实时PCR

摘要： 本文对一例育成蛋鸡滑液囊支原体病的发病情况、临床症状、病理剖检变化、实时PCR检测、治疗方法等进行介绍,并对该病的危害、流行病学特点、防控措施等进行了讨论,为广大蛋鸡养殖场(户)防治该病提供参考。

摘要： 目的:探讨使用实时PCR检验高危型人乳头瘤病毒的价值.方法:纳入时间为2016年10月至2019年10月,纳入来我院就诊的患者58例,对所有患者行HCⅡ法诊断和PCR检验方法 诊断,计算2组患者的检验结果 .结果:对于CIN的Ⅰ~Ⅲ级阳性检出率相比于PCR诊断结果 无明显差异性(p＞0.05);采取PCR诊断的阳性检出率相比于HCⅡ法诊断结果 较高,组间差异性显著(p＜0.05).结论:使用实时PCR检验高危型人乳头瘤病毒,在诊断中具有较高的诊断价值,临床上应用价值显著.

摘要： 目的 评价甲状腺转录因子-1 (TTF-1)、p63、细胞角蛋白(CK)5、CK7等指标单独或联合应用在肺癌病理分型中的诊断价值.方法 通过经支气管镜针吸活检术获得肺癌病理组织标本,采用实时PCR法检测TTF-1、p63、CK5、CK7等标志物的表达水平.结果 与肺腺癌相比,肺鳞状细胞癌中TTF-1 (P=0.006)、CK7 (P=0.012)表达水平显著降低,p63 (P=0.008)、CK5 (P=0.025)表达水平显著升高.综合各指标建立综合评分诊断模型,计算综合评分(TS).TS诊断腺癌和鳞状细胞癌分型时,与各单个指标相比,具有最高的灵敏度(0.942)和特异度(0.841),诊断价值最佳.而与单因素指标相比,TS的腺癌检出率(P=0.040)、鳞状细胞癌检出率(P=0.013)及总检出率(P＜ 0.001)均显著升高.结论 利用经支气管镜针吸活检术获取肺癌患者病理组织,并应用实时PCR法检测肺癌分型重要分子标志物TTF-1、p63、CK7、CK5等的表达水平,能够对肺癌病理分型进行诊断分析,且综合运用各分子标志物的TS能够获得更高的诊断效率.

摘要： 根据表皮葡萄球菌16S基因片段序列,用Primer express 3.0设计一对特异性引物和一个TaqMan探针,建立表皮葡萄球菌实时荧光PCR检测方法.通过对梯度含量的表皮葡萄球菌标准菌液样品DNA和多种细菌的DNA进行实时荧光PCR检测,来检测其灵敏度和验证引物和探针的特异性.实验结果表明,只有表皮葡萄球菌产生扩增曲线,其他细菌无扩增,说明引物及TaqMan探针特异性较好,检测灵敏度为1×103 CFU/mL.该方法具有很好的研究价值和应用前景.

摘要： 目的:以实时荧光聚合酶链式反应(qPCR)筛查社区获得性肺炎患者中的支原体肺炎(MPP)病例,并归纳总结MPP在人口统计学、临床表现、实验室检测和影像学表现的特点.方法:选取大理大学大理教学医院(大理市第一人民医院)2017年8月至2018年2月间共182例以肺炎收住入院的患者为研究对象,以RepMP1基因设计引物,用qPCR方法检测研究对象的呼吸道标本,收集182例患者临床资料.结果:共有12例病例诊断为MPP阳性,通过对这些患者的住院信息分析,发现这些患者普遍存在发热症状,且C反应蛋白较非MPP者更高.结论:qPCR方法可快速检测MPP病例,且MPP患者C反应蛋白相比其他社区获得性肺炎更高,可为临床诊断和治疗提供一定参考.

摘要： 目的:以实时荧光聚合酶链式反应(qPCR)筛查社区获得性肺炎患者中的支原体肺炎(MPP)病例,并归纳总结MPP在人口统计学、临床表现、实验室检测和影像学表现的特点。方法:选取大理大学大理教学医院(大理市第一人民医院)2017年8月至2018年2月间共182例以肺炎收住入院的患者为研究对象,以RepMP1基因设计引物,用qPCR方法检测研究对象的呼吸道标本,收集182例患者临床资料。结果:共有12例病例诊断为MPP阳性,通过对这些患者的住院信息分析,发现这些患者普遍存在发热症状,且C反应蛋白较非MPP者更高。结论:qPCR方法可快速检测MPP病例,且MPP患者C反应蛋白相比其他社区获得性肺炎更高,可为临床诊断和治疗提供一定参考。

摘要： 背景:目前,通过腺病毒感染方法在细胞中构建蛋白质过表达模型的方法主要有2种,一是在腺病毒感染细胞4 h后补充1640完全培养基,24 h后换为完全培养基,再继续培养到48 h(方法Ⅰ);另一种是在腺病毒感染细胞4 h后用PBS洗去含有腺病毒的1640培养基,更换4 mL完全培养基培养到48 h,中间不做任何处理(方法Ⅱ).前者病毒的作用时间较长,感染效果较好,但病毒本身对细胞的损害程度较大,对实验模型的稳定性产生干扰.而后者病毒的作用时间短,对细胞的毒性低,但有时病毒感染效率较低,目的蛋白的表达效果欠佳.目的:在大鼠INS-1胰岛β细胞中,通过比较相同腺病毒载体介导的不同感染细胞的方法而寻找一种更加稳定而高效的硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin-interacting protein,TXNIP)过表达模型.方法:构建含有绿色荧光蛋白的腺病毒载体(Ad-GFP)和TXNIP过表达腺病毒载体(Ad-TXNIP-GFP).分别设立正常组、空病毒组和TXNIP过表达组,按照上述2种不同的方法进行病毒转染.结果与结论:①方法Ⅱ中的绿色荧光蛋白荧光强度和阳性效率高于方法Ⅰ;②方法Ⅱ中的细胞形态更好且细胞存活率更高;③方法Ⅱ中,目的基因TXNIP在mRNA水平和蛋白质水平的表达情况明显高于方法Ⅰ.由以上结果得出结论,腺病毒感染INS-1细胞4 h后,使用PBS将旧培养基洗去并更换新培养基,继续培养到48 h的方法更有利于在INS-1细胞中构建TXNIP过表达模型.

摘要： 目的:从结直肠癌症患者血浆中分离微量来源于肿瘤细胞的游离DNA，检测甲基化EphA7作为肿瘤标志。rn 方法：运用试剂盒提取血浆中微量游离DNA，并亚硫酸氢钠修饰DNA。根据修饰后的DNA序列，设计RphA7甲基化特异性引物和探针，利用Real Time PCR仪扩增甲基化EphA7基因。rn 结果：从大肠癌患者血浆中检出微量甲基化EphA7基因。rn 结论:应用荧光标记TaqMan探针Real Time PCR可以检测出结直肠癌患者血浆中微量游离DNA中甲基化EphA7基因，血浆甲基化EpgA7可能作为一种新的肿瘤标志物。

摘要： 目的:从结直肠癌症患者血浆中分离微量来源于肿瘤细胞的游离DNA，检测甲基化EphA7作为肿瘤标志。rn 方法：运用试剂盒提取血浆中微量游离DNA，并亚硫酸氢钠修饰DNA。根据修饰后的DNA序列，设计RphA7甲基化特异性引物和探针，利用Real Time PCR仪扩增甲基化EphA7基因。rn 结果：从大肠癌患者血浆中检出微量甲基化EphA7基因。rn 结论:应用荧光标记TaqMan探针Real Time PCR可以检测出结直肠癌患者血浆中微量游离DNA中甲基化EphA7基因，血浆甲基化EpgA7可能作为一种新的肿瘤标志物。

摘要： 目的:从结直肠癌症患者血浆中分离微量来源于肿瘤细胞的游离DNA，检测甲基化EphA7作为肿瘤标志。rn 方法：运用试剂盒提取血浆中微量游离DNA，并亚硫酸氢钠修饰DNA。根据修饰后的DNA序列，设计RphA7甲基化特异性引物和探针，利用Real Time PCR仪扩增甲基化EphA7基因。rn 结果：从大肠癌患者血浆中检出微量甲基化EphA7基因。rn 结论:应用荧光标记TaqMan探针Real Time PCR可以检测出结直肠癌患者血浆中微量游离DNA中甲基化EphA7基因，血浆甲基化EpgA7可能作为一种新的肿瘤标志物。

摘要： 目的:从结直肠癌症患者血浆中分离微量来源于肿瘤细胞的游离DNA，检测甲基化EphA7作为肿瘤标志。rn 方法：运用试剂盒提取血浆中微量游离DNA，并亚硫酸氢钠修饰DNA。根据修饰后的DNA序列，设计RphA7甲基化特异性引物和探针，利用Real Time PCR仪扩增甲基化EphA7基因。rn 结果：从大肠癌患者血浆中检出微量甲基化EphA7基因。rn 结论:应用荧光标记TaqMan探针Real Time PCR可以检测出结直肠癌患者血浆中微量游离DNA中甲基化EphA7基因，血浆甲基化EpgA7可能作为一种新的肿瘤标志物。

摘要： 目的:从结直肠癌症患者血浆中分离微量来源于肿瘤细胞的游离DNA，检测甲基化EphA7作为肿瘤标志。rn 方法：运用试剂盒提取血浆中微量游离DNA，并亚硫酸氢钠修饰DNA。根据修饰后的DNA序列，设计RphA7甲基化特异性引物和探针，利用Real Time PCR仪扩增甲基化EphA7基因。rn 结果：从大肠癌患者血浆中检出微量甲基化EphA7基因。rn 结论:应用荧光标记TaqMan探针Real Time PCR可以检测出结直肠癌患者血浆中微量游离DNA中甲基化EphA7基因，血浆甲基化EpgA7可能作为一种新的肿瘤标志物。

摘要： 目的:从结直肠癌症患者血浆中分离微量来源于肿瘤细胞的游离DNA，检测甲基化EphA7作为肿瘤标志。rn 方法：运用试剂盒提取血浆中微量游离DNA，并亚硫酸氢钠修饰DNA。根据修饰后的DNA序列，设计RphA7甲基化特异性引物和探针，利用Real Time PCR仪扩增甲基化EphA7基因。rn 结果：从大肠癌患者血浆中检出微量甲基化EphA7基因。rn 结论:应用荧光标记TaqMan探针Real Time PCR可以检测出结直肠癌患者血浆中微量游离DNA中甲基化EphA7基因，血浆甲基化EpgA7可能作为一种新的肿瘤标志物。

摘要： 对普通PCR和实时(reahime)PCR两种方法在饲料中牛、羊源性成分检测中的应用进行了比较.分别设计并合成相应的引物和探针,对饲料中的牛、羊源性成分进行检测.结果表明,用普通PCR最低可以从饲料中检出0.1%的牛、羊源性成分,realtime PCR最低可以从饲料中检出0.01%的牛、羊源性成分.

摘要： 对普通PCR和实时(reahime)PCR两种方法在饲料中牛、羊源性成分检测中的应用进行了比较.分别设计并合成相应的引物和探针,对饲料中的牛、羊源性成分进行检测.结果表明,用普通PCR最低可以从饲料中检出0.1%的牛、羊源性成分,realtime PCR最低可以从饲料中检出0.01%的牛、羊源性成分.

摘要： 对普通PCR和实时(reahime)PCR两种方法在饲料中牛、羊源性成分检测中的应用进行了比较.分别设计并合成相应的引物和探针,对饲料中的牛、羊源性成分进行检测.结果表明,用普通PCR最低可以从饲料中检出0.1%的牛、羊源性成分,realtime PCR最低可以从饲料中检出0.01%的牛、羊源性成分.

摘要： 对普通PCR和实时(reahime)PCR两种方法在饲料中牛、羊源性成分检测中的应用进行了比较.分别设计并合成相应的引物和探针,对饲料中的牛、羊源性成分进行检测.结果表明,用普通PCR最低可以从饲料中检出0.1%的牛、羊源性成分,realtime PCR最低可以从饲料中检出0.01%的牛、羊源性成分.

摘要： 为含有PCR溶液(3)构造的用于实时PCR的反应室(1)，所述室具有捕获分子(4)和窗口(7)，捕获分子(4)固定于室内表面上，所述表面构造成与PCR溶液(3)间歇接触，窗口(7)通过位于室外的阅读器(6)可以检测来自所述内表面的信号，并且其中固定化的捕获分子(4)是没有标记的。

摘要： 本发明涉及一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液及其反应体系和PCR方法,该一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液包括如下原料：三羟甲基氨基甲烷‑盐酸缓冲液、氯化钾、氯化镁、硫酸铵、二甲基亚砜、脱氧核糖核苷三磷酸、甘油、牛血清蛋白、吐温20、三氮化钠、Rox参比染料、去离子水。该一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液增加了NH4+和N3‑，提高PCR反应效率，适用于PCR技术的高效扩增型和灵敏检测，其不仅具有稳定性好，荧光效果佳、灵敏度高的优点。该实时荧光PCR方法，通过采用一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液配置成荧光RT‑PCR反应体系，其具有结果可靠和准确灵敏、操作简单、省时省力、降低检测成本，提高检查效率等优点。

摘要： 本发明公开了一种实时荧光PCR热循环装置及PCR仪，涉及生物实验仪器领域。实时荧光PCR热循环装置包括依次设置的隔板层、样品层和温控层；隔板层、样品层以及温控层形成闭环控制系统；隔板层以及温控层分别连接至样品层；温控层包括依次设置的均热层和供热层，供热层连接至均热层，均热层连接至样品层；均热层内部开设有真空腔体，真空腔体中设置有导热液。本发明提供的实时荧光PCR热循环装置及PCR仪通过导热液在均热层的真空腔体里吸收气化或者气相的导热液遇冷液化的往复循环以实现热传递，提高了整个加热面温度的均匀性，提高PCR反应的质量，提供更可靠的实验结果。

摘要： 本发明提供了一种实现PCR的微流控芯片，包括反应层，所述反应层内设有样本槽，所述样本槽周围设有多组反应区，每组反应区至少包括一反应槽，每个反应槽通过流道与样本槽相连，所述样本槽通过进样孔与外界相连。同时，本发明还提供了包含该微流控芯片的实时PCR的病毒快速检测装置。该微流控芯片不仅使用的样本剂量小、可靠性高，从而节约了使用成本；而且，可以根据不同的测试需要加入不同的检测试剂，从而达到标准化和规范化。同时，该检测装置不仅操作简单、使用方便，而且便于携带。

摘要： 公开了一种用于在PCR反应容器内进行实时PCR的热循环器模块和系统，热循环器模块包括：热块，所述热块包括用于接收PCR反应容器的器具；可移动盖子，所述盖子与所述热块重叠并且具有打开位置和闭合位置，所述可移动盖子能够在所述打开位置和闭合位置之间移动；激发光学组件，所述激发光学组件被配置成当所述PCR反应容器位于所述器具中时将激发光传到所述PCR反应容器；以及发射光学组件，所述发射光学组件被配置成当所述PCR反应容器位于所述热块的所述器具中时从所述PCR反应容器接收光；其中，所述热循环器模块被配置成在热循环器库中装配多个狭槽的一个。

摘要： 本发明提供一种植物免提取直接实时荧光快速PCR扩增稳定剂、PCR扩增组合物和PCR扩增方法，具体公开了一种植物免提取PCR反应的稳定剂，所述稳定剂包括MgCl

摘要： 为含有PCR溶液(3)构造的用于实时PCR的反应室(1)，所述室具有捕获分子(4)和窗口(7)，捕获分子(4)固定于室内表面上，所述表面构造成与PCR溶液(3)间歇接触，窗口(7)通过位于室外的阅读器(6)可以检测来自所述内表面的信号，并且其中固定化的捕获分子(4)是没有标记的。

摘要： 本发明涉及一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液及其反应体系和PCR方法,该一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液包括如下原料：三羟甲基氨基甲烷‑盐酸缓冲液、氯化钾、氯化镁、硫酸铵、二甲基亚砜、脱氧核糖核苷三磷酸、甘油、牛血清蛋白、吐温20、三氮化钠、Rox参比染料、去离子水。该一步法实时荧光RT‑PCR反应缓冲液增加了NH4

摘要： 本发明公开了一种实时荧光PCR热循环装置及PCR仪，涉及生物实验仪器领域。实时荧光PCR热循环装置包括依次设置的隔板层、样品层和温控层；隔板层、样品层以及温控层形成闭环控制系统；隔板层以及温控层分别连接至样品层；温控层包括依次设置的均热层和供热层，供热层连接至均热层，均热层连接至样品层；均热层内部开设有真空腔体，真空腔体中设置有导热液。本发明提供的实时荧光PCR热循环装置及PCR仪通过导热液在均热层的真空腔体里吸收气化或者气相的导热液遇冷液化的往复循环以实现热传递，提高了整个加热面温度的均匀性，提高PCR反应的质量，提供更可靠的实验结果。

摘要： 本实用新型公开了一种实现PCR的微流控芯片及实时PCR的细菌检测装置，所述检测装置包括光电倍增管，所述光电倍增管内部设置有滤光片一与滤光片二，所述光电倍增管下部依次设置有光阑、透镜组与物镜，所述透镜组与物镜之间设置有两向色镜，所述检测装置右侧设置有半导体激光器，所述半导体激光器与检测装置之间设置有扩束器与滤光片三，所述检测装置底部设置有芯片。采用半导体激光器作为激发光源，经二向色镜反射入物镜,被物镜聚焦后垂直入射芯片的分离通道内,从而激发出荧光，提高了检测的效率，同时荧光信号经光电倍增管收集后由记录仪记录，可实时的了解检测的信息，提高了工作的效率。