连接蛋白类

摘要： 神经连接蛋白Neuroligins(NLs)是突触后膜细胞黏附分子,主要有4种亚型,分别是Neuroligin1(NL1)、Neuroligin2(NL2)、Neuroligin3(NL3)和Neuroligin4(NL4).NLs在突触的结构和功能上都发挥着重要的作用,其与疼痛、神经和精神疾病的发生有着密切的联系.本文就NLs的研究进展及应用前景作一综述.

摘要： 胎膜早破(premature rupture of membranes,PROM)是产科最常见的早产原因之一,可诱发新生儿呼吸窘迫综合征、绒毛膜羊膜炎、胎盘早剥、败血症等不良结局.间隙连接通讯是细胞间最常见的信息交互及物质交换途径,其功能主要由间隙连接蛋白实现,间隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)是间隙连接蛋白家族中最常见且最重要的一类间隙连接蛋白,Cx43的半通道结构可在细胞间进行连接,形成细胞间的完整传输通道,在细胞间缝隙连接、细胞间信息和物质交流及胎膜完整性中发挥重要作用,Cx43在胎膜中的表达与胎膜中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平有密切关系,并可通过影响Ⅰ、Ⅲ型胶原数量及交联方式而致胎膜薄弱,进而导致胎膜早破.Cx43降低可致胎膜微裂隙发生及扩大进而导致胎膜早破发生,本文就Cx43与胎膜早破的相关性进行综述,以期对胎膜早破的发生机制及防治有进一步认识.

摘要： [目的]探讨细胞纤维连接蛋白(cFN)、白蛋白(Alb)/糖化血红蛋白(HbA1c)、干扰素-γ(IFN-γ)在创伤性脑出血标准大骨瓣减压术(SLTC)患者围术期动态变化及与神经功能的相关性.[方法]选取2017年5月至2020年2月本院收治的219例拟行SLTC术创伤性脑出血患者,根据术后30 d预后分为预后良好组(n=107)和预后不良组(n=112).比较两组术前及术后3 d、7 d血清cFN、Alb/HbA1c、IFN-γ水平,美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、格拉斯哥昏迷评分法(GCS)评分,采用Pearson分析cFN、Alb/HbA1c、IFN-γ与GCS评分、NIHSS评分的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析cFN、Alb/HbA1c、IFN-γ预测预后的效能.[结果]两组患者不同时间血清cFN、Alb/HbA1c、IFN-γ水平及GCS评分、NIHSS评分与术前比较,差异有统计学意义(P<0.05);术后3 d、7 d,两组患者血清cFN、Alb/HbA1c、IFN-γ水平及GCS评分、NIHSS评分比较,差异有统计学意义(P<0.05).术后3 d、7 d血清cFN、Alb/HbA1c、IFN-γ水平与对应的GCS评分、NIHSS评分均呈显著相关性(P<0.05).术后7 d血清cFN、Alb/HbA1c、IFN-γ水平预测预后的效能高于术后3 d,其中cFN预测预后的AUC最大,为0.857.[结论]创伤性脑出血SLTC术患者术后早期cFN、IFN-γ呈升高趋势,Alb/HbA1c呈降低趋势,检测术后7 d各指标水平能为临床预测预后提供重要的参考信息.

摘要： 目的分析内蒙古地区23个非综合征型耳聋家系缝隙连接蛋白β2(gap junction protein beta 2,GJB2)基因突变特点,探讨该耳聋家系遗传学病因。方法对内蒙古地区23个非综合征型遗传性聋家系共122人进行问卷调查、听力学检查,提取外周血DNA,经聚合酶链反应(PCR)扩增GJB2基因编码区进行直接测序,运用DNAStar软件进行测序结果分析。结果共检测到8个家系46名家系个体存在8种GJB2基因核酸序列改变。包括5种致病突变及3种多态性改变,明确了6个耳聋家系的遗传学病因为GJB2基因纯合突变所致。GJB2基因突变在23个家系中的检出率为33%(8/23),在122个家系个体的检出率为33%(37/122),在62例耳聋患者中的检出率为60%(37/62)。c.235delC突变检出率最高,为52%(32/62),其次为c.299-300delAT,突变携带率为8%(5/62)。结论内蒙古地区家系遗传性聋GJB2基因突变有较高的携带率,c.235delC位点是最常见的致病位点,其次为c.299-300delAT。以散发耳聋患者为根源,对其亲属进行耳聋基因筛查可以更加高效的发现潜在的耳聋基因突变携带者。

摘要： 目的 探讨蛋白激酶C(PKC)在机械牵张致肺上皮细胞损伤中的作用.方法 体外培养小鼠肺上皮细胞MLE-12,传代至稳定后分别进行8％和20％应变率的机械牵张,频率0.5 Hz,牵张时间分别为0h,1h,2h,4h,采用Western blot法测定肺组织occludin蛋白的表达.之后再将MLE-12细胞随机分为3组:牵张组(C组)、二甲基亚砜对照组(D组)和PKC抑制剂BIM组(B组).牵张前1h使用PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I 5μmol/L(用二甲基亚砜溶解)处理细胞,采用20％的强度牵张0h,1h,2h,4h,频率0.5 Hz.采用Western blot法测定肺组织occludin蛋白的表达、显微镜下观察细胞生长状态.结果 Occludin蛋白在MLE-12细胞上表达明显,occludin蛋白表达随着牵张强度和时间的增加而减少,20％的强度、牵张4 h occludin蛋白表达明显下降;与C组比较,D组occludin蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),B组机械牵张4h时occludin蛋白表达上调(P＜0.05).同时,显微镜下显示:与C组比较,D组细胞损伤较明显,B组细胞损伤程度明显减轻.结论 蛋白激酶C参与机械牵张致肺上皮细胞损伤.

摘要： 目的 评价亚低温对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮层内质网肌醇酶1-X盒连接蛋白1(IRE1-XBP1)信号通路的影响.方法 清洁级健康雄性SD大鼠54只,8～10周龄,体重200～230 g,采用随机数字表法分成3组(n=18):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I组)和亚低温组(T组).采用线栓阻断大脑中动脉2 h后恢复灌注的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型.T组于再灌注即刻行全身体表喷洒酒精降温,维持直肠温度32～34°C3 h.S组仅暴露血管,不阻断.于再灌注24 h时行神经功能缺陷评分,随后处死大鼠取脑组织皮层缺血区,透射电镜下观察细胞超微结构,TUNEL染色法确定神经细胞凋亡率,采用Western blot法检测IRE1和XBP1的表达,qRT-PCR法测定IRE1和XBP1 mRNA的表达.结果 与S组比较,I组和T组神经功能缺陷评分升高,皮层缺血区神经细胞凋亡率、IRE1和XBP1及其mRNA表达水平升高(P＜0.05),神经细胞胞核变性肿胀,核膜破碎缺损,染色质固缩边集,内质网扩张成囊池状;与I组比较,T组神经功能缺陷评分降低,皮层缺血区神经细胞凋亡率降低,IRE1和XBP1及其mRNA表达水平升高(P＜0.05),神经细胞超微结构损伤减轻.结论 亚低温减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的机制与进一步激活神经细胞IRE1-XBP1信号通路,缓解内质网应激反应有关.

摘要： 目的 评价大鼠神经病理性痛时脊髓kindlin-1/Wnt3a信号通路与炎症反应的关系.方法 清洁级健康雄性SD大鼠24只,10～12周龄,体重250～ 280 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(SH组)、神经病理性痛组(NP组)、kindlin-1 shRNA组(K组)和Wnt3a抑制组(W组).采用慢性坐骨神经压迫法建立小鼠神经病理性痛模型.于术前21 d时K组鞘内注射kindlin-1 shRNA腺病毒载体10μl,SH组、NP组和W组鞘内注射病毒空载体10μl.于术后1～3d时W组鞘内注射Wnt抑制剂IWP-210μl,SH组、NP组和K组鞘内注射人工脑脊液10μl.分别于术前1d、术后4和7d时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).术后7d痛阈测定结束后,处死大鼠取L4.6脊髓组织,采用ELISA法测定TNF-α和IL-1β含量,采用Western blot法检测kindlin-1和Wnt3a表达.结果 与SH组比较,NP组、K和W组术后4和7d时MWT降低,TWL缩短,脊髓TNF-α和IL-1β含量升高,NP组和W组脊髓kindlin-1和Wnt3a表达上调,K组脊髓Wnt3a表达上调(P＜0.05);与NP组比较,K组和W组术后4和7d时MWT升高,TWL延长,K组脊髓TNF-α和IL-1β含量降低,kindlin-1和Wnt3a表达下调,W组脊髓TNF-α和IL-1β含量降低,Wnt3a表达下调(P＜0.05),kindlin-1表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脊髓kindlin-1通过上调Wnt3a的表达,进而调控炎症反应,参与大鼠神经病理性痛的维持.

摘要： 目的 探讨细胞外ATP(eATP)-P2X7R-NLRP3信号通路在慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化中的作用以及ATP抑制剂甘珀酸(CBX)对CP的治疗作用.方法 将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机均分为5组:正常组,模型组,CBX低、中、高剂量组(分别为25、50、100 mg/kg).造模结束后,CBX各剂量组小鼠分别腹腔注射相应剂量的药物.末次给药24 h后将小鼠脱颈处死.HE染色评估胰腺组织病理学改变;ATP化学发光法测定小鼠胰腺组织eATP水平;免疫荧光染色检测P2X7R、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测P2X7R、NLRP3、Caspase-1、缝隙连接蛋白(PAN-1)mRNA的表达.结果 HE染色,光镜下可见正常组小鼠胰腺细胞分布紧密,排列规则,无纤维化及炎症细胞浸润.模型组细胞间隙增宽、腺泡萎缩、炎症细胞浸润且有大量胶原纤维生成,组织学评分较正常组显著升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组炎症细胞浸润及胶原纤维生成均减少,组织学评分降低.模型组小鼠造模后eATP水平较正常组显著升高(P<0.01),CBX中、高剂量组给药2周后,胰腺组织eATP水平均低于模型组.免疫荧光染色法和qPCR检测均显示,与正常组相比,模型组P2X7R、NLRP3、Caspase-1蛋白和mRNA表达升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.05).此外,qPCR检测结果还显示,模型组小鼠PAN-1 mRNA表达较正常组显著上调;与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.01).结论 CP病程中eATP水平显著增加并激活P2X7R,促进NLRP3炎性体组装,加重胰腺纤维化,CBX可下调P2X7R、NLRP3、Caspase-1,减轻胰腺炎症损伤及纤维化,从而发挥治疗作用.

摘要： 目的 探讨阿司匹林对人视网膜色素上皮细胞屏障功能的影响和潜在分子机制.方法 选取第3代人视网膜色素上皮细胞:(1)细胞培养液中添加阿司匹林,浓度分别为5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L,刺激24 h后,检测细胞活力.(2)细胞培养液中添加10 mmol/L的阿司匹林,刺激时间分别是30 min、60 min、120 min,提取细胞蛋白,检测p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化水平.(3)细胞分为对照组(未刺激),阿司匹林组(10 mmol/L的阿司匹林刺激24 h),阿司匹林+SB2035080刺激组(联合组,1μmol/L的SB2035080预处理30 min,10 mmol/L的阿司匹林刺激24 h),检测细胞的跨膜电阻抗(TER)和单层细胞的通透性.结果 5、10、20 mmol/L视网膜色素上皮细胞的活力与对照组比较,无统计学差异(P＞0.05).与对照组比较,阿司匹林刺激30 min、60 min、120 min的p38MAPK蛋白磷酸化程度明显增加(P＜0.05).与对照组比较,阿司匹林组上皮细胞的TER、claudin-7和ZO-1蛋白表达明显降低,细胞通透性明显增高(P＜0.05).与阿司匹林组比较,联合组TER、claudin-7和ZO-1蛋白表达明显升高,细胞通透性明显降低(P＜0.05).结论 阿司匹林通过激活p38MAPK信号通路,抑制紧密连接蛋白claudin-7和ZO-1蛋白表达,从而损伤人视网膜色素上皮细胞的屏障功能.

摘要： 一类连接蛋白转导结构域和辅助蛋白的生物活性蛋白及其应用。它解决了生物活性蛋白分子跨膜进入细胞的问题；它包括蛋白转导结构域、辅助蛋白和生物活性蛋白。辅助蛋白用于改善融合蛋白的表达水平、分离纯化、热稳定性和在细胞内的半衰期，以及调节生物活性蛋白，特别是酶分子的反应产物，从而提高生物活性蛋白的使用效果等。它可用作化妆品、炎症疾患和功能食品的有效成分。例如，GST、TAT、SOD融合蛋白可广泛用于美白、消除青春痘、疤痕、皱纹等调整皮肤失调方面，并可用于外部皮肤的局部应用和许多肤发疾病的治疗，具有防晒、抗辐射、增白、防皱、消炎和延缓衰老的功效；亦可用于调整关节炎等疑难病症。

摘要： 本发明公开了一种用于胰岛素样生长因子结合蛋白‑1和胎儿纤维连接蛋白含量的联合定量检测系统，包括试剂盒、检测设备；试剂盒运用双抗体夹心法免疫层析技术，与配套仪器使用，实现对孕妇阴道分泌物或阴道流出液中胰岛素样生长因子结合蛋白‑1与胎儿纤维连接蛋白的定量检测，为诊断胎膜早破与预测早产提供参考依据。还公开了一种同时测定胰岛素样生长因子结合蛋白‑1和胎儿纤维连接蛋白含量的金标垫的制备方法及其制备的金标垫，所述金标垫采用两种抗体标记胶体金并混合复溶液喷金的方法实现两种蛋白的同时检测，实现了一次取样同时定量检测两个指标，操作快速简单，检测准确度高。

摘要： 一类连接蛋白转导结构域和辅助蛋白的生物活性蛋白及其应用。它解决了生物活性蛋白分子跨膜进入细胞的问题；它包括蛋白转导结构域、辅助蛋白和生物活性蛋白。辅助蛋白用于改善融合蛋白的表达水平、分离纯化、热稳定性和在细胞内的半衰期，以及调节生物活性蛋白，特别是酶分子的反应产物，从而提高生物活性蛋白的使用效果等。它可用作化妆品、炎症疾患和功能食品的有效成分。例如，GST、TAT、SOD融合蛋白可广泛用于美白、消除青春痘、疤痕、皱纹等调整皮肤失调方面，并可用于外部皮肤的局部应用和许多肤发疾病的治疗，具有防晒、抗辐射、增白、防皱、消炎和延缓衰老的功效；亦可用于调整关节炎等疑难病症。

摘要： 本发明涉及生物领域，具体讲，涉及神经连接蛋白1的截短蛋白及其应用。神经连接蛋白1的截短蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明经实验发现，通过筛选获得的截短蛋白能缓解Aβ1‑42对SH‑SY5Y细胞的增殖抑制，改善Aβ1‑42对突触的毒性作用，缓解Aβ1‑42诱导的SH‑SY5Y细胞凋亡，说明该截短肽在制备治疗阿尔茨海默病方面、以及作为β‑淀粉样多肽抑制剂的应用。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，本发明公开了一种防止IL‑2衍生物蛋白复合体聚集及非共价连接蛋白亚基脱落的制剂；较高的离子强度会促进这一非共价连接蛋白复合体的解离，这一问题在患者输液的过程中至关重要，因为常用的接近人体体液离子强度的注射液(如0.9％生理盐水)的离子强度较高，足以使白细胞介素‑2蛋白复合体的非共价连接蛋白复合体解离，本发明系统地研究了溶液的pH、缓冲盐类型、表面活性剂及添加剂对蛋白复合体解离、胶体稳定性和聚集的影响，减少了白细胞介素‑2蛋白复合体的解离，同时保证了蛋白不形成聚集体。

摘要： 涉及一种重组透明质酸和蛋白聚糖连接蛋白1(hyaluronan and proteoglycan link protein 1；HAPLN1)蛋白以及一种用于预防或治疗肺部疾病的组合物，所述组合物包括选自由HAPLN1(透明质酸和蛋白聚糖连接蛋白1)蛋白、编码HAPLN1蛋白的基因以及促进HAPLN1蛋白或基因的表达或激活其功能的有效试剂组成的组中的至少一种作为有效成分。根据本公开的重组HAPLN1蛋白具有改善由老化或弹性蛋白减少引起的肺泡损伤的优异效果，从而可以有效地预防或治疗诸如慢性支气管炎、哮喘、肺气肿和慢性阻塞性肺部疾病等的肺部疾病。

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种外显子连接蛋白、核酸分子、表达载体、重组蛋白表达系统、应用。本发明公开了一种具有如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的外显子连接蛋白，通过构建含有外显子连接蛋白基因序列的重组蛋白表达系统，将外显子连接蛋白应用于重组蛋白的表达，同等条件下，与不含外显子连接蛋白的细胞系进行比较，能够显著提高重组蛋白的表达量，表达水平提高6～11倍多，降低生产成本。

摘要： 本发明涉及靶向CAIX、ANO1、间皮素、TROP2或紧密连接蛋白18.2的多特异性结合蛋白。具体地，本发明描述了结合NKG2D受体、CD16和选自碳酸酐酶9(CAIX)、钙激活氯通道蛋白1(ANO1)、间皮素、TROP2、CEA和紧密连接蛋白‑18.2的肿瘤相关抗原的多特异性结合蛋白，以及可用于治疗癌症的药物组合物和治疗方法。

摘要： 描述了结合NKG2D受体、CD16和选自碳酸酐酶9(CAIX)、钙激活氯通道蛋白1(ANO1)、间皮素、TROP2、CEA和紧密连接蛋白‑18.2的肿瘤相关抗原的多特异性结合蛋白，以及可用于治疗癌症的药物组合物和治疗方法。

摘要： 本实用新型是关于一种检测胎儿纤维连接蛋白和人胰岛素样生长因子结合蛋白‑1的试纸条，包括：样品垫；第一标记物垫，其连接于所述样品垫；第二标记物垫，其连接于所述第一标记物垫；包被垫，其连接于所述第二标记物垫，所述包被垫上依次设有第一检测线、第二检测线及质控线；吸水垫，其连接于所述包被垫。本实用新型还提供了包含上述检测胎儿纤维连接蛋白和人胰岛素样生长因子结合蛋白‑1的装置。本实用新型是对胎儿纤维连接蛋白和胰岛素样生长因子结合蛋白‑1(fFN‑IGFBP‑1)进行定性检测，具有稳定性好、特异性好、定性准确以及简单快速的优势，并适用于各级医院及家庭医疗。