聚合酶链反应(PCR)

摘要： 寄生虫感染兼具地方病与传染病的特点,其发病呈现一定地域性,并有传播属性。器官移植术后寄生虫感染的发生率较低,大多数分布于发展中国家与地区,多见于一些个案或病例报道。随着社会经济的发展以及器官移植病例数量的逐渐增加,移植受者在不同国家或地区之间的旅行增加,其暴露于寄生虫的机会亦增加,而免疫抑制状态又是寄生虫感染的危险因素,因此,器官移植受者寄生虫感染的风险不容忽视。本文就文献报道的器官移植术后寄生虫感染的流行病学特点、临床表现、诊断及治疗与预防进行分类综述,旨在为器官移植受者寄生虫感染的防治提供参考。

摘要： 目的:研究方舱核酸检测实验室应用于综合医院"应检尽检"和"愿检尽检"人群核酸标本检测.方法:采用定制钢结构焊接加工,体积为17500 mm×2980 mm×2980 mm,设计可移动有标准四区分隔和气流控制的聚合酶链反应(PCR)方舱核酸检测实验室.选取2021年1-7月医院方舱核酸检测实验室全部进行核酸检测样本,依据检测方法将其分为发热和急诊组、门诊和住院组以及无症状核酸检测组.统计方舱核酸检测实验室检测样本量、阳性样本量、平均检测时长和环境采样结果,计算3组样本平均检测时长,对比常规核酸检测实验室和方舱核酸检测实验室样本的平均检测时长.结果:方舱核酸检测实验室累计检测样本121312份,累计检测出阳性样本8份,平均检测时长(360.00±156.00)min,满足国家卫健委对不同核酸检测人群的检测时长要求.3组平均检测时长比较,差异有统计学意义(F=1795,P<0.001).结论:方舱核酸检测实验室能弥补综合医院原有的医疗用房不够及P2实验室建设不足,满足综合医院分人群检测需求,且能保证检测质量.

摘要： 目的:对国家食品药品监督管理总局(CFDA)批准的4种国产甲型流感病毒核酸检测试剂性能进行评估和临床确认试验.方法:使用美国病理学家协会(CAP)提供的标准毒株(2份)及北京协和医院就诊患者的300份呼吸道剩余样本,对其中2018年1月间84份患者的鼻咽拭子剩余样本进行临床确认试验.参考美国临床和实验室标准协会文件指南,使用CAP提供的A/H1N1和A/H3N2标准毒株制备样本盘,分别从重复性、重现性、检测下限、抗干扰能力、特异性、稳定性和模拟临床评估等方面的性能对试剂A、B、C和D进行评估;结果:试剂C的稳定性较好但其聚合酶链反应(PCR)酶对血液造成的干扰影响较大;试剂D的重复性、重现性、检测下限、抗干扰能力以及稳定性均未达到本实验室的临床应用需求.试剂D与试剂A、试剂B和试剂C的3种试剂评估结果比较,试剂D的重复性、重现性和抗干扰能力结果存在明显差异,具有统计学意义(F=6.53,F=25.44,F=14.15;P<0.05).试剂A的检测下限可以达到102 copies/ml,在4种试剂中具有较明显优势.临床确认实验中试剂A和试剂B检测结果的阳性率分别为38.1％(32/84)和23.8％(20/84),两者比较差异具有统计学意义(Z=-3.464,P<0.05).结论:通过对重复性、重现性、检测下限、抗干扰能力、特异性、稳定性及模拟临床评估等方面的性能评估和临床确认试验,试剂A漏检率更低,临床检测准确率更高.

摘要： 目的 研究以NS5-NS6为引物,扩增真菌同源性序列ssu-rDNA片段,建立广范围真菌检测的方法.方法 扩增医学主要致病真菌、细菌和人体细胞.结果 声有真菌均扩增出一个约310bp的产物,而细菌和人体细胞均扩增阴性,1pg白色假丝酵母菌DNA即可检出.结论 用PCR扩增真菌同源性ssu-rDNA具有高度的特异度和敏感度,而且缩短了检出时间.若深入研究,有可能成为诊断真菌感染的一种实用、理想的方法.

摘要： 目的 探讨解聚蛋白酶-12(ADAMTS-12)在退变腰椎间盘组织中的表达及意义.方法 选取2015年2月至2017年2月在我院治疗的腰椎间盘突出组织标本54例,其中后外层纤维环破裂32例,后外层纤维未破裂22例,同时选取腰椎骨折患者腰椎间盘组织40例(对照组),采用HE染色观察椎间盘髓核组织,采用免疫组化法和聚合酶链反应(PCR)检测ADAMTS-12蛋白和mRNA表达.结果 后外层纤维环破裂患者ADAMTS-12蛋白阳性表达率和mRNA分别为84.38%和(0. 812±0.048),明显高于后外层纤维环未破裂患者和对照组(P＜0.05);后外层纤维环未破裂患者ADAMTS-12蛋白阳性表达率和mRNA分别为59.09%和(0.521±0.037),明显高于对照组(P＜0.05);MRI 分级为Ⅴ级组织ADAMTS-12 mRNA 表达为(0. 901±0.042),明显高于Ⅲ级和Ⅳ级组织(P＜0.05);Ⅳ级组织ADAMTS-12 mRNA表达为(0.703±0.040),明显高于Ⅲ级组织(P＜0.05).结论 ADAMTS-12可能参与了腰椎间盘组织退变过程,其表达水平与腰椎间盘组织退变程度有一定关系.

摘要： 医院感染是威胁医疗安全的重要问题,病原菌在医院内的传播是引起医院感染的关键问题.总结整理了医院手术中悬浮菌数量与感染风险关系的研究,主要对微生物气溶胶检测技术——聚合酶链反应(PCR)技术的最新发展进行了总结,为今后医院实际病原微生物的实时测量与控制研究提供参考依据.%Nosocomial infection is an important issue that threatens medical safety.The spread of pathogens in hospitals is a key issue in nosocomial infection.Summarizes the relationship between the colony number of suspended bacteria and the infection risk during hospital surgery operation,as well as the latest developments of the microorganism aerosol detection technology—the polymerase chain reaction (PCR) technology,providing the references for real-time measurement and control of actual pathogenic microorganisms in the future.

摘要： 本发明提供了一种基于肽核酸(PNA)钳制聚合酶链反应(PCR)的耳聋突变基因的检测方法，涉及分子生物学遗传工程核酸检测技术领域。包括如下步骤：(1)设计一种与野生型耳聋基因(含突变位点)杂交的肽核酸PNA；(2)构建和提取突变型及野生型耳聋基因质粒，计算拷贝数；(3)采集待测个体的样本，提取基因组DNA或线粒体DNA；(4)设计PCR扩增所需的一对上下游引物和Taqman探针；(5)用上述肽核酸PNA对质粒标准品或待测样本按照改进PCR反应条件进行检测，得出扩增曲线；(6)根据所述扩增曲线对照检测定性基因突变。本发明操作简便、敏感性高、特异性高，可实时检测耳聋基因突变量，可用于疾病的早期辅助诊断。

摘要： 本发明涉及一种利用单管巢式实时聚合酶链反应（PCR）的改良结核菌诊断方法，尤其是一种利用两组结核菌特殊引物（Primer）的单管巢式PCR方法，本发明的方法诊断迅速，有利于特异且具有高敏感性的结核菌诊断。

摘要： 本发明涉及在PCR产物的末端上互补结合探针的情况下，利用抑制DNA聚合酶的5'‑瓣状内切核酸酶(FEN)活性的特性来检测单核苷酸多态性(SNP)的方法。更具体地涉及将实时聚合酶链反应(real‑time PCR)中使用的探针与PCR产物末端进行互补结合的情况下，确认抑制针对探针的耐热性DNA聚合酶的5'‑瓣状内切核酸酶活性的特性，并利用其特性来使待检测的单核苷酸多态性(SNP)部位位于探针的5'‑末端部位时，根据等位基因(allele)来诱导5'‑瓣状的形成，从而可有效地检测单核苷酸多态性(SNP)的方法。

摘要： 本发明提供了一种基于肽核酸(PNA)钳制聚合酶链反应(PCR)的耳聋突变基因的检测方法，涉及分子生物学遗传工程核酸检测技术领域。包括如下步骤：(1)设计一种与野生型耳聋基因(含突变位点)杂交的肽核酸PNA；(2)构建和提取突变型及野生型耳聋基因质粒，计算拷贝数；(3)采集待测个体的样本，提取基因组DNA或线粒体DNA；(4)设计PCR扩增所需的一对上下游引物和Taqman探针；(5)用上述肽核酸PNA对质粒标准品或待测样本按照改进PCR反应条件进行检测，得出扩增曲线；(6)根据所述扩增曲线对照检测定性基因突变。本发明操作简便、敏感性高、特异性高，可实时检测耳聋基因突变量，可用于疾病的早期辅助诊断。

摘要： 本发明涉及一种利用单管巢式实时聚合酶链反应（PCR）的改良结核菌诊断方法，尤其是一种利用两组结核菌特殊引物（Primer）的单管巢式PCR方法，本发明的方法诊断迅速，有利于特异且具有高敏感性的结核菌诊断。

摘要： 一个通过给出变性、退火和延伸事件的隶属关系数值以确定反应中每个事件的相对基值并利用遗传算法确定完成每一事件所需最适时间来优化用于控制聚合酶链反应的循环条件的系统。

摘要： 提供了用于核酸聚合酶链反应(PCR)的热循环装置。第一浴槽(50)和第二浴槽(51)中的浴槽介质(75)被保持在两种不同的温度。转移装置(85)让反应器(15)在多个热循环中处于两个浴槽(50、51)之中以交替地达到预定的高目标温度THT和预定的低目标温度TLT。荧光成像装置在热循环期间为反应材料(21)进行成像。当至少一个浴槽(50、51)中所使用的浴槽介质(75)是粉末(76)时，粉末清洁装置(20)就以机械方式去除附着在反应器(15)上的粉末(76)颗粒。

摘要： 本发明公开了一种微滴式数字聚合酶链反应芯片，属于数字PCR芯片领域，包括相连的芯片本体和收集管，芯片本体内设置有流向收集管的浊相通道以及汇聚于浊相通道入口的油相通道和水相通道，浊相通道按乳液流经次序分为曲流道和直流道，芯片本体顶面设置有油相通道入口、水相通道入口、经直流道直通收集管的吸出口和与曲流道相贯的热熔柱入口，该芯片既能生成乳液，也能加热加压扩增，油相和水相分别经油相通道和水相通道进入浊相通道中混合，流入收集管中，扩增时能利用热熔柱隔断浊相通道，隔离生成乳液的部分，便于扩增时加热、加压，不会导致溶液向外蒸发，减少热量向外散失，在扩增完成后能直接从吸出口将溶液吸出，有利于后续检测准确。

摘要： 本发明公开了一种一体化聚合酶链反应检测装置，包括平板反应器、进样杆和检测棒，平板反应器包括平板本体和密封膜，平板本体上开设有反应槽，反应槽上分别开设有进样孔和出样孔，密封膜密封反应槽形成反应腔，进样杆包括进样杆本体，进样杆本体一端开设有样本仓，检测棒包括检测棒本体，检测棒本体上开设有试纸槽，进样杆本体和检测棒本体分别与平板本体转动连接，当进样杆本体旋转至连通位置时，样本仓与进样孔连通，当进样杆本体旋转至隔绝位置时，样本仓与进样孔不连通，当检测棒本体旋转至连通位置时，试纸槽与出样孔连通，当检测棒本体旋转至隔离位置时，试纸槽与出样孔不连通。该装置结构简单，整合度高，将聚合酶链反应和检测整合在一起。

摘要： 本实用新型提供了一种PCR聚合酶链反应分析仪温度校准设备，包括传感器数据采集处理模块、传感器排线、USB TYPE‑C口和96孔的温度传感器模块，所述的传感器数据采集处理模块外设有处理模块外壳，所述的USB TYPE‑C口一端通过连线与传感器数据采集处理模块相连接，所述的USB TYPE‑C口另一端用于连接电脑，所述的传感器排线一端通过焊接固定在96孔的温度传感器模块上，所述的传感器排线另一端与传感器采集装置和处理模板相连，本实用新型采用了温度传感器探头，提供了温度测量的准确性，该结构更改可靠和便捷，通过在温度传感器中设置金属探头，增加了导热系数。