荧光定量

摘要： 目的比较抗酸染色和荧光定量聚合酶链反应(PCR)对结核病的诊断价值。方法选择2019年11月至2020年11月在医院开展检查的100例疑似肺结核患者的痰液样本作为研究样本,对所有痰液样本均分别实施抗酸染色与荧光定量PCR检测,并以结核分枝杆菌培养结果为判断肺结核阳性的主要标准,统计全部患者的结核分枝杆菌培养结果,分析抗酸染色和荧光定量PCR检测的检出情况,比较两种检测方式的阳性检出率及诊断效能。结果结核分枝杆菌培养结果显示,100例疑似肺结核患者中,肺结核阳性90例(90.00%)、阴性10例(10.00%)。抗酸染色检测结果显示,肺结核阳性58例、阴性42例;荧光定量PCR检测结果显示,肺结核阳性86例、阴性14例。抗酸染色检测的阳性检出率为58.00%,低于荧光定量PCR检测的86.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。抗酸染色与荧光定量PCR检测的诊断灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为61.11%、70.00%、94.83%、16.67%、62.00%及94.44%、90.00%、98.84%、64.29%、94.00%;荧光定量PCR检测的诊断灵敏度、阴性预测值及准确度均高于抗酸染色检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论荧光定量PCR检测能够提升对肺结核的阳性检出率及诊断效能,为疾病早期诊断及开展个性化治疗提供参考依据。

摘要： 目的探讨研究本地区先兆性流产与亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性的关系。方法选取2019年4月至2020年5月于本院就诊的380例先兆流产患者作为先兆流产组,另选取同期孕期各项检测指标均正常且无任何不良妊娠疾病的孕期女性508名作为正常对照组。抽取两组外周血,提取基因组DNA,采用荧光定量PCR方法检测MTHFR基因多态性。结果两组MTHFR C677T基因型构成,C、T基因型、频率分布比较差异均无统计学意义。结论本地区亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T位点生突变与先兆性流产并无明显的相关性。

摘要： 为探究粪肠球菌CylA基因对血脑屏障的影响,本试验选取粪肠球菌的CylA为目的基因,用PCR技术获取CylA基因片段与pMD@19-TSimpleVector过夜连接后转化至Dh5α中,经含Amp培养基筛选后进行PCR扩增并鉴定,对阳性菌株进行培养并提取其质粒,用酶BamhⅠ和酶XhoⅠ对提取的质粒和pcDNA3.1/Myc-his分别进行双酶切,将阳性质粒转染至鼠脑微血管内皮细胞中。采用实时荧光定量PCR和WesternBlot技术对鼠脑微血管内皮细胞中CylA的表达进行检测及验证。结果显示,CylA全长约707bp。重组真核质粒经双酶切后分别得到一条5500bp和700 bp左右的条带。荧光定量结果显示,CylA基因42 h差异不显著(P> 0.05);30、36、48 h差异显著(P <0.05),且36 h的表达量最低。同时WesternBlot也扩增出阳性条带。由此可知,粪肠球菌CylA基因可在鼠脑微血管内皮细胞中表达,并呈现先下降后上升的趋势。本试验为进一步研究其致病机制提供理论参考。

摘要： 为解析AglaRpS8功能特征及在光肩星天牛生长发育过程中的作用机制,通过克隆核糖体蛋白基因AgRpS8的ORF全长序列,采用生物学信息方法分析AglaRpS8基因的理化性质、结构及功能特征;利用荧光定量PCR检测该基因在不同发育阶段的表达特征。结果表明:AglaRpS8基因ORF区长度627 pb,编码个208氨基酸,无跨膜区螺旋结构,具6个Motif结构域,该基因等电点5.21,分子量大小为49.99 KDa,与AmRpS8基因同源性最高,与TcRpS8-like和TcRpS8基因亲缘性最近。AglaRpS8基因在光肩星天牛不同发育阶段存在显著的差异性表达,在幼虫1~2龄期,3~4龄期,5龄期相对表达量较平稳,在光肩星天牛成虫期相对表达量较低,而在光肩星天牛雌虫交配后怀卵的阶段相对表达量达到最高值。

摘要： 【目的】验证梭梭NAC转录因子基因(HaNAC12)的抗逆功能,以期解析梭梭响应逆境胁迫的分子机制,为梭梭及其他作物抗逆遗传改良提供理论参考。【方法】通过实时荧光定量PCR对HaNAC12基因在干旱、高盐、ABA处理下的表达模式分析。利用同源重组法、农杆菌介导喷花法、喷洒除草剂等方法构建并筛选HaNAC12转基因拟南芥阳性植株,在不同胁迫处理后测定其与野生型(WT)在萌发率、气孔开度、相对含水量、株高、生长速率和生理指标等方面的差异,并以正常生长的植株为对照,验证HaNAC12基因在拟南芥逆境胁迫下的抗逆功能。【结果】HaNAC12基因相对表达量在干旱胁迫12 h时极显著高于0 h(P<0.01,下同),盐胁迫1 h时极显著高于0 h,ABA处理3和12 h均显著高于0 h(P<0.05,下同)。筛选获得3个高表达量的T3代转基因株系HaNAC12-1、HaNAC12-2和HaNAC12-3。种子干旱胁迫后WT的最终萌发率为45.00%,3个转基因株系的最终萌发率为66.11%~85.00%;种子盐胁迫后WT的最终萌发率为36.42%,3个转基因株系的最终萌发率为49.38%~58.64%。自然干旱和高盐胁迫下WT出现明显的干枯、枯黄现象,而3个转基因株系未出现干枯;自然干旱胁迫下3个转基因株系出现了提前抽薹、早花等生殖发育加速现象,且植株生长速率比WT快。苗期自然干旱胁迫后WT的气孔开度缩小67.54%,3个转基因株系的气孔开度分别缩小了91.08%、83.14%和85.04%,且HaNAC12-1、HaNAC12-2和HaNAC12-3株系的相对含水量显著或极显著高于WT。干旱和盐胁迫后3个转基因株系的丙二醛含量、脯氨酸含量、过氧化氢含量、过氧化氢酶活性均较胁迫前明显上升,其中,脯氨酸含量和过氧化氢酶活性上升幅度较WT大,而丙二醛含量和过氧化氢含量上升幅度较WT小。【结论】拟南芥过表达HaNAC12基因可增强拟南芥在萌发期和苗期对干旱和高盐胁迫的抗性,干旱胁迫可促进拟南芥开花,说明HaNAC12基因可提高转基因拟南芥的抗旱和耐盐性。

摘要： 通过荧光定量实验选定一系列浓度不同的标准品,分别在国产和进口遗传分析仪上进行平行实验,结果表明二者之间无明显差异,国产遗传分析仪的主要技术指标能满足检案需求。

摘要： 为探究乌苏里白鲑Coregonus ussuriensis Berg肝脏表达抗菌肽Leap-2基因的分子结构和表达特征,采用PCR技术从乌苏里白鲑(体质量为30.0 g±1.2 g)肝脏组织中扩增Leap-2基因的开放阅读框(ORF),使用生物信息学软件对其编码的氨基酸序列进行分析,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其在健康组织及嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila、杀鲑气单胞菌Aeromonas salmonicida和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus感染后的组织表达变化。结果表明:采用PCR方法从乌苏里白鲑肝脏中克隆得到Leap-2基因的ORF区(GenBank:MZ170050),片段长度为276 bp,可编码91个氨基酸,其成熟肽区域包含4个高度保守的半胱氨酸残基;系统进化分析显示,乌苏里白鲑的Leap-2氨基酸序列与银鲑Oncorhynchus kisutch的亲缘关系较近,且具有较高的同源性,一致性为96.7%;乌苏里白鲑肝脏中的Leap-2基因表达量最高,其次为肠和肾,肌肉中的基因表达量最低;3种细菌感染导致Leap-2在各组织中的表达均有所上调,Western blot检测也显示,Leap-2蛋白水平在24 h内表达上调。研究表明,Leap-2基因参与了乌苏里白鲑应对外源干扰的免疫反应,本研究结果可为解析乌苏里白鲑应对病原体的免疫应答机制提供科学参考。

摘要： 目的:探讨微小RNA-181a (miR-181a)、TGFβR2在食管癌细胞ECA109中的表达水平及其意义。方法:采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测HEEC、ECA109细胞株中miR-181a的表达情况。miR-181a模拟物(miR-181a mimics)、miR-181a抑制物(miR-181a inhibitor)转染食管癌细胞系ECA109。RT-qPCR检测各组miR-181a的表达水平。采用CCK8检测miR-181a对EC109细胞增殖能力的影响。采用RT-qPCR、Western Blot检测TGFβR2mRNA及其蛋白的表达水平。结果:与正常食管上皮细胞株相比,食管癌细胞株ECA109中miR-181a的表达水平明显升高。与阴性对照组相比,在miR-181a mimics组,食管癌细胞ECA109中miR-181a的表达水平明显升高,且细胞增殖能力增强。miR-181a inhibitor组,食管癌细胞ECA109中miR-181a的表达水平明显降低,且细胞增殖能力降低。与阴性对照组相比,miR-181a mimics组,食管癌细胞ECA109中TGFβR2mRNA及其蛋白的表达水平明显降低。miR-181a inhibitor组,食管癌细胞ECA109中TGFβR2mRNA及其蛋白的表达水平明显升高。结论:miR-181a在食管癌细胞ECA109中高表达,通过影响TGFβR2的表达参与食管癌的发生发展。

摘要： [目的]拟克隆朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶TecCDA3并对其进行表达特征分析.[方法]采用同源基因克隆技术克隆TecCDA3,通过实时荧光定量PCR技术分析其表达特征.[结果]成功克隆朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶TecCDA3 (GenBank No.MK779705),其开放阅读框长度为1 611 bp,共编码536个氨基酸,含有3种结构域,根据同源性和发育树分析判定其属于几丁质脱乙酰基酶家族Group Ⅱ.TecCDA3在成螨时期表达量最高,在幼螨时期表达量最低,呈现先下降后升高的表达趋势.[结论]克隆得到朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶TecCDA3并对其表达特征进行分析,丰富朱砂叶螨几丁质脱乙酰基酶基因家族.

摘要： 目的:为猪场实验室提供科学的非洲猪瘟病毒核酸诊断试剂盒选择方案.方法:选择4种非洲猪瘟核酸检测试剂盒,通过对比梯度稀释后标准物质的线性扩增、对低含量时(20 copies/μL)的敏感性、对以纯水为样本时假阳性检出率.结果:线性扩增试验中,A试剂盒对20 copies/μL浓度的标准品检测率为100％(3/3),其他试剂盒对该浓度下的标准品,均未达到100％;低含量敏感性试验中,A试剂盒阳性检出率为91.67％(44/48),其他厂家试剂盒的检出率分别为85.42％(41/48)、79.17％(38/48)、58.33％(28/48);假阳性试验中,A和B未出现阳性反应,而C、D试剂盒分别出现2、1个非特异性反应.结论:经过性能比较,A试剂盒更符合猪场实验室对于高敏感性和低假阳性的要求.

摘要： 本文介绍了荧光定量PCR分析仪的工作原理和结构特点,提出了该仪器的温度性能校准项目,以及一种基于光学模拟的校准方法.通过采用可变光强的PCR温度校准仪和PCR荧光校准仪,合理布置温度传感器和LED光源位置,对荧光定量PCR分析仪的温度控制性能和定量准确度进行了校准,并对可能影响校准结果的不确定度分量做了说明.

摘要： 猪繁殖与呼吸障碍综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的疾病.目前PRRSV的检测方法主要是RT-PCR和ELISA,但是RT-PCR存在假阳性、灵敏度低的缺点、ELISA步骤较多检测所用时间较长.本研究通过荧光定量检测PRRSV方法的建立,为猪场提供一种快速准确的检测方法.结果:(1)通过引物浓度、反应条件优化得到了荧光定量PCR检测PRRSV反应的最适体系和条件:体系:SYBR Primix Ex TaqTM 10μL，上下引物终浓度0.5μM，模板8.5μL;反应条件95°C 3min,40cycles;95°C 6s,55°C 7s,72°C 13s;(2)建立了标准曲线Ct值=-3.323*1g拷贝数+30.898,R2=0.998线性关系良好，扩增效率E=100%。(3)灵敏度检测发现，荧光定量方法最低可以检测出102copies/μL，远大于普通RT-PCR的灵敏度。本研究建立了荧光定量的方法检测PRRSV，与普通RT-PCR相比荧光定量不需进行电泳，因此减少了PCR产物污染造成假阳性的缺点;本方法可以在3h内完成，步骤较简单，比ELISA方法用时少且成本较低。

摘要： 人鼻病毒(HRV)是单股正链小RNA病毒,其编码的3C蛋白酶属于半胱氨酸蛋白酶家族,可以识别多肽序列LEVLFQ△GP,并在Gln和Gly之间进行切割.HRV3C蛋白酶具有特异性强,酶活高等特性,即使在4°C低温条件下依然有较高的酶活.

摘要： NOD1是天然免疫胞内模式识别受体NLR家族的一个重要成员.其在先天性免疫反应中参与炎症反应和细胞凋亡过程,也与一些炎症性疾病的发生有关.但目前在禽类中相关研究报道较少,本文采用荧光定量的方法,检测了NOD1基因在不同发育时期AA肉鸡几种免疫器官中的表达量,分析NOD1基因的表达特性,为NOD1基因的在鸡体免疫系统中的功能研究奠定理论基础.NOD1基因在鸡的几个免疫组织的不同发育阶段均有表达，且鸡Nod1基因在免疫器官中的表达量变化具有组织和时间特异性，提示Nod1基因在这几种免疫器官发育的不同时期可能具有重要作用。

摘要： 本研究应用免疫组织化学和荧光定量PCR的方法来研究绵羊肺腺癌和正常绵羊肺组织中醛缩酶A的表达量。材料是从实验室里保存的16个经检测己经确定为自然感染绵羊肺腺癌的肺脏中随机选取4个肺脏，再从实验室里保存的非疫区的健康绵羊肺组织4例。采用Image-Pro Plus图像分析软件对免疫组化结果中醛缩酶A表达的光密度和阳性单位(PU)进行定量测试，同时采用荧光定量PCR的方法来对绵羊肺腺癌和正常绵羊的肺脏检测醛缩酶A mRNA的表达。结果显示，醛缩酶A在正常肺组织的支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞和肺腺癌组织的肿瘤细胞的细胞质中均有明显表达。醛缩酶A在绵羊肺腺癌组的平均光密度值显著高于正常绵羊肺组织组(P＜0.05)，绵羊肺腺癌组醛缩酶A的平均光密度值约是正常组的3.7倍，醛缩酶A在绵羊肺腺癌组的PU值(阳性单位)极显著高于正常绵羊肺组织组(P＜0.01)，绵羊肺腺癌组醛缩酶A的PU值约是正常组的2.6倍。2-△△CT法分析荧光定量PCR的结果，绵羊肺腺癌组中醛缩酶A也是正常绵羊组的1.22倍。结果说明醛缩酶A在绵羊肺腺癌中过表达。

摘要： 为探讨青蒿素对柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)卵囊排出量以及第二代裂殖子微线基因(EtMIC)mRNA表达量的影响,在雏鸡人工感染E.tenella后第6、7d分别采用麦克马斯特计数法计算感染鸡球虫卵囊的排出量(OPG),并用荧光定量PCR方法检测第二代裂殖子中微线基因(EtMIC1、EtMIC2、EtMIC3、EtMIC4,EtMlC5)的相对表达量.结果表明:与感染对照组比较,青蒿素给药组的OPG值显著减少,同时5种微线基因中EtMIC1、EtMIC2、EtMIC4、EtMIC5的mRNA表达水平均显著下调(P＜0.05),EtMIC3则极显著下调(P＜0.01).以上结果说明青蒿素可能是通过降低球虫第二代裂殖子EtMIC mRNA的表达而间接减少了球虫感染鸡卵囊的排出量.

摘要： 小肠结肠炎耶尔森菌(YE菌)和空肠弯曲杆菌(空弯菌)是一种在世界范围内广泛流行的人畜共患病的病原菌,主要引起人类的急性肠炎.YE菌能在冷藏温度下(0—4°C)生长繁殖,俗称"冰箱菌".韩国和加拿大对我国出口的实验猴提出了YE菌检疫要求.空弯菌已经取代沙门氏菌成为发达国家最常见的腹泻病病原菌之一,将来某些国家很可能提出该菌的检疫要求.猴YE菌GB标准检验耗时过长,仅增菌步骤需要3周时间.空弯菌是微需氧菌,培养条件苛刻,难以培养成功.以上两种细菌的检验方法存在着较大的技术上的缺陷和操作上的困难,难以适应实验动物检疫准确快捷的要求.

摘要： 本文利用环介导恒温扩增(LAMP)和实时荧光定量PCR技术成功鉴定了赤潮微藻微小原甲藻(Prorocentrum minmum),并对这两种方法进行了特异性和敏感性验证.LAMP方法特异性检验显示,只有微小原甲藻为阳性扩增，其他对照藻类均为阴性；敏感性检验表明,LAMP方法的敏感度是常规PCR的10倍,最低检测限仅为36 pg DNA.实时荧光定量PCR最低检测限度为0.1个细胞,能够检测到10 pg DNA.利用荧光定量PCR方法建立的标准曲线对微小原甲藻进行计数，与显微镜计数结果非常一致。为进一步验证这两种方法在室外检验的可行性，进行了初步模拟现场样品检测，以含目标藻超声波破碎藻液与其他藻液的混合物为阳性对照模板，不含目标藻的藻液混合物为阴性对照模板，结果可以看出，其他藻的存在对目标藻的LAMP扩增和实时荧光定量PCR扩增没有任何影响。总之，LAMP方法特异性和灵敏度高，检测速度快，整个过程在1个小时内完成，操作简单，设备要求低，特别适合于现场检测；实时荧光定量PCR方法精确度和灵敏度高，稳定性和重复性好，适合于实验室内检测。

摘要： 目的:建立一种检测猪细小病毒(PPV)的荧光定量PCR方法,并应用于病毒去除工艺验证,评价在血液制品生产过程中辛酸沉淀及纳米膜过滤去除病毒的效果。方法:用上游引物(PI)5'-CCA AAA ATG CAA ACC CCA ATA-3,和下游引物(P2)5'-TCT GGC GGT GTT GGA GTT AAG-3',在95W3min、95°C10s60 W10s条件下扩增40个循环,建立检测样品中PPV含量的QPCR方法并验证该方法的专一性、重复性和灵敏性;用该方法检测辛酸沉淀及纳米膜过滤去除制品中PPV的效果。结果:该方法实验内和实验间的精密度均小于5％,最低检测限为102copies/μl;辛酸处理可使样品中PPV滴度下降5Logs;不同公司生产的20nm膜滤器在过滤量及过滤效果方面有明显的差异,其中S公司生产的滤器效果最好,可使样品中的PPV滴度下降4Logs.结论:成功建立了具有良好专一性、重复性和灵敏性的荧光定量PCR方法。

摘要： 在本研究中，发现了一种可以降低质体和线粒体DNA的污染的方法。通过qPCR技术和质粒文库的构建，均可以证明处理方法的显著性。把CTAB法提取的细胞总DNA和利用细胞核分离方法获得的核DNA相比，通过核分离的方法可以减少质体和线粒体的污染。从qPCR的结果来看，CTAB法分离得到的质体:线粒体:核的拷贝数是325∶190∶1，细胞核分离的方法分离得到的质体:线粒体:核的拷贝数是244∶134∶1，从质粒文库的测序结果来看，细胞核的含量从32%提高到了71%。坛紫菜叶片经过黑暗和抗生素的处理，质体:线粒体:核的比例是134:217:1，核DNA占了总DNA的88%。本研究的目的是为了探索一种有效的方法来获得高质量的核DNA。高质量的核DNA的制备，不仅可以促进坛紫菜基因相关的工作，但也可以大大减少测序的成本，并提高测序精确度。

摘要： 本发明涉及荧光定量检测领域，提供了一种高灵敏度荧光定量检测血清肿瘤标志物的纳米复合探针，所述纳米复合探针包括负载待检测血清肿瘤标志物二抗和DNA酶链的金纳米粒子。本发明提供的纳米复合探针，以金纳米粒子为载体，负载了高催化特性的脱氧核酶，形成的复合物既保留了脱氧核酶的高催化特性和识别能力，又引入了纳米材料的信号转导功能，实现了识别与信号转导功能的一体化。结合肿瘤标志物高效的特异性识别功能、脱氧核酶的高识别和催化特性结合以及金纳米粒子的信号转导和荧光放大功能显著提高了荧光定量检测的灵敏度和特异性，检测灵敏度可达到0.01ng/mL。

摘要： 本发明提供了一种三重荧光定量PCR引物探针组与三重荧光定量PCR试剂盒，涉及生物技术领域。本发明的PCR引物探针组包括SEQ ID NO.1所示的APP‑F、SEQ ID NO.2所示的APP‑R、SEQ ID NO.3所示的APP‑探针，SEQ ID NO.4所示的HPS‑F、SEQ ID NO.5所示的HPS‑R、SEQ ID NO.6所示的HPS‑探针，SEQ ID NO.7所示的Pm‑F、SEQ ID NO.8所示的Pm‑R、SEQ ID NO.9所示的Pm‑探针。将该引物探针组制备成试剂盒，可特异的同时检测APP、HPS和Pm，灵敏度能达到10拷贝/μl。

摘要： 本发明公开了一种可同时检测多种微生物的多重荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：第一步，以待测样品的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；第二步，检测扩增产物的荧光信号；第三步，以检测结果的Ct值判定样品中是否含有大肠埃希氏菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、诺如病毒GI、诺如病毒GII和轮状病毒。本发明还公开了一种可同时检测多种微生物的多重荧光定量PCR检测试剂盒，可以用于定性检测蔬菜中是否含有大肠埃希氏菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、诺如病毒GI、诺如病毒GII和轮状病毒。

摘要： 一种用于检测水貂圆环病毒的荧光定量PCR引物组和荧光定量PCR试剂盒，涉及水貂圆环病毒检测领域，包括：MiCV荧光定量PCR反应液、阳性质控品和阴性质控品；MiCV荧光定量PCR反应液包括上下游引物、TBPremix Ex TaqTMII和ddH2O；上游引物：5'‑AGGGCCTTTGGGCATCATTG‑3'；下游引物：5'‑CCCGCCTGCAAACTGAAGAA‑3'。本发明根据水貂圆环病毒的Cap基因保守序列设计引物，通过反应体系和条件优化建立了基于SYBR Green II的实时荧光定量PCR技术并组装试剂盒，该试剂盒具有稳定性好、敏感性和特异性较高等优点。

摘要： 本发明属于D型流感病毒检测技术领域，具体涉及D型流感病毒荧光定量PCR与LAMP荧光定量PCR引物对及其应用。D型流感病毒主要感染动物中包括猪和牛，对畜牧业的发展具有一定的威胁，提供稳定可靠的检测方法具有重要的意义。本发明提供了一种用于D型流感病毒实时荧光定量PCR检测的引物序列及相应的试剂盒，该引物针对D型流感病毒HE基因中的保守序列进行设计，能够实现良好的检测特异性和灵敏度，敏感性比普通PCR和荧光定量LAMP均高100倍，可以实现大量通用样品的检测，可对D型流感病毒进行快速、高敏感度的实时荧光定量PCR检测，对于提高D型流感病毒的检测精度具有重要的意义。

摘要： 本发明涉及荧光定量检测领域，提供了一种高灵敏度荧光定量检测血清肿瘤标志物的纳米复合探针，所述纳米复合探针包括负载待检测血清肿瘤标志物二抗和DNA酶链的金纳米粒子。本发明提供的纳米复合探针，以金纳米粒子为载体，负载了高催化特性的脱氧核酶，形成的复合物既保留了脱氧核酶的高催化特性和识别能力，又引入了纳米材料的信号转导功能，实现了识别与信号转导功能的一体化。结合肿瘤标志物高效的特异性识别功能、脱氧核酶的高识别和催化特性结合以及金纳米粒子的信号转导和荧光放大功能显著提高了荧光定量检测的灵敏度和特异性，检测灵敏度可达到0.01ng/mL。

摘要： 本发明提供了一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法，将包含有PCR引物的反应体系进行荧光定量PCR反应；PCR引物包括上游引物和下游引物；反应体系包括以下组分：上游引物，下游引物，SYBR Premix Ex TaqⅡ，ROX Reference DyeⅡ，样品DNA模版，ddH

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种荧光定量PCR反应液及试剂盒和荧光定量PCR方法。所述荧光定量PCR反应液，包括如下的原料制备而成：二甲亚砜，牛血清蛋白，DNTP，10×SYBR荧光染料，10×PCR buffer，溶质体积百分数为30％的甘油溶液和Ex-Taq酶。本发明优化了PCR实验的荧光定量PCR反应液，特别是加入一定比例的甘油溶液，以保证Ex-Taq酶的活性，加入BSA与DMSO的组合保证了Tag酶的稳定性及活性并减少引物二聚体的形成，减少荧光定量PCR反应液配置时间，所得PCR反应液可以长期保存在-20°C中，使用方便。

摘要： 本实用新型公开了一种荧光定量PCR光学激发装置及成像装置、荧光定量PCR仪，其中荧光定量PCR光学激发装置包括光源，该光源的出光方向上设有激发光滤光片和二向色镜，还包括设于激发光滤光片与二向色镜之间的光均匀化透镜组；所述光均匀化透镜组包括平行透镜、复眼透镜和积分透镜，激发光滤光片、平行透镜、复眼透镜、积分透镜、二向色镜沿光源的出光方向依次设置；所述光源为宽光谱光源。本实用新型能够获得照度均匀的激发光，并能够在不同的光谱通道进行检测，使用寿命长，光源更换次数少；成像效果好；尤其适用于微流体芯片的荧光定量PCR检测。

摘要： 本实用新型涉及一种POCT荧光定量分析仪的光路系统及POCT荧光定量分析仪，光路系统包括激发光源、用于调整激发光源发出的光的光斑大小的光源整形光路及荧光接收光路，光路系统还包括转动设置的二向分光镜，二向分光镜用于反射经光源整形光路后的光且透射荧光，激发光源发出的光经光源整形光路后照射到二向分光镜，二向分光镜将经光源整形光路后的光反射到试纸条的检测线以激发检测线上的荧光，荧光被二向分光镜透射后被荧光接收光路接收，二向分光镜的转动使光能够反射到试纸条的不同检测线上。本实用新型的光路系统采用转动设置的二向分光镜，实现对试纸条上的检测线进行逐条顺序扫描检测，简洁化了光学扫描机构的结构设计，避免了较复杂的直线传动扫描方法。