马立克氏病毒

摘要： 鸡马立克氏病是一种由马立克氏病毒引起的鸡恶性T淋巴细胞增生性疾病,主要特征表现为病鸡产生免疫抑制,外周神经、 各种内脏器官、 性腺、 虹膜、 皮肤和肌肉等组织器官发生淋巴细胞浸润、 增生、 形成淋巴肿瘤等.马立克氏病流行范围广,发病率和死亡率高,严重困扰我国养禽业事业的发展.鸡马立克氏病可根据临床症状初步判断,在此基础上可以通过制作石蜡切片病理观察和病毒目的基因PCR扩增进行进一步确诊.本文从传染源、 传播途径和易感动物3方面重点阐述鸡马立克氏病的防治方法.

摘要： 近年来,禽类病毒性疾病已经成为研究病毒感染和致病机制的重要模型之一,而且病毒与microRNA的调控关系和机制研究也成为人们关注的焦点.本文简要总结禽源疱疹病毒编码microRNA的概况,以及禽源疱疹病毒的致瘤性与microRNA的表达调控关系,同时探讨了利用microRNA靶向调控机制在病毒疾病(如传染性法氏囊病毒、禽白血病病毒、禽流感病毒等)防治中的可能应用.

摘要： 为研究主要组织相容性抗原(MHC)不同的G2系和G5系鸡在感染马立克氏病毒(MDV)后立即早期病毒复制及细胞因子转录水平的动态变化,本实验对14日龄G2和G5系SPF鸡滴鼻接种超强毒(wMDV) Md5株,以28S rRNA基因为内参,利用双重荧光定量RT-PCR (dqRT-PCR)方法对接种后4h、24 h、48 h和96 h肺淋巴细胞、脾脏和外周血淋巴细胞(PBL)中MDV meq、IFN-γ、IL-18、IL-4和IL-10的mRNA含量进行检测.结果显示,接种后96 h仅在两品系感染鸡的肺淋巴细胞和脾脏中检测到了meq mRNA,G2系鸡群肺淋巴细胞中病毒mRNA含量高于G5系,但脾脏中较低.96 h肺淋巴细胞和脾脏中IFN-γ、IL-4和IL-10转录水平大幅上调,并且G2系鸡群均略高于G5.本研究结果提示G2系对MDV的抵抗能力强于G5,这两种品系鸡感染MDV后可能主要启动以Th2型为主的细胞免疫反应,为研究MDV对不同MHC单倍型鸡的致病性提供了实验依据.

摘要： [目的]比较敲除meq基因的马立克氏病毒(MDV)与标准疫苗株CVI988/Rispens对MDV超强毒GX0101攻毒的免疫保护作用.[方法]本实验将1日龄SPF鸡120只随机分成4组,每组30只,分别饲养在正压过滤空气的SPF动物饲养隔离罩内.1日龄时,第1组鸡以2000PFU/只的剂量颈部皮下接种SC9-1;第2组鸡以2000PFU/只的剂量颈部皮下接种CVI988/Rispens;第3、4组为不免疫攻毒对照组.免疫接种后5d后,第1、2、3组分别以2000PFU/只的剂量腹腔接种MDV GX0101.饲养至90日龄,记录死亡情况,对死亡鸡只剖检,并取疑似马立克特有病变脏器做病理切片.期间,检测不同免疫状态下病毒GX0101的增殖动态以及禽流感、新城疫灭活苗在鸡体诱导产生抗体的水平.对含有MDY母源抗体的海蓝褐鸡的试验方案与SPF鸡一致.[结果]SC9-1株免疫对感染MDV GX0101攻击SPF鸡、海兰褐鸡均提供100％的免疫保护作用;CVI988/Rispens对SPF鸡、海兰褐鸡分别提供86.7％、93％的免疫保护作用.未免疫SPF鸡攻毒组死亡率为53.3％,肿瘤率为16.7％;未免疫海兰褐鸡攻毒组死亡率为36.7％,肿瘤率为6.67％;相比,空白对照组鸡只没有任何病变及死亡.荧光定量结果显示,淋巴细胞和羽毛囊DNA中,SC9-1免疫组鸡体内GX0101的病毒拷贝数显著低于CVI988/Rispens免疫组.血凝抑制试验结果显示,SC9-1免疫攻毒组鸡的产生的AIV、NDV抗体水平高于CVI988/Rispens免疫攻毒组.[结论]SC9-1株免疫无论在SPF鸡还是含有MDV母源抗体的海兰褐鸡均能提供比CVI988/Rispens更好的免疫保护效果.

摘要： 本研究参照美国国家环境保护局(EPA)关于消毒剂在干燥的非生物体表面的抗病毒效果测评方法,评定联合碳化公司UCAESAN 4256消毒剂对禽喉气管炎病毒及鸡马立克氏病毒的杀毒效力.

摘要： [目的]建立一种能够快速、灵敏地检测鸡马立克氏病病毒(MDV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量检测方法.[方法]针对马立克氏病毒特异的Meq基因序列设计引物,利用SYBR Green Ⅰ染料建立检测马立克氏病毒的实时荧光定量PCR方法,进行敏感性、特异性、重复性试验,并应用该方法检测了罗曼蛋鸡、AA肉鸡、二郎山山地鸡SD02和SD03品系4种鸡只感染组和对照组样本的脾、法氏囊、胸腺等组织中的病毒拷贝数.[结果]该方法建立的定量标准曲线荧光阈值循环数(Threshold cycle,Ct)与模板拷贝数呈良好线性关系(r=0.996),扩增效率(E)为96％,熔解曲线分析显示其PCR扩增具有良好的特异性,敏感性和重复性试验证明该方法具有较高的灵敏度和稳定性,最低检测浓度为102拷贝/μL.同时运用该方法对试验样本进行检测,结果显示在4个感染组鸡只的肝,脾,肾,胸腺,法氏囊组织中均检测出Meq的拷贝,并计算出了待测样品的病毒拷贝数,相反在未感染组却没有检测出任何Meq的拷贝.试验结果还发现二郎山山地鸡两品系各组织中MDV的拷贝数显著低于AA肉鸡和罗曼蛋鸡各组织.[结论]建立的检测方法能够快速检测马立克氏病毒,结果准确,成本低廉,可以将其作为生产上监控马立克氏病的一个重要手段.

摘要： 为构建表达鸡新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的重组马立克氏病毒(MDV),本研究采用RT-PCR方法从NDV强毒株F48E9基因组中扩增出病毒的融合蛋白F基因,构建由CMV启动子和BGH polyA组成的2.7 kb F基因表达盒.将其插入带有黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶基因(gpt)和MDV US2同源臂的中间转移载体pUAB-gpt中获得重组MDV转移载体pUAB-gpt-wF.将该转移载体与MDV-814疫苗株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)总DNA共转染CEF,经同源重组及gpt选择系统筛选,获得带有F基因表达盒的重组MDV(rMDV814-wF).其体外增殖与亲本病毒没有差异.经间接免疫荧光试验、PCR、Southern-blot及western blot等试验证明,重组病毒在CEF中传至13代以上仍稳定表达NDV的F蛋白.该重组病毒的构建为MDV活载体疫苗的筛选及应用奠定了基础.%To generate the recombinant Marek's disease virus (MDV) expressing F protein of Newcastle disease virus (NDV), the F gene was amplified by RT-PCR from NDV F48E9 strain. The cassette containing the F gene under the control of the CMV promoter and BGH ployA was constructed and inserted into plasmid pUAB-gpt containing gpt and MDV US2 homologous arms to construct transfer vector of pUAB-gpt-wF. The recombinant MDV was generated by co-transfection chicken embryo fibroblast (CEF) with pUAB-gpt-wF and the total DNA extracted from CEF infected with MDV-814 strain, and selected in present of mycophenolic acid substrates for HGPRT transferase. The growth rate of the recombinant MDV was similar to the parental virus in vitro. Immunefluorenscence assays, western blot and southern blot analysis indicated the recombinant virus was stably expressed NDV F protein over 13 passages in CEF.

摘要： Sixty SPF chickens are divided randomly into three groups. Two groups of chickens, of 10 days old and 21 days old respectively, are challenged with MDV J-1 strain. The chickens of the control group are injected with the same volume of diluent. The results indicate that the clinical signs of the two challenged groups all occur on the 18th day after infection. The death peak appears from the 20th day to the 25th day, and gradually relieves on the 26^th day. The mor- talities of the two challenged groups are 80% and 60%, and the incidences of tumor are 80% and 65%, respectively. Neoplasm mostly occurs in heart, liver, spleen, kidney and thymus. The chickens suffering from tumor in two or three tissues count for 65% in the 10-day-old group and 35 % in the 21-day-old group, while the chickens with tumor in four or more tissues only count for 5% in the 10-day-old group and 20% in the 21-day-old group. Therefore chick- ens in the 10-day-old group are sensitive to MDV J-1 strain, and are more sensitive than those in the 21-day-old group.%将60羽SPF鸡随机分为3组,选取马立克氏病毒标准毒株京-1株分别对10日龄组和21日龄组鸡进行人工感染试验,对照组注射同等剂量的稀释液。结果显示：两组攻毒组试验鸡均于接种病毒后18d开始发病,并于20～25d出现死亡高峰,26d开始逐渐缓解。两组鸡的死亡率分别为80%和60%,肿瘤发生率分别为80%和65%,肿瘤主要出现在心脏、肝脏、脾脏、肾脏和坐骨神经等组织,其中10日龄攻毒组2～3个器官发生肿瘤的个体占65%,4个及以上器官发生肿瘤的个体仅占5%,21日龄攻毒组2～3个器官发生肿瘤的个体仅占35%,4个及以上器官发生肿瘤的个体达到20%。由此说明,10日龄SPF鸡对京-1株MDV敏感,而21日龄该品系鸡对之敏感性略低。

摘要： 鸡马立克氏病（MD）是由马立克氏病毒（MDV）引起鸡的一种高度接触性的淋巴组织增生性肿瘤疫病，主要病理特征是各种内脏组织器官、外周神经、性腺、虹膜、肌肉和皮肤等组织器官的单核细胞浸润，产生淋巴细胞性肿瘤。该病于1907年首先由匈牙利兽医病理学家马立克氏（Dr．Joseph Marek）报道，随后在全球流行和发病，目前已成为危害鸡群健康的主要免疫抑制性疾病之一。

摘要： 鸡马立克氏病（MD）是由马立克氏病毒（MDV）引起的鸡的一种高度接触性、淋巴组织增生性肿瘤疫病，主要病理特征是各种内脏组织器官、外周神经、性腺、虹膜、肌肉和皮肤等组织的单核细胞浸润，产生淋巴细胞性肿瘤。该病于1907年首先由匈牙利兽医病理学家Dr．JosephMarek报道，随后在全球发生和流行，目前已成为危害鸡群健康的主要免疫抑制性疾病之一。我国于1973年在北京、上海、哈尔滨、大连、青岛等地区确认MDV的存在。近年来．MD的发牛和毹害旱上升趋势。

摘要： 用马立克氏病毒(Marek’s disease vims,MDV)人工感染雏鸡为疾病模型,采取人参皂苷及其衍生物口服,通过间接免疫荧光试验动态观察人参皂苷及其衍生物能否减少MDV抗原在组织中的分布。结果显示：人参皂苷组、衍生物组被检组织的阳性细胞数量明显比盐酸吗啉胍阳性对照组被检组织的阳性细胞数量少。表明人参皂苷及其衍生物抗MDV效果要优于盐酸吗啉胍。

摘要： 2006年～2007年我们从现地暴发鸡马立克氏病(MD)鸡场采集发病鸡羽髓，无菌处理后分别接种鸭胚成纤维细胞(DEF)，蚀斑克隆纯化后，随机选1个单克隆，再接种DEF增殖，获得9株适应DEF生长的鸡马立克氏病毒(MDVs)野毒株，分别命名为ZY、FY、SY、YC、CZ、MS、CGZ、QQHE和DH株。应用聚合酶链式反应(PCR)技术分别扩增这9株的132bp重复序列，发现这9株MDVs基因组的132bp重复序列的拷贝数均为2个拷贝，符合MDVS强毒株的特点。从分离的9株MDVS中选择5株人工感染5日龄白来航SPF鸡，感染鸡60d后剖杀，发病鸡大多可见内脏肿瘤；其中3株MD阳性率达100%。我们培育并鉴定了9株适应DEF生长的MDVs流行野毒株，为监测我国现地MD毒株的变异和评价现有疫苗对MD保护效果提供有价值的研究材料。

摘要： 2006年～2007年我们从现地暴发鸡马立克氏病(MD)鸡场采集发病鸡羽髓，无菌处理后分别接种鸭胚成纤维细胞(DEF)，蚀斑克隆纯化后，随机选1个单克隆，再接种DEF增殖，获得9株适应DEF生长的鸡马立克氏病毒(MDVs)野毒株，分别命名为ZY、FY、SY、YC、CZ、MS、CGZ、QQHE和DH株。应用聚合酶链式反应(PCR)技术分别扩增这9株的132bp重复序列，发现这9株MDVs基因组的132bp重复序列的拷贝数均为2个拷贝，符合MDVS强毒株的特点。从分离的9株MDVS中选择5株人工感染5日龄白来航SPF鸡，感染鸡60d后剖杀，发病鸡大多可见内脏肿瘤；其中3株MD阳性率达100%。我们培育并鉴定了9株适应DEF生长的MDVs流行野毒株，为监测我国现地MD毒株的变异和评价现有疫苗对MD保护效果提供有价值的研究材料。

摘要： 本试验首先用PCR方法扩增出传染性法氏囊病毒(IBDV)株的VP2基因,将其克隆到T载体上,并进行序列分析.然后将其亚克隆到真核表达载体pcDNATM4/His/LacZ中,并将该真核表达载体上的CMV启动子和增强子控制的含LacZ和VP2基因表达盒克隆入pUS2基因中,成功地构建了马立克氏病毒的转移载体。

摘要： 为了探索鸡β2-微球蛋白(chβ2M)作为MDV致肿瘤过程中新靶位的可能性，本研究应用荧光定量PCR技术对chβ2M在MDV感染不同细胞中基因表达水平进行检测。结果显示，在BUdR刺激下，MDV感染的淋巴细胞系MDCC-MSB1由潜伏状态向感染过程转化时chβ2M明显上调，特别于前期24 h基因表达水平上调显著(P<0.01)；通过GA株感染CEF后发现，chβ2M在马立克感染CEF前期第24 h，48 h，72 h较对照组明显升高(P<0.05)，呈逐渐下降趋势，而于第5 d，第7d低于对照组(P＜0.01);有趣的是，MDV超强毒株RB1B感染鸡后，外周血淋巴细胞中chβ2M在感染前期第4 d，7 d与对照组相比较明显上调(P<0.05)，而于14 d，28 d表达下降。结果证实，chβ2M在MDV感染和抗感染中具有十分重要的作用，特别是在感染前期明显上调，后期下调，提示chβ2M可作为进一步恶化的重要标记。

摘要： 为了选择适宜的启动子调控外源基因的表达,以改善马立克氏病毒为载体的重组病毒的免疫保护力,克隆了马立克氏病病毒(MDV)CVI988株病毒囊膜糖蛋白B基因启动子(gB启动子),通过测序分析发现克隆的gB启动子与Genbank上发表的MDVGA株序列的同源性为99.5﹪.分别以lacZ、Luc为报告基因,构建pSK-gB-LacZ和pgB-Luc真核表达载体.将pSK-gB-LacZ转染CHO,转染细胞经固定、染色后,出现兰色,说明在CHO中,所克隆的gB启动子可以有效地调控lacZ基因的转录.在CEF细胞中,利用虫荧光素酶系统将gB启动子与SV40及hCMV启动子进行活性比较比较,结果发现hCMV启动子的活性为gB启动子的31倍,SV40启动子为gB启动子的27倍.本研究为下一步gB启动子的应用奠定了基础.

摘要： 在鸡场中对NDV和高致病性禽流感疫苗的免疫失败时而发生，由不同免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制很可能是引起这种免疫失败的流行病学因素。我们的研究表明，在这些亚临床感染中，网状内皮增生病病毒(REV)是最强的免疫抑制性病毒。在中国鸡群中REV感染非常普遍，而且经常是以与其它病毒共感染的形式存在，如马立克氏病病(MDV)、传染性贫血病病毒(CAV)、J亚群白血病病毒(ALV-J)等。rn 动物试验表明，REV的早期感染可显著抑制NDV，H5-和H9-AIV疫苗的抗体反应。而且，这种免疫抑制作用至少可持续4个半月。REV与ALV-J、MDV和CAV的共感染又能进一步增强这种免疫抑制作用。由免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制有可能造成不完全免疫抑制的个体，进而成为鸡群中被NDV和AIV进一步感染的靶动物和传染源。鸡群的免疫抑制状态还将有助于NDV和AIV在鸡场中持续循环和变异。

摘要： 在鸡场中对NDV和高致病性禽流感疫苗的免疫失败时而发生，由不同免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制很可能是引起这种免疫失败的流行病学因素。我们的研究表明，在这些亚临床感染中，网状内皮增生病病毒(REV)是最强的免疫抑制性病毒。在中国鸡群中REV感染非常普遍，而且经常是以与其它病毒共感染的形式存在，如马立克氏病病(MDV)、传染性贫血病病毒(CAV)、J亚群白血病病毒(ALV-J)等。rn 动物试验表明，REV的早期感染可显著抑制NDV，H5-和H9-AIV疫苗的抗体反应。而且，这种免疫抑制作用至少可持续4个半月。REV与ALV-J、MDV和CAV的共感染又能进一步增强这种免疫抑制作用。由免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制有可能造成不完全免疫抑制的个体，进而成为鸡群中被NDV和AIV进一步感染的靶动物和传染源。鸡群的免疫抑制状态还将有助于NDV和AIV在鸡场中持续循环和变异。

摘要： 在鸡场中对NDV和高致病性禽流感疫苗的免疫失败时而发生，由不同免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制很可能是引起这种免疫失败的流行病学因素。我们的研究表明，在这些亚临床感染中，网状内皮增生病病毒(REV)是最强的免疫抑制性病毒。在中国鸡群中REV感染非常普遍，而且经常是以与其它病毒共感染的形式存在，如马立克氏病病(MDV)、传染性贫血病病毒(CAV)、J亚群白血病病毒(ALV-J)等。rn 动物试验表明，REV的早期感染可显著抑制NDV，H5-和H9-AIV疫苗的抗体反应。而且，这种免疫抑制作用至少可持续4个半月。REV与ALV-J、MDV和CAV的共感染又能进一步增强这种免疫抑制作用。由免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制有可能造成不完全免疫抑制的个体，进而成为鸡群中被NDV和AIV进一步感染的靶动物和传染源。鸡群的免疫抑制状态还将有助于NDV和AIV在鸡场中持续循环和变异。

摘要： 在鸡场中对NDV和高致病性禽流感疫苗的免疫失败时而发生，由不同免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制很可能是引起这种免疫失败的流行病学因素。我们的研究表明，在这些亚临床感染中，网状内皮增生病病毒(REV)是最强的免疫抑制性病毒。在中国鸡群中REV感染非常普遍，而且经常是以与其它病毒共感染的形式存在，如马立克氏病病(MDV)、传染性贫血病病毒(CAV)、J亚群白血病病毒(ALV-J)等。rn 动物试验表明，REV的早期感染可显著抑制NDV，H5-和H9-AIV疫苗的抗体反应。而且，这种免疫抑制作用至少可持续4个半月。REV与ALV-J、MDV和CAV的共感染又能进一步增强这种免疫抑制作用。由免疫抑制性病毒亚临床感染造成的免疫抑制有可能造成不完全免疫抑制的个体，进而成为鸡群中被NDV和AIV进一步感染的靶动物和传染源。鸡群的免疫抑制状态还将有助于NDV和AIV在鸡场中持续循环和变异。

摘要： 本发明提供了一种抑制马立克氏病病毒复制的药物，包括去泛素化酶UL36抑制剂，以及一种预防或抗马立克氏病药物。通过抑制病毒编码的酶活性实验、CEF细胞水平上进行药物毒性实验、病毒CPE抑制实验和鸡马立克氏病模型实验，本发明首次筛选出去泛素化酶UL36抑制剂DUBs‑IN‑1及其衍生物，不仅能够在酶水平上抑制UL36的活性，在细胞水平上抑制马立克氏病病毒的复制，还可在动物水平上抑制马立克氏病肿瘤生长和内脏出血，且具有效果极强，剂量小的优点，可作为抗MD药物广泛用于养禽业防御马立克氏病的生产实践中。

摘要： 本发明公开了新型重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体及以及在家禽疫苗中使用它们的方法，所述构建体编码并表达传染性喉气管炎病毒蛋白抗原和传染性法氏囊病病毒蛋白抗原二者。

摘要： 本发明公开了新型的重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体，其编码并表达传染性喉气管炎病毒和新城疫病毒蛋白二者的抗原，及其在家禽疫苗中使用的方法。

摘要： 本发明提供了一种抑制马立克氏病病毒复制的药物，包括去泛素化酶UL36抑制剂，所述去泛素化酶UL36抑制剂为雷公藤提取物，以及一种预防或抗马立克氏病的药物。通过抑制病毒编码的酶活性实验、CEF细胞水平上进行药物毒性实验、病毒CPE抑制实验和鸡MD模型实验证明了所述雷公藤提取物能有效地抑制马立克氏病病毒的复制和鸡MD肿瘤的产生，在禽类养殖业具有良好的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种抑制马立克氏病病毒复制的药物，包括去泛素化酶UL36抑制剂，以及一种预防或抗马立克氏病药物。通过抑制病毒编码的酶活性实验、CEF细胞水平上进行药物毒性实验、病毒CPE抑制实验和鸡马立克氏病模型实验，本发明首次筛选出去泛素化酶UL36抑制剂DUBs‑IN‑1及其衍生物，不仅能够在酶水平上抑制UL36的活性，在细胞水平上抑制马立克氏病病毒的复制，还可在动物水平上抑制马立克氏病肿瘤生长和内脏出血，且具有效果极强，剂量小的优点，可作为抗MD药物广泛用于养禽业防御马立克氏病的生产实践中。

摘要： 公开了编码马立克氏病病毒的gp82多肽的核苷酸序列。可用作疫苗保护抗马立克氏病的重组病毒也被公开,该重组病毒优选含有位于禽痘病毒DNA中对于病毒生长不必要的区域中的、在痘病毒启动子调控下的两种或更多的编码如糖蛋白B和糖蛋白gp82的马立克氏病病毒抗原的基因。还提供了具有协同免疫保护作用的疫苗,其含有与火鸡疱疹病毒组合的表达马立克氏病病毒gB蛋白的重组禽痘病毒。还提供了包括施用任何本公开疫苗的免疫家禽的方法。

摘要： 本发明公开了新型重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体及以及在家禽疫苗中使用它们的方法，所述构建体编码并表达传染性喉气管炎病毒蛋白抗原和传染性法氏囊病病毒蛋白抗原二者。

摘要： 本发明公开了新型的重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体，其编码并表达传染性喉气管炎病毒和新城疫病毒蛋白二者的抗原，及其在家禽疫苗中使用的方法。

摘要： 本发明公开了新型的重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体，其编码并表达传染性喉气管炎病毒和新城疫病毒蛋白二者的抗原，及其在家禽疫苗中使用的方法。

摘要： 本发明公开了二重荧光LAMP区分马立克氏病病毒和J亚群禽白血病病毒检测引物组，包括引物1至引物14，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.14的碱基序列，其中引物7与引物1互补的探针、引物14为与引物8互补的探针，它们使扩增反应具有很高的特异性，能分别与MDV meq基因和ALV‑J gp85基因结合，反应后在不同波长的荧光下发出不同颜色的荧光，从而实现快速敏感特异的鉴别MDV和ALV‑J。据此，还研制了相应试剂盒并建立相应LAMP方法。总之，本发明具有特异性强、灵敏度高、快速简便的特点，适合在基层兽医站和具备基本实验仪器的养殖场中快速检测，具有较好的应用前景。