碱性磷酸酶活性

摘要： 背景:静电纺丝制备的聚己内酯纳米纤维支架具有仿细胞外基质的结构,但其亲水性较差,不利于细胞的黏附、迁移、增殖和分化。目的:利用3D电喷印法制备凹凸棒石/聚己内酯支架,评价其对小鼠骨髓间充质干细胞的生物学影响及成骨诱导分化作用。方法:采用3D电喷印法制备含不同质量比例凹凸棒石(0%,0.5%,1%,2%)的凹凸棒石/聚己内酯支架,扫描电镜观察其形貌结构。将4组支架分别与骨髓间充质干细胞共培养,第7天时扫描电镜下观察细胞黏附,第2天时Live/Dead染色观察材料表面细胞生长状态,第1,3,5天时利用CCK-8法检测细胞增殖,第3,7,14天时采用Real-time PCR检测成骨标志基因的表达水平,第3,7,10天时检测细胞碱性磷酸酶活性。结果与结论:①扫描电镜显示,4组支架均呈多孔隙的网状结构,平均孔隙约450μm,其中0%,0.5%凹凸棒石组支架表面光滑,1%,2%凹凸棒石组支架表面粗糙;②扫描电镜显示,细胞能在4组材料表面黏附和生长,其中1%凹凸棒石组细胞数量多于其他3组;③Live/Dead染色显示,细胞在4组材料表面黏附和生长,其中2%凹凸棒石组细胞数量最少;④CCK-8检测结果显示,0.5%凹凸棒石组的细胞增殖速率快于其他3组;⑤Real-time PCR检测显示,0.5%凹凸棒石组共培养14 d的碱性磷酸酶、骨钙素、Osterix和Runx-2基因表达量均高于其他3组;⑥0.5%,1%,2%凹凸棒石组的碱性磷酸酶活性均不同程度地高于0%凹凸棒石组,共培养3,7 d时0.5%凹凸棒石组最高,共培养10 d时1%,2%凹凸棒石组最高;⑦结果表明,加入质量比例0.5%凹凸棒石的聚己内酯支架具有良好的生物相容性和一定的成骨诱导效应。

摘要： [目的]磷极易被土壤吸附和固定,导致土壤中磷有效性较低.研究接种丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)和低磷处理两者交互对紫花苜蓿生长和磷吸收的影响,为提高碱性土壤中磷肥利用率提供理论依据.[方法]以黄绵土和紫花苜蓿(Medicago sativa)为试验材料进行盆栽试验.在施磷0、5、20 mg/kg(P0、P5、P20)3个水平下,分别设接种和不接种丛枝菌根Glomus mosseae BGC YN02(+AMF、-AMF)处理.植物生长120天后测定植株生物量、磷吸收量、AMF侵染率以及根际和非根际土壤的pH、土壤碱性磷酸酶活性、土壤有效磷含量、土壤微生物生物量磷,分析根际有机酸的组成与含量.[结果]+AMF处理中植物根系被AMF侵染,且施磷水平对侵染率没有显著影响;施磷和+AMF处理显著提高了植株地上部、地下部生物量以及磷含量,其中P20+AMF处理生物量和磷含量最高;根际有机酸总量随施磷水平上升而显著降低,但+AMF处理有机酸总量高于-AMF处理,其中柠檬酸和乙酸含量的变化较为明显;施磷和+AMF显著降低土壤碱性磷酸酶活性,增加土壤有效磷含量和微生物生物量磷,且低磷环境(P0、P5)下根际土壤碱性磷酸酶活性和微生物生物量磷均显著高于非根际土;P20处理显著降低磷利用效率和磷肥利用率,+AMF处理显著提高磷肥利用率.[结论]碱性土壤(黄绵土)中,AMF和紫花苜蓿根系能建立较好的共生关系,低施磷水平(施磷量≤20 mg/kg)对AMF侵染率没有显著影响.施磷和接种AMF均可以显著促进紫花苜蓿生长和磷吸收.低磷环境下,接种AMF可以扩大植物根系吸收范围,同时增强根际土壤碱性磷酸酶活性,促进根系分泌有机酸,特别是乙酸和柠檬酸,从而提高磷肥利用率.

摘要： 大蒜(Allium sativum)是一种有着独特气味、含有抗菌活性的葱属植物.该研究比较了4种不同大蒜(太仓白皮、二水早、红七星和独蒜)的抗菌活性,抗菌活性最强的是"红七星",其次是"二水早".利用GC-MS对大蒜提取物进行成分分析,结果显示:"二水早"和"红七星"中含有大量的5-羟甲基糠醛.此外,"二水早"和"红七星"中的硫化物含量和抑菌活性也高于其他两种大蒜.根据电解质和蛋白质的泄漏量、AKP活性和透射电镜观察的结果,"红七星"提取物的抗菌活性机制可能对其膜的完整性起破坏作用.

摘要： 背景:静电纺丝制备的聚己内酯纳米纤维支架具有仿细胞外基质的结构,但其亲水性较差,不利于细胞的黏附、迁移、增殖和分化.目的:利用3D电喷印法制备凹凸棒石/聚己内酯支架,评价其对小鼠骨髓间充质干细胞的生物学影响及成骨诱导分化作用.方法:采用3D电喷印法制备含不同质量比例凹凸棒石(0％,0.5％,1％,2％)的凹凸棒石/聚己内酯支架,扫描电镜观察其形貌结构.将4组支架分别与骨髓间充质干细胞共培养,第7天时扫描电镜下观察细胞黏附,第2天时Live/Dead染色观察材料表面细胞生长状态,第1,3,5天时利用CCK-8法检测细胞增殖,第3,7,14天时采用Real-time PCR检测成骨标志基因的表达水平,第3,7,10天时检测细胞碱性磷酸酶活性.结果 与结论:①扫描电镜显示,4组支架均呈多孔隙的网状结构,平均孔隙约450μm,其中0％,0.5％ 凹凸棒石组支架表面光滑,1％,2％凹凸棒石组支架表面粗糙;②扫描电镜显示,细胞能在4组材料表面黏附和生长,其中1％凹凸棒石组细胞数量多于其他3组;③Live/Dead染色显示,细胞在4组材料表面黏附和生长,其中2％凹凸棒石组细胞数量最少;④CCK-8检测结果显示,0.5％凹凸棒石组的细胞增殖速率快于其他3组;⑤Real-time PCR检测显示,0.5％凹凸棒石组共培养14 d的碱性磷酸酶、骨钙素、Osterix和Runx-2基因表达量均高于其他3组;⑥0.5％,1％,2％凹凸棒石组的碱性磷酸酶活性均不同程度地高于0％凹凸棒石组,共培养3,7 d时0.5％凹凸棒石组最高,共培养10 d时1％,2％凹凸棒石组最高;⑦结果表明,加入质量比例0.5％凹凸棒石的聚己内酯支架具有良好的生物相容性和一定的成骨诱导效应.

摘要： 纳米银广泛用于抗菌材料、医疗设备和其他抗菌产品.在纳米银产品的生产、运输、消费和处置过程中,纳米银将不可避免地释放到自然环境中,而水生生态系统是纳米银在自然界中重要的汇之一.本文以青岛近海为研究对象,采集现场海水进行实验室模拟培养,通过测定(48 h)不同浓度纳米银(0.5、5和50mg/L)短期暴露下对表层海水中浮游细菌死亡率、蛋白质含量、碱性磷酸酶活性及氨肽酶活性的变化,研究纳米银对近岸海区浮游细菌生长和活性的影响.研究结果表明,在纳米银胁迫下细菌生长和活性受到显著抑制(P＜0.05),高浓度组在培养4h后死亡率达到最高值88.20％,随着暴露时间延长,纳米银胁迫组活细菌数量缓慢恢复、死亡率逐渐减小;纳米银对碱性磷酸酶活性和氨肽酶活性的抑制效应分别在培养4和8h后达到最高,分别为8.58％和32.55％,在培养16 h后,酶活性开始缓慢上升,表现出对纳米银胁迫的适应性;纳米银组的蛋白质含量在培养8h后达到最低,相比于对照组降低了29.80％,在培养后期同样有所升高,蛋白质含量接近于对照组.由此可见,纳米银对青岛近海浮游细菌的生长和活性都具有显著的抑制效应;不同浓度纳米银对细菌的抑制效应不同,纳米银浓度越高,抑制效应越明显(P＜0.05),具有明显的浓度梯度效应;在培养后期,碱性磷酸酶活性和氨肽酶活性都有恢复,蛋白质含量上升,细菌死亡率下降,表明细菌对纳米银胁迫表现出一定的适应性.

摘要： 背景:寻找促进骨髓间充质干细胞增殖及向成骨细胞分化的方法,可以为治疗骨质疏松类疾病提供治疗思路.目的:探讨氯化锂调控大鼠骨髓间充质干细胞增殖分化的机制.方法:实验采用全骨髓细胞接种法和贴壁纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞,分别给予0,2,5 nmol/L氯化锂进行干预;采用CCK-8法检测大鼠骨髓间充质干细胞的增殖情况,茜素红染色法检测钙化结节形成情况,PNPP法测定碱性磷酸酶活性,Western blot法检测大鼠骨髓间充质干细胞中GSK3β,p-GSK3β,β-catenin蛋白含量变化.结果与结论:①2,5 nmol/L氯化锂均能促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖,5 nmol/L氯化锂促增殖能力最强;②2,5 nmol/L氯化锂组矿化结节与碱性磷酸酶活性均比0 nmol/L氯化锂组明显,且5 nmol/L氯化锂促成骨分化更为显著;③2,5 nmol/L氯化锂能够显著增加p-GSK3β、β-catenin蛋白表达,而各组GSK3β蛋白表达差异无显著性意义;④结果表明,氯化锂能够促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及向成骨细胞分化,其可能机制是通过调控Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达实现的.

摘要： 背景:miRNA表达谱预测miR-210可能在牙髓干细胞向牙本质和成骨方向分化中发挥作用,但具体作用尚不明确.目的:探讨miR-210在大鼠牙髓干细胞增殖和牙源性分化中的作用.方法:经河南中医药大学第二附属医院伦理委员会批准,收集5只SD大鼠牙髓组织,分离获得牙髓干细胞并分为5组:正常对照组、miR-210模拟物阴性对照组、miR-210模拟物组、miR-210抑制物阴性对照组和miR-210抑制物组.实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中miR-210、ALP、DSPP、DMP-1、GIT2、OPN mRNA的表达和DSPP、DMP-1、OPN和OCN蛋白的表达,CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测细胞的增殖能力,比色法检测细胞碱性磷酸酶活性,茜素红染色检测矿物质合成能力.结果与结论:①miR-210模拟物组细胞的增殖活力高于其他4组,差异有显著性意义(P<0.01);miR-210抑制物组细胞的增殖活力低于其他4组,差异有显著性意义(P<0.01);②miR-210模拟物组细胞的碱性磷酸酶活性高于其他4组,差异有显著性意义(P<0.01);miR-210抑制物组细胞的碱性磷酸酶活性低于其他4组,差异有显著性意义(P<0.01);③茜素红染色结果显示,miR-210模拟物组细胞表面布满钙盐沉积形成的大小不等的暗红色结节,数量多于其他4组,miR-210抑制物组细胞表面的暗红色钙结节散在分布,数量少于其他4组;④miR-210模拟物组细胞中miR-210、ALP、DSPP、DMP1、GIT2、OPN mRNA和DSPP、DMP1、OPN、OCN蛋白的表达高于其他4组,差异有显著性意义(P<0.01);miR-210抑制物组细胞中miR-210、ALP、DSPP、DMP1、GIT2、OPN mRNA和DSPP、DMP1、OPN、OCN蛋白的表达低于其他4组,差异有显著性意义(P<0.01);⑤结果提示,miR-210能够促进大鼠牙髓干细胞增殖与牙源性分化.

摘要： 背景:既往研究大多侧重于炎症因子激活NF-κB信号通路对骨细胞的影响,关于微炎症环境对人牙周膜干细胞成骨分化及NF-κB信号通路的影响研究较少.目的:探讨肿瘤坏死因子α对人牙周膜干细胞骨向分化及NF-κB信号通路的影响.方法:通过酶消化结合组织块法体外培养人牙周膜干细胞,免疫组织化学染色鉴定人牙周膜干细胞来源.该研究获得青海大学附属医院伦理委员会批准,患者均签署知情同意书.将人牙周膜干细胞分为2组,对照组用单纯成骨诱导液培养,肿瘤坏死因子α组用单纯成骨诱导液+10μg/L肿瘤坏死因子α培养.在成骨诱导不同时间点,进行茜素红染色定量分析、碱性磷酸酶活性检测,实时定量RT-PCR检测Osterix、Runx2基因表达水平,Western Blot检测NF-κB信号通路关键蛋白表达水平.结果与结论:①免疫组织化学染色结果显示人牙周膜干细胞抗波形丝蛋白染色表达阳性,抗角蛋白表达阴性;②茜素红染色后肿瘤坏死因子α组形成的矿化结节比对照组数量少、范围小、染色浅;③肿瘤坏死因子α组碱性磷酸酶活性明显低于对照组(P<0.05);④肿瘤坏死因子α组Osterix、Runx2基因表达水平均显著低于对照组(P<0.05);⑤肿瘤坏死因子α组p-IκBα蛋白表达量显著高于对照组(P<0.05),p65、IκBα蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05);⑥结果表明,肿瘤坏死因子α能够通过激活NF-κB信号通路抑制人牙周膜干细胞成骨分化.

摘要： 2005年与2006年夏季，对台湾海峡南部受到上升流影响的海区进行了2个航次的跟踪研究。主要通过检测群落水平和单细胞水平碱性磷酸酶活性来指示该海区的磷胁迫状况，同时，通过追踪上升流不同阶段来探讨涌升过程对浮游植物磷胁迫的影响。主要结果：在上升流发生和发展的过程中，总碱性磷酸酶活性主要由浮游植物态贡献，这与上升流引发的浮游植物水华有关。到上升流衰亡阶段，浮游植物大量死亡，胞外碱性磷酸酶大量脱落，进入水体中，因而上升流末期总碱性磷酸酶活性主要由游离态贡献。

摘要： 目前对污染环境中植物修复技术的研究已经成为生态修复的热点之一.以海马齿(Sesuvium portulacastrum)为主的植物修复技术在厦门市筼筜湖已初步展开.为研究海马齿根系对湖水中细菌丰度和碱性磷酸酶活性(APA)的影响,对种植于筼筜湖和生态实验场水池中的海马齿根际细菌数量和碱性磷酸酶活性分别进行了测定.筼筜湖根际水中细菌密度可以达到3.5×107个/mL,非根际水体中的细菌密度只有约3.5×106个/mL.筼筜湖和水池根际水中的APA分别为5.06和2.06nmol/(min·mL),两者都显著高于非根际水中的APA.APA主要集中在＞2μm的范围内,大约占到总APA的70％,其次在＜0.45μm的范围内,而0.45-2μm范围内的APA最小,只有不到10％.种植于水体中的海马齿根际效应明显,可以显著增加根系周围水体中的细菌数量和APA,在对污染湖泊的治理中具有及其重要的应用价值.

摘要： 试验选用25日龄黄羽肉公鸡1 600羽,随机分成5组,每组4个重复,日粮中添加由猪脂和大豆油组成的混合油脂,各处理组猪脂占混合油脂的比例分别为0(1组)、25％(Ⅱ组)、50％(Ⅲ组)、75％(Ⅳ组)和100％(Ⅴ组),试验分前期(25～45日龄)和后期(46～65日龄)两个阶段,各阶段结束时屠宰取样,测定相关血清生理生化和抗氧化指标。结果发现：(1)45日龄黄公鸡血清尿素氮含量1组比Ⅴ组显著提高79．97％(P＜O。05);碱性磷酸酶活性11组显著升高(P＜O．05)。65日龄时黄公鸡尿素氮含量各组差异不显著(P＞0.005);碱性磷酸酶活性Ⅲ组、Ⅳ组显著降低(P＞O．05)。(2)45日龄黄公鸡血清中SOD活性Ⅳ组比Ⅰ组高32．70％(P＜O．05),65日龄时各抗氧化指标各组差异不显著(P＞O．05)。总之,日粮中猪脂与大豆油的比例为1～3：1时,对黄鸡肝胆系统功能、蛋白质代谢和抗氧化特性有一定的改善作用,且3：1比1：1更适宜。此时日粮中不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸之比为1．60(25～45日龄)和1．58(46～65日龄)。

摘要： [目的]研究镉对体外培养成骨细胞(osteoblast,OB)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及表达的影响,以探讨镉骨毒性机理.rn [方法]混合酶消化法分离大鼠颅盖骨OB,进行原代培养.OB经不同浓度的镉(Cadmium,Cd)作用后,通过ALP组织化学染色及对硝基苯磷酸盐(PNPP)法检测OB细胞的ALP活性,同时应用RT-PCR方法观察Cd对ALP基因表达的影响.rn [结果]镉作用后24 h,Cd处理组的ALP活性无明显变化.Cd作用后48 h,各剂量Cd处理组的ALP活性均明显低于对照组(P＜0.05).Cd作用后48 h和72 h,ALP染色可见Cd处理组ALP表达明显减少.RT-PCR结果显示,Cd作用后24 h,0.5 μmol/L、1.0 μmol/L.剂量组的ALP/β-Actin光密度值与对照相比没有显著差异,但是2.0μmol/L剂量组的ALP/β-Actin光密度值较对照明显降低(P＜0.05);2.0μunol/L Cd作用后48 h及72 h,ALP/β-Actin光密度值较对照组明显降低(P＜0.05).rn [结论]Cd离子可以抑制体外培养OB细胞ALP活性及表达,抑制OB分化.

摘要： 背景与目的：乳腺癌细胞对成骨细胞（osteoblast, OB)正常功能的影响作用尚不明确。本研究探讨人乳腺癌细胞MCF-7或MDA-MB-231条件培养基对 OB正常功能的影响。rn 方法：源于大鼠颅盖骨的原代OB与雌檄素受体阴性（ER-) 或阳性（ER+)的MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基共同培养，MTT 法观察条件培养基对OB増殖的影响，对硝基苯磷酸盐偶氮法观察条件培养基对 OB碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP)活性的影响，茜素红S进行矿化结节染色并计算面积以观察条件培养基对OB矿化能力的影响。rn 结果：MDA-MB-231 细胞和MCF-7细胞条件培养基使OB发生纤维细胞形态改变，使细胞突起和突起连接均减少，并显著抑制OB的增殖。与培养基对照组比较，加入50%来自 MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基后1 d、3 d、5 d和7 d,OB的增殖抑制率分别为18.1%、13.0%、19.2%、19.3%和15.8%、20.8%.33.9%、28.7%，两组之间的差异均有统计学意义 (P<0.01)。条件培养基可明显下调OB的ALP活性，并呈剂量-效应关系，50%的条件培养基使ALP活性分别下降 31.9%和47.5%(P<0.01)。条件培养基对OB的矿化结节形成能力也呈明显抑制作用：加入50%MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基培养后，OB形成矿化结节面积分别减少89%和74%(P<0.01)。rn 结论：乳腺癌细胞可抑制OB的增殖能力和矿化形成能力，下调其AKP活性。

摘要： 背景与目的：乳腺癌细胞对成骨细胞（osteoblast, OB)正常功能的影响作用尚不明确。本研究探讨人乳腺癌细胞MCF-7或MDA-MB-231条件培养基对 OB正常功能的影响。rn 方法：源于大鼠颅盖骨的原代OB与雌檄素受体阴性（ER-) 或阳性（ER+)的MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基共同培养，MTT 法观察条件培养基对OB増殖的影响，对硝基苯磷酸盐偶氮法观察条件培养基对 OB碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP)活性的影响，茜素红S进行矿化结节染色并计算面积以观察条件培养基对OB矿化能力的影响。rn 结果：MDA-MB-231 细胞和MCF-7细胞条件培养基使OB发生纤维细胞形态改变，使细胞突起和突起连接均减少，并显著抑制OB的增殖。与培养基对照组比较，加入50%来自 MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基后1 d、3 d、5 d和7 d,OB的增殖抑制率分别为18.1%、13.0%、19.2%、19.3%和15.8%、20.8%.33.9%、28.7%，两组之间的差异均有统计学意义 (P<0.01)。条件培养基可明显下调OB的ALP活性，并呈剂量-效应关系，50%的条件培养基使ALP活性分别下降 31.9%和47.5%(P<0.01)。条件培养基对OB的矿化结节形成能力也呈明显抑制作用：加入50%MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基培养后，OB形成矿化结节面积分别减少89%和74%(P<0.01)。rn 结论：乳腺癌细胞可抑制OB的增殖能力和矿化形成能力，下调其AKP活性。

摘要： 背景与目的：乳腺癌细胞对成骨细胞（osteoblast, OB)正常功能的影响作用尚不明确。本研究探讨人乳腺癌细胞MCF-7或MDA-MB-231条件培养基对 OB正常功能的影响。rn 方法：源于大鼠颅盖骨的原代OB与雌檄素受体阴性（ER-) 或阳性（ER+)的MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基共同培养，MTT 法观察条件培养基对OB増殖的影响，对硝基苯磷酸盐偶氮法观察条件培养基对 OB碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP)活性的影响，茜素红S进行矿化结节染色并计算面积以观察条件培养基对OB矿化能力的影响。rn 结果：MDA-MB-231 细胞和MCF-7细胞条件培养基使OB发生纤维细胞形态改变，使细胞突起和突起连接均减少，并显著抑制OB的增殖。与培养基对照组比较，加入50%来自 MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基后1 d、3 d、5 d和7 d,OB的增殖抑制率分别为18.1%、13.0%、19.2%、19.3%和15.8%、20.8%.33.9%、28.7%，两组之间的差异均有统计学意义 (P<0.01)。条件培养基可明显下调OB的ALP活性，并呈剂量-效应关系，50%的条件培养基使ALP活性分别下降 31.9%和47.5%(P<0.01)。条件培养基对OB的矿化结节形成能力也呈明显抑制作用：加入50%MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基培养后，OB形成矿化结节面积分别减少89%和74%(P<0.01)。rn 结论：乳腺癌细胞可抑制OB的增殖能力和矿化形成能力，下调其AKP活性。

摘要： 背景与目的：乳腺癌细胞对成骨细胞（osteoblast, OB)正常功能的影响作用尚不明确。本研究探讨人乳腺癌细胞MCF-7或MDA-MB-231条件培养基对 OB正常功能的影响。rn 方法：源于大鼠颅盖骨的原代OB与雌檄素受体阴性（ER-) 或阳性（ER+)的MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基共同培养，MTT 法观察条件培养基对OB増殖的影响，对硝基苯磷酸盐偶氮法观察条件培养基对 OB碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP)活性的影响，茜素红S进行矿化结节染色并计算面积以观察条件培养基对OB矿化能力的影响。rn 结果：MDA-MB-231 细胞和MCF-7细胞条件培养基使OB发生纤维细胞形态改变，使细胞突起和突起连接均减少，并显著抑制OB的增殖。与培养基对照组比较，加入50%来自 MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基后1 d、3 d、5 d和7 d,OB的增殖抑制率分别为18.1%、13.0%、19.2%、19.3%和15.8%、20.8%.33.9%、28.7%，两组之间的差异均有统计学意义 (P<0.01)。条件培养基可明显下调OB的ALP活性，并呈剂量-效应关系，50%的条件培养基使ALP活性分别下降 31.9%和47.5%(P<0.01)。条件培养基对OB的矿化结节形成能力也呈明显抑制作用：加入50%MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基培养后，OB形成矿化结节面积分别减少89%和74%(P<0.01)。rn 结论：乳腺癌细胞可抑制OB的增殖能力和矿化形成能力，下调其AKP活性。

摘要： 背景与目的：乳腺癌细胞对成骨细胞（osteoblast, OB)正常功能的影响作用尚不明确。本研究探讨人乳腺癌细胞MCF-7或MDA-MB-231条件培养基对 OB正常功能的影响。rn 方法：源于大鼠颅盖骨的原代OB与雌檄素受体阴性（ER-) 或阳性（ER+)的MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基共同培养，MTT 法观察条件培养基对OB増殖的影响，对硝基苯磷酸盐偶氮法观察条件培养基对 OB碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP)活性的影响，茜素红S进行矿化结节染色并计算面积以观察条件培养基对OB矿化能力的影响。rn 结果：MDA-MB-231 细胞和MCF-7细胞条件培养基使OB发生纤维细胞形态改变，使细胞突起和突起连接均减少，并显著抑制OB的增殖。与培养基对照组比较，加入50%来自 MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基后1 d、3 d、5 d和7 d,OB的增殖抑制率分别为18.1%、13.0%、19.2%、19.3%和15.8%、20.8%.33.9%、28.7%，两组之间的差异均有统计学意义 (P<0.01)。条件培养基可明显下调OB的ALP活性，并呈剂量-效应关系，50%的条件培养基使ALP活性分别下降 31.9%和47.5%(P<0.01)。条件培养基对OB的矿化结节形成能力也呈明显抑制作用：加入50%MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基培养后，OB形成矿化结节面积分别减少89%和74%(P<0.01)。rn 结论：乳腺癌细胞可抑制OB的增殖能力和矿化形成能力，下调其AKP活性。

摘要： 背景与目的：乳腺癌细胞对成骨细胞（osteoblast, OB)正常功能的影响作用尚不明确。本研究探讨人乳腺癌细胞MCF-7或MDA-MB-231条件培养基对 OB正常功能的影响。rn 方法：源于大鼠颅盖骨的原代OB与雌檄素受体阴性（ER-) 或阳性（ER+)的MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基共同培养，MTT 法观察条件培养基对OB増殖的影响，对硝基苯磷酸盐偶氮法观察条件培养基对 OB碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP)活性的影响，茜素红S进行矿化结节染色并计算面积以观察条件培养基对OB矿化能力的影响。rn 结果：MDA-MB-231 细胞和MCF-7细胞条件培养基使OB发生纤维细胞形态改变，使细胞突起和突起连接均减少，并显著抑制OB的增殖。与培养基对照组比较，加入50%来自 MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基后1 d、3 d、5 d和7 d,OB的增殖抑制率分别为18.1%、13.0%、19.2%、19.3%和15.8%、20.8%.33.9%、28.7%，两组之间的差异均有统计学意义 (P<0.01)。条件培养基可明显下调OB的ALP活性，并呈剂量-效应关系，50%的条件培养基使ALP活性分别下降 31.9%和47.5%(P<0.01)。条件培养基对OB的矿化结节形成能力也呈明显抑制作用：加入50%MDA-MB-231细胞或MCF-7细胞的条件培养基培养后，OB形成矿化结节面积分别减少89%和74%(P<0.01)。rn 结论：乳腺癌细胞可抑制OB的增殖能力和矿化形成能力，下调其AKP活性。

摘要： 本发明属于生物分析检测技术领域，尤其涉及一种基于以碱性磷酸酶为开关的路径选择器的碱性磷酸酶测定方法、试剂盒及其应用。本发明设计了有两条轨道的双链脱氧核糖核酸。轨道1以5’‑FAM和3’‑BHQ‑1为荧光探针，在5’‑FAM末端有2‑nt的突出结构。轨道2是一个带有5’‑PO4的ssDNA，该序列的大部分与探针互补，在5’‑PO4末端有0‑10nt的突出结构。没有碱性磷酸酶时，λexo选择与5’‑PO4末端结合并消化互补链，导致低荧光信号。当样品中有碱性磷酸酶时，轨道2中的5’‑PO4被转化为5’‑羟基；λexo选择与5’‑FAM末端结合并消化探针以离开FAM和BHQ‑1并发出强荧光信号。

摘要： 本发明涉及用于发酵产碱性磷酸酶的培养基和碱性磷酸酶的制备方法。上述用于发酵产碱性磷酸酶的培养基，包括：5g/L‑15g/L的葡萄糖、10g/L‑20g/L的蛋白胨、3g/L‑10g/L的酵母粉、2g/L‑7g/L的NaCl、2.5g/L‑7.5g/L的(NH4)2SO4、3g/L‑4g/L的KH2PO4、5g/L‑6g/L的K2HPO4、0.3mg/L‑4.5mg/L的MnCl2·4H2O、0.1mg/L‑0.5mg/L的Na2MoO4·2H2O、1mg/L‑5mg/L的FeCl3·6H2O、3mM‑10mM的Mg2+、0.05mM‑0.5mM的Zn2+。上述用于发酵产碱性磷酸酶的培养基能够提高碱性磷酸酶单位酶活和表达量。

摘要： 本发明属于无机半导体材料技术领域，具体涉及碱性磷酸酶检测试剂及其制备方法和碱性磷酸酶的检测方法。本发明所提供的碱性磷酸酶检测试剂包括：过渡金属二硫化物量子点/铁离子复合物、抗坏血酸酯类物质和溶剂，抗坏血酸酯类物质溶解于溶剂中，过渡金属二硫化物量子点/铁离子复合物分散于溶剂中，过渡金属二硫化物量子点/铁离子复合物中的铁离子吸附于过渡金属二硫化物量子点的表面。过渡金属二硫化物量子点作为荧光标记，吸附于过渡金属二硫化物量子点表面的铁离子作为检测开关，抗坏血酸酯类物质作为抗坏血酸的合成前体，采用本发明提供的碱性磷酸酶检测试剂可实现对碱性磷酸酶的快速检测，操作简便，灵敏度高。

摘要： 本发明公开一种碱性磷酸酶酶标缓冲液和碱性磷酸酶酶标试剂。其中，所述碱性磷酸酶酶标缓冲液包括基础液和稳定剂，所述稳定剂为甘氨酸、海藻糖、甘油中的至少一种。本发明的技术方案能够提高碱性磷酸酶酶标试剂的稳定性。

摘要： 本发明涉及用于发酵产碱性磷酸酶的培养基和碱性磷酸酶的制备方法。上述用于发酵产碱性磷酸酶的培养基，包括：5g/L‑15g/L的葡萄糖、10g/L‑20g/L的蛋白胨、3g/L‑10g/L的酵母粉、2g/L‑7g/L的NaCl、2.5g/L‑7.5g/L的(NH4)2SO4、3g/L‑4g/L的KH2PO4、5g/L‑6g/L的K2HPO4、0.3mg/L‑4.5mg/L的MnCl2·4H2O、0.1mg/L‑0.5mg/L的Na2MoO4·2H2O、1mg/L‑5mg/L的FeCl3·6H2O、3mM‑10mM的Mg2+、0.05mM‑0.5mM的Zn2+。上述用于发酵产碱性磷酸酶的培养基能够提高碱性磷酸酶单位酶活和表达量。

摘要： 本发明属于无机半导体材料技术领域，具体涉及碱性磷酸酶检测试剂及其制备方法和碱性磷酸酶的检测方法。本发明所提供的碱性磷酸酶检测试剂包括：过渡金属二硫化物量子点/铁离子复合物、抗坏血酸酯类物质和溶剂，抗坏血酸酯类物质溶解于溶剂中，过渡金属二硫化物量子点/铁离子复合物分散于溶剂中，过渡金属二硫化物量子点/铁离子复合物中的铁离子吸附于过渡金属二硫化物量子点的表面。过渡金属二硫化物量子点作为荧光标记，吸附于过渡金属二硫化物量子点表面的铁离子作为检测开关，抗坏血酸酯类物质作为抗坏血酸的合成前体，采用本发明提供的碱性磷酸酶检测试剂可实现对碱性磷酸酶的快速检测，操作简便，灵敏度高。

摘要： 本发明属于生物分析检测技术领域，尤其涉及一种基于以碱性磷酸酶为开关的路径选择器的碱性磷酸酶测定方法、试剂盒及其应用。本发明设计了有两条轨道的双链脱氧核糖核酸。轨道1以5’‑FAM和3’‑BHQ‑1为荧光探针，在5’‑FAM末端有2‑nt的突出结构。轨道2是一个带有5’‑PO4的ssDNA，该序列的大部分与探针互补，在5’‑PO4末端有0‑10nt的突出结构。没有碱性磷酸酶时，λexo选择与5’‑PO4末端结合并消化互补链，导致低荧光信号。当样品中有碱性磷酸酶时，轨道2中的5’‑PO4被转化为5’‑羟基；λexo选择与5’‑FAM末端结合并消化探针以离开FAM和BHQ‑1并发出强荧光信号。

摘要： 本发明涉及食品工业和医学，并描述了生产含有重组人碱性磷酸酶的转化植物细胞的方法。本方法包括构建具有人碱性磷酸酶基因的植物表达载体，将具有人碱性磷酸酶基因的植物表达载体导入农杆菌菌株，生产植物愈伤组织细胞，使用农杆菌菌株农杆菌转化愈伤组织细胞；从转化的愈伤组织细胞产生体细胞胚，并在悬浮培养中培养含有人碱性磷酸酶基因的体细胞胚。本发明的目的是调节胃肠道微生物群落以及保护和恢复人体免疫系统。

摘要： 本发明提供了一种检测碱性磷酸酶活性的方法，其包括如下步骤：A1：将三(羟甲基)氨基甲烷、焦磷酸盐混匀后，分成若干份反应体系，每一份所述反应体系中分别加入不同浓度的碱性磷酸酶，在37°C下孵育后，在每一份反应体系中依次加入醋酸缓冲液、CeO2纳米粒子和3,3',5,5'‑四甲基联苯胺，在22～47°C下孵育后，分别进行紫外‑可见吸收光谱的测量，得到碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程；A2：将待测碱性磷酸酶按照步骤A1的操作进行紫外‑可见吸收光谱的测量，得到ΔA，将ΔA代入步骤A1中得到的碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程，计算出待测碱性磷酸酶的活性。本发明具有如下的有益效果：1、本发明所利用的CeO2纳米粒子在水溶液中分散较好；2、本发明所提出方法检测时间短。

摘要： 本发明提供了一种检测碱性磷酸酶活性的方法，其包括如下步骤：A1：将三(羟甲基)氨基甲烷、焦磷酸盐混匀后，分成若干份反应体系，每一份所述反应体系中分别加入不同浓度的碱性磷酸酶，在37°C下孵育后，在每一份反应体系中依次加入醋酸缓冲液、CeO2纳米粒子和3,3',5,5'‑四甲基联苯胺，在22～47°C下孵育后，分别进行紫外‑可见吸收光谱的测量，得到碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程；A2：将待测碱性磷酸酶按照步骤A1的操作进行紫外‑可见吸收光谱的测量，得到ΔA，将ΔA代入步骤A1中得到的碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程，计算出待测碱性磷酸酶的活性。本发明具有如下的有益效果：1、本发明所利用的CeO2纳米粒子在水溶液中分散较好；2、本发明所提出方法检测时间短。