TET酶活性测定方法及TET酶活性小分子激活剂或抑制剂的高通量筛选方法

摘要

本发明提供了一种TET酶活性测定方法，其特征在于其步骤包括：将5mC DNA与待测TET酶混合后孵育；在反应体系中加入SDH和DCPIP进行反应；加入三氯乙酸终止反应；酶标仪测量反应液在600nm处的吸收峰值，峰值越高则代表酶活性越强。还公开了SDH和DCPIP联合在测定TET酶活性中的应用，以及TET酶活性小分子激活剂或抑制剂的高通量筛选方法。本发明提供了一种简便快速的TET酶活性测定方法，利用TET酶氧化反应产物琥珀酸盐在琥珀酸脱氢酶的催化下释放出还原氢，还原氢被DCPIP捕获生成DCPIPH2（蓝色），在波长600 nm处出现特异性的吸收峰。整个方法流程只需要4步操作、一管式反应、耗时1 h即可完成，具有成本低、通量大、适用范围广和准确性高的优点。