预48h后,微卫星位点(D2S123、D5S346)的变异趋于稳定,同时可以增加微卫星相关蛋白及基因的表达水平. 结论：消痰散结方能抑制MKN-45人胃癌细胞的微卫星不稳定,其作用机制与增加微卫星相关蛋白hMLH1、TGFβRⅡ、IGFRⅡ、Bax的表达有关.

摘要： 微卫星不稳定(MSI),又称复制错误(replication Error,RER),即是指与同一个体的正常组织细胞的DNA相比,肿瘤细胞的基因组DNA中单个、二个、三个或四个核苷酸组成的重复序列的长度发生了改变.20年前的研究报道:MSI是遗传性非息肉病性结直肠癌(hereditary nonpolyposis colorectal cancer,HNPCC或Lynch综合征)特征性的分子变化,与人类错配修复基因(Mismatch Repair,MMR)的种系突变有关.而后续研究发现一小部分的散发性大肠癌也存在着MSI,但这种MSI大都与hMLH1基因的启动子区高甲基化状态有关.2010年JCO(Journal of Clinical Oncology)杂志上的一篇回顾性研究分析发现:它的状态可以指导Ⅱ期患者进行术后辅助化疗.美国癌症综合网络(NCCN)的结直肠癌指南中已经明确指出:＜50岁的所有结直肠癌患者;所有Ⅱ期结直肠癌患者在术后选择辅助化疗前,均需明确肿瘤的MSI状态.本文就MSI这个分子标志在结直肠癌患者中检测的价值做一个重新定位.通过比较正常组织和肿瘤组织，如果2个以上位点存在MSI则认为该患者是高度微卫星不稳定如果<2个位点存在MSI或无一位点存在MSI，则认为该患者是低度微卫星不稳定根据以上两种方法的检测结果，dMMR等同于MSI-H，或免疫组化提示四个蛋白中任一表达缺失;而pMMR则等同于MSI-L或MSS，或免疫组化提示四个蛋白均有表达。在组织标本量不足的情况下，优先检测hMLHl和hMSH2蛋白的表达。

摘要： 目的: 多重荧光PCR片段分析技术检测NCI方案微卫星不稳定.方法: 应用ABI 3100-Avant型遗传分析仪对54例肿瘤和36例正常人对照样品的5个STR位点(D2S123、D17S250、D5S346、BAT25、BAT26)进行多重荧光PCR片段分析,数据处理使用GeneMapper软件v3.7.结果: 44例散发性肠癌肿瘤组织的MSI检出率为27.3％(12/44),微卫星稳定(MSS)的检出率为72.7(32/44);3例子宫内膜异型增生中检出1例MSI-H,1例慢性萎缩性胃炎伴异型增生表现为MSI-H;4例前列腺癌和2例胃腺癌均未检出MSI.正常中国人中此5个STR位点的等位基因分布及杂合率均与NCBI的参考数据差异有显著性.结论: 中国人群中这5个STR位点的等位基因分布具有种族特异性.多重荧光PCR片段分析技术结合基因测序仪GeneMapper软件进行MSI检测敏感、高效、定量可靠.

摘要： 目的：探讨荧光多重PCR片段分析微卫星不稳定的实验方法.方法：应用ABI-3100型测序仪对54例肿瘤和36例正常人进行多片段的多重PCR微卫星不稳定性(MSI)片段分析,采用GeneMapper软件进行数据分析和统计.结果：44例散发性肠癌肿瘤组织中MSI的检出率为27.3％(12/44),MSS为72.7(32/44);4例前列腺癌未检出MSI,3例子宫内膜异型增生有1例为MSI-H,2例胃腺癌未检出MSI,1例慢性萎缩性胃炎伴异型增生表现为MSI-H.中国人五个微卫星位点在正常人中的长度及杂合率与NCBI的参考数据有明显区别.结论：多重PCR可高通量诊断MSI,在MSI分析中需注意片段长度的种族特点.应用荧光多重PCR基因测序仪和GeneMapper分析软件进行微卫星不稳定检测效率高,结果可靠.

摘要： 目的:探讨多重荧光PCR方法检测结直肠癌微卫星不稳定及其临床价值. 方法:对2004-2005年在本中心进行手术治疗的110例结直肠癌患者建立队列,以多重荧光PCR方法检测结直肠癌微卫星不稳定并对MSI和微卫星稳定结直肠癌进行比较. 结果:男性66例(61.8％)、女性42例(38.2％),年龄26-94岁,平均年龄60.8岁.多重PCR方法扩增出所有患者的5个微卫星序列.其中MSI-H为10(8.1％),MSI-L为13例(11.8％),MSS为87例(79.1％).共检测BAT-26变异9例(8.2％)、BAT-25变异11例(10.0％)、D2S123变异11例(10.0％)、D5S346变异6例(5.5％)和D17S250变异8例(7.3％).MSI-L、MSI-H和MSS组结直肠癌年龄差异有显著意义,其他临床特点差异无显著意义. 结论:多重荧光PCR方法检测微卫星不稳定结果稳定,适合于在临床应用;MSI和MSS结直肠癌比较差异无显著意义可以与MSI组病例数较少有关.

摘要： 目的:检测微卫星不稳定结直肠癌中Hmlh1、Hmsh2和Hmsh6基因种系突变. 方法:抽取18例微卫星不稳定结直肠癌患者外周血,直接测序法检测Hmlh1、Hmsh2和Hmsh6基因种系突变. 结果:18例结直肠癌患者中,共发现Hmsh2和Hmsh6基因种系突变3处,并发现3例患者Hmsh6基因第五外显子发现A/T杂合. 结论:在微卫星不稳定结直肠癌中33.3％患者发现携带错配修复基因突变,其中Hmsh2和Hmsh6基因突变多见;Hmsh6基因第五外显子发现A/T杂合其功能需要进一步研究.

摘要： 选择nm23-H1基因内部及附近5个微卫星多态标记,对72例喉癌标本进行杂合性丢失和微卫星序列不稳定性分析,同时以RT-PCR方法检测38例配对喉鳞状细胞癌标本中nm23-H1基因表达.发现5个标记均存在LOH,以D17S1665位点频率最高,达38.10％,LOH涉及至少一个位点的频率高达76.39％.3个位点出现M1,最高为12.70％.nm23-H1基因杂合性丢失及微卫星不稳定与淋巴结转移、临床分期和肿瘤分化无显著相关(p＞0.05);癌、癌旁及转移淋巴结中表达无显著差异,mRNA水平与淋巴结转移无关(p＞0.05).nm23-H1基因可能在喉鳞癌发生中具有重刎要作用,杂合性丢失可能是其失活的主要机制.

摘要： 人类DNA错配修复系统至今已克隆了6种基因,它们是hMSH2、hMLH1、hPMS1、hPMS2、hMSH3和hMSH6(GTBP),分别定位于染色体2p、3p、2q、7p、5q和2p上.已证实遗传性家族性非息肉性结肠癌(HNPCC)与这些基因改变密切相关.MMR基因功能缺陷是遗传不稳定或微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)的重要机制.有报道肺癌组织中存在MSI,但MSI的发生是否与MMR功能降低有关,尚有待研究.本文通过对46例肺癌组织中5种MMR基因mRNA表达研究,以期阐明MMR基因mRNA在肺癌组织中的表达状态及其与MSI的关系.

摘要： 本发明提供一种用于与微卫星不稳定性（MSI）检测相关的微卫星位点进行杂交的DNA探针库，所述DNA探针库包括一个或多个能够与MSI状态相关微卫星位点进行杂交的DNA探针。所述DNA探针中，MSI相关微卫星位点探针如以下序列所示：SEQ ID NO.1～66。此外，本发明提供利用该探针库对MSI相关微卫星位点进行富集及检测的方法，采用此方法与下一代测序技术（NGS）相结合可以极大地提高MSI检测的敏感性，准确性与全面性。

摘要： 本发明提供了一种使用高通量测序检测微卫星不稳定的探针组、试剂盒及微卫星不稳定的检测方法，涉及基因检测技术领域，本发明提供的探针组，能够通过高通量测序同时捕获BAT26、BAT25、BAT‑34c4、BAT‑40、D2S123、D5S346、MONO‑27、NR21、NR24、NR27和D17S250这11个用于评价微卫星不稳定的位点，准确评估待测对象的微卫星不稳定状态，为肿瘤患者的预后及临床治疗方案的制定提供理论基础及指导。

摘要： 本发明涉及使用双功能PNA探针进行熔解曲线分析的方法、以及使用所述方法诊断微卫星不稳定性的方法和诊断微卫星不稳定性的试剂盒。更具体地，本发明涉及：通过使用能够与相同碱基发生重复的区域特异性结合的荧光PNA探针根据缺失的碱基突变的数量以不同的键合强度结合的荧光PNA探针的结构进行熔解曲线分析的方法；以及通过所述分析方法和通过分析作为结果发生的碱基突变的数量检测相同碱基发生重复的区域中碱基缺失产生的微卫星标记物中的基因突变能够快速准确地确定微卫星不稳定性的诊断方法。根据本发明，通过使用准基因座中具有高灵敏度和特异性的五个微卫星标记物，可以分析微卫星标记物基因是否已以高灵敏度缺失，因此，与现有的MSI诊断方法相比，可以降低成本并且可以减少检查所需的时间。

摘要： 本发明提供一种用于与微卫星不稳定性（MSI）检测相关的微卫星位点进行杂交的DNA探针库，所述DNA探针库包括一个或多个能够与MSI状态相关微卫星位点进行杂交的DNA探针。所述DNA探针中，MSI相关微卫星位点探针如以下序列所示：SEQ ID NO.1～66。此外，本发明提供利用该探针库对MSI相关微卫星位点进行富集及检测的方法，采用此方法与下一代测序技术（NGS）相结合可以极大地提高MSI检测的敏感性，准确性与全面性。

摘要： 本发明公开用于二代测序微卫星不稳定位点检测的探针组、系统、检测方法及其应用，该方法包括：选择至少一个微卫星位点作为靶标；设计针对靶标的探针组，该探针组包括针对至少一个微卫星位点的侧翼探针，侧翼探针覆盖至少一个微卫星位点序列的侧翼序列；利用探针组捕获目标序列。本发明的侧翼探针与常规野生型探针相比不仅能够有效避开GC异常的区域，而且能够有效弥补丢失的有效测序读段，进而显著提高微卫星位点的覆盖度。此外，本发明独特的探针设计能够大大提高靶点的捕获效率，提高探针的特异性和GC均一性。因此，本发明的探针组、系统、检测方法在癌症相关微卫星检测中具有较高的检测价值以及临床价值和广阔的应用前景。

摘要： 本试剂盒以数字PCR技术为基础，提供了一种新型的操作简单、用时短、超灵敏、检测重复性好的微卫星不稳定的检测试剂盒。该试剂盒无需正常样本作为对照，无需复杂的分析软件，克服了微卫星不稳定状态中低频、杂合性缺失难以检出的情况，检测灵敏度可以达到0.1％。

摘要： 本发明公开一种确定用于检测微卫星不稳定状态的位点组合的方法、系统及探针组。该方法为使用肿瘤单个样本且基于二代测序技术的方法，其包括以下步骤：(1)初步筛选得到由多个微卫星位点组成的候选位点集；和(2)计算候选位点集中各微卫星位点对于MSI状态的贡献度，并根据贡献度大小对候选位点集中的微卫星位点进行排序，取排名前n的微卫星位点组成筛选位点集，利用筛选位点集计算MSI‑H和MSS两组样本的样本MSI评分，根据样本评分得到所需的位点组合。本发明的位点组合不仅能够提高微卫星状态检测的准确度和灵敏度，同时大大降低单样本流程的检测成本。

摘要： 本申请涉及癌症、尤其是错配修复(MMR‑)缺陷肿瘤领域。本文提供对检测肿瘤是否为错配修复缺陷具有高敏感性的新标记。该标记尤其是微卫星区域中的突变。因此，提供用于诊断肿瘤的微卫星不稳定性的方法，其包括测定这些标记的存在。此外，提供试剂盒来检测这些标记(或其亚组)在样品中的存在。

摘要： 本发明属于生物信息学技术领域，具体公开了一种基于二代测序的微卫星不稳定性检测方法及装置。本发明的检测方法利用二代测序技术获得的测序读段，先计算得到待测样本中每个候选微卫星位点的平均缺失单元数，据此检测每个微卫星位点的MSI状态，再以此评估待测样本的MSI状态。本发明将微卫星位点的平均缺失单元数作为特征值，无需使用参考样本，也不用比较每个位点的多态分布，检测原理简单，计算简便，对测序深度的要求低，临床可实施性好，稳定性高，检测结果准确可靠，与PCR金标准的一致性为100％。

摘要： 本发明公开了恩贝酸在联合奥沙利铂治疗微卫星不稳定的大肠癌中的应用，属于生物医药技术领域。恩贝酸是从矮地茶中分离的一种醌类化合物，属于天然产物类药物，目前已通过FDA批准进入抗肿瘤治疗的临床前研究阶段。本发明的研究结果显示，恩贝酸能够显著增加微卫星不稳定的大肠癌对化疗药物奥沙利铂的敏感性。基于此本发明首次提出了一种基于恩贝酸和奥沙利铂药物治疗的微卫星不稳定的大肠癌联合协同治疗新策略，这将有助于提高大肠癌化学药物治疗水平，增加恩贝酸在肿瘤治疗中的适应范围。