转移载体
转移载体的相关文献在1984年到2022年内共计179篇,主要集中在畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂、分子生物学、基础医学
等领域,其中期刊论文79篇、会议论文17篇、专利文献76225篇;相关期刊50种,包括生物工程学报、生物技术通报、中国病毒学等;
相关会议16种,包括2012第四届中国兽药大会、中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会、中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次会议等;转移载体的相关文献由532位作者贡献,包括岸本·隆·慧、童光志、仇华吉等。
转移载体—发文量
专利文献>
论文:76225篇
占比:99.87%
总计:76321篇
转移载体
-研究学者
- 岸本·隆·慧
- 童光志
- 仇华吉
- 吴凤笋
- 李文刚
- 陈焕春
- 孟庆文
- 汪铭书
- 钱平
- 陈溥言
- 余国莲
- 刘家森
- 司昌德
- 周庆丰
- 周艳君
- 周雪媚
- 姜骞
- 孙昆峰
- 张强
- 招丽婵
- 曲连东
- 李永清
- 李江龙
- 李祥敏
- 李群辉
- 李薇
- 林丽苗
- 樊淑华
- 王君伟
- 程安春
- 陈孝跃
- 韩凌霞
- 项朝荣
- A-S·贝尼翁
- F·P·库唐
- K·库贝雷泰
- P·沙尔诺
- 乔传玲
- 凌红丽
- 刘全
- 华星旸
- 卢中华
- 吕素芳
- 吴国华
- 周丽娜
- 周彦君
- 周洁
- 周运垚
- 夏新月
- 孙金永
-
-
-
-
何妍萍;
贾怀杰;
蔺国珍;
王盈盈;
白刚;
胡永浩;
景志忠
-
-
摘要:
为构建猪伪狂犬病毒BarthaK61株TK缺失株,利用PCR法从猪伪狂犬病毒BarthaK61株基因组分别扩增出TK基因的左右2条臂TKR和TKL,并将TKR和TKL定向插入到pQCXIX载体中,构建pTK-转移质粒。进一步将EGFP基因插入到pTK-质粒中,构建pTK-/EGFP转移质粒。用pTK-/EGFP质粒与伪狂犬病毒BarthaK61株基因组共转染BHK-21细胞,通过挑取病变荧光蚀斑的方法获得了PRV/gE-/TK-/EGFP重组病毒。%To construct TK-null recombinant pseudorabies virus (PRV)BarthaK6 1 strain as a technol-ogy support of the research of genetic engineering vaccine of pseudorabies virus.Transfer vector pTK- was constructed using homology recombination arms of PRV TK gene,which were successfully amplified by PCR from PRV BarthaK6 1 genome.Subsequently enhanced green fluorescent protein gene (EGFP)was cloned into pTK-,resulting a universal transfer vector pTK-/EGFP.Co-transfecting pTK-/EGFP and genome of PRV BarthaK61 into BHK-21cells,recombinant PRV/gE-/TK-/EGFP were obtained follow-ing plaque screening.
-
-
高洋;
程子英;
王铭;
郑君;
贾洪林;
鲁承
-
-
摘要:
为构建表达弓形虫抗原的重组猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)转移载体,本研究以pBluescipt Ⅱ-SK(-)为骨架载体,分别插入FHV-1 TK基因的5’(2 000 bp)和3’(1 700 bp)同源臂、pCAGGs载体中含有启动子和终止信号的表达盒以及弓形虫RH株SAG1或GRA4基因,构建重组FHV-1的转移载体pBS-TK-SAG1和pBS-TK-GRA4.将其分别转染于293T细胞,通过原核细胞表达的截短SAG1和GRA4重组蛋白制备的鼠多克隆抗体进行westernblot鉴定.结果显示,制备的弓形虫SAG1和GRA4多克隆抗体能够特异性识别重组表达和虫体表达的天然的SAG1和GRA4两种弓形虫蛋白,分子量一致,分别为35 ku和45 ku.本研究为表达弓形虫RH株SAG1和GRA4基因的猫重组疱疹病毒Ⅰ型载体疫苗的研制奠定了基础.
-
-
杨承槐;
李俊平;
李启红;
刘丹;
黄建华;
蒋桃珍;
李慧姣;
夏业才
-
-
摘要:
根据GenBank已发表的鸭瘟病毒活疫苗C-KCE株基因组序列设计一对引物,扩增出含TK基因完整ORF的2.7 kb的片段,克隆至pMD18T simple载体.利用该片段内的两个酶切位点Xho Ⅰ和EcoR Ⅴ,切除TK基因内的244 bp,用T4 DNA聚合酶补平末端;pVAX1-LacZ用NruⅠ和Nar Ⅰ双酶切,回收含LacZ表达盒的4.1 kb片段,通过平末端连接将LacZ表达盒插入到TK基因中,从而获得了转移载体pTK-LacZ,为构建重组鸭瘟病毒奠定了基础.
-
-
闫帅;
李越;
王云峰;
崔红玉;
李巧玲;
赵妍;
石星明;
赵晓岩;
胡顺磊;
王玫;
高明
-
-
摘要:
为构建表达鸡新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的重组马立克氏病毒(MDV),本研究采用RT-PCR方法从NDV强毒株F48E9基因组中扩增出病毒的融合蛋白F基因,构建由CMV启动子和BGH polyA组成的2.7 kb F基因表达盒.将其插入带有黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶基因(gpt)和MDV US2同源臂的中间转移载体pUAB-gpt中获得重组MDV转移载体pUAB-gpt-wF.将该转移载体与MDV-814疫苗株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)总DNA共转染CEF,经同源重组及gpt选择系统筛选,获得带有F基因表达盒的重组MDV(rMDV814-wF).其体外增殖与亲本病毒没有差异.经间接免疫荧光试验、PCR、Southern-blot及western blot等试验证明,重组病毒在CEF中传至13代以上仍稳定表达NDV的F蛋白.该重组病毒的构建为MDV活载体疫苗的筛选及应用奠定了基础.%To generate the recombinant Marek's disease virus (MDV) expressing F protein of Newcastle disease virus (NDV), the F gene was amplified by RT-PCR from NDV F48E9 strain. The cassette containing the F gene under the control of the CMV promoter and BGH ployA was constructed and inserted into plasmid pUAB-gpt containing gpt and MDV US2 homologous arms to construct transfer vector of pUAB-gpt-wF. The recombinant MDV was generated by co-transfection chicken embryo fibroblast (CEF) with pUAB-gpt-wF and the total DNA extracted from CEF infected with MDV-814 strain, and selected in present of mycophenolic acid substrates for HGPRT transferase. The growth rate of the recombinant MDV was similar to the parental virus in vitro. Immunefluorenscence assays, western blot and southern blot analysis indicated the recombinant virus was stably expressed NDV F protein over 13 passages in CEF.
-
-
-
-
刘振江;
鲁会军;
金宁一;
刘昊;
刘燕瑜;
郭欢欢;
凡敏;
岳云强;
陆飞;
秦艳青;
李国江
-
-
摘要:
为了构建表达辛德毕斯病毒E基因的重组痘苗病毒,本研究通过基因重组的方法将辛德毕斯病毒E基因及绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因分别连接至痘苗病毒转移载体pSTK,酶切鉴定得到阳性重组质粒pSTK-SINE-EGFP。采用脂质体转染的方法,将该重组质粒与痘苗病毒天坛株共转染BHK-21细胞,通过同源重组获得重组痘苗病毒。利用EGFP筛选阳性重组痘苗病毒vTTVV-SINE-EGFP,收集感染重组痘苗病毒的BHK-21细胞,SDS-PAGE电泳检测辛德毕斯病毒E基因在细胞中的表达情况,Western blot分析表达产物的免疫原性。结果证明辛德毕斯病毒E基因能在重组痘苗病毒vTTVV-SINE-EGFP中获得表达,且表达产物具有良好的免疫原性。表达辛德毕斯病毒E基因的重组痘苗病毒的成功构建,为研制辛德毕斯病毒活载体疫苗奠定了基础。%To construct recombinant vaccinia virus expressing E gene of Sindbis virus, Sindbis virus E gene and green fluorescent protein (EGFP) gene were inserted to the vaccinia virus transfer vector pSTK by gene recombination. The resulting recombinant plasmid pSTK-SINE-EGFP was confirmed in restriction enzyme digestion. Subsequently, the recombinant plasmid and vaccinia virus Tiantan strain were co-transfected into BHK-21 cells and positive recombinant vaccinia virus was identified by fluorescent plaque purification. Sindbis virus E gene was expressed in BHK-21 cells infected with the recombinant vaccinia virus as determined in SDS-PAGE and Western blot. The results demonstrated that recombinant vaccinia virus expressing Sindbis virus E gene was constructed and expressed product showed good immunogenicity, which laid a solid foundation for development of a live vector vaccine of Sindbis virus.
-
-
毕研丽;
郭广君;
吕素芳;
魏凤;
沈志强
-
-
摘要:
构建伪狂犬病毒TK基因缺失载体,在BHK-21细胞中表达,为研究TK基因生物学活性及其基因工程疫苗研制提供科学依据.根据伪狂犬病病毒sA株TK基因序列,设计引物,通过Overlap PCR扩增到长约1814bp的TK基因,与PMDl8-T载体连接,将鉴定为阳性的重组质粒pMD-TK与表达载体pBluescript SK(+)分别用限制性内切酶BamH I,HindIII酶切后,定向亚克隆;重组表达质粒pBTK经PCR、酶切鉴定后,阳性质粒进行测序.利用脂质体介导阳性重组质粒pBTK转染BHK.21细胞,通过噬斑纯化获得获得重组病毒PRV/TK-.该重组病毒在体外传15代后仍具有良好的遗传稳定性,应用PCR技术可从体外反复传代的阳性细胞基因组中扩增到TK基因,其TCID50毒价是5.75.本实验为PRV基因功能的研究及PRV基因缺失苗的研究提供了基础.
-
-
-
刘根梅;
陈瑞爱;
韩静芳;
罗满林
- 《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会》
| 2009年
-
摘要:
以重组腺病毒转移载体P-ORF2,P-γ-IFN为模板,应用Primer5.0设计了2对引物,其中一对引物P1,P2用于猪圆环病毒2型ORF2基因的扩增,另一对引物P3,P4则用于γ-IFN基因的扩增。再以所扩增的2段基因为模板,P1,P4为引物扩增融合基因ORF2-γ-IFN。将所扩增的串联基因连接PMD-18T-Simple Vector,经PCR方法和限制性内切酶分析鉴定该串联基因已成功转入重组质粒中(命为PMD-ORF2-γ-IFN)。腺病毒转移载体Pshuttle-CMV和PMD-ORF2-γ-IFN经双酶切后再切胶回收并连接后,经PCR方法和限制性内切酶酶切法及测序证明两基因已成功连接,由此获得了重组腺病毒转移载体Pshuttle-CMV-ORF2-γ-IFN。rn 重组腺病毒转移载体经PmeI酶切线性化后,在BJ5173细菌中与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组获得重组腺病毒质粒pAD-CMV-ORF2-γ-IFN。经PCR方法和Pacl酶切方法及测序鉴定表明该重组腺病毒载体已得到成功构建。
-
-
-
-
- 《首届中国兽药大会暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008年学术年会》
| 2008年
-
摘要:
根据文献设计2对引物,PCR扩增FPV复制非必需区中外源基因插入位点两侧翼的片段,分别克隆到pUC19和DSK质粒中,并命名为pFP1和pFP2根据文献设计引物,PCR扩增鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的GB基因的编码区。将GB基因克隆到质粒pFP1中获得重组质粒pFP1-GB;用酶切质粒pEGFP,得到GFP片段并克隆到质粒pFP2中,得到重组质粒pFP2-GFP。双酶切pFP1-GB得到FP1-GB片段,并克隆到质粒pFP2-GFP中,得到重组质粒pFP1GB-FP2GPF。酶切质粒pE/L-7.5,获得背向连接的2个鸡痘病毒启动子片段——PE/L-7.5,并将该片段克隆到重组质粒pFP1GB-FP2GPF获得重组质粒pGB-GFP,该质粒即为鸡痘病毒的转移质粒。在质粒pGB-GFP中,2个背向连接的启动子被克隆到的GB和GFP基因之间,分别启动GB和GFP基因的表达。经酶切和测序鉴定pGB-GFP,启动子PE/L和P7.5已分别正确地插入到GB和GFP基因之间,分别启动外源表达基因GB和筛选标记基因GFP的表达,从而证明已获得表达鸡传染性喉气管炎病毒GB基因重组鸡痘病毒转移载体DGB-GFP。该载体为下一步获得表达鸡传染性喉气管炎病毒GB基因的重组鸡痘病毒奠定基础。
-
-
闫瑾;
刘琥;
金梅林
- 《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会》
| 2007年
-
摘要:
伪狂犬病毒通用载体pIE-CMV是一种优良的转移载体。其上含有一个人巨细胞病毒启动子CMV,多克隆位点。(MCS),终止子BGH Poly(A)。两端同源臂的大小分别为0.8kb和2.5kb,完全满足同源重组的要求。构建多价伪狂犬病毒基因工程疫苗的候选毒株需要构建双基因或多基因共表达的转移载体。为了验证以pIE-CMV基础构建双基因表达转移载体的可行性和研究上下游基因表达量之间的关系,本研究利用两种报告基因EGFP(增强绿色荧光蛋白基因)和Ds Red(红色荧光蛋白基因)分别构建由单CMV启动子并由IRES(内部核糖体进入位点。)连接的和双CMV启动子所驱动的双基因共表达载体pIE-GIR和pIE-RG..通过pIE-GIR和pIE-RG分别转染IBRS-2(猪肾传代细胞)来验证载体构建方式是否正确以及初步判断上下游基因表达量之间的关系。
-
-
李文刚;
吴凤笋;
樊淑华;
项朝荣;
韩勇;
卢中华
- 《中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛》
| 2006年
-
摘要:
根据已发表的细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)NADL-2株全基因序列,设计一对引物用PCR方法扩增出PPV VP2基因,将其连接到pGEM-T载体中,此重组质粒命名为pVP2.对含伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)Min-A株gD、gI、gE、11K全基因,gG、28K基因部分编码区的质粒pPR128进行改造,用StuI和SphI双酶切,切去部分gI、gE基因.然后把两端带有StuI和SphI酶切位点的细小病毒VP2基因插入,构建了含VP2基因的转移载体pPR-VP2.上述结果为进一步研制猪伪狂犬病-细小病毒病的二价基因工程疫苗奠定了基础.
-
-
-
史秋梅;
王凤霞;
向华;
王延树;
严悌昆;
郑翠玲;
宣华
- 《中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会》
| 2006年
-
摘要:
根据GenBank已发表O型FMDVP1基因序列,应用Primers5.0软件设计特异性引物,以O/DG/2005株为模板,扩增其中的P1完整基因序列.将所扩增的基因片断插入伪狂犬病病毒gI/E基因缺失转移载体pIESLacZ的BamH Ⅰ酶切位点,经PCR方法和限制性酶切方法鉴定该基因已成功插入了转移载体并且插入方向正确,获得了重组伪狂犬病毒转移载体pIESLacZP1,此转移载体可与伪狂犬病病毒进行细胞内同源重组,获得了携带FMDV P1基因的PRV重组病毒.
-