敲低Ⅰ型胶原α1链基因抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

摘要

目的 研究Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)基因对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响.方法 该研究于2017年9月至2018年12月完成,实时定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测COL1A1在鼻咽癌(C666-1、CNE1、CNE2)细胞系中的表达量;CNE1细胞分m为对照组、阴性对照(si-NC组)、敲低COL1A1(si-COL1A1)组,通过Lipofectamine 2000将siRNA COL1A1质粒转染至鼻咽癌CNE1细胞中,对照组细胞正常培养,si-NC组细胞转染阴性对照;qPCR和Western blotting检测转染效果,噻唑蓝(MTT)、Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭、迁移;Western blotting检测钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白N(N-cadherin)水平.结果 COL1A1 mRNA[(3.565±0.341)(4.253±0.410)(3.968±0.378)]和蛋白表达量[(2.214±0.216)(3.152±0.305)(2.519±0.221)]在鼻咽癌(C666-1、CNE1、CNE2)细胞系中表达量增加(P<0.05);CNE1细胞转染siRNA COL1A1质粒能显著下调COL1A1 mRNA(0.352±0.045)和蛋白表达量(0.245±0.232)(P<0.05);敲低COL1A1的表达量抑制CNE1细胞增殖(0.536±0.059)(0.665±0.067)(0.893±0.081)(P<0.05),降低其侵袭(52.895±5.635)、迁移(113.254±13.279)能力(P<0.05),上调E-cadherin蛋白水平(2.152±0.223)(P<0.05),下调Vimentin(0.362±0.045)、N-cadherin(0.423±0.043)蛋白水平(P<0.05).结论 COL1A1可能通过抑制上皮细胞间充质化(EMT)促进鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移.