肝素酶

摘要： 本文总结和探讨肝素酶的结构与功能的关系及其在低分子肝素生产中的应用.通过对相关的研究性文献进行归纳与总结,对肝素黄杆菌Pedobacter heparinus的三种肝素酶的分子结构、底物识别、催化机制、分子结构改造及其应用进展等进行了综述,并展望肝素酶未来研究的发展方向.肝素酶的结构和功能有着紧密的关系.基于结构和功能关系的肝素酶分子改造,在未来生产肝素,尤其是低分子量肝素等医药领域有着重要的价值.

摘要： 目的:探索不同来源的肝素酶Ⅰ对依诺肝素钠降解特性的差异,以及依诺肝素钠精细结构表征,为此类药物的质量控制提供理论依据.方法:考察3种肝素酶Ⅰ在不同条件下对依诺肝素钠的降解特点,并利用离子交换色谱法纯化降解产物,之后进行质谱和核磁共振分析,获得结构信息,从而阐述降解产物组成和降解效率的差异.结果:不同来源的肝素酶Ⅰ对依诺肝素钠的降解效果不同.大肠杆菌表达体系的融合蛋白肝素酶Ⅰ的降解效率要高于来源于肝素黄杆菌的原生肝素酶Ⅰ,而大肠杆菌表达体系的重组肝素酶Ⅰ效率最低.经离子交换纯化获得数个寡糖,通过结构确认的1个寡糖组分(△UA2S-GlcNS6S-IdoA2S-GlcNS6S)在第1和第2种酶的降解产物中没有发现,而在第3种酶的降解产物中始终存在.结论:本文比较了3种不同来源肝素酶Ⅰ降解依诺肝素钠过程中的细微差异,为以肝素酶降解为基础的依诺肝素钠结构研究和质量控制提供了有效支持.

摘要： 目的 探索肝癌肝素酶(HPSE)对微血管内皮细胞(MVECs)凋亡及跨细胞迁移的影响.方法 用qRT-PCR和Western blot法从HepG2,BEL-7402和HCCLM3三种肝癌细胞中筛选高表达HPSE的肝癌细胞;构建含有HPSE之RNA干扰序列的慢病毒载体(LV-HPSE-RNAi-1249-2,RNAi组),用含有阴性对照序列的慢病毒载体(LV-HPSE-Control,Control组)作为对照,分别感染肝癌细胞,并验证感染效率.用人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)代表肝癌MVECs,用Transwell小室行肝癌细胞跨内皮迁移试验;肝癌细胞和HUVECs细胞非接触共培养24 h,应用CCK-8法检测内皮细胞存活率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡情况,电镜观察细胞形态.肝癌细胞腹腔注射法制作裸鼠肝癌模型,观察肝癌MVECs凋亡及癌细胞跨内皮成瘤情况.结果 从3种肝癌细胞中筛选出高表达HPSE的HCCLM3肝癌细胞.慢病毒载体分别感染HCCLM3细胞72 h后,荧光显微镜显示细胞感染效率达到70％以上,qRT-PCR和Western blot法检测RNAi组肝素酶mRNA和蛋白表达下降(P.＜0.05).RNAi组肝癌细胞跨内皮迁移率为0.39,显著低于Control组的0.62(P＜0.01).HCCLM3细胞与HUVECs非接触共培养,RNAi组内皮细胞成活率为1.14,显著高于Control组的0.77(P＜0.05);RNAi组凋亡指数3.94±1.51明显低于Control组(12.53±0.55)(P＜0.05).透射电镜示RNAi组细胞形态大致正常;Control组内皮细胞体积变小、变形,胞膜有发泡现象;染色质浓缩、边缘化,部分分割成块状,并见凋亡小体.实验裸鼠全部成活,Control组6只肝组织中均出现GFP标记的肿瘤细胞,镜下成瘤率100％(6/6),显著高于RNAi组成瘤率(33.3％,2/6) (P＜0.05).光镜下Control组肝组织内可见肝癌细胞,部分血管内皮细胞坏死,胞浆可见空泡,核质浓缩;RNAi组肝组织内罕见肝癌细胞,内皮细胞基本正常.结论 肝癌肝素酶可能通过诱导血管内皮细胞凋亡而促进癌细胞转移.

摘要： 肝素的结构通常以不同的二糖单位表示,了解肝素二糖的组成有助于从微观结构上解析肝素的作用机理.采用肝素酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ混合,在合适的温度及缓冲液条件下,共同酶解肝素溶液,肝素酶解后得到的二糖及寡糖由于其磺酸化程度的不同因而在阴离子交换柱上保留的程度不同,已达到分离的效果,通过二糖标准品对肝素酶解后的二糖及寡糖进行定位,进而确认肝素酶解后不同糖的构成比例.结果 表明,肝素结构测定检测方法具有较好的精密度,在分别改变柱温、体积流量时具有较好的耐用性,该检验方法可用于肝素二糖结构的解析.

摘要： 目的:观察局部走罐联合刺血拔罐疗法治疗寻常型银屑病的临床疗效及患者治疗前后血清肝素酶(HPA)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化.方法:将90例寻常型银屑病患者随机分为常规治疗组、走罐组及联合治疗组,每组30例.常规治疗组给予窄谱中波紫外线(NB-UVB)照射联合外用哈西奈德乳膏治疗,走罐组给予局部走罐联合刺血拔罐疗法治疗,联合治疗组同时采用上述2组的治疗方案,3组均治疗8周.观察3组临床疗效并检测治疗前后血清HPA、VEGF水平.结果:联合治疗组愈显率为86.67％,走罐组愈显率为56.67％,常规治疗组愈显率为63.33％.联合治疗组愈显率高于走罐组及常规治疗组(P＜0.05).常规治疗组愈显率与走罐组愈显率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后,3组血清HPA、VEGF水平均较治疗前降低(P＜0.05);联合治疗组血清HPA、VEGF水平均较走罐组及常规治疗组降低更明显(P＜0.05);常规治疗组HPA、VEGF水平与走罐组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:局部走罐联合刺血拔罐疗法治疗寻常型银屑病可提高临床疗效,其作用机制可能与降低血清HPA、VEGF水平有关.

摘要： 目的探讨肝素酶(heparanase,HPA)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在进行期寻常型银屑病患者皮损中的表达水平及意义。方法选取嘉兴市第一医院皮肤科门诊2015年1月-2016年12月收治的进行期寻常型银屑病患者25例。采用免疫组化S-P法检测25例进行期寻常型银屑病患者皮损标本和20例对照组健康皮肤标本的HPA和VEGF水平并进行比较。结果HPA表达产物主要位于细胞浆,呈棕黄色颗粒状,银屑病组表达集中于棘层、基底层与乳头层血管内皮细胞,对照组呈阴性表达。VEGF表达产物主要位于细胞浆,呈棕黄色颗粒状,银屑病组表达集中于棘层与乳头层血管内皮细胞,基底层也有少量表达,对照组呈阴性表达或基底层少量表达。对照组HPA和VEGF表达阳性率分别为0%、5%,银屑病组HPA和VEGF表达阳性率分别为88%、96%,银屑病组HPA和VEGF表达阳性率均显著高于对照组(均P<0.05)。银屑病皮损中HPA和VEGF的表达呈正相关(r=0.585,P<0.05)。结论HPA和VEGF在进行期寻常型银屑病皮损中的表达水平明显高于正常皮肤,二者在银屑病发病机制中起到重要作用,可作为进行期寻常型银屑病病理诊断的辅助指标之一。

摘要： 细胞外基质和基底膜的降解是癌细胞穿透组织屏障发生转移的重要步骤.硫酸乙酰肝素蛋白聚糖是细胞外基质和基底膜的组成成分,其多糖侧链可以被葡萄糖苷内切酶-肝素酶,特异性识别并切割,以破坏细胞外基质和基底膜的完整性,促进肿瘤转移.临床上肿瘤患者肝素酶高表达与肿瘤恶性程度和转移发生密切相关.深入了解硫酸乙酰肝素、肝素酶及它们与肿瘤转移相关的作用机制有助于我们寻找肿瘤治疗的新思路.本文将从硫酸乙酰肝素的合成调控、功能、肝素酶的转录和活性调节、肝素酶表达与肿瘤患者的临床特征,以及硫酸乙酰肝素、肝素酶与肿瘤转移的关系进行综述.%Degradation of extracellular matrix and basement membrane is the significant procedure of cancer metastasis,as cancer cell penetrates tissue barrier.Heparan sulfate proteoglycan is the major component of extracellular matrix and basement membrane,and its polysaccharide side chains can be specifically cleaved by heparanase,a kind of endo-[β-D-glucuronidase;subsequently,the structural integrity of extracellular matrix and basement membrane is impaired,which prompts cancer metastasis.The overexpression of heparanase in cancer patient is associated with grade malignancy of cancer and metastasis.It is helpful to understand the action mechanism of heparan sulfate and heparanase in cancer metastasis for investigating new methods of cancer treatment.This article will summarize synthesis regulation and function of heparan sulfate,transcription and activity regulation of heparanase,heparanase expression and clinical characteristics of tumor patients,the relationship among heparan sulfate,heparanase and cancer metastasis.

摘要： 目的 通过观察血栓弹力图(TEG)肝素酶对比检测的变化,探讨原位肝移植术中凝血功能障碍的原因.方法 接受原位肝移植手术患者24例,男性20例,女性4例,年龄41～60岁,体重48～86 kg;美国麻醉医师协会(ASA)Ⅱ～Ⅳ级.所有病例均采取经典非转流术式.记录患者手术过程中所用红细胞以及血浆输注总量,分别于新肝期15分钟采集中心静脉血样,将血液样本同时加入TEG肝素酶试杯和TEG普通试杯中,应用TEG分析仪进行检测,观察两种不同试杯的检测结果.如果两组TEG图形不重合且差异明显,则给予鱼精蛋白,在此之后重复TEG检测.结果 所有患者手术过程均顺利,新肝期15分钟时,与普通试杯组结果相比,含有肝素酶试杯组的R值、K值、α角及MA值均差异有统计学意义(P0.05).结论 肝素的抗凝作用是新肝再灌注早期凝血功能紊乱的主要因素.

摘要： 肝素酶是一类能够特定切割肝素或硫酸乙酰肝素中α-1,4糖苷键并将其裂解成有活性寡糖片段的酶,主要分为真核生物肝素酶(Heparanase)和原核生物肝素酶(Heparinase).由于原核生物肝素酶是一种高效绿色的生物催化剂,因此近年来在医药领域的应用性研究逐渐被重视.文中结合本课题组相关工作,归纳介绍了原核生物肝素酶通过作用于硫酸肝素蛋白聚糖(HSPGs)生成肝素小分子,抑制肿瘤细胞增殖方面的应用;原核生物肝素酶在制备第三代创新型抗凝血药物低分子量肝素(Low molecular weight heparin,LWMH)和超低分子量肝素(Ultra low molecular weight heparin,ULMWH)方面的应用;原核生物肝素酶作为肝素拮抗药物等医药领域的重要应用;并展望了原核生物肝素酶的未来应用前景及挑战.

摘要： 恶性肿瘤一直以来都是全球范围内的热门课题,肿瘤细胞的恶性转移是肿瘤致死率居高不下的重要原因.研究发现,肝素酶(Heparanase,HPA)在肿瘤发展的过程中起关键作用,是抗肿瘤治疗的重要靶点;肝素酶抑制剂,通过降低HPA的活性或抑制HPA的表达,有效抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移,是颇具潜力的抗肿瘤治疗药物.文章对HPA作为肿瘤治疗靶点以及针对该靶点的抗肿瘤新药研发进行了综述,重点介绍了具有干扰HPA活性的底物类似物--肝素衍生物SST0001和硫酸化寡糖PG545、小分子化合物,以及抑制HPA表达的小干扰RNA(siRNA)等,为设计合理、高效的肝素酶抑制剂提供参考.

摘要： 本研究利用肌肉注射联合活体电穿孔技术将表达肝素酶基因的裸质粒DNA疫苗导入小鼠体内，间隔1周共免疫8次，不同的免疫时间点获取各主要脏器；提取组织总RNA，以其为模板进行RT—PCR，并且利用实时荧光定量PCR技术考察肝素酶在各组织的表达情况；及质粒本身的生物分布情况。对持续高表达和高分布的组织，利用琼脂糖凝胶分离游离质粒DNA与基因组DNA，考察质粒DNA疫苗是否与基因组发生整合。结果：发现小鼠在肌肉注射联合电穿孔导人人肝素酶质粒瞬时(24小时)和长期(5/8周)，表现出不同的特点。瞬时电穿孔给药，在主要脏器均能检测到质粒的表达和分布，而5周和8周后，仅能在注射部位发现微量的tuRNA表达，在其它器官均无表达；而肝素酶质粒本身在所有的组织均未检测到。本研究提示，电穿孔作为一种基因导入手段在本研究的剂量和操作下是安全、可控、高效的。

摘要： 肿瘤转移即肿瘤由原发灶迁移到远处器官后生长、发育的过程,在此过程中,细胞黏附、细胞运动、基底膜和细胞外基质(ECM)的降解及血管生成情况是肿瘤转移的决定因素。ECM和基底膜主要由两类成分组成,一是包括胶原蛋白和弹性蛋白在内的结构蛋白,二是包括蛋白多糖和糖氨多糖在内的非结构蛋白,后者的主要成分是硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)。HSPG是一种蛋白多糖类碳水化合物,由一个核心蛋白通过共价键与硫酸乙酰肝素(HS)结合组成糖氨聚糖。本文介绍了肝素酶的基因表达与分子结构，探讨了肝素酶与肿瘤侵袭转移的关系及肝素酶抑制剂的抗肿瘤作用。

摘要： 目的：综述肝素酶及其研究进展.方法：根据文献对近年来肝素酶的研究进展进行整理、分析、归纳.结果与结论：肝素酶在医药工业领域有着重要的应用价值和前景.了解肝素酶的结构性质,优化肝素酶的发酵生产条件以及对重组肝素酶的研究对进一步拓宽肝素酶的生产和应用有着重要的意义.

摘要： 近年研究发现,肝素酶(heparanase, HPR)在多种肿瘤中表达,其在黑色素瘤、恶性淋巴瘤、结肠癌及乳腺癌中的表达与肿瘤细胞的转移潜能密切相关,并与肿瘤血管的生成相关。但罕见肝素酶在胰腺癌表达的报道。血管内皮生长因子vEGF在多种消化道肿瘤中均高表达,与肿瘤血管化密切相关,是诱导肿瘤血管生成的主要因素,并且与肿瘤的生长、转移和预后相关。 本文采用免疫组化技术检测胰腺癌中HPR和vEGF的表达情况，并分析其与肿瘤微血管生成、临床病理参数以及预后的关系，探讨两者在胰腺癌转移复发中的作用以及两者相互关系，为临床上判断肿瘤的转移潜能和预后，寻找胰腺癌新的治疗途径，提供了理论基础。

摘要： 为了验证融合酶的可应用性，本论文针对肝素酶容易失活的特性，研究了融合肝素酶I的热失活机理，其失活为非一级失活动力学，表明在受热情况下，该酶的失活主要是由于分子的伸展并形成聚集体而导致的。

摘要： 本文研究了PMSF、甘油、PEG、肝素、CaCl2、巯基乙醇和BSA对肝素黄杆菌肝素酶粗酶液酶活的保护作用。结果表明,20mmol/LCaCl2对酶活有非常显著的保护作用,肝素、CaCl2和巯基乙醇有轻微作用,其余几种没有作用,PEG甚至加速酶失活。

摘要： 本实验室从自鞘胺醇杆菌中分离纯化得到了一种新型内切肝素酶,其对肝素和硫酸乙酰肝素有着较广的底物特异性.为进一步了解该酶的催化剂制,对肝素的降解特性,使用该酶降解了猪肠粘膜肝素,对降解产物进行了超滤、色谱分离和电喷雾质谱表征,获得了一些很有意义的结果.

摘要： 患者女性,41岁,既往体健,因"停经31周+3天,发现胎儿畸形2天,要求引产"入院.B超提示"胎儿胸腔积液,腹水,羊水过多".患者于2013-11-069:57入产房引产,9:59突然出现剧烈干咳,胸闷憋气,口唇青紫,意识清,心电监护示心率180次/分,氧饱和度88％,考虑羊水栓塞,紧急给予吸氧、地塞米松、氨茶碱等抢救,急查血常规及血凝,决定采取剖宫取胎术.患者入手术室时血压120/80mmHg,心率180bpm,氧饱和度92％.病房急查血常规结果HGB168g/L,血凝D二聚体17.82μg/ml,余大致正常.rn 本例患者高龄、胎儿畸形、羊水过多，结合其发病时间（分娩过程中）、临床表现（呼吸窘迫及紫绀）、胎盘早剥、DIC，临床诊断为羊水栓塞，但本患者未抽取中心静脉血液送检。术中见胎盘早剥，阴道及子宫大量渗血，HGB快速下降，病人皮肤散在斑片状出血点，DIC诊断成立。在DIC的治疗中，尽管小剂量的肝素对DIC治疗有所帮助，肝素对产后的胎盘附着创面更易出血，所以有人主张产科中尽量少用或不用肝素，同样．有专家不提倡抗纤溶治疗，因为患者己处于纤溶异常状态。TEG能够快速检测出凝血因素和血小板之间的关系及血凝块的强度及稳定性，可以为采用肝素抗凝患者提供是否需要鱼精蛋白拮抗依据，从而减少抗凝引起的失血，本例患者第二次TEG肝素酶试验证实己无肝素。同样TEG可以对纤溶异常做出准确判断，对是否抗纤溶治疗提供依据，此患者第一次TEG结果为纤溶亢进，故给予抗纤溶治疗。此病例总结：羊水栓塞导致DIC引起的出凝血功能障碍的处理一直是临床工作的重点和难点，TEG作为反映血液凝固动态变化的指标，可以在血常规、血凝检测基础上给提供更多的信息，使DIC的治疗更有针对性、更合理。

摘要： 本发明公开了重组酶硫酸乙酰肝素3‑O磺基转移酶的表达方法及其在合成硫酸乙酰肝素中的应用。利用Wistar大鼠脑组织来源的RNA为模板进行反转录，得到3‑O‑硫酸转移酶‑1的互补脱氧核糖核酸序列，进行密码子优化并切除信号肽；优化后的片段与pET‑28a质粒连接，导入宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。得到表达后，使用镍亲和柱进行纯化去除杂蛋白；并利用透析法对包涵体进行复性；通过3’‑磷酸腺苷‑5’‑磷酰硫酸再生系统，对复性后蛋白进行酶活检测，并应用于底物N‑脱乙酰/硫酸化的heparosan(NSNAH)的硫酸化修饰中。本发明可有效地获得重组酶硫酸乙酰肝素3‑O磺基转移酶的表达，并成功用于合成硫酸乙酰肝素。

摘要： 提供一个产肝素酶的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)菌株及从其衍生的肝素酶。还提供该肝素酶的制备和应用。

摘要： 本发明公开了利用SUMO融合表达系统制备重组肝素酶II的方法及其所制备的肝素酶II，该制备方法包括下列步骤：选择来自肝素黄杆菌(Pedobacter heparinus)的肝素酶II序列，其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，共772aa；去除信号肽序列，获得肝素酶II的DNA序列，如SEQIDNo.2；将所述肝素酶II的DNA序列插入带有N端SUMO蛋白标签的pSMART载体质粒；将正确的质粒转化至BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中，挑取单克隆，获得融合蛋白；用SUMO蛋白酶将SUMO标签蛋白从融合蛋白上切割下来，即获得肝素酶II。本发明的优点是：提高目标蛋白质的可溶性、促进目标蛋白质的正确折叠，避免形成包涵体；降低纯化成本、提高纯化效率；SUMO蛋白标签分子量较小，对肝素酶II的酶活性影响较小，获得纯化的肝素酶II。

摘要： 本发明公开了利用SUMO融合表达系统制备重组肝素酶I的方法及其所制备的肝素酶I，该制备方法包括下列步骤：选择来自肝素黄杆菌(Pedobacter heparinus)的肝素酶I序列，其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，共384aa；去除信号肽序列，获得肝素酶I的DNA序列，如SEQIDNo.2；将所述肝素酶I的DNA序列插入带有N端SUMO蛋白标签的pSMART载体质粒；将正确的质粒转化至BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中，挑取单克隆，通过发酵和纯化获得融合蛋白；用SUMO蛋白酶将SUMO标签蛋白从融合蛋白上切割下来，即获得肝素酶I。本发明的优点是：提高目标蛋白质的可溶性、促进目标蛋白质的正确折叠，避免形成包涵体；降低纯化成本、提高纯化效率；SUMO蛋白标签分子量较小，对肝素酶I的酶活性影响较小，获得纯化的肝素酶I。

摘要： 本发明公开了利用SUMO融合表达系统制备重组肝素酶III的方法及其所制备的肝素酶III，该制备方法包括下列步骤：选择来自肝素黄杆菌(Pedobacter heparinus)的肝素酶III序列，其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，共659aa；去除信号肽序列，获得肝素酶III的DNA序列，如SEQIDNo.2；将所述肝素酶III的DNA序列插入带有N端SUMO蛋白标签的pSMART载体质粒；将正确的质粒转化至BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中，挑取单克隆，通过发酵和纯化获得融合蛋白；用SUMO蛋白酶将SUMO标签蛋白从融合蛋白上切割下来，即获得肝素酶III。本发明的优点是：提高目标蛋白质的可溶性、促进目标蛋白质的正确折叠，避免形成包涵体；降低纯化成本、提高纯化效率；SUMO蛋白标签分子量较小，对肝素酶III的酶活性影响较小，获得纯化的肝素酶III。

摘要： 提供一个产肝素酶的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)菌株及从其衍生的肝素酶。还提供该肝素酶的制备和应用。

摘要： 本发明涉及体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种肝素酶冻干制剂、肝素酶杯及其制备方法和用途。本发明提供的肝素酶冻干制剂的复溶酶活收率至少为75％。本发明提供的肝素酶杯，包括：杯体和肝素酶冻干制剂，所述杯体内限定出容纳空间；所述肝素酶冻干制剂设置在所述容纳空间中。本发明还提供了一种肝素酶冻干制剂的方法，包括：将含有预定比例的所述肝素酶、所述保护剂、所述缓冲盐和所述防腐剂的水溶液依次进行预冻处理、升华处理和干燥处理，以便获得所述肝素酶冻干制剂。将本发明肝素酶冻干制剂和肝素酶杯应用在血液样本的检测过程中，其检出灵敏度高，而且能够显著提升肝素酶在冻干过程中的活性和稳定性。

摘要： 本发明提供了一种可彻底特异性酶解依诺肝素钠的肝素酶组合物，所述肝素酶组合物为肝素酶Ⅱ与肝素酶Ⅲ的混合物，所述肝素酶Ⅱ：肝素酶Ⅲ的酶量活性比为3:1。通过本发明的肝素酶组合物可以彻底的酶解依诺肝素钠形成并经还原制得1,6-酐衍生物，且含量均在合格范围，本发明的肝素酶组合物不用肝素酶I减少了酶杂质的引入，使方法更可靠，是对几大药典方法的重要补充，具有很高的实际使用价值和意义。

摘要： 本发明涉及一种乙酰肝素酶活性抑制剂，其包含下述式(I)所示的4-烷基间苯二酚作为活性成分。

摘要： 本发明公开了人肝素酶cDNA表达载体的一种新用途，即在制备抗人肝素酶免疫抗体中的应用。所述人肝素酶cDNA表达载体，是含有人肝素酶肝素酶全长编码cDNA的重组表达载体。检测结果表明用本发明的人肝素酶cDNA表达载体获得的免疫血清具有针对肝素酶的免疫特性，纯化出的抗人肝素酶免疫抗体可用于科研和临床上，如病人血清、肿瘤组织中肝素酶的定性及定量检测，有助于相关疾病的临床诊断和预后判断。本发明将在抗人肝素酶免疫抗体的制备及医学领域中发挥重要作用，应用前景广阔。