苏云金芽孢杆菌

摘要： 为了提高分离自酸橙果实中的一株内生细菌Bacillus thuringiensis Bt028产几丁质酶的性能。采用单因素实验方法考察了培养基组成和发酵条件对该菌株产几丁质酶的影响,并在此基础上采用响应面方法对该菌株产几丁质酶的摇瓶发酵条件进行了优化。单因素实验结果表明胶体几丁质浓度、培养温度和初始pH对该菌株产几丁质酶影响明显;响应面试验结果表明,当胶体几丁质浓度为0.8%、酵母粉浓度为1%、初始pH为6.9、接种量3%、装液量为100 mL/250 mL、30°C培养48 h时,该菌株产几丁质酶性能最佳,发酵液中几丁质酶酶活可达10.48 U/mL。研究结果为该菌株几丁质酶的进一步开发与应用奠定了基础。

摘要： 为了探究不同种类茶叶的抑菌效果及指导日常饮茶。以苏云金芽孢杆菌和大肠杆菌作为指示菌,采用滤纸片抑菌圈法测定3种茶叶对其的抑菌效果。结果表明,茶叶粗体液的抗菌效果与茶叶浓度呈正相关;3种茶叶的抑菌效果依次为茉莉花茶>铁观音>红茶(滇红);铁观音、茉莉花茶在提取时间为20 min时获得最大提取率,滇红在提取时间为50 min时,抑菌圈直径最大;铁观音分别再80°C和90°C有最大的抑菌效果,而茉莉花茶和滇红的抑菌效果都随提取温度的增加而增加。茶叶粗提物对革兰氏阳性细菌的抑制效果大于革兰氏阴性细菌;铁观音在提取质量浓度为5 mg/m L,提取时间20 min,提取温度80°C时有较好的抑菌效果。

摘要： 杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins,ICPs;含有Cry和Cyt 2大家族)和营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal proteins,Vips)等Bt杀虫蛋白可有效防治鳞翅目害虫,其中Cry应用最广泛。然而,一些地区的鳞翅目害虫已对Bt杀虫蛋白产生了抗性。目前,普遍认为鳞翅目昆虫中肠受体与Bt杀虫蛋白结合能力的改变是导致其对Bt杀虫蛋白产生抗性的最主要因素。在鳞翅目昆虫中,Cry受体是研究得最为透彻的Bt受体,已经被证实的有氨肽酶N、钙黏蛋白、碱性磷酸酶和ABC转运蛋白等。Vips杀虫蛋白类与鳞翅目昆虫中肠受体的结合方式与Cry杀虫蛋白相似,但结合位点与Cry杀虫蛋白不同。本文从结构特点、作用机制及不同鳞翅目昆虫间的表达差异等角度对以上4种鳞翅目昆虫中肠Bt受体进行了综述,并提出如下展望:(1)以棉铃虫或小菜蛾等鳞翅目昆虫为农业害虫模式生物进行深入研究,阐明其对Bt杀虫蛋白产生抗性的机制,为研究其他鳞翅目农业害虫对Bt杀虫蛋白产生抗性的机制提供理论借鉴;(2)鉴于在不同鳞翅目昆虫间,中肠Bt受体与Bt杀虫蛋白结合存在差异,且同一Bt杀虫蛋白与鳞翅目昆虫Bt受体并不专一性结合,Bt杀虫蛋白多基因组合策略是较为有效的田间鳞翅目昆虫防治策略,是今后一段时间内Bt杀虫蛋白应用的发展方向。

摘要： 【目的】本研究旨在探讨葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOX)在黏虫Mythimna separata发育、消化和免疫防御中的作用。【方法】采用转录组测序技术克隆了黏虫GOX基因的cDNA序列。qRT-PCR检测该GOX基因在黏虫不同发育阶段(1-6龄幼虫、蛹和1日龄成虫)和4龄第1天幼虫不同组织(前肠、中肠、后肠、下唇腺、马氏管、脂肪体和表皮)、以及取食用不同浓度(0.01%,0.1%,1%和10%)葡萄糖溶液浸泡10 s的玉米叶片及饥饿和再取食条件下的4龄第1天幼虫中的特异性表达模式。通过RNAi和生物测定研究该GOX基因在黏虫对苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis抗性中的功能。【结果】克隆获得了一条新的长2187 bp的黏虫GOX基因MsG OX cDNA序列(GenBank登录号:KY348779),其开放阅读框长1821 bp,编码606个氨基酸,预测分子量为66.4 kD。发育表达谱结果表明MsG OX在黏虫不同发育阶段表达量不同,在4龄幼虫期表达量最高;组织表达谱结果表明MsG OX在黏虫4龄第1天幼虫各组织中均有表达,在下唇腺中表达量最高。饲喂幼虫不同浓度葡萄糖对MsG OX转录的诱导效果不同,在葡萄糖浓度为10%时,该基因的表达水平达到最高。随着饥饿时间的延长,4龄第1天幼虫中MsG OX的表达水平逐渐升高,并在饥饿24 h时达到高峰,饥饿后再用玉米叶片饲喂幼虫,MsG OX的表达水平逐渐回升。注射ds MsG OX 48 h后,MsG OX的表达水平较对照(注射ds EGFP)降低了88.3%;与同一时间点的对照相比,注射ds MsG OX后48和72 h幼虫的体重、体长和消化系数均显著降低,苏云金芽孢杆菌侵染48和72 h提高了幼虫的校正死亡率。【结论】MsG OX可能参与了黏虫中肠的消化和抗菌,研究结果为进一步研究黏虫MsG OX的功能并提出新的黏虫防治策略提供了依据。

摘要： 【目的】明确一株具有烟草甲毒杀作用的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)在醇化过程中对烟叶的影响,为烟叶仓库中应用Bt菌剂防控烟草甲的可行性和安全性评价提供参考依据。【方法】按照0.1 g Bt菌剂处理1 kg烟叶的比例作处理,以未喷施Bt菌剂的烟叶作为对照,在仓库中贮藏12个月后,每隔2个月采集醇化阶段烟叶,对总糖、还原糖、氯、总植物碱、钾、总氮和淀粉等7项常规化学成分,以及香气质、香气量、杂气、刺激性、透发性、柔细度、甜度、余味、浓度和劲头等10项感官品质进行测定和评估。同时对醇化24个月的烟叶样品使用16S rDNA扩增子测序,比较分析喷施Bt菌剂和未喷施Bt菌剂的烟叶细菌群落结构多样性变化。【结果】Bt菌剂处理后,烟叶的7项常规化学成分均未出现显著变化(P>0.05);而感官质量的5项指标出现显著性差异(P<0.05,下同),其中香气量和杂气的评吸得分表现为处理组优于对照组,香气质、透发性和甜度的评吸得分表现为对照组优于处理组;处理组和对照组的细菌种类存在明显差异,在处理组中,纲、目、科和属分类中相对丰度最高的分别为杆菌纲(Bacilli,95.9%)、芽孢杆菌目(Bacillales,95.9%)、芽孢杆菌科(Bacillaceae,96.0%)和芽孢杆菌属(Bacillus,95.9%),而在对照组中,相对丰度最高的分别为丙型变形菌纲(Gammaproteobacteria,47.6%)、肠杆菌目(Enterobacteriales,31.3%)、肠杆菌科(Enterobac-teriaceae,33.7%)和志贺氏大肠杆菌属(Escherichia-Shigella,22.9%)。处理组和对照组的Alpha多样性指数中Ob-served species指数和Chao1指数存在显著差异,处理组的细菌群落丰富度显著低于对照组,Beta多样性分析证明2组间的群落结构存在显著差异。【结论】使用苏云金芽孢杆菌处理后,烟叶中的细菌群落结构发生显著变化,但对烟叶化学成分和感官质量的影响较小,不造成烟叶品质的下降,说明在仓储中使用该菌株防控烟草甲的经济风险较小。

摘要： 为进一步发掘国内苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)的菌株资源,在上海市若干地区搜集土壤样品,采用NaAc-抗生素筛选法从土样中分离野生Bt菌株,通过光学显微镜染色镜检、PCR-RFLP体系及SDS-PAGE电泳等方法对分离菌株的杀虫晶体蛋白形态、蛋白表达量及cry基因类型进行分析,并测定了分离菌株对草地贪夜蛾的室内杀虫活性。结果表明:在上海地区采集的165份土壤样品中共分离得到苏云金芽孢杆菌50株,总出菌率为8.20%;其伴孢晶体蛋白呈菱形、球形、椭球形、不规则形等晶体形态,以球形晶体为主;多数表达130 ku、90 ku、80 ku、50 ku蛋白;分离菌株所含cry基因类型丰富,包含cry1、cry3、cry8类等共16种基因类型,以cry32及cry8类基因居多;有6株菌株对草地贪夜蛾表现出高杀虫活性,72 h校正死亡率最高可达100%。上述分离菌株对后续开展草地贪夜蛾的绿色防控及抗性治理具有重要的实践意义。

摘要： 为了提高苏云金芽孢杆菌SY-1菌株淀粉酶活性,提升烟叶生物酶发酵过程中淀粉降解效率,从而提高烟叶品质,以淀粉酶活性为指标,对SY-1菌株产酶培养基及发酵条件进行单因素及响应面试验优化。结果显示,SY-1菌株产淀粉酶的最优培养基及发酵条件:可溶性淀粉+玉米淀粉(m_(可溶性淀粉)∶m_(玉米淀粉)=1∶1)15.69 g/L,蛋白胨+酵母粉(m_(蛋白胨):m_(酵母粉)=1∶1)16.87 g/L,CaCl_(2)5.91 g/L;温度36.83°C、转速189.71 r/min。酶活性为223.45 U/mL,与优化前相比提高92.55%。利用优化后SY-1酶液处理烟叶,淀粉降解率达40.68%。与优化前酶液处理相比,淀粉降解率提高23.80个百分点,优化后酶液处理烟叶中水溶性总糖和还原糖含量分别增加5.91%和7.84%,总氮和烟碱含量分别下降4.23%和2.84%,两糖差降低,糖碱比提高,有利于提高烟叶吃味品质。

摘要： 转Bt基因作物的长期大面积种植使靶标害虫对其产生了抗性,然而,对害虫抗性机制的认识不足严重阻碍了Bt杀虫蛋白的长效使用。ABC转运蛋白(ATP-binding cassette transporter, ABC)属于跨膜类家族蛋白,多项研究表明,ABC转运蛋白基因的突变与表达量变化与多种害虫对Bt产生抗性的调控机制相关。通过对ABC转运蛋白转录水平差异、基因编辑验证和体外细胞表达的分析综述了ABC转运蛋白介导害虫对Bt杀虫蛋白抗性调控的研究进展。同时,以亚洲玉米螟基因组为例,建立了亚洲玉米螟ABC转运蛋白与果蝇ABC家族蛋白基因序列聚类建树,将亚洲玉米螟ABC转运蛋白基因分为8个家族。综述结果为分析害虫在田间的抗性演化机理提供理论依据,为Bt杀虫蛋白的长效应用提供治理决策。

摘要： 于浙江省余姚市明凤淡水养殖场某养殖基地采集病鳖,利用血平板从肝脏、脾脏以及心脏中分离细菌,对分离细菌进行了形态特征和分子鉴定,判定该菌为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,B.thuringiensis),通过药敏试验、毒力因子检测及回归感染试验,证明该菌为该养殖场中华鳖暴发性死亡的主要病原菌,确定该菌含有非溶血性肠毒素(nheA)和与腹泻毒素相关的溶血素BL(hblC)两种毒力因子,并对恩诺沙星、环丙沙星、罗红霉素、氧氟沙星、氟罗沙星等抗生素敏感。本研究为中华鳖相关细菌性疾病的防控和相关疫苗的制备奠定基础。

摘要： 日前,河北省农林科学院植物保护研究所宋健、杜立新、曹伟平等人申请的国家发明专利“一种苏云金芽孢杆菌及其应用”发明专利获得授权,专利号为ZL201711053773.6该发明公开了属于生物防治领域的一种苏云金芽孢杆菌菌株DK49,该发明还公开含有DK49的微生物杀虫剂.以及它们在防治寡毛跳甲属害虫上的应用。

摘要： 目的：探讨苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)BtZ01对小鼠胚胎发育和胚后生长发育的影响. 方法：将48只孕鼠随机分组,试验组分别饲喂浓度为106CFU/mL、108CFU/mL、5×109CFU/mL的Bt菌液,并设灭菌水对照组.采用行为致畸学方法检查Bt对小鼠胚胎和胚后发育的影响并制作脏器切片,测量脏器指数等指标. 结果：与对照组相比,各试验组小鼠在胚胎和胚后发育各阶段体重和体长无显著差异(p＞0.05),胚胎畸形发生率无增加,骨骼染色观察发现高剂量组小鼠后囟门显著大于其它3组(p＜0.05).18d与48d小鼠部分脏器指数存在显著差异,但病理切片观察仅高剂量组肾脏有病变发生. 结论：苏云金芽孢杆菌BtZ01在浓度为108cfu/ml及以下时对小鼠胚胎发育及胚后生长发育无不良影响.

摘要： 苏云金芽孢杆菌是中国产量最大、应用最广泛的活体微生物农药,也是许多绿色和有机食品生产中离不开的生物杀虫剂.Bt具有突出的优点,但杀虫范围比较窄、易受外界环境因素(如阳光照射、高温等)影响、生产成本较高等问题也制约了其更广泛地应用和推广.近年来项目组开展了一系列工作，以Bt菌种资源库的挖掘利用为核心，在杀虫、防病新基因、治理重金属污染、基因工程菌构建及其应用等多方面开展研究，不断完善传统Bt生物农药研发与产业化体系，推进了产业升级改造。

摘要： 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是中国产量最大、应用最广泛的活体微生物农药.作者近5年来以Bt菌种库的挖掘利用为核心,克隆了4个经Bt内毒素国际命名委员会命名的新杀虫基因,开展了6个毒力、分化发育调控基因和11个生物被膜调控基因的研究,为研制更高效、更持效的Bt新型制剂奠定了坚实的基础;获得了1个含有冷激蛋白结构域的新细菌素BtCspB,以期实现Bt杀虫、杀菌双重经济效益;明确了在选择Bt工业化生产菌株时,不仅要考虑优点(杀虫谱、促生等),也要权衡其可能的不足(抑制作物生长);建立了Bt治理Cr(Ⅵ)和镍污染的方法;访学加拿大女王大学学习结构生物学,顺利获得多个蛋白质晶体;与企业合作研发了高效价Bt生物农药,推动了生物农药制造业的升级.

摘要： 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在芽孢形成的同时积累杀虫晶体蛋白,并在芽孢形成末期可达整个细胞干重的20％～30％,这种大量的杀虫晶体蛋白的产生源于它特定的转录系统,并由一系列sigma因子,如σA,σH,σE,σK,σF,σG等调控.

摘要： 本文简要介绍了苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫蛋白的杀虫机制,主要有两种假说:中肠穿孔假说和信号转导假说.现在已经有许多害虫在实验室条件下对Bt蛋白产生了抗性,而且在田间条件下也已经发现对Bt蛋白产生抗性的害虫种群.害虫对Bt蛋白的抗性可能在多个环节发生,其中与Bt蛋白特异结合的受体上结合位点的改变,及蛋白水解过程的变化是抗性产生的两个主要环节.

摘要： 通过构建orf1基因缺失和orf1基因起始密码子突变的转录分析载体，测定orf1基因缺失或突变后启动子的β-半乳糖苷酶活性，结果发现，HD-73的转录活性在TO到T10之间没有差异，而orf1基因完全缺失HD-73的转录活性在T5以后就显著高于前两者，SDS-PAGE分析了orf1基因缺失后CryBE蛋白的表达情况发现，orf1基因缺失的菌株所表达的CryBE蛋白产量明显多于orf1基因存在的HDcry8E菌株，综合说明，orf1基因的可在转录水平上抑制cry8E启动子的转录。

摘要： 苏云金芽孢杆菌产生的Cry杀虫蛋白是一种重要的昆虫致病蛋白.高浓度的Cry蛋白使昆虫中肠细胞膨胀和裂解,造成昆虫死亡,相比之下,低浓度的Cry蛋白能够诱导寄主对其产生防御反应.这些防御反应是通过胞内的多种细胞信号传导通路和防御相关分子来调控的.

摘要： 近年来,在农业生产中由于大量使用化肥和农药,导致了食品安全形势和环境污染问题日趋严峻.如何在保证农产品产量和质量的前提下,减少农药和化肥的使用量已成为人们关心的焦点和热点问题.为此,安徽莱姆佳生物科技有限公司在其生产的固氮、溶磷、解钾复合微生物菌肥料的基础上,增加了具有防控病虫害功能的枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌菌种,研发了具有防控蔬菜病虫害功能的生物菌肥,并通过农科部门大田试验,达到了预期的效果.防控蔬菜病虫害型生物菌肥是根据蔬菜施肥的特点，以有机肥为主、重在底肥、合理追肥、控制氮肥用量、禁施硝态氮肥以及培肥地力、保持土壤肥力平衡的规律而研发的，在传统的蔬菜专用菌肥中增加了具有杀灭土壤中线虫和蝇蛆的菌种，并对其单独培植、纯化复壮、液体制种、联合发酵、高效生物载体复配和低温干燥等工艺生产而成。下面简单介绍该肥生产过程中的菌种选择、工艺流程、工艺控制指标以及肥料特点。

摘要： 苏云金芽孢杆菌能在其对数生长期向胞外分泌一类具有广谱杀虫活性的毒蛋白,即营养期杀虫蛋白.结构生物学、蛋白质组学、细胞生物学等技术方法的发展和综合运用有助于Vip3的杀虫机理与作用受体的阐明。未来Vip3蛋白的研究有望在以下几个方面获得突破：晶体结构获得解析，这将有利于阐明Vip3的杀虫机理，推动其定向改造；明确其特异受体； 建立Vip3的作用模型。

摘要： 来源于苏云金杆菌(Bt)的昆虫特异性毒素为抑制害虫提供了宝贵的资源.在此,我们将回顾一些已经应用于增强对特定目标物种毒素活性作用的不同策略,目标物种包括那些已经进化了的抗Bt基因毒性的物种,或者是用来修饰Bt Cry毒素和Cyt毒素的寄主范围的不同方法.这些策略包括添加肽、结构域交换筛选出毒性提高的突变毒素等.优化的毒素提供了一种有效的途径来拓展这些毒素蛋白质对那些对天然Bt毒素低敏感性的害虫的抑制,并克服野外抗性.

摘要： 公开了一种控制双翅目昆虫幼虫的方法或者一种抑制幼虫抗性发展、控制双翅目昆虫抗性种群并降低抗性水平的方法，其通过将杀幼虫有效量的苏云金芽孢杆菌以色列亚种菌株和球形芽孢杆菌菌株的混合物引入到含有双翅目昆虫幼虫的环境中；以及混合物的组合物。优选两种菌株都是未遗传修饰的。

摘要： 本发明提供了一种得自苏云金芽孢杆菌苏云金亚种的分离和纯化蛋白，该蛋白的分子量经SDS-PAGE测定约为20千道尔顿(kDa)，所述的蛋白具有部分SEQID NO：1所示的氨基酸序列，而且，所述蛋白表现出抗肿瘤细胞的细胞毒性。本发明还提供了一种处理肿瘤细胞的方法，该方法包括对所述细胞使用治疗有效量的本发明组合物。

摘要： 本发明公开了一种防治韭菜迟眼蕈蚊的苏云金芽孢杆菌JQ23的液体发酵培养方法，该方法所使用的发酵培养基配方为葡萄糖30‑50g/L，黄豆饼粉25‑35g/L，花生粕5‑15g/L，蛋白胨10‑30g/L，酵母粉2‑5g/L，磷酸二氢钾0.2‑0.5g/L，硫酸铵0.2‑0.5g/L，氯化钙0.1‑0.3g/L，氯化锰0.01‑0.05g/L，其余为无菌水。本发明培养的苏云金芽孢杆菌芽孢含量可达8.25×109cfu/mL，对2龄韭蛆幼虫3天的校正死亡率可达93％，且杂菌含量低，发酵液制备的悬浮剂常温下放置性能稳定，便于长途运输和长期保存。

摘要： 本发明大体上涉及制备包含高效力苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki)菌株和苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种(Bacillus thuringiensis subsp.aizawai)菌株的农业制剂的方法，其中苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的重量比率为约20:80到80:20。本发明还涉及通过本发明的方法制造的制剂和使用所述制剂来有效防治作物害虫的方法。

摘要： 本发明大体上涉及包含高效力苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki)菌株和苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种(Bacillus thuringiensis subsp.aizawai)菌株的农业制剂，其中苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的重量比率为约20:80到80:20。本发明还涉及制造本发明的制剂和使用所述制剂来有效防治作物害虫的方法。

摘要： 本发明大体上涉及协同量的苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种用于防治小菜蛾、甜菜夜蛾、甘蔗螟、大豆尺蠖、棉铃虫、粉纹夜蛾以及西南玉米秆草螟的用途，其中所述苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种与所述苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种的比率是约1:0.001至约1:3.5。

摘要： 公开了一种控制双翅目昆虫幼虫的方法或者一种抑制幼虫抗性发展、控制双翅目昆虫抗性种群并降低抗性水平的方法，其通过将杀幼虫有效量的苏云金芽孢杆菌以色列亚种菌株和球形芽孢杆菌菌株的混合物引入到含有双翅目昆虫幼虫的环境中；以及混合物的组合物。优选两种菌株都是未遗传修饰的。

摘要： 本发明提供了一种得自苏云金芽孢杆菌苏云金亚种的分离和纯化蛋白,该蛋白的分子量经SDS－PAGE测定约为20千道尔顿(kDa),所述的蛋白具有部分SEQ ID NO∶1所示的氨基酸序列,而且,所述蛋白表现出抗肿瘤细胞的细胞毒性。本发明还提供了一种处理肿瘤细胞的方法,该方法包括对所述细胞使用治疗有效量的本发明组合物。

摘要： 本发明公开了一种能够荧光追踪的杆菌肽碳点/苏云金芽孢杆菌纳米材料的制备方法及其产品、应用，其包括，溶解杆菌肽：将杆菌肽于溶剂中溶解；制备碳点：在150～200°C的温度下加热反应4～24h；掺入苏云金芽孢杆菌：加入苏云金芽孢杆菌，搅拌；离心，过滤。本发明使用相对廉价的杆菌肽为碳源，不需要加入任何的表面钝化剂，采用目前使用最广泛的一步水热法，就能制备可荧光追踪的杆菌肽碳点/苏云金芽孢杆菌(Bt‑CQDs)天然防腐保鲜剂，实验步骤简单，荧光性能稳定突出，抗菌功能明显，为现有的果蔬食品市场保鲜难题带来了福音。

摘要： 本发明公开了一株苏云金芽孢杆菌及其应用。苏云金芽孢杆菌具体为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringensis)FR104，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.19019。实验证明，用苏云金芽孢杆菌FR104对植物进行叶面喷施并灌根，可以促进植物生长，具体表现为地上部分鲜重的显著增加。本发明具有重要的应用价值。