建兰

摘要： 【目的】对32份建兰品种资源的18个主要数量性状进行观测与分析,为建兰品种DUS性状科学判定方法的建立提供支持。【方法】以收集保存的32份建兰品种资源为试验材料,依据NY/T 2441-2013《植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南:兰属》(以下简称《兰属植物DUS测试指南》)中的测试要求,每个品种测量10株,每株取样1个,对建兰植株的大小(高度)和叶片数、叶长度和宽度、假鳞茎大小、花序花数量、花序梗长度和粗度以及花、中萼片、侧萼片、花瓣、唇瓣的长度和宽度共18个主要数量性状进行测量并采集数据,利用Excel和SPSS软件进行数量性状分级与各级分布频率分析、相关性分析、变异情况分析和主成分分析。【结果】根据《兰属植物DUS测试指南》中的分级数并结合实际情况对18个数量性状进行分级,将叶片数由5级改为3级,花序花数量由9级改为5级;根据各级的分布频率结果可知,18个数量性状中除植株大小是偏左的偏态分布外,其余17个数量性状较为符合不同峰度的正态分布。相比植株和叶片性状,花部性状间相关性更高,花长度、花宽度与萼片、花瓣、唇瓣长度呈极显著正相关,萼片宽度与花瓣宽度呈极显著正相关。32份建兰品种资源品种内变异系数均小于15%,稳定性较高,而品种间变异系数较大,变异丰富。通过主成分分析,选择出的分组性状为花长度、植株大小、萼片宽度、花序梗长度和假鳞茎大小,与《兰属植物DUS测试指南》中的分组性状部分吻合,可以增加花序梗长度作为分组性状。【结论】建兰种质资源品种内稳定性较好,品种间变异丰富,为种质资源创新利用提供了更大的选择潜力;DUS测试数量性状具有较大的不确定性,要结合标准品种或实际栽培品种来进行分级,并进行年度间的矫正;数量性状的分组性状可以通过主成分分析进行筛选。

摘要： 以赣南地区野生建兰蒴果为材料,研究了不同培养基对种子无菌萌发的影响以及NAA浓度对无菌芽生根的影响,并对建兰种子无菌萌发过程进行了观察。结果表明:添加外源植物生长调节剂6-BA、NAA以及适宜浓度的蔗糖能显著提高建兰种子的萌发率,建兰种子无菌萌发最适培养基为1/2 MS+8 g/L琼脂粉+60 g/L蔗糖+2.0 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-BA+1 g/L活性炭;当0.8 mg/L NAA与0.4 mg/L 6-BA组合时,无菌芽生根率最高,在90 d时最高可达80.50%;通过观察建兰种子无菌萌发过程发现,建兰种子在播种后到形成根状茎分枝大约要经历250 d。

摘要： 结合相关研究对建兰组织培养再生体系的培养基进行优化,筛选获得了建兰离体培养快繁的最佳培养基激素配方。结果表明:(1)建兰茎尖组织更适宜作为原球茎诱导的外植体材料;(2)原球茎最佳诱导培养基:MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.1 mg/L;(3)不定芽最佳诱导培养基:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;(4)生根最佳诱导培养基:1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。

摘要： 通过探究建兰红草红荷各部位器官的组织培养效果,对扩大建兰红草红荷繁殖及长期保持建兰红草红荷红色叶,增加其观赏价值及经济价值具有重大意义。本试验以建兰红草红荷为试验材料,将其叶片、根尖、鳞茎芽等作为外植体进行组织培养。结果表明,以鳞茎芽为组织培养外植体的效果优于叶片,叶片优于根尖,并且红色幼叶诱导成功率高于绿色成熟叶。

摘要： 对建兰花色形成的关键调控基因(CHS)编码区片段克隆至pET28a质粒,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3).SDS-PAGE检测表达产物,针对IPTG浓度、温度与时间等因素,优化其最佳诱导表达条件.结果显示:(1)总RN A提取质量高,经反转录成cDNA,设计引物通过PCR扩增,琼脂糖电泳显示片段为1200 bp;(2)对转化子进行菌落PCR与质粒双酶切鉴定,片段大小均为1200 bp与预计相符,经测序获得片段插入方向正确,未发生突变,可用于蛋白诱导表达;(3)诱导表达优化显示,温度为37°C、IPTG浓度1 mM及诱导时间6 h是重组子(pET28-CeCHS1)在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达的最佳条件.

摘要： 以30份不同来源的建兰种质资源为供试材料,测定其25个表型性状,计算其各性状的变异系数,并进行主成分分析和聚类分析,以期揭示建兰各品种间的亲缘关系及遗传差异.结果表明,30个建兰供试品种各表型性状的变异幅度为9.28％～76.17％,各表型性状间均存在较大程度的变异;表型性状聚类分析结果显示30个建兰供试品种欧式距离范围为3.612～38.796.'汇翠粉荷'和'峨眉水仙'的欧式距离最小,为3.612,表明二者的亲缘关系最近;'素君荷'和'富山奇蝶'之间的欧式距离最大,为38.796,表明二者的亲缘关系最远;其他材料之间的亲缘关系位于二者之间.对30个供试品种的表型性状使用层次聚类法进行树状图绘制,在欧氏距离为16处,30个建兰供试品种分成4个群集;主成分分析结果表明贡献值最大的花部性状有花葶高度、花长和唇瓣长等性状,均与花部质量有关,花部性状的综合评分表明广东佛山的'红君荷'花部综合特性最好,观赏价值最高,广东佛山的'水晶皇梅'综合特性最低.

摘要： [目的]为探究建兰Cymbidium ensifolium根系共生真菌群落结构及生物学功能.[方法]利用高通量测序技术和FunGulid数据库,对来自湖南省(HN)、福建省(FJ)、贵州省(GZ)和云南省(YN)的4个样品的野生建兰根围土壤、根表和根内3个生态位的共生真菌种群结构与功能进行鉴定和预测.[结果]建兰根系共生真菌分布在12门44纲103目241科432属中,优势门类为担子菌门Basidiomycota(49.51％)、子囊菌门Ascomycota(27.39％)和被孢霉门Mortierellomycota(20.22％),在属水平上,被孢霉属(Mortierella)(11.75％)、Saitozyma(11.45％)和Papiliotremna(7.93％)为优势属.不同建兰样品的真菌营养类型相差较大,但每个样品在根围土壤和根表间的真菌营养类型相似度高,根内菌均以腐生型为绝对优势类型(50.11％-85.98％),其中FJ样品较为特殊,3个生态位均以腐生营养型占绝对优势(85.98％-94.76％).根围土壤和根表都以病理-腐生-共生混合型真菌为主,除此之外GZ样品的共生营养型,YN样品的腐生型、共生型,HN样品的腐生型也均为各自的优势营养类型.[结论]建兰根系共生真菌种类多样性丰富,各样品和各生态位点间的共生真菌群落结构均存在极显著差异.建兰根系共生真菌存在的潜在有益真菌包括被孢霉属、红菇属(Russula)、Saitozyma、Papiliotrema、Cladophialophora等.该研究为揭示建兰根部与真菌的共生关系,以及为建兰共生真菌的开发利用提供了理论基础.

摘要： 初夏,建兰盛开,兰花谷芳香四溢。可是今年很奇怪,前往兰花谷采蜜的蜜蜂总会神秘失踪。一时间,大家都说兰花谷出现了吃蜜蜂的“兰花怪”,可怕极了。许多胆小的工蜂都不敢去兰花谷采蜜了。这到底是怎么回事,蜂后决定要弄个明白,她请来了黄蜂大侦探调查真相。

摘要： 为了解建兰花色多样性及其形成机理,对58个建兰品种的萼片进行了颜色表型分析和色素成分初步分析.结合目测分析、比色卡比色以及色差仪测色,将58个建兰品种的萼片分为4大色系,分别为紫红色系、红色系、黄绿色系和白色系.选择各色系的代表品种进行显色反应、类黄酮特征颜色反应和紫外-可见光谱扫描,分析不同花色系的建兰萼片中含有的色素成分.结果表明:白色系萼片中色素成分较为单一,不含叶绿素和类胡萝卜素,有黄酮类化合物存在;紫红色系和红色系的萼片所含的主要色素成分为类黄酮化合物和花色素苷;黄绿色系萼片所含色素种类最多,包括叶绿素、类胡萝卜素和黄酮类化合物等.该试验为建兰花色素成分的进一步研究以及建兰花色的形成机理奠定了理论基础,同时为建兰色花品种培育提供了参考.

摘要： 为揭示建兰种质间的亲缘关系,促进建兰种质资源的有效保护和利用.本研究利用ISSR标记分析了源于中国各地的39份建兰品种,并采用UPGMA方法进行了聚类分析.结果表明:6个ISSR引物对39份建兰品种的基因组DNA进行扩增,共扩増出64条清晰条带,其中57条为多态性条带.平均每条引物检测到的条带数为11条,多态性条带10条,多态性比率为89.88％.通过UPGMA法进行聚类分析表明供试材料的遗传相似系数在0.500～0.953之间,供试材料被分为6群集,说明ISSR标记在建兰的品种间具有丰富的多态性,能够很好地揭示建兰品种间的亲缘关系.本研究结果可为建兰种质资源品种鉴定及杂交育种等提供理论依据.

摘要： 建兰因其优雅的花姿和浓郁的芳香而备受人们喜爱,前期研究表明,建兰花香物质主要为茉莉酸甲酯(MeJA),其生物合成是通过十八烷途径完成的,丙二酰氧化环化酶(AOC)是MeJA合成的关键酶之一,对其进行转录调控和蛋白互作研究有助于阐明建兰花香释放的分子机理.本研究以建兰'小桃红'为材料,用染色体步移法克隆获得了CeAOC的启动子序列643bp,应用PLACE网站对其顺式作用元件进行在线预测,结果表明除具有启动子区的基本特征外,还分别在+219bp和+480bp处有两个G-box(5'-AAACGTGT-3')元件.通过RT-PCR技术,克隆了转录因子CeMYC2全长,cDNA序列长1509bp,编码503个氨基酸,具有典型的bHLH结构域.分别构建pAbAi-pAOC诱饵载体和pGADT7-MYC2酵母表达载体并进行酵母单杂交,结果表明CeMYC2可以和CeAOC的启动子区相结合.克隆了组成型光形态建成基因COP1的cDNA序列,全长为2073bp,具有环形锌指结合域和WD-40重复序列,构建酵母诱饵载体pGBKT7-COP1,并与pGADT7-MYC2进行酵母双杂交,结果表明CeCOP1和CeMYC2能产生互作.分别对CeMYC2和CeCOP1构建GFP瞬时表达载体,转化洋葱表皮细胞,结果表明均定位于细胞核;通过双分子荧光互补(BIFC)实验进一步验证了CeMYC2和CeCOP1能在洋葱表皮细胞核中互作.实验结果为进一步研究CeMYC2对建兰花香茉莉酸甲酯的释放及其下游基因的转录调控奠定了基础.

摘要： 以建兰三星蝶种子为外植体进行无菌萌发,结果表明:使用含5％活性氯的NaClO溶液处理建兰三星蝶种子20～30min,种子的萌发率较高;在含有6-BA和NAA的改良1/2MS培养基上所播的种子萌发率达到41.8％,种子萌发率较高.

摘要： 兰花花器官为独特的左右对称结构,第二轮花被为3个内瓣,且中间的内瓣高度特化成舌状,故称之为"唇瓣".唇瓣在形状和大小上往往不同于其同源的两个侧内瓣.在此研究中,利用双向电泳技术发现在建兰唇瓣和侧内瓣的蛋白谱比较中发现30个差异表达的蛋白.然后以建兰的转录组数据为基础,结合串联飞行质谱的指纹数据,鉴定到了21个蛋白,并得到了其对应的核酸序列.对这21个蛋白进行功能分析发现这些蛋白与苯基丙烷生物合成、固碳以及细胞壁形成等途径有关.这些基因与唇瓣特殊结构和功能的关系需要进一步研究,但这些信息为今后兰科植物唇瓣的研究奠定了基础.

摘要： 以建兰'银针'为材料,研究了不同浓度细胞分裂素(6-BA)和赤霉素(GA3),以及二者不同配比对建兰开花时间和开花数量的影响.结果表明:①与对照相比,6-BA处理可促进花芽分化,显著提高单株花芽数并增加单箭花朵数量,其中以200mg/L处理效果最佳,但对花期影响不大;②相比对照组,GA3处理促使植物开花,花期提前,并在一定浓度范围内随着GA3浓度增加,产花量增加.但超过一定浓度则会产生抑制作用,最适处理浓度为50mg/L.③在研究不同激素配比对建兰开花的调控作用时发现,相对于单激素处理,6-BA与GA3混合使用效果更为显著,其中以6-BA(100mg/L)+GA3(50mg/L)处理效果最佳,花期提前9天,花朵数量增加近1倍.此外,发现植物激素处理可抑制花莛伸长,缩短花间距,使花朵更加紧凑.因此使用最适浓度配比,对于产业化促进建兰高品质快速成花具有重要指导意义.

摘要： 建兰是兰属植物中的一种,香气袭人,具有很高的观赏价值.目前,其分子标记数量有限.为了开发可靠、有效的分子标记,本研究对建兰转录组数据进行SSR搜索,根据基元、长度和所在位置选取30个SSR进行引物设计.在10个建兰品种中尝试性地扩增,结果发现22个引物成功扩增,其中12个引物有多态性,其PIC范围为0.160～0.770,平均为0.371.然后对能成功扩增的30个SSR所在基因序列进行基因注释,发现29个比对上了数据库的序列.这12个多态性标记可用于建兰的遗传多样性、图谱构建和基因定位等研究,相应的基因注释信息丰富了这些标记的内涵.

摘要： 目前对兰属植物的分子生物学研究十分有限,其相关的基因序列也非常之少.为了研究挖掘花发育或者开花的相关基因,这里提取了建兰花苞和成花的RNA对其进行了测序,取得了9.52Gb去杂的数据,包含了98819349条reads.其中101423条isogenes序列,代表了51696个基因,含139385689个碱基对.对这些序列进行了功能注释分析,14612条isogenes有23类COG分类注释,41873条isogenes有58类GO注释,另外17542条isogenes含有292类KEGG途径注释,且发现了158和119个分别与花器官发育和开花相关的基因.这些信息为研究兰属的花发育以及开花机理的研究奠定了基础.

摘要： 本研究以转化建兰根状茎为材料,探究了各种浓度梯度的潮霉素对植物材料的影响,寻求最适筛选浓度.分别利用固体和液体两种培养方式对转化材料的筛选体系进行了探究.主要结果如下:固体培养基以0mg/1、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L、25mg/L、30mg/L、40mg/L建立潮霉素(hyg)浓度梯度和液体培养基以0mg/1、10mg/L、20mg/L、25mg/L、30mg/L、40mg/L、50mg/L建立潮霉素(hyg)浓度的梯度.结果发现不同的培养方式筛选效果不同,滤纸桥法褐化外植体死亡速度比固体法快近两倍,为保证筛选的真实有效,最终确定固体培养法40mg/L为筛选终浓度,时间需要30d左右.在上述的基础上,同时对羧卞青霉素(Carb)不同浓度的抑菌效果和对植物材料生长的影响也进行了探究.最后得出抑菌剂羧卞青霉素浓度为100mg/L时,可有效抑制农杆菌生长,同时不影响愈伤组织的出愈和生长.

摘要： 采用固相微萃取和GC/MS技术收集和鉴定了建兰“小桃红”花部的唇瓣、花瓣、萼片、蕊柱和蜜腺的挥发性香气成分.研究结果表明:小桃红花部共检测出31种倍半萜类、酯类、酮酚类、烃类等挥发性香气成分,其中主成分为茉莉酸甲酯,邻苯二甲酸二异丁酯,4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸,(Z,Z,Z)-4,6,9-十九碳三烯,2,6,10三甲基十四烷,1,1-双对甲苯基乙烷等.萼片、花瓣和蕊柱是香气释放的主要部位,香气释放总量为2116.46,898.08和2269.49ng·g-1·h-1,而唇瓣和蜜腺不是香气释放的主要部位,释香量仅为42.02和17.1ng·g-1·h-1,且蜜腺仅有邻苯二甲酸二异丁酯,唇瓣2,6,10三甲基十四烷(19.37ng·g-1·h-1)和十六酸(22.65ng·g-1·h-1)的释放.

摘要： 本发明公开了一种建兰愈伤组织的诱导方法，所述方法以建兰幼嫩子房作为外植体，以1/2LS作为第一培养基，明培养环境下诱导后，接着以N6作为第二培养基，在暗明交替的环境下继续培养，该方法诱导产生的愈伤组织能够实现继代培养，愈伤组织不易褐化死亡，且培养时间大大缩短，由12～18个月缩短至6～8个月，愈伤组织长势良好，色泽健康，同时诱导率极高。

摘要： 本发明公开了一种脱除建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的方法，包括以下步骤：以感染建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的蝴蝶兰组培苗为对象，在体视显微镜下取茎尖；茎尖放入在预培养基进预培养；用加载液加载茎尖；用冰冻保护液处理茎尖；将冰冻保护液处理后的茎尖投入液氮中进行超低温处理；将超低温处理后的茎尖放入卸载液进行卸载；处理完的茎尖放入再生培养基，再转入正常光照下进行培养；3个月后，茎尖顺利成苗。本发明能够提高茎尖成活率和再生率。

摘要： 本发明公开了一种建兰花序套状嵌合枝接法，将建兰花序通过冷藏推迟开花，冷藏后的建兰花枝接穗经处理，套状嵌合到砧木的孔中，用封口膜包扎嫁接口，嫁接后加强水分和光照管理。通过上述方法培育建兰，经验证：建兰的花序嫁接成活率达到90‑100%，开花率为100%，始花期为嫁接后第5‑7天，花期历长8‑16天，解决了调整建兰花期的问题，具有重要的实际应用价值。

摘要： 本发明提出和一种山地仿野生种养的建兰方法，利用1年1茬，树冠下袋栽种养，年初2‑3月份种植，每袋种1丛，每丛3株以上，每亩种养约2500袋，高温季节通过喷灌设施喷水降温，干燥季节通过喷灌设施喷水增加基地内湿度，年底收成时，每丛新增3‑5株；该方法种植的建兰长年累月生长在野外山地上，不管炎热的夏天，还是寒冷的冬天，都在野外生存，出圃进入消费者家庭，进入相对更加舒适的环境，更加容易种养。仿野生山地种养的建兰，因抗逆性强，即使普通的兰花爱好者，也容易种好、养好，让建兰产品走进千家万户，且经济效益显著。

摘要： 本发明公开了一种建兰愈伤组织的诱导方法，所述方法以建兰幼嫩子房作为外植体，以1/2LS作为第一培养基，明培养环境下诱导后，接着以N6作为第二培养基，在暗明交替的环境下继续培养，该方法诱导产生的愈伤组织能够实现继代培养，愈伤组织不易褐化死亡，且培养时间大大缩短，由12～18个月缩短至6～8个月，愈伤组织长势良好，色泽健康，同时诱导率极高。

摘要： 本发明提供了一种建兰茎腐病菌LAMP检测引物组及其快速检测方法。用于检测建兰茎腐病菌的LAMP引物组由1对外侧引物F3/B3和1对内侧引物FIP/BIP组成，F3/B3和FIP/BIP引物序列如SEQ ID.1‑4所示。包括以下步骤：1）提取待测样品DNA；2）进行LAMP扩增；3）使用荧光染料SYBR Green I对扩增结果进行显色或琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行检测。本发明能快速、方便、高效、高特异、高灵敏地检测到建兰茎腐病菌，不需要复杂昂贵的仪器，能较好地满足对建兰茎腐病菌的现场快速检测，可广泛应用于基层单位田间病害的早期诊断和病菌的监测、鉴定，为防治建兰茎腐病提供可靠的技术和理论依据。

摘要： 本发明公开了一种建兰种子的无菌播种快繁方法，包括以下步骤：步骤一、种子材料处理、消毒流程；取建兰9成熟未开裂的蒴果，用流水冲洗，然后用药棉沾75％酒精擦拭建兰蒴果，然后放在10倍漂白水浸泡震荡15分钟，然后用无菌水冲洗3‑4次，晾干水分，用无菌解剖刀将蒴果切开一个小口，将蒴果中的种子均匀的撒在培养基：美国花宝1号2‑‑4g/L+马铃薯10‑50g/L+香蕉5‑25g/L+活性炭1g/L中，本发明中建兰蒴果消毒成功率达到100％，建兰种子无菌播种，促使种子萌发获得根状茎，并探讨根状茎增殖、分化培养条件，探索出建兰金荷和建兰夏皇梅无菌播种快繁技术。

摘要： 本发明公开了一种建兰与火焰兰属间杂交快速高效培育兰花新品种的方法。该方法包括花粉收集及保存、人工授粉及杂交果实培育、杂种胚培养发育为根状茎、根状茎增殖培养、根状茎分化培养、不定芽生根成苗培养以及成苗移栽及栽培等步骤。本发明利用低温保存且无菌的具有活力的花粉解决兰花属间杂交花期不遇的瓶颈问题，利用胚拯救培养技术解决属间远缘杂交杂种胚发育不良的关键问题，通过单个杂种胚无菌培养发育为根状茎后进行相对应的根状茎克隆增殖培养，避免传统杂交育种年限长的缺点，可快速培育出兰花新品种。

摘要： 一种杂交建兰瓶内开花的培养方法，包括以下步骤：1、选取大且饱满的建兰杂交果荚消毒处理；2、将处理好的果荚切开接种到初代培养基；3、选取长势健康的龙根转接至增殖培养基培养；4、将分化苗转至生根培养基中继续培养；5、2～3个月后转至诱导开花培养基中培养，诱导开花培养基为：1/2MS+NAA0.2mg/l+6‑BA0.5mg/l+花宝2号1～3g/L+KH

摘要： 本发明公开了一种建兰花叶病毒株系，其全长基因组序列如SEQ ID NO:1‑10所示，其5'端亚基因组序列如SEQ ID NO:11‑21所示。本发明还公开了一种用于上述全长基因组序列和/或5'端亚基因组的体外转录载体、一种用于扩增上述全长基因组序列和/或5'端亚基因组的引物组合物及扩增方法、一种采用上述体外转录载体制备建兰花叶病毒的方法。本发明考虑自然状态下病毒株系准种的存在，通过本发明的方法获得了一种建兰花叶病毒株系的全长基因组序列及建兰花叶病毒株系的5'端亚基因组序列，其构建的载体制备的体外转录物具有侵染活性，这不仅增加了建兰花叶病毒基因组序列的丰富度，也为进一步深入研究建兰花叶病毒的基因重组、基因组功能及致病分子机理奠定了基础。