钙黏蛋白

摘要： 杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins,ICPs;含有Cry和Cyt 2大家族)和营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal proteins,Vips)等Bt杀虫蛋白可有效防治鳞翅目害虫,其中Cry应用最广泛。然而,一些地区的鳞翅目害虫已对Bt杀虫蛋白产生了抗性。目前,普遍认为鳞翅目昆虫中肠受体与Bt杀虫蛋白结合能力的改变是导致其对Bt杀虫蛋白产生抗性的最主要因素。在鳞翅目昆虫中,Cry受体是研究得最为透彻的Bt受体,已经被证实的有氨肽酶N、钙黏蛋白、碱性磷酸酶和ABC转运蛋白等。Vips杀虫蛋白类与鳞翅目昆虫中肠受体的结合方式与Cry杀虫蛋白相似,但结合位点与Cry杀虫蛋白不同。本文从结构特点、作用机制及不同鳞翅目昆虫间的表达差异等角度对以上4种鳞翅目昆虫中肠Bt受体进行了综述,并提出如下展望:(1)以棉铃虫或小菜蛾等鳞翅目昆虫为农业害虫模式生物进行深入研究,阐明其对Bt杀虫蛋白产生抗性的机制,为研究其他鳞翅目农业害虫对Bt杀虫蛋白产生抗性的机制提供理论借鉴;(2)鉴于在不同鳞翅目昆虫间,中肠Bt受体与Bt杀虫蛋白结合存在差异,且同一Bt杀虫蛋白与鳞翅目昆虫Bt受体并不专一性结合,Bt杀虫蛋白多基因组合策略是较为有效的田间鳞翅目昆虫防治策略,是今后一段时间内Bt杀虫蛋白应用的发展方向。

摘要： 钙黏蛋白作为介导细胞间黏附连接的钙依赖性黏附分子,与肿瘤的分化、细胞黏附、凋亡、血管生成、侵袭和转移等方面密切相关。近年来研究发现,钙黏蛋白与糖尿病患者的胰岛功能维持及糖尿病视网膜病变的发生有密不可分的关系,可能是糖尿病微血管病变的预警因子。本文对钙黏蛋白的分子结构、生物学功能及其与胰岛功能维持、糖尿病视网膜病变之间的关系的研究进展进行综述。

摘要： 由于细胞隧道纳米管(tunneling nanotube,TNT)生成的分子机制的多样性,目前尚未发现靶向TNT的低毒、广谱药物。本研究使用细胞松弛素D(cytochalasin D,cytoD)、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)、甲基β环糊精(Mbc)分别破坏HEK293细胞间TNT结构的微丝、N型钙黏蛋白和胆固醇,来研究TNT结构组分对其形成和维持的影响。结果表明,破坏F-actin对TNT的生成频率的抑制作用最为明显,而对已存在的TNT的生存时间影响较小,钙黏蛋白是影响TNT的生存时间的关键分子,而胆固醇的水平对TNT的生成频率和生存时间的作用均有一定影响。本研究表明,通过干预TNT的结构组分控制TNT数量,有望成为筛选靶向TNT的药物的新方向。

摘要： 目的探讨E-钙黏蛋白(E-CAD)、细胞角蛋白7(CK7)和胎盘特异性蛋白8(PLAC8)在不明原因稽留流产绒毛组织中的表达及其可能的意义。方法选取早孕期不明原因稽留流产病人20例(稽留流产组)、非计划妊娠行人工流产的正常早孕女性20例(正常妊娠组)作为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测绒毛组织中E-CAD、CK7及PLAC8的mRNA表达,Western Blot及免疫组织化学方法检测绒毛组织中E-CAD、CK7及PLAC8的蛋白表达。结果稽留流产组绒毛组织中E-CAD、CK7的mRNA和蛋白表达均明显高于正常妊娠组(t=3.995~12.200,P0.05)。E-CAD以及CK7的阳性染色主要定位于滋养层细胞的细胞膜,PLAC8的阳性染色主要定位于合体滋养层细胞的细胞核,稽留流产组绒毛组织中E-CAD、CK7的平均光密度值(AOD)明显高于正常妊娠组(t=3.823、3.889,P0.05)。结论绒毛组织E-CAD、CK7表达升高可能与不明原因稽留流产的发生有关。

摘要： 目的研究神经母细胞瘤中E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达在肿瘤转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的上皮-间质转化(EMT)中的作用。方法体外采用TGF-β1(1μg/L、5μg/L、10μg/L)处理人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,与空白对照组比较,采用荧光定量PCR及Western blot法检测EMT相关基因及蛋白表达。采用迁移实验及划痕实验检测肿瘤细胞迁移能力的改变。选取2008年1月至2012年12月上海交通大学附属儿童医院血液肿瘤科收治的神经母细胞瘤患儿18例。收集患儿术后肿瘤组织,采用免疫组织化学法检测E-cadherin的表达情况,并与患儿临床特点及生存预后行相关性分析。结果与空白对照组相比,SK-N-SH细胞经TGF-β1(1μg/L、5μg/L、10μg/L)处理后,实时荧光定量PCR及Western blot均提示上皮细胞标志E-cadherin的mRNA(0.603±0.081、0.606±0.008、0.716±0.166比1.000)及蛋白(0.855±0.026、0.600±0.017、0.495±0.011比1.000)表达量明显下降(F=8.144,P=0.035;F=74.810,P<0.001),间质细胞标志α-平滑肌肌动蛋白的mRNA(2.132±0.167、3.494±0.017、4.184±0.021比1.000)及蛋白(1.175±0.053、1.189±0.058、1.225±0.106比1.000)的表达量明显上升(F=547.300,P<0.001;F=68.810,P=0.007),提示发生EMT。划痕实验及Transwell迁移实验均发现随着TGF-β1处理后(5μg/L),迁移细胞数明显增多(t=16.070,P=0.040)。神经母细胞瘤患儿组织病理中E-cadherin强阳性、阳性、弱阳性及阴性表达的10年总体生存(OS)率分别为(77.78±13.86)%、(75.00±21.66)%、(25.00±21.65)%及0,差异有统计学意义(F=8.160,P=0.040)。结论TGF-β1可诱导神经母细胞瘤SK-N-SH细胞发生EMT,并使细胞迁移能力增强。神经母细胞瘤患儿E-cadherin表达降低与疾病临床进展及复发/转移明显相关。

摘要： 目的 研究Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)基因对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响.方法 该研究于2017年9月至2018年12月完成,实时定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测COL1A1在鼻咽癌(C666-1、CNE1、CNE2)细胞系中的表达量;CNE1细胞分m为对照组、阴性对照(si-NC组)、敲低COL1A1(si-COL1A1)组,通过Lipofectamine 2000将siRNA COL1A1质粒转染至鼻咽癌CNE1细胞中,对照组细胞正常培养,si-NC组细胞转染阴性对照;qPCR和Western blotting检测转染效果,噻唑蓝(MTT)、Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭、迁移;Western blotting检测钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白N(N-cadherin)水平.结果 COL1A1 mRNA[(3.565±0.341)(4.253±0.410)(3.968±0.378)]和蛋白表达量[(2.214±0.216)(3.152±0.305)(2.519±0.221)]在鼻咽癌(C666-1、CNE1、CNE2)细胞系中表达量增加(P<0.05);CNE1细胞转染siRNA COL1A1质粒能显著下调COL1A1 mRNA(0.352±0.045)和蛋白表达量(0.245±0.232)(P<0.05);敲低COL1A1的表达量抑制CNE1细胞增殖(0.536±0.059)(0.665±0.067)(0.893±0.081)(P<0.05),降低其侵袭(52.895±5.635)、迁移(113.254±13.279)能力(P<0.05),上调E-cadherin蛋白水平(2.152±0.223)(P<0.05),下调Vimentin(0.362±0.045)、N-cadherin(0.423±0.043)蛋白水平(P<0.05).结论 COL1A1可能通过抑制上皮细胞间充质化(EMT)促进鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移.

摘要： 钙黏蛋白中的多个成员与食管鳞癌的侵袭转移有关,其中上皮钙黏素通过Wnt/β联蛋白等通路影响食管鳞癌的进展和预后;免疫球蛋白超家族成员对食管鳞癌细胞的生长转移有显著影响,可作为预后指标和治疗靶点;整合素家族的α5、α6、α7、α11、β1等在食管鳞癌细胞中的表达明显上调,可作为侵袭指标;选择素主要参与食管鳞癌细胞的血行转移;其他细胞黏附分子,如CD44、闭合蛋白、上皮细胞黏附分子也可影响食管鳞癌的侵袭转移.深入研究黏附分子与食管鳞癌的关系对食管鳞癌的早期诊断、预后和治疗靶点的选择有重要意义.

摘要： 目的 研究神经母细胞瘤中E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达在肿瘤转化生长因子-β31(TGF-β1)诱导的上皮-间质转化(EMT)中的作用.方法 体外采用TGF-β1(1μg/L、5μg/L、10 μg/L)处理人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,与空白对照组比较,采用荧光定量PCR及Western blot法检测EMT相关基因及蛋白表达.采用迁移实验及划痕实验检测肿瘤细胞迁移能力的改变.选取2008年1月至2012年12月上海交通大学附属儿童医院血液肿瘤科收治的神经母细胞瘤患儿18例.收集患儿术后肿瘤组织,采用免疫组织化学法检测E-cadherin的表达情况,并与患儿临床特点及生存预后行相关性分析.结果 与空白对照组相比,SK-N-SH细胞经TGF-β1(1μg/L、5μg/L、10 μg/L)处理后,实时荧光定量PCR及Western blot均提示上皮细胞标志E-cad-herin的mRNA(0.603±0.081、0.606±0.008、0.716±0.166比1.000)及蛋白(0.855±0.026、0.600±0.017、0.495±0.011比1.000)表达量明显下降(F=8.144,P=0.035;F =74.810,P＜0.001),间质细胞标志α-平滑肌肌动蛋白的mRNA(2.132±0.167、3.494±0.017、4.184±0.021比1.000)及蛋白(1.175±0.053、1.189±0.058、1.225±0.106比1.000)的表达量明显上升(F=547.300,P＜0.001;F =68.810,P=0.007),提示发生EMT.划痕实验及Transwell迁移实验均发现随着TGF-β1处理后(5μg/L),迁移细胞数明显增多(t=16.070,P =0.040).神经母细胞瘤患儿组织病理中E-cadherin强阳性、阳性、弱阳性及阴性表达的10年总体生存(OS)率分别为(77.78±13.86)％、(75.00±21.66)％、(25.00±21.65)％及0,差异有统计学意义(F=8.160,P =0.040).结论 TGF-β1可诱导神经母细胞瘤SK-N-SH细胞发生EMT,并使细胞迁移能力增强.神经母细胞瘤患儿E-cadherin表达降低与疾病临床进展及复发/转移明显相关.

摘要： 目的:分析食管癌组织中miR-503和钙黏蛋白(E-cadherin)的表达情况,探讨miR-503、E-cadherin与食管癌患者预后的关系.方法:选取2013-09-2015-03宝鸡市中心医院胸外科接受外科手术治疗的119例食管癌患者,术中收集相应的食管癌组织和癌旁正常组织.采用实时荧光定量PCR法检测组织中miR-503的相对表达量;采用免疫组化法检测食管癌组织中E-cadherin表达水平;采用Pearson法分析食管癌组织中miR-503表达水平与E-cadherin表达积分的相关性;对所有患者术后进行随访,采用Kaplan-Meier法分析食管癌组织中miR-503和E-cadherin表达与患者5年累积生存率的关系.结果:与癌旁正常组织比较,食管癌组织中miR-503相对表达量显著上升,E-cadherin阳性表达率、表达积分显著降低(P＜0.05).与浸润深度T1+T2、TNM分期Ⅰ+Ⅱ、高分化、无淋巴结转移患者比较,浸润深度T3+T4、TNM分期Ⅲ+Ⅳ、中和低分化、有淋巴结转移的患者miR-503相对表达量显著上升,而E-cadherin表达积分显著降低(P＜0.05).食管癌组织中miR-503表达水平与E-cadherin表达积分呈负相关(r=--0.517,P＜0.05).食管癌组织中miR-503高表达者5年累积生存率低于miR-503低表达者(42.31％ vs 65.85％,x2=4.962,P＜0.01),E-cadherin高表达者5年累积生存率高于E-cadherin低表达者的(79.59％ vs 30.00％,x2=25.803,P＜0.01).结论:miR-503在食管癌组织中呈高表达,E-cadherin呈低表达,二者与食管癌的发生及患者预后密切相关.

摘要： 目的 分析急性前循环大血管闭塞性脑卒中患者单核因子趋化蛋白(MCP)、钙黏蛋白(VEcadherin)及炎性因子的表达及临床意义.方法 我院收治的153例急性前循环大血管闭塞性脑卒中患者(梗死组),根据患者临床症状分为进展性脑梗死61例和非进展性脑梗死92例,根据患者病灶可分为完全前循环梗死43例和不完全前循环梗死110例,根据神经功能损伤程度分为轻度61例、中度54例、重度38例.另选取同期健康体检者65例作为健康组.检测不同人群中MCP、VEc-adherin及炎性因子的表达情况,以及不同情况下梗死组中MCP、VEcadherin及炎性因子的表达情况.结果 MCP、VEcadher-in、IL-6、TNF-ɑ、hs-CRP水平比较,梗死组高于健康组,进展性脑梗死组高于非进展性脑梗死组,完全前循环脑梗死组高于不完全前循环梗死组(P<0.05);不同程度神经损伤患者之间MCP、VEcadherin、IL-6、TNF-ɑ、hs-CRP水平有差异,重度神经损伤患者表达水平高于轻度和中度组(P<0.05).结论 急性前循环大血管闭塞性脑卒中患者MCP、VEcadherin及炎性因子的表达明显升高,其表达水平变化可为患者病情、临床治疗以及预后情况评估提供参考.

摘要： 目的：观察益气活血中药人参三七川芎提取物对复制性衰老人心脏微血管内皮细胞(human cardiac microvascular endothelial cells,HCMEC)血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)的影响.rn 方法：通过细胞体外传代,结合β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)衰老染色鉴定、CCK-8检测细胞增殖能力、流式细胞仪分析细胞周期等建立复制性衰老HCMEC模型.实验分组为8代复制性衰老模型组(衰老组)、白藜芦醇组(10μmol/L)、中药低剂量组(50mg/L)、中药中剂量组(100mg/L)、中药高剂量组(200mg/L),药物干预24h.运用激光免疫共聚焦显微镜观察VE-cadherin的形态学改变,western blot检测VE-cadherin蛋白的表达情况.rn 结果：人参三七川芎提取物减少了SA-β-gal衰老染色比例，促进细胞的增殖，减少G0/G1期细胞比例，增加G2/M期细胞比例，保持VE-cadherin形态的完整性，促进VE-cadherin蛋白的表达。rn 结论：人参三七川芎提取物能够维持复制性衰老HCMECVE-cadherin的正常形态和蛋白的表达，这可能是益气活血中药延缓内皮衰老的作用机制所在。

摘要： Bt是一种重要的微生物杀虫剂,其杀虫作用主要来自晶体蛋白.随着Bt杀虫作用机理的深入研究,新的昆虫Bt蛋白受体不断被发现.这些受体起到非常重要的作用,受体与Bt毒素作用的变化可能是昆虫对Bt产生抗性的主要原因.本文从受体类钙黏蛋白在昆虫组织的分布、结构、与毒素的结合情况以及表达类钙黏蛋白的细胞系与Bt毒素作用情况等方面综述了近期的研究进展。

摘要： 种植转Bt基因作物是目前世界范围内控制农业害虫最有效的方式之一.红铃虫(Pectinophora gossypiella)是一种十分重要的棉花害虫,也是转Bt棉花的靶标害虫.转Bt棉花种植以前,防治红铃虫主要依靠化学农药,但其钻蛀习性严重影响了农药的使用效果,致使红铃虫常年为害成灾,严重影响了棉花生产.转Bt棉花种植之后,有效地控制了红铃虫及棉铃虫等鳞翅类害虫.然而,由于红铃虫在棉田对棉花寄主的专一性,使其面临着持续的选择压力,相比于其他害虫,其抗性演化速率可能更快.目前,美国与中国长江流域分别在室内与田间条件下筛选获得了多个红铃虫Cry1Ac高抗品系,印度甚至发现红铃虫对转Cry1Ac棉演化了实质抗性;这些都充分说明红铃虫不仅具有对Bt棉花产生抗性的潜力,其抗性问题还严重威胁着Bt棉的持续使用.因此,了解红铃虫对Bt的抗性机制,有助于制定合理的抗性管理策略.

摘要： 目的:本研究主要关注B16F10-E21活瘤苗免疫对防治小鼠肺部黑色素瘤转移的效果,并对其抑制肿瘤侵袭转移的分子机制进行初步探讨.方法:B16F10-E21瘤苗免疫小鼠后,经尾静脉注射野生型B16F10细胞,观察肺转移情况;应用体内诱导特异性CD8+T细胞增殖试验和CFSE/7-AAD细胞毒实验分析瘤苗免疫鼠CTL增殖活性和细胞毒活性;以ELISA检测免疫鼠血清IFN-γ表达水平;采用RT-PCR方法检测肿瘤组织中TGF-β2、ZEB1等基因表达情况;利用免疫荧光方法检测肿瘤组织E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白的表达情况.结论:B16F10-E21瘤苗免疫能够促进CD8+T细胞活化,免疫小鼠分泌IFN-γ的能力增强,血清IFN-γ浓度明显升高而产生拮抗TGF-β作用,激活黑色素瘤细胞MET.与对照组相比,瘤苗免疫小鼠黑色素瘤组织中E-钙黏蛋白表达增加,N-钙黏蛋白表达下降,这一综合效应可抑制黑色素瘤细胞EMT,因而能有效抑制黑色素瘤的肺转移.

摘要： 文章首先阐述了 E-Cad, N-Cad及P-Cad的结构特点、生物学功能及致癌机制。其次，介绍了Cad在三阴乳腺癌组织中的表达及临床意义。最后，对以上研究内容作了总结。

摘要： 本发明涉及CDH1基因pre-mRNA选择性剪接检测试剂盒及其用途。试剂盒的主要成分包括：（1）CDH1基因cDNAPCR扩增引物7对；（2）RT-PCR试剂；（3）PCR扩增用试剂。通过本试剂盒得到的PCR扩增产物，可通过琼脂糖凝胶电泳结合DNA序列分析检测mRNA表达。本试剂盒具有高效的cDNA检出作用。用于CDH1基因pre-mRNA选择性剪接检测。

摘要： 本发明的目的是为克服现有大豆蛋白质胶黏剂存在的低胶合强度、耐水性差的缺点，提供一种高强度防水大豆蛋白质-碳酸钙纳米胶黏剂及其制备方法和应用。该制备方法工艺简便，生产成本低，无污染，适于工业化生产。该胶黏剂可于粘合木、竹、藤、秸秆以及纸张等纤维材料，而且施用方便，粘合性能好。本发明的大豆蛋白质-碳酸钙纳米胶黏剂，包括以下重量份的成份：(1)大豆蛋白质基体：干重80-95份；(2)以纳米尺寸分散于(1)中的无机碳酸钙颗粒：1-15份。

摘要： 本发明涉及CDH1基因突变检测试剂盒及其用途。试剂盒的主要成分包括：（1）CDH1基因PCR扩增与测序引物19对；（2）PCR扩增用试剂。通过本试剂盒得到的PCR扩增产物，可通过高分辨率溶解曲线法筛查基因微小突变，或者是进行限制性片段长度多态性分析。本试剂盒具有高效的突变检出与功能评估作用。用于CDH1基因突变检测。

摘要： 本发明公开了一种角蛋白和磷酸钙低聚物增强大豆胶黏剂及其制备方法，胶黏剂包括以下原料制备而成：主剂、分散介质水、增强剂、环氧类交联剂和填料，所述主剂为大豆蛋白粉，所述增强剂为角蛋白粉，所述填料为磷酸钙。本发明中角蛋白上的巯基与大豆蛋白分子的巯基交叉聚合形成新的二硫键共价交联网络，磷酸钙填料的磷酸根离子与大豆蛋白上的氨基反应，钙离子与羧基反应，融合到交联结构中形成矿化结构，通过应力传导和分散进一步提高胶黏剂耐水胶接性能，制备得到的胶黏剂交联密度高、耐水胶接性能好、流动性好，能够满足胶合板胶黏剂的耐水与施胶工艺要求，且成本低，可以推广与应用。

摘要： 本发明涉及

摘要： 本发明涉及CDH1基因突变检测试剂盒及其用途。试剂盒的主要成分包括：(1)CDH1基因PCR扩增与测序引物19对；(2)PCR扩增用试剂。通过本试剂盒得到的PCR扩增产物，可通过高分辨率溶解曲线法筛查基因微小突变，或者是进行限制性片段长度多态性分析。本试剂盒具有高效的突变检出与功能评估作用。用于CDH1基因突变检测。

摘要： 本发明涉及分子生物学及免疫学技术领域，尤其涉及血管内皮钙黏蛋白抗原表位、抗体及其应用。本发明提供了血管内皮钙黏蛋白抗原表位、抗体及其应用。该抗原表位氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，位于CDH5蛋白的N端，具有更高的保守性。本发明提供的表位是中和性表位，能够特异性的识别肿瘤血管并抑制其生成。本发明通过试验证实，该表位能够特异性识别肿瘤血管中的血管内皮钙黏蛋白，从而起到抑制肿瘤血管生成的作用。

摘要： 本发明公开了昆虫钙黏蛋白含量酶联免疫定量检测试剂盒及其使用方法，属于生物技术领域。本发明通过原核表达获得钙黏蛋白重组蛋白，将重组蛋白免疫小鼠，并通过筛选得到特异性的单克隆抗体，将钙黏蛋白重组蛋白免疫兔，得到特异性的多克隆抗体，最终开发出定量检测钙黏蛋白含量的酶联免疫定量检测试剂盒，通过检测钙黏蛋白含量来确定昆虫对Bt蛋白的抗性。该试剂盒可准确、可靠地进行钙黏蛋白的定量检测，并通过对钙黏蛋白的含量检测，来判断昆虫对Bt蛋白的抗性强弱。该试剂盒检测方便、快捷、稳定性好。

摘要： 基于亚硫酸氢盐测序法的钙黏蛋白甲基化检测方法，包括：步骤1，选用6‑7周龄大鼠，收集处死后大鼠的肾脏，剪除结缔组织，取肾皮质剪碎成50‑100mg组织小块，采用液氮速冻并保存于‑80°C冰箱中；步骤2，采用基因组DNA提取试剂盒提取基因组DNA；步骤3，用核酸定量仪测量基因组DNA的浓度和纯度，通过0.5％‑1.0％的琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA完整性，并将检测合格的DNA样本置于‑20°C至‑80°C的冰箱备用；步骤4，采用甲基化转化试剂盒修饰基因组DNA，用核酸定量仪确定修饰好的基因组DNA浓度；步骤5，在多种不同的实验条件下进行PCR扩增；步骤6，从步骤5中选定后续步骤所用的样本。本发明提高了钙黏蛋白甲基化实验的成功率。

摘要： 本发明涉及分子生物学及免疫学技术领域，尤其涉及血管内皮钙黏蛋白抗原表位、抗体及其应用。本发明提供了血管内皮钙黏蛋白抗原表位、抗体及其应用。该抗原表位氨基酸序列如SEQ？ID？NO:1所示，位于CDH5蛋白的N端，具有更高的保守性。本发明提供的表位是中和性表位，能够特异性的识别肿瘤血管并抑制其生成。本发明通过试验证实，该表位能够特异性识别肿瘤血管中的血管内皮钙黏蛋白，从而起到抑制肿瘤血管生成的作用。