Wnt蛋白质类

摘要： 自噬是真核细胞内发生的一种高度保守的自我降解机制,宫颈癌的肿瘤细胞自噬是肿瘤进展的重要因素。自噬作用的下调与宫颈细胞HPV感染、宫颈癌的产生存在紧密联系。Wnt信号通路在宫颈癌细胞的自我更新和分化的调控中扮演重要角色,越来越多的研究证明Wnt信号通路表达的激活及β-catenin的异常表达与宫颈癌密切相关。宫颈癌细胞自噬与Wnt/β-catenin信号通路之间存在一定关系并相互作用,影响着癌症的发生发展。本文就宫颈癌细胞自噬与Wnt/β-catenin信号通路关系综述如下。

摘要： 目的 探究Wnt3a对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSC)增殖、迁移和成骨分化的影响,确定Wnt3a对小鼠实验性牙周炎牙槽骨再生的作用.方法 分别用不同质量浓度的Wnt3a(0、20、100、200、500 μg/L)刺激PDLSC(计为5组),培养2、4、7或10d后通过细胞计数检测细胞增殖,通过Transwell实验检测细胞迁移;培养21d时通过实时荧光定量PCR检测成骨相关基因Ⅰ型胶原、runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达情况.将Wnt3a蛋白包裹在聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球复合透明质酸水凝胶中,注入牙周炎小鼠的龈沟中.在1、2、4和8周取上颌牙槽骨样本,用显微计算机断层扫描、HE染色及骨形成标志物碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)、Runx2和骨钙蛋白免疫组化染色评估牙槽骨再生情况.结果 培养10d后,与0 μg/L Wnt3a组相比,Wnt3a在20～500 μg/L时均可显著促进PDLSC增殖(p＜0.01).培养21d时,0、20、100、200及500 μg/L组Ⅰ型胶原mRNA的表达量分别为0.96±0.27、1.90±0.47、2.18±0.24、2.32±0.15、1.99±0.43,Runx2 mRNA的表达量分别为1.08±0.15、3.19±0.17、6.19±0.28、9.19±0.41、5.55±0.06,Ⅰ型胶原和Runx2 mRNA的表达与0μg/L Wnt3a组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).在注射水凝胶第1、2、4、8周后,包裹Wnt3a的水凝胶组小鼠上颌第二磨牙颊侧釉质牙骨质界至牙槽嵴顶的距离[分别为(497.3±18.2)、(455.7±12.5)、(401.0±8.5)、(362.3±15.5) μm]与牙周炎组小鼠[分别为(710.3±10.2)、(614.0±16.4)、(564.3±12.5)、(502.3±6.8)μm]相比均显著减少(P＜0.01),牙周炎症减轻.注射水凝胶4周后免疫组化结果显示,与牙周炎组相比,Wnt3a水凝胶组成骨相关基因ALP(0.72±0.01)、Runx2(0.77±0.03)及骨钙蛋白(0.72±0.07)的表达水平均显著升高(P＜0.01).结论 Wnt3a可以促进PDLSC的增殖、迁移和成骨分化以及实验性牙周炎小鼠的牙槽骨再生.

摘要： Wnt信号通路参与各种组织器官的纤维化疾病,如肺纤维化、肝纤维化、肾纤维化、皮肤纤维化的过程,该信号通路的激活与子宫内膜、异位内膜的纤维化相关,是潜在的宫腔粘连形成机制的关键靶点.Wnt通过促进内膜增殖、促血管生成作用以及增强子宫内膜干细胞的集落形成和自我更新的能力,Wnt信号通路在宫腔粘连中可能存在复杂的信号调控网络,使得内膜纤维化及修复的过程动态平衡,可成为研究其病理机制,寻找治疗作用靶点的潜在目标.

摘要： [目的]探讨无翅整合蛋白(Wnt10B)、β连环蛋白(β-catenin)在宫颈鳞癌组织中的表达及其临床意义.[方法]采用免疫组化法检测Wnt10B、β-catenin蛋白在19例正常宫颈组织、27例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者和50例宫颈鳞癌组织中的表达,比较三组Wnt10B、β-catenin阳性表达,分析两者及其与临床病理特征的相关性.[结果]Wnt10B在正常宫颈组织中的阳性表达率为36.84％(7/19),在CIN组织中的阳性表达率为66.67％(18/27),在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率为94.00％(47/50),三组Wnt10B阳性率比较差异具有统计学意义(χ2=25.381,P<0.05);β-catenin在正常宫颈组织中的阳性表达率为52.63％(10/19),在CIN组织中的阳性表达率为74.07％(20/27),在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率为90.00％(45/50),三组β-catenin阳性率比较差异具有统计学意义(χ2=11.611,P<0.05).Wnt10B、β-catenin的阳性表达率均与宫颈鳞癌浸润深度、临床分期及分化程度有关.[结论]Wnt10B、β-catenin在宫颈病变组织中,随着病变加重其阳性表达率逐渐升高,且二者的表达呈正相关,这提示二者可能参与肿瘤的发生、发展过程.

摘要： 目的 评价乌司他丁对幼鼠高氧急性肺损伤的影响及其与Wnt/β-连环素(β-catenin)信号通路的关系.方法 清洁级健康雄性SD大鼠36只,14日龄,体重40～ 50 g,采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、高氧致急性肺损伤组(ALI组)和乌司他丁组(UTI组).ALI组和UTI组采用吸入高浓度氧(氧浓度＞90％)72 h的方法制备幼鼠高氧急性肺损伤模型,C组正常呼吸空气.模型制备成功后1d时开始,UTI组每天同一时点腹腔注射乌司他丁50000 U/kg,连续注射3 d;C组和ALI组于相同时点腹腔注射等容量生理盐水.于模型制备成功后4d时处死大鼠取肺组织,确定湿重/干重(W/D)比值,光镜下观察病理学结果并行肺损伤评分,电镜下观察细胞超微结构,采用ELISA法检测IL-6、IL-1β和TNF-α.含量,采用Westem blot法检测磷酸化糖原合成激酶3β(p-GSK-3β)、Wnt3a和β-catenin的表达.结果 与C组比较,ALI组和UTI组肺组织W/D比值和肺损伤评分升高,肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量、p-GSK-3β、Wnt3a和β-catenin表达水平升高(P＜0.05);与ALI组比较,UTI组肺组织W/D比值和肺损伤评分降低,肺组织IL-6、IL-1β和TNF-oα含量、p-GSK-3β、Wnt3a和β-catenin表达水平降低(P＜0.05).UTI组肺组织细胞超微结构损伤较ALi组减轻.结论 乌司他丁减轻高氧致幼鼠急性肺损伤的机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活,降低炎症反应有关.

摘要： 目的 探讨大鼠神经病理性痛时长链非编码RNA (lncRNA)与kindlin-1/Wnt3a信号通路的关系.方法 实验Ⅰ 7日龄SD大鼠,体重15～20 g,雌雄不拘,断头处死后取脊髓背角,提取并培养原代星形胶质细胞,加入LPS 1 μg/ml诱导星形胶质细胞活化24 h.采用PCR免疫共沉淀法筛选与kindlin-1结合的lncRNA,采用荧光原位杂交法观察星形胶质细胞中lncRNA FOXF1-AS1的定位,采用生物素标记磁珠法检测lncRNA FOXF1-AS1与kindlin-1的结合情况.实验Ⅱ 清洁级健康雄性SD大鼠30只,体重250～280 g,10～12周龄,采用随机数字表法分为5组(n=6):假手术对照组(C组)、神经病理性痛组(NP组)、lncRNA FOXF1-AS1过表达组(F组)、lncRNA FOXF1-AS1过表达+kindlin-1 shRNA组(FK组)和lncRNA FOXF1-AS1过表达+Wnt抑制剂组(FW组).采用坐骨神经慢性压迫法建立大鼠神经病理性痛模型.F组于术前28 d时鞘内注射lncRNA FOXF1-AS1过表达慢病毒10μl,其余各组鞘内注射空载病毒10μl;FK组于术前21 d时鞘内注射kindlin-1 shRNA干扰腺病毒10μl,其余各组鞘内注射空载病毒10μl;FW组于术后1～3d时鞘内注射Wnt抑制剂IWP-210μl,其余各组于相同时点鞘内注射人工脑脊液10μl.分别于术前1d、术后4和7d时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).于术后7d时痛阈测定结束后处死大鼠取脊髓组织,采用Western blot法检测kindlin-1、Wnt3a和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达,采用ELISA法检测TNF-α和IL-1β含量.结果 实验Ⅰ 表达于星形胶质细胞胞浆内的lncRNA FOXF1-AS1与kindlin-1具有结合作用.实验Ⅱ 与C组比较,NP组术后4和7d时MWT降低,TWL缩短,脊髓kindlin-1、Wnt3a和GFAP表达上调,TNF-α和IL-1β含量升高(P＜0.05);与NP组比较,F组术后4和7d时MWT降低,TWL缩短,脊髓kindlin-1、Wnt3a和GFAP表达上调,TNF-α和IL-1β含量升高,FK组和FW组术后4和7d时MWT升高,TWL延长,脊髓TNF-α和IL-1β含量降低,FK组脊髓kindlin-1、Wnt3a和GFAP表达下调,FW组脊髓kindlin-1上调,Wnt3a和GFAP表达下调(P＜0.05);与F组比较,FK组和FW组术后4和7d时MWT升高,TWL延长,脊髓TNF-α和IL-1β含量降低,FK组脊髓kindlin-1、Wnt3a和GFAP表达下调,FW组脊髓Wnt3a和GFAP表达下调(P＜0.05).结论 lncRNA FOXF1-AS1可通过上调kindlin-1表达,激活Wnt3a信号通路,促进星形胶质细胞活化,进而调控炎症反应,参与大鼠神经病理性痛的过程.

摘要： 目的 评价大鼠神经病理性痛时脊髓kindlin-1/Wnt3a信号通路与炎症反应的关系.方法 清洁级健康雄性SD大鼠24只,10～12周龄,体重250～ 280 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(SH组)、神经病理性痛组(NP组)、kindlin-1 shRNA组(K组)和Wnt3a抑制组(W组).采用慢性坐骨神经压迫法建立小鼠神经病理性痛模型.于术前21 d时K组鞘内注射kindlin-1 shRNA腺病毒载体10μl,SH组、NP组和W组鞘内注射病毒空载体10μl.于术后1～3d时W组鞘内注射Wnt抑制剂IWP-210μl,SH组、NP组和K组鞘内注射人工脑脊液10μl.分别于术前1d、术后4和7d时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).术后7d痛阈测定结束后,处死大鼠取L4.6脊髓组织,采用ELISA法测定TNF-α和IL-1β含量,采用Western blot法检测kindlin-1和Wnt3a表达.结果 与SH组比较,NP组、K和W组术后4和7d时MWT降低,TWL缩短,脊髓TNF-α和IL-1β含量升高,NP组和W组脊髓kindlin-1和Wnt3a表达上调,K组脊髓Wnt3a表达上调(P＜0.05);与NP组比较,K组和W组术后4和7d时MWT升高,TWL延长,K组脊髓TNF-α和IL-1β含量降低,kindlin-1和Wnt3a表达下调,W组脊髓TNF-α和IL-1β含量降低,Wnt3a表达下调(P＜0.05),kindlin-1表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脊髓kindlin-1通过上调Wnt3a的表达,进而调控炎症反应,参与大鼠神经病理性痛的维持.

摘要： 本发明涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，更具体地涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，所述方法包括使用一种固定有包含溶胶-凝胶材料与蛋白质的混合物的位点的蛋白质芯片。根据本发明，蛋白质芯片可以容易地用溶胶-凝胶材料在96孔板中制造，从而可以容易地从天然物质的文库中筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的抑制剂。

摘要： 由下述氟树脂形成了与蛋白质或包含蛋白质的组合物接触的表面的容器及用于制造蛋白质或包含蛋白质的组合物的器材具有显著的低蛋白质吸附性，其中，所述氟树脂为选自四氟乙烯‑六氟丙烯系共聚物及四氟乙烯‑全氟烷基乙烯基醚系共聚物中的至少1种氟树脂，并且，所述氟树脂的熔点为320°C以下，所述氟树脂中的相对于每1×10

摘要： 本发明提供能减小使用了特异性地结合的物质的测定中的由肝型脂肪酸结合蛋白质引起的测定值的变动幅度的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂、评价该制剂的方法、制作肝型脂肪酸结合蛋白质的校准曲线的方法、以及定量该蛋白质的方法。一种用使用了用10mM的氧化剂在25°C下进行1小时的氧化处理的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂的测定值与使用了未进行上述氧化处理的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂的测定值的比表示的氧化变动系数设定为1.4以下的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂、用于该制剂的肝型脂肪酸结合蛋白质、编码该蛋白质的DNA、由该DNA转化得到的细胞、该蛋白质的制造方法、评价该制剂的方法、抑制使用该制剂的测定中的测定值的变动幅度的方法、制作该蛋白质的校准曲线的方法、以及定量该蛋白质的方法。

摘要： 本发明提供一类能够携带生物活性蛋白分子穿透细胞膜的非肽类多胍有机小分子或其药学上可接受的盐，所述非肽类多胍有机小分子具有式I所示的结构：

摘要： 本发明提供一种糖化蛋白质测定试剂，其至少包含Trinder’s试剂、4‑氨基安替比林、蛋白酶、蛋白酶的稳定剂以及亚铁氰化物，其中，至少Trinder’s试剂包含在含有Trinder’s试剂的部分组合物中，至少4‑氨基安替比林包含在含有4‑氨基安替比林的部分组合物中，蛋白酶的稳定剂是使亚铁氰化物与该蛋白酶的稳定剂混合后的氧化还原电位大于0.058V的稳定剂，氧化还原电位是包含蛋白酶的稳定剂和亚铁氰化物、不包含糖化蛋白质的反应体系的氧化还原电位。

摘要： 本发明提供能够以优异的安全性将蛋白质导入到细胞中的蛋白质导入方法。通过使目标蛋白质承载在由粘土矿物构成的蛋白质导入用载体上并将其添加到细胞中，可以将所述目标蛋白质导入到所述细胞内中。所述粘土矿物优选为层状粘土矿物，可以使用蒙脱石、蛭石、伊利石等。

摘要： 本发明涉及与粉碎或切断洋葱等植物时发生催泪成分的生成有关的表现出将1－丙烯次磺酸转变为催泪成分的作用的蛋白质或多肽、编码该蛋白质或多肽的DNA(催泪成分合成酶基因)、使用用于属于葱属植物的催泪成分合成酶基因分离的引物以及使用该引物分离该基因的方法、含有上述DNA的重组载体、包含含有上述DNA的重组载体的转化体、对用含有上述DNA的重组载体转化的宿主细胞进行培养制造具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的方法、具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽、以及具有抑制具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的mRNA翻译的功能的核酸分子。

摘要： 本发明涉及一种与蛋白质类药用活性成分结合使用的配体，所述配体由牛磺胆酸和甘氨胆酸组成。本发明还提供一种口服蛋白质类药物制剂，具体为以所述配体与蛋白质类药用活性成分形成的结合物为中心、外侧包裹纳米脂质体的微粒；所述纳米脂质体包裹层可以增加对核心结构的保护，且当活性成分为胰岛素时可为胰岛素质粒接触受体时产生自磷酸化提供磷离子。本发明提供的以胰岛素为活性成分的口服蛋白质类药物制剂不但能调节血糖、血脂，主要的是能防治II型糖尿病的并发症；其生物利用度高于注射胰岛素，不会引起低血糖，更不会至低血糖引起脑死亡；采用口服方式，给药方便，给药后血糖平稳，对机体的内环境的稳定更有益，具有良好且广泛的应用前景。

摘要： 本文公开了至少一种低蛋白质酸奶组合物，其包括：至少一种乳制品成分、乳制品替代物成分或其混合物；以及调质剂，所述调质剂包括抑制淀粉和非粒状酶促脱支蜡质马铃薯淀粉，其中所述低蛋白质酸奶包括小于2.9％的乳制品蛋白质含量；并且公开了至少一种用于制备这些低蛋白质酸奶组合物的方法。本文还公开了一种调质剂，其包括抑制淀粉和非粒状酶促脱支蜡质马铃薯淀粉。

摘要： 本发明涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，更具体地涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，所述方法包括使用一种固定有包含溶胶-凝胶材料与蛋白质的混合物的位点的蛋白质芯片。根据本发明，蛋白质芯片可以容易地用溶胶-凝胶材料在96孔板中制造，从而可以容易地从天然物质的文库中筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的抑制剂。