内生菌

摘要： 【目的】研究内生菌(Bacillus velezensis BHZ-29、B.atrophaeus SHZ-24)和根际细菌(B.subtilis SHT-15、B.vanillea SMT-24)在灭菌土与非灭菌土中对棉花的促生作用及诱导抗病效果。【方法】以棉花植株为试材,通过测量内生菌和根际细菌处理后第50天棉花的株高、根长、根毛数、叶片数,分析内生菌及根际细菌对棉花的促生作用;同时测定第50天棉花叶片过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及丙二醛(MDA)含量和木质素含量,探究内生菌和根际细菌处理对棉花诱导抗性作用。【结果】接种内生菌及根际细菌后,均能提高灭菌土与非灭菌土棉花株高、根长、增加根毛数和叶片数。在灭菌土中,SHZ-24处理组株高最高为24.78 cm,是对照组的1.21倍,SHT-15处理组根长最长,是对照组的1.14倍,根毛数和叶片数最多,分别是对照组的1.71和1.18倍;在非灭菌土中,SMT-24处理组株高最高为24.33 cm,是对照组的1.11倍,叶片数最多,是对照组的1.18倍,SHT-15处理组根长最长,根毛数最多,分别是对照组的1.07和1.78倍;此外,在灭菌土中,棉花叶片中的CAT、POD、PPO、SOD、PAL活性和木质素含量均有不同程度提高,丙二醛含量下降。【结论】在灭菌土与非灭菌土中,内生菌及根际细菌对棉株具有明显促生作用,能诱导棉花体内防御酶活性的表达,降低丙二醛含量,增强棉株抗病能力。

摘要： 内生菌可为植物提供营养成分,也可以通过代谢产物促进植物生长,目前很少出现关于百香果(Passiflora edulia Sims)内生菌的研究。百香果是西番莲科西番莲属的一种草质藤本植物,主要生长于亚热带与热带地区,对其内生菌进行分离纯化,依据插入序列指纹图谱(IS-PCR)结果对所得菌株聚类,经16S rRNA基因测序并进行系统发育分析,之后对聚类得到的各类群代表菌株进行固氮酶活性、产生长素能力、溶磷能力、解钾能力、产蛋白酶能力与生理生化特性试验。共分离纯化得到51株百香果内生细菌,经聚类分为12个类群,分别属于Bacillus altitudinis、Bacillus circulans、Lysinibacillus macroides、Brevibacillus antibioticus、Paenibacillus illinoisensis、Microbacterium zeae、Rhizobium pusense、Beijerinckia fluminensis、Achromobacter mucicolens、Stenotrophomonas maltophilia、Klebsiella michiganensis和Klebsiella pneumoniae,对分离得到的内生菌进行促生特性试验,结果表明分离所得的百香果内生菌各类群代表菌株具有丰富的功能:其中10株具有分泌生长素的能力,5株具有固氮功能,6株具溶磷功能,7株具有解钾能力,3株具有分泌铁载体功能,5株具有产蛋白酶能力。本研究表明,从百香果中分离得到的内生菌不但具有种群多样性,而且具有功能多样性,这些具有不同特性的菌株有望应用在农业生产中以发挥其价值。

摘要： 利用基因测序技术对空白组(C)和经过生物预处理的2组(水预处理组,W;酵母液预处理组,Y)肉桂枝叶18个样本的内生菌进行基因测序。物种组成分析发现C组特有物种数为56个,W组为50个,而Y组达到了100个;3组样本中的变形菌门等丰度较高,总丰度占比达到了96%。对18个样本进行比较分析发现Y;和W;具有显著差异性。物种差异分析对比C组发现3组样本中厚壁菌门等为显著差异。对W、Y2组进行LEfSe多级物种差异判别分析发现W组中甲基杆菌门的丰度对差异效果影响最大;Y组中,厚壁菌门对组间差异存在最显著影响,同时其丰度对差异效果影响也是最大。

摘要： 本研究从安徽道地药材黄精中筛选出一株内生菌HJ-3,采用五点对峙培养法观察该菌株对8种植物病原真菌的拮抗作用,将HJ-3菌株的发酵产物经萃取浓缩配制成不同浓度,通过滤纸片扩散法检测其对4种供试菌的抑菌活性,并用LC-MS检测分析。结果表明:内生菌HJ-3对8种常见植物病原真菌均表现出明显的拮抗活性,其中对立枯丝核菌等7种病原真菌拮抗活性很明显,盘长孢状刺盘孢拮抗活性较弱;另外发现,不同浓度的发酵产物对4种供试菌均有一定抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌抑菌效果较好。经形态学分析及16S rRNA基因测序,将该内生菌HJ-3鉴定命名为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。LC-MS检测分析,获得一种5,5′-methylenebis(2-tert-butyl-4-methylphenol)酚类物质以及三种同系列化合物。研究结果为黄精内生菌药物开发奠定基础,也为植物内生菌药物广泛应用提供依据。

摘要： 由尖孢镰刀菌萎蔫专化型(Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum)引起的棉花枯萎病是棉花生产上最严重病害之一,而植物内生菌是生物农药重要资源。本研究采用组织研磨、涂布法分离石豆兰属植物内生菌,对峙法和琼脂柱法筛选对棉花枯萎病菌有抑制作用的菌株并进行分子鉴定;单因素试验和Box-Behnken设计优化产抑菌物质的发酵条件,电镜分析脂肽对菌丝形态影响。结果表明:筛选到13株菌对棉花枯萎病菌有抑制效果,其中BBs-27抑菌活性最高,经分子鉴定与Bacillus subtilis subsp.subtilis strain 168相似性为98.93%;优化出培养基为LB中添加2.5%蔗糖和0.01%(NH_(4))_(2)HPO_(4)、pH=5、装液量20 mL/50 mL、接种量2%、40°C、180 r/min、发酵105 h,经验证抑菌率达到88.06%。脂肽的半抑菌率浓度IC_(50)为488.93μg/L,电镜观察发现脂肽会使菌丝膨大、不规则,分化出大量分生孢子。BBs-27作为生防菌具有进一步研究开发价值。

摘要： 研究红景天内生菌Fusarium sp.HJT-P-5代谢产物。采用薄层层析色谱(TLC)、正/反相柱色谱、凝胶柱色谱、以及高效液相色谱(HPLC)等多种现代分离技术对HJT-P-5代谢产物进行分离纯化,结合理化性质和核磁共振波谱数据进行结构鉴定。从HJT-P-5乙酸乙酯萃取物中分离得到4个单体化合物,选取模式植物拟南芥对分离得到的单体化合物进行活性评价。结果表明,高浓度的4个化合物均降低拟南芥平均根长和平均鲜重,证明植物衰败凋落后,红景天内生菌代谢产物累积达到一定程度后,进而抑制其他植物的生长,从而提高自身的生态竞争能力,具备开发成除草剂的潜力。

摘要： 为了提高分离自酸橙果实中的一株内生细菌Bacillus thuringiensis Bt028产几丁质酶的性能。采用单因素实验方法考察了培养基组成和发酵条件对该菌株产几丁质酶的影响,并在此基础上采用响应面方法对该菌株产几丁质酶的摇瓶发酵条件进行了优化。单因素实验结果表明胶体几丁质浓度、培养温度和初始pH对该菌株产几丁质酶影响明显;响应面试验结果表明,当胶体几丁质浓度为0.8%、酵母粉浓度为1%、初始pH为6.9、接种量3%、装液量为100 mL/250 mL、30°C培养48 h时,该菌株产几丁质酶性能最佳,发酵液中几丁质酶酶活可达10.48 U/mL。研究结果为该菌株几丁质酶的进一步开发与应用奠定了基础。

摘要： 水稻的根、茎、叶、种子等器官存在大量对植株生长和产量、品质、抗性等有重要作用的共生和伴生微生物,其中内生菌是种子共生和伴生微生物中的一个代表类群。水稻种子中普遍存在种类丰富且结构复杂的内生菌群落,会直接或间接地影响种子的萌发、生长和群体的产量特性。从水稻种子内生细菌的多样性、水稻种子与其内生细菌分布的相关性、水稻种子内生菌的生物学功能及水稻种子内生菌的垂直传递4个方面对目前有关于水稻种子内生菌的研究进行了综述,以期为后续相关水稻种子内生菌的研究提供参考。在此基础上,对水稻内生菌研究的短板——"杂交水稻种子内生菌"研究做出论述与展望,希望能够引发读者思考。

摘要： 为揭示酸橙内生菌Bacillus thuringiensis Bt028几丁质酶的基本酶学性质,采用离心、硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶G-100层析及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法对菌株Bt028发酵液中的几丁质酶进行分离纯化鉴定,并考察该几丁质酶的最适温度、最适pH、催化动力学参数等性质。结果表明,Bt028菌株发酵液经离心、硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶G-100层析分离纯化后获得电泳纯几丁质酶比活力为681.78 U/mg,纯化倍数为3.21,回收率15.52%。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,几丁质酶的分子质量为65 kDa。酶学性质研究结果表明,该酶的最适反应温度为60°C,最适反应pH为6.5,在温度低于60°C、pH5.5~7.5时有较好的稳定性;Mg^(2+)、Ca^(2+)、Hg^(2+)、Co^(2+)对该酶活力有抑制作用,而Cu^(2+)和Fe^(3+)有一定的促进作用;低浓度的甲醇、乙醇、正丙醇和二甲亚砜使酶的活性增加,但当浓度继续增大,反而会抑制酶的活性;丙酮对几丁质酶有激活作用,而甲醛对几丁质酶有抑制作用。在最适催化条件下,几丁质酶催化反应的米氏常数Km、最大反应速率Vmax、酶的转换数Kcat分别为29.533 mg/mL、108.696μmoL/(L·min)和0.527/min。研究结果可为该酶的实际应用提供必要的工艺参数。

摘要： 茶树内生菌对茶树的所处环境以及代谢情况影响较大。目前,关于植物内生菌的研究已较为丰富,但对茶树内生菌的研究不足,文章从茶树内生菌的分离鉴定、分布及生物学作用方面阐述茶树内生菌的研究进展,为茶树内生菌的进一步深入研究提供参考,为茶树内生菌的资源开发提供了一定的理论依据。

摘要： 近年来,重金属污染尤其是铜污染给生态环境和农业生产带来一定影响,研究和治理铜污染变得尤为重要,抗铜内生菌对鸭跖草铜的富集起到重要抑制作用.本研究从污染区和非污染区的鸭跖草中分离得到了铜抗性较强菌株,其中细菌污染区3株,根、茎、叶中各1株,分别用SRW、SJW、SLW表示,非污染区茎中1株,用SJF表示;真菌污染区2株,茎、叶中各1株,分别用ZJW、ZLW表示,非污染区茎中1株,用ZJF表示.通过对菌株形态观察和16SrDNA序列比对分析,细菌SRW和SJF分属芽孢杆菌(Bacillus sp.)和纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillts fusiformis),细菌SJW和SLW暂未鉴定;真菌ZJW、ZLW和ZJF分别为马唐生防菌弯饱霉(Curvularia sp.)、多变根毛霉(Rhizomucor variabilis)和链格孢霉(Alternaria alternate).其中内生细菌抗Cu2浓度最高为2.5mmol/L,内生真菌抗Cu2+最高浓度为4.5mmol/L.根据对各内生菌促生性反应研究发现,所筛选出的内生细菌和内生真菌均能产生吲哚乙酸,且有较强的增磷能力;各菌株分泌铁载体的能力均较差.在增磷能力方面以真菌多变根毛霉(ZJW)最强,细菌纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(SJF)次之.

摘要： 内生菌与植物共生的关系出现于几亿年前,该内共生系统互惠的"协同进化",不仅使得内生菌能产生与宿主相同或相似成分,而且因为内生菌的种类组成、偏好性、定殖率不同,因而产生特有成分.为从珍惜濒危兰科药用植物竹叶兰(傣药)内生菌中筛选有效的、新颖的生物活性物质,本文采用经典的植物内生菌分离方法,从竹叶兰植物的新鲜的茎、叶片上分离纯化出TJ-1、TJ-2、TJ-3、TY-1、TY-2共5株内生菌,其中TJ-2和TJ-3为产孢真菌;通过对T J-3进行液体发酵得到的次级代谢产物进行紫外全波长扫描及薄层层析,发现该产物既含有与竹叶兰成分相同或相似的化合物,又有不同于宿主竹叶兰的化学物质.同时发酵液的乙酸乙酯、正丁醇萃取物和菌丝甲醇浸泡液有明显的抑菌活性.

摘要： 共生是构建一个或一个以上的生物体,形成新的结构和代谢.共生方式的进化中一些基因可能涉及合作伙伴间的交流.世上没有一种生物可以独自生存的.细胞化学的检测表明:在野生型的共生体中内生菌胞外物质中有ROS的积累。在胞外基质和寄主分生组织细胞壁之间，但是在noxA的突变组合体中没有这个现象。这些结果表明:真菌ROS的生成对于维持互惠的真菌一植物相互关系是至关重要的。

摘要： 本文研究了植物种子内生菌区系，新菌种的发现与鉴定方法，评价了植物促生细菌资源功能，并收集汇总了植物种子微生物生态学相关研究及研究技术进展。

摘要： 采用组织块法对喜树根和茎的内生菌进行了分离纯化,共分离得到11株内生菌。将纯化后的这些内生菌进行摇瓶和平皿静止培养,在经过过滤、冻融、研磨、萃取等一系列预处理后,采用薄层层析(TLC)对其菌丝提取物进行分析,结果显示有一株内生菌菌株(初步命名为喜根-11)的产物在层析带上的的迁移率Rf值与喜树碱(Camptothecin,CPT)标准品十分接近,初步表明该菌株可能具有产喜树碱类物质的能力。随后采用点植培养法、载片培养法和插片法等常规方法对喜根-11的菌落、菌丝体和孢子等主要形态特征进行了鉴定,初步判定喜根-11可能为核盘菌属。

摘要： 本文以南方红豆杉植株为材料,采用组织块法从中开展内生菌的分离筛选,并借助薄层层析利HPLC列内生菌的发酵产物进行分析,最终获得一株具有产紫杉醇能力的内生菌.根据菌株形态学观察以及18S rRNA序列分析,结果表明该菌株为间座壳属(Diaporthe sp.),初步命名为Diaporthe sp.H-3.值得注意的是,间座壳属内生菌产紫杉醇尚属首次报道.

摘要： 分离纯化马铃薯组织培养过程中的几种内生菌,采用滤纸片法和双倍试管稀释法测定几种抗生素:头孢替唑钠(Ceftezole sodium)、头孢霉素(Cephalosporin)、阿奇霉素(Azithromycin)、羧苄青霉素(Carbenicillin)、硫酸链霉素(Streptomycin sulfate)对它们的最小抑菌浓度(MIC),几种抗生素都有抑茵效果,头孢霉素对C15的抑茵效果最好,羧苄青霉素对23号菌的抑菌效果最好,头孢替唑钠对17号菌的抑菌效果最好。

摘要： 目的：了解白英、巴天酸模、葎草、泽漆、商陆、野老鹳草6种植物不同采集地点不同器官中内生细菌的群落分布及其规律.方法：分别提取植物根和叶的总DNA,应用PCR-DGGE技术对6种植物3处地点的根叶共36个样本的细菌群落进行研究,根据DGGE图谱,对它们的菌落多样性进行分析.结果：不同植物的内生细菌群落在种类和含量上均有差异;同种植物不同器官的内生细菌在种类上无明显差异,含量上有差异;不同地点的植物内生菌相似性较高,差别不明显.结论：生长环境以及植物不同部位对于内生菌群落分布具有一定的影响.

摘要： 小麦赤霉病是为害我国乃至世界小麦生产安全的主要病害之一.该病害主要为害穗部,降低产量,严重时甚至颗粒无收;赤霉菌产生的毒素存留在籽粒中,影响食品安全(Goswami et al.,2003).迄今,我国有记载的小麦赤霉病曾有3次大的流行,2003年、2010年和2012年.近年来,在我国有逐渐加重的趋势.

摘要： 小麦赤霉病是为害我国乃至世界小麦生产安全的主要病害之一.该病害主要为害穗部,降低产量,严重时甚至颗粒无收;赤霉菌产生的毒素存留在籽粒中,影响食品安全(Goswami et al.,2003).迄今,我国有记载的小麦赤霉病曾有3次大的流行,2003年、2010年和2012年.近年来,在我国有逐渐加重的趋势.

摘要： 本发明公开了一种具有杀虫活性物质的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)CGMCC No.3026及其在生物防治的应用。通过在醉马草根中分离、筛选和培养，获得荧光假单胞菌的最适杀虫pH为7-8，在pH 7.2-7.4范围内可保持较高的杀虫活性，在20-37°C范围内均有杀虫活性。本发明菌株广泛应用在防治蚜虫害的生物防治领域。

摘要： 本发明公开了一株牛蒡内生细菌WY035、含有该内生细菌的牛蒡专用微生物菌剂及应用，该菌株的分类命名为Bacillus siamensis WY035，属于暹罗芽孢杆菌，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏日期为2017年11月8日，保藏编号为GDMCC 60275，该牛蒡专用微生物菌剂包括作为有效成分的上述牛蒡内生细菌WY035；所述牛蒡内生细菌WY035和牛蒡专用微生物菌剂可用于促进牛蒡种子萌发与育苗、幼苗生长中。本发明提供的牛蒡内生细菌暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)WY035能够产生铁载体、植物生长激素吲哚乙酸、氨，分泌纤维素酶与蛋白酶，并具有广谱抑菌活性，能够显著促进牛蒡幼苗的生长。

摘要： 本发明公开了一种大豆根瘤内生菌及其应用，生防菌剂及生物促生菌剂，属于作物栽培种植及作物病害生物防治技术领域。本发明中大豆根瘤内生菌为粘质沙雷氏菌(Serratia sp.)DSer1305(保藏编号：CCTCC NO:M 2013624)，是从大豆根瘤样品中分离出的一株内生细菌，为革兰氏阳性菌；菌体呈短杆状，无芽孢，菌落呈乳白色，边缘圆整、突起有光泽，表面有皱褶；该菌能产生铁载体和果胶酶，抗小麦赤霉病菌并促进小麦发芽及幼苗生长，可用于制备生防菌剂和生物促生菌剂。

摘要： 本发明公开了一株牛蒡内生链霉菌、含有该内生菌的微生物菌剂及应用，该菌株的分类命名为Streptomyces sp.WY228，属于链霉菌属，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC 60274，该微生物菌剂包括作为有效成分的上述牛蒡内生链霉菌WY228；所述牛蒡内生链霉菌WY228和微生物菌剂可用于促进牛蒡、番茄幼苗生长中。本发明提供的牛蒡内生链霉菌Streptomyces sp.WY228具有固氮潜在性，且具有多种促生长特征，其菌剂对牛蒡、番茄幼苗具有较好的促生能力，在农作物幼苗种植上具有较好应用潜力。

摘要： 本发明公开了一种烟草普通花叶病毒生防内生菌粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)菌株，菌株代号为L1，该菌株于2014年10月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.9758。该菌株能够抑制烟草普通花叶病毒(Tobacco mosaic virus)的侵染，生防实验表明能够防治烟草普通花叶病毒。同时本发明还同时提取该菌株胞内对烟草普通花叶病毒有防治作用的蛋白粗提液，在烟草普通花叶病毒防治方面，具有很高的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种大豆根瘤内生菌及其应用，生防菌剂及生物促生菌剂，属于作物栽培种植及作物病害生物防治技术领域。本发明中大豆根瘤内生菌为粘质沙雷氏菌(Serratia？sp.)DSer1305(保藏编号：CCTCC？NO:M？2013624)，是从大豆根瘤样品中分离出的一株内生细菌，为革兰氏阳性菌；菌体呈短杆状，无芽孢，菌落呈乳白色，边缘圆整、突起有光泽，表面有皱褶；该菌能产生铁载体和果胶酶，抗小麦赤霉病菌并促进小麦发芽及幼苗生长，可用于制备生防菌剂和生物促生菌剂。

摘要： 本发明公开了一株牛蒡内生链霉菌、含有该内生菌的微生物菌剂及应用，该菌株的分类命名为Streptomyces sp.WY228，属于链霉菌属，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC 60274，该微生物菌剂包括作为有效成分的上述牛蒡内生链霉菌WY228；所述牛蒡内生链霉菌WY228和微生物菌剂可用于促进牛蒡、番茄幼苗生长中。本发明提供的牛蒡内生链霉菌Streptomyces sp.WY228具有固氮潜在性，且具有多种促生长特征，其菌剂对牛蒡、番茄幼苗具有较好的促生能力，在农作物幼苗种植上具有较好应用潜力。

摘要： 本发明涉及一种混合内生菌，特别是从植物中分离的内生菌。本发明还涉及内生菌的用途。本发明提供的该种混合内生菌是从植物千层塔中分离得到的。本发明还提供了一种由上述获得的内生菌制备石杉碱甲的方法。本发明首次公开了从千层塔植物中分离培养出内生菌，并且发现该混合内生菌经过培养发酵后，在发酵液和菌丝体中都可以提取得到石杉碱甲化合物。为该化合物的制备找到了一条简捷，成本低廉，不需要破坏珍稀植物的途径。

摘要： 本发明公开了一种玉米种子内生菌B.sediminisYB‑1574、生防菌剂及其制备与应用，旨在解决当前小麦茎基腐病和玉米茎腐病缺乏有效的生物防治措施的技术问题。本发明从玉米种子中分离筛选得到B.sediminisYB‑1574，保藏编号为CGMCC No.24704，该菌株能够诱导玉米和小麦植株的系统抗病性，对玉米茎腐病和小麦茎基腐病有较好的防治效果，同时能提高作物的籽粒产量及品质；利用本发明菌株制备的生防菌剂可以替代或减少化学农药使用，提高食品和生态环境安全，具有显著的经济和社会效益。

摘要： 本发明公开了一种烟草普通花叶病毒生防内生菌粪产碱菌(Alcaligenes？faecalis)菌株，菌株代号为L1，该菌株于2014年10月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC？No.9758。该菌株能够抑制烟草普通花叶病毒(Tobacco？mosaic？virus)的侵染，生防实验表明能够防治烟草普通花叶病毒。同时本发明还同时提取该菌株胞内对烟草普通花叶病毒有防治作用的蛋白粗提液，在烟草普通花叶病毒防治方面，具有很高的应用价值。