植物内生真菌

摘要： 绿僵菌是广为知晓的昆虫病原真菌,被用作生物杀虫剂防治多种农林植物害虫。近年发现它也是根际微生物群落的一员,且有证据表明它内生于一些植物的根组织中,具有促进植物生长、拮抗植物病原菌、诱导植物抗性等作用。本文着重综述绿僵菌根际作用和植物内生性研究进展,从对植物的直接作用角度,了解其田间生态适应性及与植物的互作关系,以拓展昆虫病原真菌作为植物保护剂的认识,有助于根据生态学特点制定未来的生物防治应用策略。

摘要： 研究植物内生真菌布雷青霉菌(Penicillium brefeldianum)F4a次级代谢产物的提取分离方法、结构鉴定及其降血糖和抗氧化活性。采用液体发酵培养,大孔吸附树脂HP20提取后,经硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS反相开放柱色谱和高效液相色谱等手段进行分离,应用核磁共振等技术进行结构鉴定;采用紫外分光光度吸收法进行降血糖和抗氧化活性筛选。结果表明,分离得到6个化合物,分别鉴定为环(L-色氨酸-L-脯氨酸)(1)、3,3′-Methylenebis(4-hydroxy-6-methyl-2H-pyran-2-one)(2)、2-(2′S-Hydroxypropyl)-5-methyl-7-hydroxychromone(3)、染料木素(4)、大豆素(5)和苯酚(6)。化合物1和2具有一定的抗氧化活性,化合物4和5具有较强的抗氧化活性和降血糖活性。化合物2和3为首次从青霉属真菌中分离得到。化合物1和2的ABTS自由基清除活性为首次报道。

摘要： 【目的】研究红树内生真菌高粱附球菌Epicoccum sorghinum L28的代谢产物及其抗真菌活性。【方法】柱层析分离纯化代谢产物,波谱技术鉴定结构;二倍稀释法测试代谢产物对小麦赤霉菌Fusarium graminearum和番茄枯萎菌F. oxysporum的最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。【结果】分离鉴定出7-羟基-2,5-二甲基色原酮(化合物1)、Livistone A(化合物2)、Barceloneic acid A(化合物3)、Barceloneic lactone(化合物4)、2′-O-methylbarceloneate(化合物5)、Spirostaphylotrichin R(化合物6)、 Spirostaphylotrichin U(化合物7)、β-谷甾醇(化合物8)、β-胡萝卜苷(化合物9)和β-腺苷(化合物10)。化合物1能强烈抑制小麦赤霉菌和番茄枯萎菌的生长,MIC均为100μg/mL;化合物5对番茄枯萎菌的生长具有中等抑制作用,MIC为200μg/mL。【结论】化合物1和化合物5可作为相应抗菌农药先导化合物开展研究。

摘要： [目的]研究咸海岸边不同暴露时期土壤带的土壤真菌和植物内生真菌群落构成及其对湖泊干涸的响应.[方法]从咸海湖岸远端(土壤带的暴露时间最长)到湖岸近端(土壤带的暴露时间最短)的不同土壤带采集土壤样品,对其进行地球化学和矿物学分析.同时也采集各土壤带的土壤样品和优势植物,通过ITS基因高通量测序方法分析土壤真菌和植物内生真菌群落构成,进而探讨其如何响应湖泊干涸(如盐度升高、矿物组分变化、植物种类丰富度变化等)过程.[结果]持续暴露的咸海湖床从湖泊远岸到湖泊近岸形成了一个连续的盐度梯度:E48(暴露于1970年之前,总可溶解盐0.5±0.5 g/L);E38(暴露于1980年之前,总可溶解盐0.4±0.2 g/L);E28(暴露于1990年之前,总可溶解盐23.3±2.1 g/L);E18(暴露于2000年之前,总可溶解盐23.7±7.5 g/L);E9(暴露于2009年之前,总可溶解盐71.3±6.1 g/L);E1(暴露于2017年之前,总可溶解盐62.9±10.7 g/L)和E0 (2018年湖岸线附近沉积物样品,总可溶解盐69.9±8.3 g/L).咸海岸边不同土壤带分布着不同的植物:梭梭(Haloxylon ammodendron)在E48和E38区域中占优势地位;滨藜(Chenopodium album)在E28、E18和E9区域占优势;而在E1和E0区域无可见植物物种分布.另外,咸海岸边不同土壤带的主要矿物成分也存在差异:粘土矿物和蒸发岩的含量从咸海湖岸远端到湖岸近端逐渐增加,而碳酸盐矿物含量逐渐减少.咸海岸边不同土壤带土壤样品优势真菌类群(＞5％)为散囊菌纲(Eurotiomycetes)、粪壳菌纲(Sordariomycetes)、锤舌菌纲(Leotiomycetes)、座囊菌纲(Dothideomycetes)、黑粉菌亚门(Ustilaginomycotina)和伞菌纲(Agaricomycetes),且按植物种类丰富度进行聚类.而植物样品优势真菌类群为未知真菌门类(＞97.8％),且按植物种类进行聚类.线性回归结果显示,咸海岸边不同土壤带土壤样品真菌群落差异性与暴露时间距离具有显著相关(R2=0.32,P＜0.05),而与总可溶解盐差异则无明显相关性.而植物内生真菌群落差异性与暴露时间距离/总可溶解盐差异之间均无显著相关.Mantel检验结果显示,咸海岸边不同土壤带土壤真菌群落与植物种类丰富度和矿物成分组成(如白云石、方解石、微斜长石和石膏)呈显著相关(P＜0.05),其中植物种类丰富度和方解石含量的相关性系数最大;植物内生真菌群落与方解石含量之间呈显著相关(P＜0.05).[结论]咸海岸边不同暴露时期土壤带的土壤真菌和植物内生真菌种群结构具有时空差异,与植物种类丰富度和特定矿物组成相关,而与总可溶解盐无显著相关.

摘要： 土壤次生盐渍化严重阻碍设施蔬菜的生长发育,植物内生菌能够提高作物的抗逆性.该研究从次生盐渍化环境的番茄植株和根际土壤中筛选真菌,研究真菌发酵液对逆境下番茄种子发芽的影响.经分离纯化,从番茄植株和根际土壤中分别获得16株植物内生真菌和54株根际土壤真菌.利用不同浓度硝酸钙模拟设施土壤次生盐渍化环境条件,其中75 mmol/L硝酸钙胁迫下,植株株高、苗鲜重、苗干较对照分别低了36.73％、55.39％、38.71％,根长、根鲜重、根干较对照分别低了28.14％、66.87％、52.85％,因此选择75 mmol/L硝酸钙作为最佳胁迫浓度.在75 mmol/L硝酸钙胁迫下,利用分离出的16株植物内生真菌发酵液处理番茄种子,结果显示,DL12内生真菌发酵液可促进番茄种子发芽,发芽率较对照高29.01％,有效缓解盐胁迫对番茄种子萌发的毒害作用.

摘要： 从藏地植物筛选具有抗黑曲霉活性的菌株及代谢物,为化妆品天然防腐剂的研发提供候选天然产物.采集6株藏地植物,用组织分离法分离到78株内生真菌,经玉米和大米固体发酵并提取得到156个代谢物,采用滤纸片法筛选具抗黑曲霉活性代谢物13个,其中LT46C、LT46R、LT62R等8个样品对黑曲霉的抑菌圈大于1mm.活性最高的菌株LT46、LT 62、LT 36经ITS分子鉴定分别为ConiolaRella属、Coniochaeta cipronana亚属和Daldinia属.该结果为研发化妆品新型天然防腐剂提供实验依据.

摘要： 植物内生真菌是寄居植物组织内,与植物共生的真菌种类.植物内生真菌的次生代谢产物具有结构和生物活性多样性的特点,因而可为医药及农药创制提供先导结构,具有巨大的研究和开发价值.本文综述了近三年来(2017 ～2019年)从植物内生真菌中分离出来的具有生物活性的生物碱、聚酮、萜类、甾醇、蒽醌以及其他类化合物,并分别简要概述了其生物活性研究进展,以期为植物内生真菌活性代谢产物的研究与利用提供参考.

摘要： 植物内生真菌是挖掘不同类型壳聚糖酶及发现新酶的资源宝库.该研究从122株柑橘和血散薯内生真菌中筛选能产生壳聚糖酶的菌株,对其进行鉴定,初步研究酶活力影响因素,为后期其酶学性质及产壳聚糖酶内生真菌与宿主植物病害防御互作关系的研究奠定基础.通过透明圈法初筛结合液体发酵法进行复筛,得到2株可产生壳聚糖酶的内生真菌Stdif9和Stdif9-4,并发现Stdif9-4最高酶活力(0.968 U·mL-1)显著高于Stdif9(0.780 U·mL-1).采用形态学和分子生物学结合的方法将菌株Stdif9-4鉴定为青霉属菌株,即Penicillium sp.Stdif9-4.通过DNS试剂法初步研究影响该菌株产壳聚糖酶活力的因素,发现不同培养时间对菌株壳聚糖酶活力具有显著影响,在培养96 h时,壳聚糖酶活力达到最大值.9种金属离子对菌株的酶活力具有不同影响,其中Mn2+和Ca2+对壳聚糖酶活力具有明显的激活作用;Ag+、Zn2+、Cd2+、Ba2+和Fe3+对壳聚糖酶活力具有不同程度的抑制作用,并且Ag+的抑制作用最为显著;K+和Na+对壳聚糖酶活力无显著影响.不同培养代数菌株产酶活力无显著差异,说明其产酶活力稳定.

摘要： 目的:探究马铃薯内生真菌次生代谢产物中新型倍半萜类化合物TA的抗炎作用.方法:脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞建立体外炎症模型,通过测定细胞存活率、细胞NO的产生量、细胞内活性氧(ROS)水平,细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的释放量、一氧化氮合成酶(iNOS),环氧合酶(COX-2)蛋白表达量,从而评价化合物TA的抗炎活性.结果:化合物TA对细胞无毒性,可剂量依赖性地抑制LPS刺激产生的NO,降低ROS水平,减少细胞炎症因子TNF-α 和IL-1β的产生及下调iNOS,COX-2蛋白的表达量.结论:马铃薯内生真菌次生代谢产物中新型倍半萜类化合物TA具有显著的抗炎活性.

摘要： 对分离自海南植物艾纳香的一株内生真菌Corynespora cassiicola J9进行次生代谢产物研究,通过多种色谱技术从其大米培养基中分离获得了8个化合物,包括1个新的缩酚酸环醚类化合物corynetherC (1)和7个己知缩酚酸环醚类似物:corynether B (2)、corynetherlactone A (3)、corynether A (4)、diaryl ether (5)、corynesidone C (6)、corynesidone D (7)和corynesidone A (8).采用一维和二维核磁共振谱和高分辨电喷雾质谱技术对化合物结构进行了确证.叶片喷洒饲喂法抗稻水象甲活性评价显示,所有供试化合物均无杀象甲活性.

摘要： 近几十年来,植物内生真菌被认为是药物先导化合物的源泉,有大量真菌来源的天然产物被研究,同时植物内生真菌的次级代谢产物中大多数具有生物活性.特别是Hansfordia属的植物内生真菌研究成为关注焦点.从Hansfordia属中得到化合物结构较为新颖,类型非常丰富,大体可分为色酮类、倍半萜类、内脂、异香豆素类等,大多数化合物均显示显著生物活性,如抗肿瘤、抗菌等活性.本研究从四川雅安蒙顶山榆科青檀属青檀树叶柄分离得到一株真菌，命名为Hansfordiasp. SIIA-7254。在前期的固体发酵化学筛选实验中，通过HPLC检测到其固体发酵提取物中代谢产物丰富，对其进行放大发酵，结合硅胶柱、Sephadex LH-20柱子和半制备HPLC色谱柱等手段分离得到8个化合物。化合物1-8为首次在该种菌株中分离得到。课题组后期拟进一步开展对相关化合物的生物活性，同时对这些化合物进行化学后修饰探讨其在对抗耐药感染的应用前景。

摘要： 目的：从云南大围山植物缅桐中分离得到的内生真菌YN02-4,从YN02-4的大米发酵产物中提取分离得到单体化合物,并通过理化性质对其结构进行鉴定.方法：植物内生真菌YN02-4进行大米发酵培养30天,对其菌丝体进行乙酸乙酯超声萃取得浸膏,通过硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱法等手段进行分离,得到的单体进行核磁共振波谱法等理化手段进行结构鉴定.结果：从真菌YN02-4大米发酵菌丝体中得到：Pififormic acid、2-hexylidene-3-methylsuccinic acid、6-hydroxymellein、环(异亮-脯)、环(缬-脯).

摘要： 本文综述了植物内生真菌的生物多样性及其与寄主的相互关系,并对内生真菌的分离纯化和鉴定技术进行了小结.另外,本文还对植物内生真菌产生的次生代谢产物进行了概述,主要包括抗菌物质、杀虫物质、抗肿瘤物质、植物生长调节类物质等.最后,对植物内生真菌研究中存在问题进行了讨论并对其发展前景进行了展望.

摘要： 微生物是次级代谢产物的主要来源之一.植物内生真菌由于所处的环境特殊,同时与宿主植物之间存在复杂的相互作用,因而能够产生结构多样、活性广泛的次级代谢产物.由于内生真菌难于培养、生长缓慢以及缺乏相应的遗传操作系统,对内生真菌次级代谢产物的生物合成与调控的研究相对较少.揭示内生真菌次级代谢产物生物合成与调控是解决上述问题的最好方式.拟盘多毛孢是中科院微生物所郭良栋研究员从杭州郊区茶树枝中分离到的植物内生真菌，其后车永胜研究员课题组通过深度挖掘，从中发现了70多种新结构化合物。通过基因组序列分析，研究获得可能参与petheic acid生物合成的基因簇，该基因簇含有一个编码聚酮合酶的基因ptaA。转录分析发现该基因簇的基因表达与petheic acid的产生具有时序一致性。通过同源双交换敲除了ptaA基因，LC-MS检测证明petheic acid产生消失，说明该基因簇参与了petheic acid的生物合成。对该基因簇中ptaA及其它基因的敲除以及体外酶学实验初步揭示了petheic acid可能的生物合成途径.也发现该基因簇存在3个调控基因，初步试验表明它们参与petheic acid生物合成的调控。

摘要： 简述植物内生真菌的概念、特点以及与宿主的重要关系，综述全球范围内过去二十年该领域的研究进展，强调“基于植物内生真菌开发新药逐渐成为热点”。本文分析了内生真菌活性成分，探讨了植物内生真菌药用活性成分的调控。

摘要： 植物内生真菌由于能够产生丰富多样的具有生物活性的次生代谢产物,受到了广泛的关注.本文主要针对植物内生真菌在防治农作物病虫害上的应用作一综述,侧重介绍了产杀虫活性物质或抑菌活性物质内生真菌的研究,并对今后植物内生真菌的研究进行了展望.

摘要： 目的:研究植物内生真菌HCCBOO189的代谢产物.rn 方法:采用溶剂萃取、硅胶柱层析及制备HPLC等方法,对活性菌株的发酵物进行分离,并根据理化性质和光谱分析对化学结构进行鉴定.rn 结果:从其代谢产物中分离到5个化合物,鉴定为4-甲基苯甲酸羧甲基酯(1)、4-甲氧甲酰基苯甲酸(2)、4-羟甲基苯甲酸(3)、4', 7-二羟基异黄酮(4)、4',5,7-三羟基异黄酮(5).rn 结论:抗肿瘤活性测试表明化合物4、5对肿瘤细胞有较明显的抑制作用。

摘要： 为研究具有抗肿瘤活性的植物内生真菌HCCB01546发酵产物中的活性成分,采用抗肿瘤体外细胞毒筛选模型进行活性检测,经溶剂萃取、硅胶柱、ODS柱层析及制备HPLC等分离手段得到活性物质HCCB01546-C及HCCB01546-D,通过理化性质及波谱分析,确定为分别为epoxycytochalasin H及cytochalasin N.并对两化合物进行了抗肿瘤活性测试,结果发现HCCB01546-C有较明显的抗肿瘤活性。

摘要： 本文首先究了植物南方红豆杉内生真菌在以微晶纤维为唯一碳源的液体培养基中的生长情况和发酵液的滤纸酶活，发现它们均能缓慢生长，培养8d 后滤纸为6.5～17.8μg 葡萄糖/ml·min；接着，从南方红豆杉、西藏柏木、马尾松等7 种植物内生真菌中共选出26 株菌，将它们培养在汽爆小麦杆:麸皮:水＝4:1:15的固态培养基中，观察它们的生长情况并测定了发酵曲的滤纸酶活，结果它们在该培养基中生长良好，它们的滤纸酶活为0.31～0.69IU/g 干物料。研究结果表明植物内生真菌有同化秸秆纤维素的能力，它们在秸秆的有效利用中将发挥重要的作用。

摘要： 本试验初步研究了植物内生真菌球毛壳(Chaetomium globosum)ND35抗生物质粗提物对植物生长性状的影响,子囊孢子在水中的存活及对植物根际土壤微生物的影响,对小白鼠、大白兔的毒性。研究结果表明,球毛壳ND35粗提物对黄瓜、菜豆和小麦的种子是安全的,并且能够显著增加须根数和根鲜重,促进种苗生长；对根际菌群体数量无显著影响；球毛壳ND35子囊孢子在水中能自行消解；对动物来说均属低毒级。因此,球毛壳菌ND35无毒、无污染,用于土传病害的生物防治无明显性风险。

摘要： 本发明公开了银杏内生真菌代谢产物在防治植物真菌病害中的应用，属于微生物农药技术领域。该发明包括：银杏组织的准备、表面消毒与无菌检测，内生真菌的分离与培养，有效菌株的筛选、发酵及杀菌药物的制备等步骤。本发明首次将银杏内生真菌发酵代谢产物应用于植物真菌病害的防治，为农用杀菌剂的开发增添了一个新的途径。

摘要： 本发明公开了一株对植物病原真菌具拮抗作用的植物内生细菌。具体所述植物内生细菌为解淀粉芽孢杆菌菌株BSY3，该菌株于2017年8月31日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2017463。该菌株BSY3对褐根病菌、美人蕉瘟病菌、油菜菌核病菌、白蝴蝶炭疽病菌、黑松叶斑病菌以及香蕉枯萎病菌等常见植物真菌具有明显的拮抗作用，对这些病原菌引起的真菌性病害具有显著的生防作用。而且，该菌株是来源于植物体内的内生细菌，相比传统的化学药剂防治法，对真菌性病害具有更加安全的生防效果；且其长期在植物体内，可与植物建立和谐共处、稳定发展的生存关系，可以更加有效、稳定地发挥其生物防治的功能。

摘要： 本发明公开了一株土栖棘壳孢(Setophoma terrestris)D2G24，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.20268；将该菌株运用于重金属铅、锌、镉的生物修复中；在重金属污染胁迫下，该菌株能够促进植物生长，促进植物对重金属的转移能力，对重金属镉和锌有较强的累积能力，适合大面积重金属镉、锌污染原位修复。

摘要： 本发明公开了一株黑附球菌（Epicoccum nigrum）FZT214，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.21045；将该菌株运用于促进植物种子萌发、幼苗生长中，实验证明在重金属污染胁迫下，该菌株能够促进植物种子萌发、幼苗生长、增加植物种子产量以及对重金属镉较强的累积能力，适合大面积重金属镉污染土壤Cd的原位修复。

摘要： 本发明公开了银杏内生真菌代谢产物在防治植物真菌病害中的应用，属于微生物农药技术领域。该发明包括：银杏组织的准备、表面消毒与无菌检测，内生真菌的分离与培养，有效菌株的筛选、发酵及杀菌药物的制备等步骤。本发明首次将银杏内生真菌发酵代谢产物应用于植物真菌病害的防治，为农用杀菌剂的开发增添了一个新的途径。

摘要： 本发明公开了一株对植物病原真菌具拮抗作用的植物内生细菌。具体所述植物内生细菌为解淀粉芽孢杆菌菌株BSY3，该菌株于2017年8月31日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2017463。该菌株BSY3对褐根病菌、美人蕉瘟病菌、油菜菌核病菌、白蝴蝶炭疽病菌、黑松叶斑病菌以及香蕉枯萎病菌等常见植物真菌具有明显的拮抗作用，对这些病原菌引起的真菌性病害具有显著的生防作用。而且，该菌株是来源于植物体内的内生细菌，相比传统的化学药剂防治法，对真菌性病害具有更加安全的生防效果；且其长期在植物体内，可与植物建立和谐共处、稳定发展的生存关系，可以更加有效、稳定地发挥其生物防治的功能。

摘要： 本发明属于作物病害防控技术领域，尤其涉及一种生防植物内生真菌DA‑1及其在经济作物灰霉病防治中的应用。具体而言，本发明公开了一种生防植物内生真菌DA‑1，为Arcopilus aureus，保藏编号为CGMCC NO.14156。本发明还同时公开了上述生防植物内生真菌DA‑1的用途：抑制灰葡萄孢菌菌丝生长；用于防治经济作物的灰霉病。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一株植物内生真菌及其应用。本发明公开了保藏编号为CGMCC NO.20237的新菌株Phialocephala fortinii 26R‑5，能够有效促进白菜、铁皮石斛生长和防治香蕉枯萎病的作用：接种该菌株后白菜的干重较对照组提高19.88％；铁皮石斛株高较对照组提高了18.92％、茎宽提高了43.94％、鲜重提高了59.09％、干重提高了28.57％、根长提高了2.68％；对植物的促生效果明显；对香蕉枯萎病的室内防治效果达56.27％；是一株具有良好促生、防病功能的新内生真菌菌株；能很好的利用在农业微生物菌肥、病害生物防治领域。

摘要： 本发明公开了一类来源于植物内生真菌的铁载体类化合物，结构式如下所示：所述铁载体类化合物是从粉红粘帚霉15020经过发酵培养分离获得。所述化合物具有抗耐药铜绿假单胞菌感染活性，可以提高线虫存活率。

摘要： 本发明属于作物病害防控技术领域，尤其涉及一种生防植物内生真菌DA‑1及其在经济作物灰霉病防治中的应用。具体而言，本发明公开了一种生防植物内生真菌DA‑1，为Arcopilus aureus，保藏编号为CGMCC NO.14156。本发明还同时公开了上述生防植物内生真菌DA‑1的用途：抑制灰葡萄孢菌菌丝生长；用于防治经济作物的灰霉病。