镉对体外培养成骨细胞碱性磷酸酶活性及表达的影响

摘要

[目的]研究镉对体外培养成骨细胞(osteoblast,OB)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及表达的影响,以探讨镉骨毒性机理.rn [方法]混合酶消化法分离大鼠颅盖骨OB,进行原代培养.OB经不同浓度的镉(Cadmium,Cd)作用后,通过ALP组织化学染色及对硝基苯磷酸盐(PNPP)法检测OB细胞的ALP活性,同时应用RT-PCR方法观察Cd对ALP基因表达的影响.rn [结果]镉作用后24 h,Cd处理组的ALP活性无明显变化.Cd作用后48 h,各剂量Cd处理组的ALP活性均明显低于对照组(P＜0.05).Cd作用后48 h和72 h,ALP染色可见Cd处理组ALP表达明显减少.RT-PCR结果显示,Cd作用后24 h,0.5 μmol/L、1.0 μmol/L.剂量组的ALP/β-Actin光密度值与对照相比没有显著差异,但是2.0μmol/L剂量组的ALP/β-Actin光密度值较对照明显降低(P＜0.05);2.0μunol/L Cd作用后48 h及72 h,ALP/β-Actin光密度值较对照组明显降低(P＜0.05).rn [结论]Cd离子可以抑制体外培养OB细胞ALP活性及表达,抑制OB分化.