十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳

摘要： 本刊在医学论文实际应用中,新增了一些熟悉的常用词汇,并允许大家直接使用缩写,即第一次出现时可以不标注中文,这些可直接缩写的常用词汇如下:原发肿瘤-区域淋巴结-远处转移(TNM)、蛋白质印迹法(Western blot)、细胞计数检测(CCK-8)、增强化学发光(ECL)、四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)

摘要： 为研究不同生长阶段小尾寒羊股二头肌中肌球蛋白与肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)异构体相关基因的内在变化规律,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术对自然放牧条件下1~18月龄小尾寒羊股二头肌MyHC进行分离,测定其相关基因的相对表达量。结果表明:小尾寒羊股二头肌中肌球蛋白含量总体呈现上升趋势,9月龄达到最大值;MyHCⅠ基因相对表达量随着月龄的增加呈现下降趋势,MyHCⅡa基因相对表达量与月龄呈正相关,MyHCⅡb基因相对表达量总体呈现先减后增的趋势,MyHCⅡx基因相对表达量9月龄最低,12月龄最高;MyHCⅠ基因相对表达量在6~9月龄变化较大,说明6~9月龄生长变化较快,9~12月龄变化较小,说明9~12月龄生长缓慢。

摘要： 本刊在医学论文实际应用中,新增了一些熟悉的常用词汇,并允许大家直接使用缩写,即第一次出现时可以不标注中文,这些可直接缩写的常用词汇如下:原发肿瘤-区域淋巴结-远处转移(TNM)、蛋白质印迹法(Western blot)、细胞计数检测(CCK-8)、增强化学发光(ECL)、四甲基偶氮哩盐比色法(MTT)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。

摘要： 以葛根为原料提取葛根蛋白,以葛根蛋白提取率为指标对4种不同提取工艺进行对比,采用Box-Behnken响应面试验设计,优化葛根蛋白提取工艺,对葛根蛋白进行体外抗氧化分析,并以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)测定葛根蛋白分子量.结果表明葛根蛋白最佳提取工艺为:提取温度45°C,提取时间2 h,料液比1:20(g/mL),pH3.5;测得葛根蛋白提取率为11.73％;抗氧化试验表明,葛根蛋白具有良好的羟基自由基和DPPH自由基清除效果,其清除率分别为(88.62±0.73)％、(51.15±0.32)％,且清除DPPH自由基和羟基自由基的IC50分别为0.78、1.89 mg/mL,并具有一定的还原能力;SDS-PAGE试验结果可清晰看见葛根蛋白条带,分子量主要分布在14.0 kDa～43.0 kDa.

摘要： 目的 降低乳清分离蛋白中的致敏蛋白含量,制备低致敏性乳制品.方法 利用碱性蛋白酶水解乳清分离蛋白,研究酶添加量、初始pH、酶解时间以及温度对乳清分离蛋白水解度的影响.在单因素的实验基础上,采用Box-Behnken实验设计方法进行四因素三水平的响应面优化实验.结果 在P<0.05的水平下,4个因素对乳清分离蛋白的水解度都有显著影响.最优的水解工艺为:酶添加量6.4％、初始pH 11、酶解时间4 h、温度60°C.乳清分离蛋白在此条件下水解后,水解度达到21.11％.酶解液的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析显示,经过这一优化工艺水解,10 kDa以上的蛋白基本全部被降解.高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析酶解产物的多肽及蛋白质分子量分布,结果显示酶解产物的分子量大都分布在3.5 kDa及以下.采用间接竞争酶联免疫吸附法原理测定2种标志性致敏蛋白(β-乳球蛋白和α-乳白蛋白)的残余抗原性,发现2种致敏蛋白的残余抗原性也有不同程度的降低.结论 通过碱性蛋白酶水解后,乳清分离蛋白中具有致敏性的大分子蛋白转变为小分子的肽类,从而降低了致敏性.

摘要： 以乳清分离蛋白为研究对象,通过测定圆二色性光谱、巯基含量以及内源性荧光光谱等研究了不同超高压水平(100、200、400和600 MPa)对其二级、三级结构的影响,并采用水解度测定、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳以及2个标志性致敏蛋白(β-乳球蛋白和 α-乳白蛋白)含量的检测来解析超高压对乳清分离蛋白致敏性的影响.结果表明,超高压处理能够使乳清分离蛋白的 α-螺旋和 β-转角部分转化为 β-折叠和无规则卷曲,可以增强乳清分离蛋白的巯基含量,在400 MPa时,表面巯基含量提高了104.82％,也造成了乳清分离蛋白内源性荧光强度的显著变化以及最大吸收波长的红移,电泳图谱以及水解度未显示出明显差异.通过酶联免疫吸附实验原理检测致敏蛋白含量发现,超高压可以使 α-乳白蛋白含量显著减少,但是,400 MPa的超高压处理却使β-乳球蛋白含量增加.综上表明,超高压处理能够显著改变乳清分离蛋白的二级、三级结构,暴露出结构内部的疏水基团,并对致敏蛋白产生影响.

摘要： 目的:以鼠伤寒沙门氏菌CGMCC 1.1190为对象,研究柠檬酸反复胁迫处理对其抗酸性、细胞膜及其膜蛋白的影响.方法:将CGMCC 1.1190分别在经柠檬酸调节到pH值为3.0、2.7、2.5的胰蛋白胨大豆肉汤培养基中胁迫处理并转接12次培养后,获得3株CGMCC 1.1190的抗酸性菌株,测定了这3株抗酸性菌株的D值、菌落形态、个体形态、膜通透性、膜流动性和膜蛋白的变化.结果:这3株抗酸性菌株的D值随着酸处理次数的增加不断增大,酸胁迫的pH值越低,D值越大,菌落形态与个体形态变化越明显;与原始对照菌株相比,当这3株抗酸性菌株置于pH 2.0的强酸环境下时,其碘化丙啶染色区域的死菌比例显著降低(P＜0.05),表明酸胁迫pH值越低,这3株抗酸性菌株的细胞膜对H+通透性越低;随着酸胁迫pH值的降低,CGMCC 1.1190抗酸性菌株细胞膜磷脂的熔点升高,表明细胞膜磷脂的相变温度升高,细胞膜流动性降低;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,这3株抗酸性菌株分子质量35～180 kDa范围内的细胞膜蛋白表达量增加,在135 kDa和180 kDa处均增加了特异条带.结论:随着酸胁迫pH值的降低,CGMCC 1.1190抗酸性增加,菌落变小,个体形态变长,细胞膜通透性和流动性均降低,部分膜蛋白表达量和表达种类增加,这些变化有利于其适应在酸胁迫环境下生长,提高生存能力.

摘要： 通过测定羊肉的蒸煮损失率、pH值、色泽、质构、蛋白降解状况、脂肪氧化情况及微观结构,研究不同蒸煮温度(中心温度分别为20、50、60、70、80、90?°C)对羊肉肌原纤维蛋白特性的影响.结果表明:蒸煮损失率随着蒸煮温度的升高而升高,由20?°C处理组的0.90%升至90?°C处理组的最高值41.47%;硬度、内聚力和咀嚼性均在80?°C时出现峰值;硫代巴比妥酸反应物值在中心温度升高至70?°C后呈下降趋势;亮度值(L*)和黄度值(b*)分别在70、60?°C时达到最大,红度值(a*)呈下降趋势;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)图谱中,分子质量36～130?kDa的蛋白质发生降解产生小分子肽;扫描电子显微镜观察结果表明,随着中心温度的升高,肌纤维之间的间隙逐渐增大,70?°C时最大,之后随中心温度的升高逐渐缩小,且造粒和崩解现象加剧.因此,羊肉蛋白结构及微观结构在蒸煮过程中会因蒸煮温度变化而发生改变,从而对羊肉品质造成影响.

摘要： 本发明公开一种聚丙烯酰胺凝胶电泳显影仪及其显影方法，包括显影槽、试剂供给装置、双向齿轮泵以及控制装置；所述试剂供给装置包括蒸馏水桶和若干试剂桶，所述蒸馏水桶和若干所述试剂桶汇集连通到第一管路上，且所述蒸馏水桶和每个所述试剂桶分别与所述第一管路之间设置有电动阀，所述电动阀与所述控制装置电连接，所述第一管路的一端与所述双向齿轮泵连通，另一端连接有残液收集装置；所述显影槽上设置有与所述控制装置电连接的液面传感器；本发明通过设置双向齿轮泵与不同的试剂桶和蒸馏水桶进行连通，之间设置有电动阀，并利用控制装置进行控制，实现不同试剂的自动输出和回收，并能降低不同溶液通过同一管路造成的相互污染。

摘要： 本发明公开了一种钌金属配合物及其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的应用。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中，该钌金属配合物可以做蛋白染色又可以用于核酸染色的新的钌金属配合物，并且用于染色时，方法操作简便，无需脱色、节约、检测灵敏高、质谱兼容、不会对环境造成污染，并且可直接用紫外或蓝光激发观察。

摘要： 本发明属于蛋白质检测技术领域，公开了一种用于聚丙烯酰胺凝胶电泳的蛋白质染色试剂盒及其染色方法。该试剂盒包括A液和B液，A液包括金属离子，B液包括含还原性分子的水溶液，还原性分子中含有巯基，其中的试剂不易挥发，不产生废液，对实验操作人员和环境友好；对蛋白质染色的灵敏度高，综合成本低。该试剂盒的染色方法为：电泳结束，取聚丙烯酰胺凝胶置于A液中，孵育1min～60min，用水洗聚丙烯酰胺凝胶；将上述聚丙烯酰胺凝胶置于B液中，孵育1min～60min，用水洗聚丙烯酰胺凝胶。上述方法操作简便，仅使用水作为唯一溶剂，实现快速、无污染的聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质染色分析。

摘要： 本发明公开了一种管状聚丙烯酰胺凝胶电泳槽，包括底桶、中桶、盖板、接线块和硅胶垫，中桶设置在底桶内，底桶和中桶上端外周上均设有外沿，中桶上的外沿位于底桶上的外沿上端，盖板设置在中桶上端，盖板上设有贯穿盖板、中桶外沿和底桶外沿的螺孔，螺孔内设有螺杆，接线块设置在盖板上端中部，中桶底上中部设有圆柱体，中桶底上圆柱体的周围均匀设有圆孔，硅胶垫设置在圆孔内，硅胶垫中部设有贯穿硅胶垫的插孔；中桶下端中部设有圆筒，圆筒壁上设有通孔；圆柱体上端设有两个电极安装孔，电极安装孔分布在圆柱体中部和一侧，电极安装孔内均设有电极接头，圆柱体上位于圆柱体中部的电极安装孔一侧设有孔洞，孔洞下端延伸至圆筒内。

摘要： 本发明公开一种聚丙烯酰胺凝胶电泳显影仪及其显影方法，包括显影槽、试剂供给装置、双向齿轮泵以及控制装置；所述试剂供给装置包括蒸馏水桶和若干试剂桶，所述蒸馏水桶和若干所述试剂桶汇集连通到第一管路上，且所述蒸馏水桶和每个所述试剂桶分别与所述第一管路之间设置有电动阀，所述电动阀与所述控制装置电连接，所述第一管路的一端与所述双向齿轮泵连通，另一端连接有残液收集装置；所述显影槽上设置有与所述控制装置电连接的液面传感器；本发明通过设置双向齿轮泵与不同的试剂桶和蒸馏水桶进行连通，之间设置有电动阀，并利用控制装置进行控制，实现不同试剂的自动输出和回收，并能降低不同溶液通过同一管路造成的相互污染。

摘要： 本发明涉及一体式聚丙烯酰胺凝胶电泳装置，其由上槽、下槽、边板、大板、小板、梳子和紧固件组成；上槽是一个长方容器，其中一个侧面有一个方形缺口和一个凸轨，容器里面有阴极电极，容器的底部有阳极电极；下槽是一个长方槽，上面有卡槽用于插拔式固定所述上槽；边板是一个挡板，用于抬高上槽液面；大板由大板架和大方玻璃组成，大方玻璃被固定在大板架的卡槽里，大板架的一侧有凹轨；小板由小板架和小方玻璃组成，小方玻璃被固定在小板架的卡槽里，小板架的一侧有凸轨；大板和小板在顶部由一对轴两点固定，下方可开合，大板和小板一起构成凝胶盒；紧固件用于将上槽与凝胶盒、凝胶盒与凝胶盒或凝胶盒与边板夹起来。电泳时，凝胶盒的数量可变。

摘要： 本发明公开了一种基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的生物样品中炭黑定量的方法。该方法包括下述步骤：1)配制含不同浓度炭黑的BSA溶液，分别进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，使用UMAX Magic扫描仪对每条炭黑‑BSA复合物对应的电泳条带进行图像扫描，利用Gel‑pro图像软件测量所述电泳条带的光密度(IOD)，建立IOD与炭黑浓度的标准曲线；2)将待测生物样品进行前处理，再将处理后的生物样品采用步骤1)中的方法进行测定，得到所对应电泳条带的IOD，代入步骤1)的标准曲线，得到所述待测生物样品炭黑浓度。该方法所需的样品少，费用低廉，但具有很高的可靠性和准确性。

摘要： 一种聚丙烯酰胺凝胶电泳的垂直电泳胶床，涉及一种垂直电泳胶床。本实用新型是要解决现有的聚丙烯酰胺凝胶电泳玻璃板无法起到带型分析的参照作用的问题。垂直电泳胶床，包括前玻璃板、后玻璃板、齿梳和封边条，所述后玻璃板上设有多条水平刻度线和一条垂直校准线，所述垂直校准线与水平刻度线垂直。本实用新型通过在玻璃板上设置刻度线，在电泳时，很容易判断电泳位置，使相同的染料在不同胶内跑至相同的位置，这样增加了不同胶板之间的可比性，提高了带型分析的准确度。应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。

摘要： 本实用新型涉及DNA相关技术辅助设备领域，具体公开了一种用于聚丙烯酰胺凝胶电泳自动补液的装置，包括电泳装置，所述电泳装置包括第一电泳槽和第二电泳槽，所述第一电泳槽与所述第二电泳槽共有四套；所述第一电泳槽与所述第二电泳槽之间设有电泳板，所述第一电泳槽上方设有电泳仪，相邻的第一电泳槽之间设有联通管，所述第二电泳槽下方设有排液管，最左侧的第一电泳槽上方设有自动补液装置。本实用新型主要解决补加电泳TBE的问题，把原来的人为手动定时补加改变成自动补加TBE，既省时省力，且不会产生因为遗忘导致漏加等问题。

摘要： 本实用新型公开了一种用于蛋白及核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳的模架支撑盒，包括凹形板、矩形板、多孔上样成型器和指示梳孔。本实用新型不更改分离胶配方，只在外界结构上通过在特定区域内收缩蛋白及核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳的模架支撑盒和内部空间，样品通过该区域的通道变得狭窄，从而提供样品压缩效果，为制胶过程的简化起到重要的作用，并且取消了不影响蛋白或核酸检测的浓缩胶，不仅简化了电泳实验制胶过程，同时也使得凝胶配置的成功率大大提高，解决浪费问题，通过在特定区域内收缩蛋白及核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳的模架支撑盒和内部空间，使得样品通过该区域的通道变得狭窄，从而提供样品压缩效果，为制胶过程的简化起到非常重要的作用。