防御酶活性

摘要： 【目的】由灰霉菌引起的月季灰霉病是月季采后危害最严重的真菌性病害。据统计由灰霉病造成的月季采后损害在30%~70%,严重制约了月季产业的发展。因此,探索月季花器官对灰霉病的抗性机制,了解月季切花对灰霉菌胁迫的适应性具有重要意义。【方法】利用酶联免疫试剂盒测定感染灰霉菌的月季花器官超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),几丁质酶(CHT),多酚氧化酶(PPO)和β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性随时间的变化情况;并对其PPO、POD和GLU合成关键酶RcPPO,RcPOD和RcBGLU的基因表达量进行分析;最后利用茉莉酸(JA),脱落酸(ABA),水杨酸(SA),2,4表油菜素内酯(BR)和1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)5种外源激素作为诱导剂,测定月季花器官5种酶活性在不同激素处理后灰霉菌胁迫下的变化情况。【结果】在灰霉菌胁迫下,月季花器官PPO、GLU和POD活性呈持续显著上升趋势,CHT活性在60 h后显著升高,SOD活性呈持续显著下降的趋势;RcPPO,RcPOD和RcBGLU基因表达量持续显著升高;月季花器官经JA和BR处理灰霉菌胁迫后PPO和GLU活性持续显著升高(P<0.05),ACC处理能持续显著增高其CHT活性,ABA和SA处理能在灰霉菌侵染前期显著增强其POD活性,并显著降低其SOD活性。对5种酶活性的Pearson相关性分析结果显示,SOD和其他4种酶活性呈负相关。【结论】外源BR、JA和ACC通过直接诱导PPO,CHT和GLU活性的变化增强月季花器官抗灰霉病的能力,外源ABA和SA则能够降低SOD活性,提高POD活性。本研究为今后研究月季花器官对灰霉菌的抗性机制和防治方法提供了理论基础。

摘要： 本文旨在探究二斑叶螨Tetranychus urticae为害对草莓Fragaria×ananassa Duch.叶片内过氧化氢(H_(2)O_(2))、丙二醛(MDA)含量以及部分防御酶活性的影响。在草莓苗上接种不同数量(5~25头)的二斑叶螨,分别在接种后的24 h、48 h和72 h取样,分析草莓叶片内H_(2)O_(2)、MDA的含量以及部分防御酶的活性。结果显示,二斑叶螨为害的草莓叶片内H_(2)O_(2)和MDA的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性随着时间的延长而呈现先升后降的趋势,在二斑叶螨持续为害草莓叶片24 h、48 h和72 h时,受损草莓叶片中H_(2)O_(2)的含量均显著高于对照(P<0.05),不同密度二斑叶螨为害的草莓叶片中H_(2)O_(2)的含量均显著高于对照(P<0.05),但与取食时间关系不大。当为害时间达到48 h时,MDA的含量和SOD的活性均达到最高峰,此时它们均与二斑叶螨的密度密切相关。当二斑叶螨为25头/叶时,MDA的含量和SOD的活性分别约是对照的3.6倍和10倍。过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性随时间延长不断升高,均在二斑叶螨为害72 h时达到最高峰。同时,二斑叶螨的为害时间和为害密度之间存在一定的交互作用。以上结果表明草莓叶片主要通过调节其体内H_(2)O_(2)和MDA的含量以及各种防御酶活性的变化,对二斑叶螨的为害产生应激反应。

摘要： 为了探明6种供试百香果品种抗茎基腐病等级,摸清百香果抗茎基腐病与防御酶的相关性,进一步探讨百香果不同品种抗病机理。本试验通过对不同百香果品种进行活体接种,并在接种后不同时期观测取样,调查病斑生长情况;统计接种病菌对地上部分与地下部分生长影响;测量过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)5种防御酶活性变化。结果显示:叶片病斑扩展最小为黄果品种,其次是紫果品种,最大为绿皮品种,感病指数分别为“黔黄1号”<“芭乐味黄金果”<“贵寒1号”<“台农1号”<“紫香1号”<“绿皮荔枝味百香果”;接种茎基腐病菌能显著影响百香果的生长,影响最大为绿皮品种,其次为紫果品种,最小为黄果品种;接种病菌后叶片中5种防御酶活性均呈上升趋势,防御酶活性最高是黄果品种,其次是紫果品种,最后是绿皮品种。POD、CAT、SOD防御酶活性在黄果品种接种病菌7d后出现峰值,而紫果品种及绿皮品种在14d出现峰值,而PPO、PAL 2种酶活性都在接种14d后出现峰值。防御酶活性强弱或出现峰值时间早晚与抗病性具有一定相关性,抗病越强则植株防御酶活性则越强,并且有的酶出现峰值的时间越早。

摘要： 为了明确棉花AP2/ERF转录因子基因GhB301在抗枯萎病中的功能,以过表达GhB301转基因棉花纯合株系(OE)与野生型对照YZ-1(WT)为材料接种枯萎病菌,研究接菌后不同棉花材料叶片中防御酶活性变化及抗病相关基因的表达差异。结果显示:接菌后0~7 d,随着接菌时间的延长,棉花叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)活性逐渐增高,均呈先增加后降低的变化趋势,但转基因株系中酶活性提高的更快、峰值更高;接种棉花枯萎病菌24 h后,测定各材料中苯丙烷代谢途径(GhPAL5、GhC4H1、GhC3H1、GhHCT1、GhF5H2、GhCCR1)、JA/ET路径(GhAOC1、GhAOS1、GhEIN2、GhERF1、GhJAZ1)、SA路径(GhICS1、GhEDS1、GhPAD4、GhNPR1)、PR基因(GhPR1、GhPR2、GhPR4、GhPR5)等抗病相关基因的相对表达量,除GhERF1、GhJAZ1、GhNPR1外其余均在转基因株系中上调表达。推测在棉花中过表达GhB301基因提高了防御酶活性和抗性基因的表达,从而增强棉花对枯萎病的抗性。

摘要： 【目的】揭示丛枝菌根(arbuscular mycorrhizal,AM)真菌−根内根孢囊霉(Rhizophagus intraradices)对枸杞植株的促生效果和抗根腐病能力。【方法】通过盆栽试验,设置不接种微生物(CK)、接种病原菌腐皮镰刀菌(Fusarium solani)(FS)、接种根内根孢囊霉(RI)和双接种(RI+FS)共4个处理,测定菌根侵染率、病情指数、植株生长指标及相关防御酶活性等,综合评价AM真菌对枸杞生长和抗根腐病的效果。【结果】RI处理后90 d,枸杞株高、茎粗、鲜质量和总叶绿素含量较CK显著增加54.86%、35.94%、126.91%和57.14%(P<0.05),其根系侵染率达45.61%;与FS处理相比,RI+FS处理下枸杞根腐病防治效果高达62.79%;RI+FS处理后枸杞植株体内多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性较FS显著提高60.81%、51.72%、48.13%、57.54%和88.31%(P<0.05)。【结论】根内根孢囊霉具有促进枸杞生长和增强植株对根腐病抗性等作用,这种抗性可能来源于AM真菌与枸杞根系形成的良好共生体系,可提高枸杞生理代谢水平,激发其抗病机制。

摘要： 【目的】试验以赣南‘纽荷尔’脐橙为试材,探究茉莉酸甲酯(MeJA)诱导脐橙果实抗青霉病效应及其与相关防御酶活性的关系,为MeJA应用于果实贮藏保鲜提供理论参考。【方法】接种前12,24,36,48 h分别用25,50,100,500,1000μmol/LMeJA熏蒸脐橙果实,接种浓度为1.25×10^(6)spores/mL青霉病菌(Penicilliumitalicum)孢子悬浮液,测定脐橙果实经MeJA预处理后病斑直径及相关防御酶活性。【结果】50μmol/L MeJA熏蒸处理24 h诱导脐橙果实抗青霉病效果最佳,其诱导效应为27.11%。与对照相比,50μmol/LMeJA熏蒸处理脐橙果实在接种后第8天病斑直径显著降低,诱导效果最佳,达20.87%,25,50,100,500,1000μmol/LMeJA其诱导效果依次为11.53%、8.20%、6.10%、4.60%和4.10%。脐橙果实经MeJA熏蒸处理24 h和36 h在发病第4~10天中其诱导效果均显著高于熏蒸12 h和48 h对照组。其中接种后第4天,熏蒸24 h和36 h诱导效果最佳,依次为27.11%和26.68%,显著高于熏蒸12 h和48 h诱导效果的11.52%和3.66%(P<0.05)。此外,在测定的相关防御酶活性中,接种后24~36 h的MeJA处理组过氧化物酶(POD)活性均显著高于对照组。MeJA处理组于接种后0~24 h多酚氧化酶(PPO)活性呈先上升后下降趋势,而MeJA处理组的超氧化物歧化酶(SOD)在接种后0~12 h活性较低,随着诱导时间延长,活性高于对照组。而抗坏血酸过氧化物酶(APX)和过氧化氢酶(CAT)活性一直保持较高水平,且48~60 h呈现升高趋势。MeJA处理组丙二醛(MDA)含量于接种后48~60 h开始降低,且接种后24~48 h能维持病程相关蛋白β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)和几丁质酶(CHI)较高活性。【结论】25~1000μmol/L MeJA于接种前12~48 h熏蒸脐橙果实,能增强果实防御能力,提高果实对青霉病的抗性和果实中防御酶POD、PPO、APX和CAT以及病程相关蛋白CHI、GLU活性,降低MDA含量,延缓膜脂过氧化。上述结果暗示MeJA处理能抑制脐橙果实青霉病的发生可能与其提高防御酶活性和病程相关蛋白酶的水平有关,可为柑橘果实采后贮藏保鲜提供理论依据和技术参考。

摘要： 为探明西瓜防御酶活性变化与病毒病抗性之间的关系,以高抗、抗、感3种不同抗性的西瓜品系为材料,采用人工摩擦接种小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV),测定接种后西瓜幼苗叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化氢酶(CAT)活性的变化.结果表明,接种后3种不同抗性西瓜品系叶片SOD、POD、PAL、CAT、PPO活性均显著高于其对照(不接种ZYMV);高抗和抗性品系的叶片SOD、POD、CAT、PAL活性分别在接种后第4、4、4、2天达到峰值,均较感病品系提前2 d,且峰值期高抗品系酶活性较其对照增幅分别为29.80％、63.44％、55.62％、31.63％,抗性品系酶活性较其对照增幅分别为23.72％、58.13％、43.98％、19.35％,且均高于感病品系(14.29％、50.42％、39.78％、15.91％);叶片PPO活性增幅和峰值出现时间在3种不同抗感性品系间无明显规律.可见,SOD、POD、PAL、CAT、PPO活性越高,西瓜品系的抗ZYMV能力越强;SOD、POD、PAL、CAT活性变化与西瓜病毒病抗性密切相关,在抗病生理机制中起重要作用,这4种酶活性峰值出现的时间及增幅大小可作为西瓜ZYMV抗性筛选的重要生理指标.

摘要： 为探明YBUF5和YBUF7菌株对人参锈腐病的防病作用及人参植株内防御酶活性的影响,进行了田间防病试验并检测人参植株内几种主要防御酶活性(POD、CAT、SOD、PAL).结果表明:YBUF5、YBUF7及混合菌株对人参植株安全,并有一定的促进作用.田间防病试验中拮抗放线菌菌株YBUF5、YBUF7对人参锈腐病有较强防病作用.其中,YBUF5菌株的防效为69.88％;YBUF7菌株的防效为60.24％;混合菌株的防效为51.81％.YBUF5、YBUF7及混合菌株处理的健康人参组织内的主要防御酶活性有升高;受人参锈腐病菌胁迫的人参组织中主要防御酶的活性有明显升高的趋势.但YBUF5和锈腐病菌、YBUF7菌株和锈腐病菌,2种处理的人参组织中主要防御酶的活性要低于只接人参锈腐病菌,但是却高于无菌水处理.说明YBUF5和YBUF7菌株及混合菌株可以诱导人参组织内主要防御酶活性的升高.

摘要： 以籽用美洲南瓜(Cucurbita pepo L.)白粉病抗病品系F2和感病品系M3为试材,在人工气候箱内接种白粉病生理小种2US孢子悬浮液,考察在接种白粉病菌后南瓜幼苗植株与白粉病菌的互作、叶片活性氧代谢及保护酶活性的变化,探讨南瓜抵御白粉病的生理机制.结果表明:(1)与感病品系M3相比,接种白粉病菌后,抗病品系F2叶片上病原菌发育缓慢,较难侵染叶片.(2)抗病品系F2在感病初期叶片H2O2、O-·2含量迅速升高后逐渐下降,而感病品系在感病初期H2O2、O-·2含量上升缓慢,在达最大值后始终保持较高水平,且感病品系叶片MDA含量始终高于抗病品系;组织化学染色分析发现,抗病品系叶片着色比感病品系快,之后着色面积有所减少并趋于较低水平.(3)抗病品系F2和感病品系M3叶片抗氧化酶CAT、SOD、POD活性及PAL、PPO活性在接种白粉病菌后均显著增加,但抗病品系的活性及其增幅均高于感病品系.研究发现,籽用美洲南瓜抗病品系叶片上白粉病菌发育缓慢,较难受到侵染,生成菌丝体后叶片上粉状斑点较小;抗病品系在被白粉病菌侵染初期依靠活性氧的增加抵御病原菌的入侵,随着活性氧含量增加抗病品系通过迅速增加自身抗氧化酶活性来防止氧化胁迫;与感病品系相比,抗病品系在受病原菌侵染后能迅速增加PAL、PPO活性以抵御病原菌侵染.

摘要： 绿原酸是苹果中含量最高的酚类物质,为探究外源绿原酸对苹果灰霉病的影响,本研究首先通过体外抑菌实验证实绿原酸可抑制灰葡萄孢(Botrytis cinerea)生长,并确定了最佳抑菌质量浓度(300?μ?g/mL).以此质量浓度的绿原酸浸泡富士苹果30?min,24?h后损伤接种灰葡萄孢,以清水浸泡30?min的富士苹果作为对照,同时测定相关代谢酶活力及总酚、类黄酮和木质素含量.结果表明:与对照组相比,300?μ?g/mL绿原酸处理能显著降低苹果灰霉病发病率且减缓病斑扩展(P<0.05);提高几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活力,诱导酚类代谢途径中多种酶类的响应,具体表现为显著提高苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸-4-羟化酶以及4-香豆酰辅酶A连接酶活力(P<0.05),促进苹果果实总酚、类黄酮和木质素等抗性物质的积累,从而减缓灰霉病的发展.研究可为绿原酸在苹果采后灰霉病防治中的应用提供理论依据.

摘要： 花生网斑病(Peanut Web Blotch)是在花生产地发生较为普遍的一种病害,其病原为Phoma arachidicola,该病害主要在叶片正面上形成边缘网纹状不规则褐色病斑,使叶片光合作用下降,造成严重落叶,果实不饱满,进而使花生减产,严重者可达30％.同时,花生感染网斑病后,其体内的活性氧代谢和防御酶活性均会产生明显变化,进而实现防御反应.笔者针对白沙1016感染网斑病菌后其体内的生理生化反应展开研究，测量感染后其体内超氧阴离子、丙二醛(MDA)含量和防御酶活性的变化，旨在探索白沙1016对花生网斑病的抗性及其抗病机制，为改良白沙1016品种，提高花生网斑病抗性提供理论参考。

摘要： 灰霉病是由半知菌亚门灰葡萄孢属(Botrytis cinerea Pers.ex Fr.)侵染所致,是一种世界性重要病害.本文初步研究了植物乳杆菌IMAU10014对番茄的促生长作用和对番茄灰霉病的防治效果以及对植株叶片几种防御酶活性的影响.结果表明:对番茄浸种6-8h,催芽效果最好;另外在番茄幼苗接种病原菌后,再由IMAU10014处理,病情指数可由47.22分别降至18.25和14.45;与植物防御抗病相关的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)及多酚氧化酶(PPO)活力都有明显增加。

摘要： 灰霉病是由半知菌亚门灰葡萄孢属(Botrytis cinerea Pers.ex Fr.)侵染所致,是一种世界性重要病害.本文初步研究了植物乳杆菌IMAU10014对番茄的促生长作用和对番茄灰霉病的防治效果以及对植株叶片几种防御酶活性的影响.结果表明:对番茄浸种6-8 h,催芽效果最好;另外在番茄幼苗接种病原菌后,再由IMAU10014处理,病情指数可由47.22分别降至18.25和14.45;与植物防御抗病相关的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)及多酚氧化酶(PPO)活力都有明显增加.

摘要： 目的：研究接种甘蔗宿根矮化病(Ratoon stuning disease,RSD)菌后甘蔗防御酶活性的变化,为进一步探明甘蔗与RSD病菌的互作机制提供理论依据. 方法：以温汤脱毒后的甘蔗品种桂糖11号(GT11)为材料,设RSD菌液浸种为处理,ddH2O浸种为对照,测定甘蔗茎、叶不同时期超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)等5种防御酶活性变化. 结果：在RSD病菌胁迫下,甘蔗茎和叶片中相关防御酶活性均有所变化,茎中除APX活性一直高于对照外,其他酶活性均表现为在90d时低于对照,180d时高于对照;叶中除POD活性一直高于对照外,其他酶活性在90d时高于对照,180d时低于对照. 结论：在RSD病菌胁迫下,甘蔗茎和叶片中CAT、SOD、POD、APX及GR活性均有所提高,随着胁迫时间的延长在茎中出现逐渐高于对照的趋势,叶片则与此相反.

摘要： 棉花黄萎病是由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb)引起的一种重要病害,极大地限制了棉花产量的提高.对棉花黄萎病抗性的机理研究一直是棉花热点之一.植物的抗病反应机理涉及植物体内一系列复杂的生理生化变化,大量研究表明,在寄主植物和病原物抗病反应和亲和性互作的感病反应中过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)等植物体内较重要的保护酶和防御酶与植物抗性密切相关.而有关防御酶酶活性和黄萎病抗性方面的研究较少.为了进一步了解棉花黄萎病抗性机制,本研究以抗黄萎病品种陕1155、感黄萎病品种中植86-1、抗黄萎病种质川737、川2802为供试材料,采用人工接种大丽轮枝菌,并于接种前和接种后24 h、48 h、72 h、96 h、120 h分别采集长势一致同部位叶片测定酶活性,研究了大丽轮枝菌诱导这些品种的过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性差异及其与品种抗性的关系.rn 结果表明,接种大丽轮枝菌后,不同抗性品种POD、PPO、SOD和PAL活性与未接病菌的对照相比均明显提高,抗病品种POD和PPO活性较感病品种上升快且维持较高活性水平,且抗病品种POD酶活力高峰较感病品种出现得早;抗病品种的SOD和PAL酶活力较感病品种上升幅度更大,维持时间更长.相关性分析表明:接种后24～120 h,不同抗性品种平均POD、PPO、SOD和PAL活性与品种病情指数显著负相关,相关回归方程分别为y=-0.5823x+35.679(r=-0.9744,p=0.042)、y2-0.1065x+16.721(r=-0.9376,p=0.043)、y=-1.7371x+286.329(r=-0.9357,p=0.058)、3y=-0.0254x+7.641(r=-0.9611,p=0.038),即POD、PPO、SOD和PAL酶活力与品种的黄萎病抗性呈正相关关系,说明在人工接种条件下它们可以反映出棉花品种的抗病差异,可以将POD、PPO、SOD、PAL酶活力作为棉花抗病性鉴定的参考指标.

摘要： 百合枯萎病是危害百合生产较为严重的病害，为有效防治该病害，选育抗性品种是较好的方法，而采用百合无性系进行离体筛选可加速抗病品种的培育。本研究以百合品种元帅‘Acapulco’、卡萨布兰卡‘Casa Blanca'2个品种的愈伤组织为试验材料，附加不同浓度的镰刀菌粗毒素用于突变体的筛选，结果表明：在含毒素浓度为75％的培养基上，百合愈伤组织的存活率均小于30％，因此，75％的毒素浓度可以作为百合抗镰刀菌突变体离体筛选的筛选压力；进而分析百合入选系再生苗叶片中过氧化物酶(POD)，多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性变化，发现经筛选的再生苗与未经筛选的对照株相比，叶片中3种与抗病性相关的防御酶活性都有所增强。因此利用镰刀菌粗毒素加压筛选百合无性系突变体可获得抗病性中间材料。

摘要： 采用水培试验方法,研究了喷施不同浓度硼元素(5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、30 mg/L)对烟草幼苗感染马铃薯Y病毒(Potato virus Y-vein necrosis strain,PVYN)后防御酶系活性的影响.结果表明:硼浓度为10 mg/L,烟苗发病最迟,在第12天表现症状,且症状最轻,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性最高,均在接种后的第12天达到峰值：但硼浓度为5 mg/L、20 mg/L、30 mg/L,在第9天开始显症,但发病程度较对照轻,其3种酶的活性较低,但均高于对照.

摘要： 采用水培试验方法,研究了喷施不同浓度硼元素(5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、30 mg/L)对烟草幼苗感染马铃薯Y病毒(Potato virus Y-vein necrosis strain,PVYN)后防御酶系活性的影响.结果表明:硼浓度为10 mg/L,烟苗发病最迟,在第12天表现症状,且症状最轻,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性最高,均在接种后的第12天达到峰值：但硼浓度为5 mg/L、20 mg/L、30 mg/L,在第9天开始显症,但发病程度较对照轻,其3种酶的活性较低,但均高于对照.

摘要： 采用水培试验方法,研究了喷施不同浓度硼元素(5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、30 mg/L)对烟草幼苗感染马铃薯Y病毒(Potato virus Y-vein necrosis strain,PVYN)后防御酶系活性的影响.结果表明:硼浓度为10 mg/L,烟苗发病最迟,在第12天表现症状,且症状最轻,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性最高,均在接种后的第12天达到峰值：但硼浓度为5 mg/L、20 mg/L、30 mg/L,在第9天开始显症,但发病程度较对照轻,其3种酶的活性较低,但均高于对照.

摘要： 采用水培试验方法,研究了喷施不同浓度硼元素(5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、30 mg/L)对烟草幼苗感染马铃薯Y病毒(Potato virus Y-vein necrosis strain,PVYN)后防御酶系活性的影响.结果表明:硼浓度为10 mg/L,烟苗发病最迟,在第12天表现症状,且症状最轻,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性最高,均在接种后的第12天达到峰值：但硼浓度为5 mg/L、20 mg/L、30 mg/L,在第9天开始显症,但发病程度较对照轻,其3种酶的活性较低,但均高于对照.

摘要： 本发明提供一种用于检测酪氨酸酶活性的SERS基底及利用该基底检测酪氨酸酶活性的方法，利用三价铁离子与NTA形成螯合物Fe(NTA)，当体系中出现TYR时，催化氧化多巴胺变成多巴醌，多巴胺含量降低，抑制了Fe(NTA)DA络合物的形成，拉曼信号降低。利用AuPB@Au NPs做为拉曼增强基底，普鲁士蓝(PB)做为核壳结构中的内标信号分子，该分子只在生物静默区有强的谱峰，无背景信号干扰，可以用于校准检测过程中的信号波动，Fe(NTA)DA的拉曼特征峰1480cm‑1信号与普鲁士蓝2121cm‑1信号强度的比值(I1480/2121)与酪氨酸酶活性之间存在着良好的线性关系，检测限较低，可达0.0003U/mL。

摘要： 本发明涉及活性型突变酶或可溶性化突变蛋白的制造方法，其为对失活型酶或不溶性蛋白进行特定，对失活型酶或不溶性蛋白的存在于α螺旋结构部分的亲水性区域的疏水性氨基酸、存在于疏水性区域的亲水性氨基酸进行特定，制备对存在于亲水性区域的疏水性氨基酸、存在于疏水性区域的亲水性氨基酸进行替换而成的氨基酸序列进行编码的基因，或者对失活型酶的氨基酸序列中的序列同源性的保守性相对低的氨基酸进行特定，制备将该氨基酸用保守性比该氨基酸高的氨基酸进行替换而成的氨基酸序列进行编码的基因，在异源表达系统中使该基因表达，获得蛋白，从所得蛋白中选择活性型突变酶或可溶性化突变蛋白。

摘要： 本发明涉及弹性蛋白酶活性抑制剂、弹性蛋白酶活性抑制外用剂及弹性蛋白酶活性抑制饮食用组合物，其中，以担子菌X(Basidiomycetes‑X)FERM BP‑10011的干燥粉末或其提取组合物为有效成分。

摘要： 本发明涉及一种农作物逆境防御酶提取液及用其提取酶液的方法，包括去离子水、三羟甲基氨基甲烷、抗坏血酸、二硫苏糖醇、谷胱甘肽、六水氯化镁和甘油；其中，每500ml溶液中包含3.00‑3.10g重量的三羟甲基氨基甲烷、0.08‑0.09g重量的抗坏血酸、0.07‑0.08g重量的二硫苏糖醇、0.15‑0.16g重量的谷胱甘肽、0.50‑0.60g重量的六水氯化镁以及95‑105ml的甘油，且该农作物逆境防御酶提取液的pH值为6.9‑7.1。该发明克服了现有农作物逆境研究中对农作物逆境酶中的过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶需要逐个提取，存在步骤繁琐、耗时长等缺点，其采用特别的组分比例配制而成，可一次提取获得过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶这5种酶的酶液，大大简化了试验程序，提高了试验效率，且提取效果好、酶活性稳定。

摘要： 本发明涉及一种包括一个单亚基的单体多肽，所述单亚基包含[NiFe]‑氢化酶类蛋白的活性位点，所述单体多肽具有氢化酶活性。

摘要： 本发明提供了一种用于检测凝血酶活性及凝血酶抑制剂活性的荧光传感器及其制备方法与应用，所述荧光传感器包括由聚集诱导发光探针与凝血酶发色底物交联得到的纳米颗粒。本发明提供的荧光传感器制备简单、反应条件温和，且成本低廉，易于批量制备，既可用于检测凝血酶活性又可用于凝血酶抑制剂活性的检测，进而也可用于药物中抗凝血组分的筛选，相较于现有技术的检测或筛选方法而言具有成本低、简单、快速、高效的优势。

摘要： 本发明提供了一种TET酶活性测定方法，其特征在于其步骤包括：将5mC DNA与待测TET酶混合后孵育；在反应体系中加入SDH和DCPIP进行反应；加入三氯乙酸终止反应；酶标仪测量反应液在600nm处的吸收峰值，峰值越高则代表酶活性越强。还公开了SDH和DCPIP联合在测定TET酶活性中的应用，以及TET酶活性小分子激活剂或抑制剂的高通量筛选方法。本发明提供了一种简便快速的TET酶活性测定方法，利用TET酶氧化反应产物琥珀酸盐在琥珀酸脱氢酶的催化下释放出还原氢，还原氢被DCPIP捕获生成DCPIPH2（蓝色），在波长600 nm处出现特异性的吸收峰。整个方法流程只需要4步操作、一管式反应、耗时1 h即可完成，具有成本低、通量大、适用范围广和准确性高的优点。

摘要： 本发明提供一种端粒酶活性检测试剂盒，包括端粒酶延伸体系组分、磁珠体系组分和信号酶加底物的信号生成体系，还提供使用该检测试剂盒检测样品的端粒酶活性的方法。本发明的检测试剂盒和检测方法，是一种基于磁珠‑酶体系对端粒酶活性进行可视化和便携式检测的三重模式系统，结合了磁珠磁分离的优点和酶促反应信号放大的优点。通过糖苷键水解酶和磷酸酯键水解酶两种不同的酶和相应的三种不同的酶底物，可以分别通过荧光检测法、比色检测法和ATP检测法三种基于不同检测原理的方法，对同一样品同时进行平行检测，可以避免假阳性结果和假阴性结果，使检测结果更加可信，并且可以用于端粒酶活性的快速测定和单细胞水平的测定。

摘要： 本申请涉及一种端粒酶活性检测试剂盒，包括端粒酶底物引物、dNTPs、端粒酶逆转录缓冲液、量子点分子信标，其中量子点分子信标由寡核苷酸茎环、量子点荧光基团和淬灭基团组成，量子点荧光基团与寡核苷酸茎环的序列的5’端连接，淬灭基团与寡核苷酸茎环的序列的3’端连接，其中量子点荧光基团优选为CdTe:Zn

摘要： 本发明提供一种用于检测酪氨酸酶活性的SERS基底及利用该基底检测酪氨酸酶活性的方法，利用三价铁离子与NTA形成螯合物Fe(NTA)，当体系中出现TYR时，催化氧化多巴胺变成多巴醌，多巴胺含量降低，抑制了Fe(NTA)DA络合物的形成，拉曼信号降低。利用Au