移植,异种

摘要： 目的 探讨改良胫后肌移位术治疗腓总神经损伤所致足下垂及内翻畸形的早期疗效.方法 采用回顾性病例系列研究分析2017年12月至2019年10月北京积水潭医院收治的6例腓总神经麻痹性足下垂及内翻患者的临床资料,其中男4例,女2例;年龄33～48岁[(39.5 ±6.0)岁].左侧4例,右侧2例.患者均行胫后肌移位术,通过异体肌腱移植,将胫后肌止点重建于第四跖骨,纠正足下垂及内翻畸形.比较术前和末次随访时踝关节主动背屈和跖屈的活动度、足内翻和外翻的活动度;60°/s角速度时,踝关节背屈和跖屈的等速力矩峰值、足部冠状面内翻和外翻的等速力矩峰值.末次随访时观察足部的影像学Meary角、跟骨投照角及第四跖骨直径.术前和末次随访时采用美国足踝外科协会(AOFAS)踝-后足评分评价踝关节功能.结果 患者均获随访6～17个月[10(6,15)个月].末次随访时,踝关节主动背屈为6(0,10)°,足外翻为3(0,5).,较术前[-31(-33,-28).、-10(-12,-8).]均显著改善(P ＜0.05);600/s角速度的等速力矩峰值,踝关节背屈力矩[(7.7±0.8)Nm]、足外翻力矩[(7.2±0.7)Nm]较术前[(0.0±0.0)Nm、(2.1 ±0.6)Nm]均显著提高(P＜0.01).影像学检查未见获得性扁平足畸形和第四跖骨止点处形变.AOFAS踝-后足评分由术前的50～73分[(61.3 ±8.4)分]提高至末次随访时的75～97分[(86.8±7.2)分](P＜0.01).结论 改良胫后肌移位术治疗腓总神经损伤后足下垂及内翻畸形,能够增加踝关节背屈和外翻的力矩,改善踝关节活动度,促进踝关节功能恢复.

摘要： 目的 探讨骨髓间充质干细胞外泌体(BMSC-Exo)通过调控Notch信号通路促进移植脂肪血管化的机制.方法 获取1例2020年8月在空军军医大学第一附属医院整形外科行腹部脂肪抽吸术的30岁健康女性的废弃脂肪,处理后将脂肪颗粒分别移植于12只Balb/c裸鼠背部皮下左、右两侧,每侧注射0.5 ml,建立脂肪移植模型.左侧设为外泌体组,每周以50 μg的BMSC-Exo溶于100 μl PBS溶液中,移植后即刻在脂肪周围多点局部注射,然后每周注射1次,连续4次;右侧设为对照组,于同一时间注射同等剂量的PBS溶液.观测项目:(1)分别在术后4、8周获取2组脂肪移植物组织,用电子天平称其湿重并计算保留率.(2)术后8周,通过HE染色、免疫荧光检测脂肪移植物中脂滴包被蛋白A(Perilipin A)阳性细胞,观察2组脂肪细胞的结构和完整性;(3)术后8周,免疫组织化学法检测脂肪移植物中CD31阳性细胞、计算微血管密度,检测Notch1、Notch4阳性细胞、计算阳性细胞面积比例;(4)术后8周,实时荧光定量PCR检测脂肪移植物中Notch1、Notch4、VEGF mRNA相对表达量.应用Graphad Prism 8.0分析数据,组间比较采用t检验,P＜0.05表示差异有统计学意义.结果 (1)术后4、8周,对照组脂肪湿重保留率分别为(41.15±9.68)％和(34.30±6.45)％,外泌体组分别为(61.77±10.98)％和(55.93±5.89)％,均高于对照组(P＜0.05).(2)术后8周,外泌体组较对照组中脂肪细胞结构完整性更好,具有较多的新生毛细血管;外泌体组中有较多的完整Perilipin A阳性脂肪细胞,而对照组中则较少.(3)对照组微血管密度为(4.67±0.57)个,显著小于外泌体组的(13.00±2.00)个(P＜0.05);对照组每视野下Notch1和Notch4阳性细胞面积比例均低于外泌体组[(0.53±0.28)％vs.(1.67±0.11)％,(0.11±0.06)％vs.(1.20±0.24)％,P＜0.05];(4)外泌体组 Notch1、Notch4、VEGF mRNA 相对表达量分别为 1.53±0.20、1.50±0.26、2.56±0.55,均比对照组(1.00+0.00)明显上调(P＜0.05).结论 BMSC-Exo可能通过上调VEGF mRNA的表达水平激活Notch信号通路,从而促进移植脂肪血管新生,提高移植脂肪保留率.

摘要： 目的 基于新型微载体microcarrier 6复合人原代肝癌细胞接种于具有正常免疫功能的小鼠,以期建立新型肝癌人源肿瘤异种移植(PDX)模型.方法 从5例新鲜的人源肝癌组织中分离提取出原代肝癌细胞,分别与微载体microcarrier 6共培养,体外构建三维肿瘤细胞培养模型.将75只雄性C57BL/6小鼠按移植物不同随机分为3组:细胞对照组、微载体对照组和实验组(每例患者对应3组,共15组,每组5只).采用皮下接种法将肝癌细胞-微载体复合体植入小鼠体内,观察小鼠成瘤时间、成瘤率、病理组织学表现等.计数资料两组间比较采用Fisher精确检验.结果 5例患者的肝癌细胞接种小鼠后有3例对应的小鼠出现成瘤;此3例实验中,对照组均没有小鼠成瘤,仅实验组出现成瘤,实验组15只小鼠中有12只成功成瘤,成瘤率高达80％,与细胞对照组、微载体对照组相比差异均有统计学意义(P值均<0.05),其成瘤时间为5～7 d,移植瘤生长速度快,HE染色可见排列呈巢状或片状、异形性明显的细胞,可见病理性核分裂象,免疫组化染色CK8/18、Hep、Gpc-3均为阳性,符合人源肝癌细胞特点.结论 本实验成功基于microcarrier 6复合人原代肝癌细胞在正常免疫小鼠体内建立了新型人源肝癌PDX模型,此模型可以更好地研究肝癌在免疫功能正常机体中发生、发展机制,同时也为肝癌精准医疗提供了较以往更有价值的新型动物模型.

摘要： 目的 探讨苦参素(oxymatrine,OM)是否能通过调控多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated pro-tein1,MRP1)表达提高多柔比星(doxorubicin,DOX)对人肝癌耐药裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 选用人肝癌多柔比星耐药HepG2/ADM细胞在裸鼠腋下接种,创建裸鼠皮下移植瘤模型.将20只雌性裸鼠随机分成4组:NS组(对照组)、OM组(苦参素组)、DOX组(多柔比星组)、OM+DOX组(多柔比星+苦参素组).药物使用14 d后,取出瘤体,用公式计算肿瘤体积,RT-PCR法检测MRP1之mRNA表达,免疫组化法检测MRP1之蛋白表达,各组进行对比.结果 药物使用14 d后,与NS组相比,OM+DOX组出现MRP1 mRNA与蛋白表达降低(P0.05).结论 苦参素能通过调控MRP1 mRNA及蛋白表达,从而提高多柔比星对人肝癌耐药裸鼠移植瘤的抑瘤作用.

摘要： Objective To compare the primary clinical results of single-bundle anterior cruciate ligament reconstruction(ACLR) with autograft versu auto-allograft.Methods Sixty-six patients with isolated anterior cruciate ligament rupture were treated with hamstring tendon autografts(35 patients) or with auto-allograft(31 patients).Single bundle anterior cruciate ligament reconstruction surgery was applied.The KT-1000 value, Lachman test, axial shift test, Tegner score, Lysholm score and IKDC score were compared between the 2 groups.Results The autograft group were followed up for 36 months.The auto-allograft group were followed up for 33 months.There were no significant differences between the 2 groups in the results of Lachman test, KT-1000 value,pivot test, positive rate, IKDC score, Tegner score and Lysholm score(P>0.05).Conclusion Single-bundle ACLR with autografts and auto-allografts have similar excellent initial clinical results.There was no significant difference between autografts and auto-allografts.%目的 观察自体肌腱和自异体组配肌腱单束重建前交叉韧带的初期临床疗效.方法 选择单纯前交叉韧带完全断裂行前交叉韧带单束重建手术患者66例,分为自体肌腱重建组(自体组)35例和自异体组配肌腱重建组(自异体组)31例,行前交叉韧带单束重建手术.比较2组KT-1000值、Lachman试验、轴移试验、Tegner评分表、Lysholm评分表和IKDC评分.结果 自体组平均随访36个月,自异体组平均随访33个月.2组Lachman试验结果、KT-1000值、轴移试验、阳性率、IKDC评分、Tegner评分、Lysholm评分比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 自体肌腱与自异体组配肌腱单束重建前交叉韧带均能取得优良的初期临床结果,且初期临床疗效相当.

摘要： 目的 探讨姜黄素(CUR)抑制人神经母细胞瘤增殖作用.方法 建立人神经母细胞瘤细胞株免疫活性C57BL/6j小鼠移植瘤模型,随机区组设计分配成四组:(1)生理盐水(NS)对照组,腹腔注射0.2 mL NS,作为阴性对照;(2)CUR组,按50 mg/kg,每2天给药1次,连续2周;(3)环磷酰胺(CP)组,按75 mg/kg给药,每周2次,连续2周,作为阳性对照;(4)CP+CUR组,CUR在CP给药前24h给药,CUR与CP独立给药,时间和剂量同前.每组6只C57BL/6j小鼠,所有药物均于早晨9:00腹腔注射给药,每周监测相对肿瘤体积(RTV),治疗时间共2周,次日处死小鼠,称体质量、称瘤质量(Wt)、计算抑瘤率(IR),5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU)标记检测移植瘤细胞增殖.结果 治疗2周后,CUR组RTV较NS组小,但大于CP组,CUR+CP组最低.随着治疗时间的延长,CUR组、NS组、CP组RTV均呈上升趋势,但CUR+CP组呈下降趋势.CUR组、CP组、CUR+CP组移植瘤的平均Wt分别为(4 342.0±445.6)、(1 369.0±327.4)、(301.2±73.1)mg,IR分别为46.82％、83.23％、96.31％,CUR组、CP组、CUR+CP组移植瘤平均Wt与NS组[(8 164.0±718.6)mg]比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),CP+CUR组移植瘤平均Wt与CP组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).CUR组、CP组、CUR+CP组肿瘤增殖指数分别为0.135 7±0.023 0、0.119 2±0.016 4、0.039 1±0.013 8,与NS组(0.309 7±0.080 3)比较,差异有统计学意义(P＜0.05),同时CP+CUR组与CUR组、CP组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 CUR可抑制人神经母细胞移植瘤增殖,可能协同CP抗肿瘤生长.

摘要： 卵巢癌是致死率最高的女性生殖系统恶性肿瘤，至今其复发转移机制不明，预后未获改善。构建理想的临床前模型有助于开展肿瘤复发转移相关机制的研究。人源性异体移植模型的出现，提供了一种高保真性的研究用临床前模型，目前已初步应用于乳腺癌、肺癌、结肠癌等相关研究，取得了良好实验结果。在卵巢癌方面，该模型的研究刚刚起步。通过对已有文献的检索发现，该模型可以较好地复制原发肿瘤的生物学特点，保留原发肿瘤的异质性。但是，在应用中仍存在一定问题亟需解决，如成瘤率不一致、组织来源有限以及缺乏有效的质量控制标准等问题。现就其研究及应用现状作一综述。%Ovarian cancer has the highest motality among the female reproductive malignancies. The underling mechanism is still unknown, and the prognosis has not been improved significantly. To establish an ideal preclinical model is in favor of the study of recurrence and metastasis in ovarian cancer. Recently, the development of patient derived xenografts model gives us a new platform for preclinical study. Gradually it has been used in the study of breast cancer, lung cancer and colon cancer, where it is proved to be useful. Much less studies on the use of patient derived xenografts model in ovarian cancer has been reported and data was shown promising. Based on the existing literature retrieval, this model could better copy the biological characteristics of the primary tumor and keep the heterogeneity of primary tumor. But there were still some problems need to be solved in the application of it, such as the different tumor take rate, the limited tumor resources and the lack of effective quality control standards. Here this review aims to address the application status, existing problems and application prospects of this model.

摘要： Objective To investigate application feasibility of the heterogeneous de protein cancellous bone in the treatment of lumber intertransverse process spinal fusion.Methods Thirty 6 ～ 8 month healthy male goats were selected to make intertransverse bone bed,and were randomly divided into groups Ⅰ and Ⅱ,with 15 in each group.Group Ⅰ was the left side implanted the tissue engineering bone (A group),and the right side implanted recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2) composite bone (B group);Group Ⅱ was the left implanted autologous bone (C group),and the right side implanted simple heterogeneous de protein cancellous bone (D group).Each group was observed with the Xray,histological morphology,and maximum bending load.Results (1) In groups B and D,postoperative 4-,8-and 12-week X-ray scores were lower than that of group C (P ＜0.05);In group A,postoperative 4-,8-and 12-week X-ray score were (5.30 ± 0.41) points,(8.54 ± 0.89) points,and (11.25 ± 0.91)points,compared to group C,without statistically significant difference (P ＞ 0.05);(2) For groups A,B and D,postoperative 4-and 8-week histological scores were significantly lower than those in group C (P ＜0.05).For group A,postoperative 4-and 8-week histological scores were significantly higher than those of groups B and D (P ＜0.05).The histological scores of groups B and D postoperative 12 weeks were lower than those of group C (P ＜0.05).The histological score of group A postoperative 12 weeks was (11.04 ± 1.52) points,compared to group C without statistically significant difference (P ＞ 0.05);(3) The maximum bending load of groups B and D was lower than that of group C (P ＜ 0.05).The maximum bending load of group A was (60.32 ± 10.10) N,compared to group C without statistically significant difference (P ＞ 0.05).Conclusions The construction of tissue engineered bone by the heterogeneous de protein cancellous bone,its osteogenesis is close to autogenous bone,but simple heterogeneous de protein cancellous bone osteogenesis is poor.%目的 探讨脊柱横突间融合治疗中应用异种脱蛋白松质骨的可行性.方法 选取6～8月龄健康雄性青山羊30只,制备横突间植骨床,按随机数字表法分为Ⅰ组和Ⅱ组,每组15只.Ⅰ组于左侧植入组织工程骨(A组),右侧植入重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)复合骨(B组),Ⅱ组于左侧植入自体骨(C组),右侧植入单纯异种脱蛋白松质骨(D组),观察各组X线、组织学形态以及最大弯曲载荷.结果 (1)B组和D组术后4、8、12周X线评分均低于C组(P＜0.05);A组术后4、8、12周X线评分分别为(5.30±0.41)分、(8.54±0.89)分和(11.25±0.91)分,与C组各期比较差异无统计学意义(P＞0.05).(2)A组、B组和D组术后4、8周组织学评分均低于C组(P＜0.05);A组术后4、8周组织学评分高于B组和D组(P＜0.05);B组和D组术后12周组织学评分低于C组(P＜0.05);A组术后12周组织学评分为(11.04±1.52)分,与C组比较差异无统计学意义(P＞0.05).(3)B组和D组最大弯曲载荷低于C组(P＜0.05);A组最大弯曲载荷为(60.32±10.10)N,与C组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异种脱蛋白松质骨为载体构建组织工程骨成骨性能接近自体骨,但单纯异种脱蛋白松质骨成骨差.

摘要： 本发明公开了一种异种角膜移植物的无菌加工制备方法，采用眼球整体处理，包括两步病毒灭活——紫外线照射和次氯酸钠溶液浸泡、去上皮层、两步脱细胞——血清浸泡和渗透压法、削切脱水和甘油溶液保存步骤。本发明的制备方法不需要干燥和终端灭菌步骤，工艺简单，生产周期短，生产成本低；柔和脱细胞处理，最大程度地保持了天然角膜基质的结构和组成，透明度、力学强度与天然角膜基质无显著性差异，降解与新生角膜组织再生速度相匹配；抗原去除和病毒灭活彻底，生物相容性和生物安全性高；甘油保存，结构和性能能够长期保持稳定；临床使用方便，可替代异体角膜进行角膜移植。

摘要： 本发明公开了一种异种骨材料的脱脂处理方法，取新鲜的异种骨条放入索氏提取器的抽提筒内，利用石油醚在一定条件下不断回流抽提，直到更换后的石油醚经脱脂后其颜色仍然保持澄清；得到脱脂后的异种骨材料。本发明还公开了一种脱蛋白处理方法，将前述脱脂处理后的异种骨材料放入含胃蛋白酶的脱蛋白处理液中进行浸泡，浸泡时pH值控制在1.5～3，然后用碱液灭活胃蛋白酶，反复冲洗、沥干后即可。本发明还公开了一种异种骨移植替代材料的制备方法，将前述脱脂、脱蛋白处理后的异种骨材料进行冷冻干燥、灭菌处理，即得到异种骨移植替代材料。本发明的方法加工制作简单、成本低，产品具有低抗原性、较好的骨传导性及生物力学性能。

摘要： 异种干细胞动物子宫内胎儿移植生产异种动物干细胞方法。它涉及移植学领域、及生物工程领域、医药学领域。为解决造血干细胞来源匮乏等移植学难题，提供被科学界公认的干细胞子宫内移植方法，能够应用异种动物干细胞，实施针对它种动物的干细胞子宫内胎儿移植，在出生后生长为成体它种动物的生存期内，分离获得在成体它种动物体内存在的异种动物干细胞方法与实验方法。例如把人的造血干细胞植入胎羊或胎猪等动物胎儿体内，在出生后生长为成体动物的生存期内，通过每年实施多次造血干细胞动员，能够在成体动物外周血中分离得到，足够多的人造血干细胞。解决造血干细胞来源匮乏等移植学难题。

摘要： 异种干细胞动物子宫内胎儿移植生产异种动物干细胞方法。它涉及移植学领域、及生物工程领域、医药学领域。为解决造血干细胞来源匮乏等移植学难题，提供被科学界公认的干细胞子宫内移植方法，能够应用异种动物干细胞，实施针对它种动物的干细胞子宫内胎儿移植，在出生后生长为成体它种动物的生存期内，分离获得在成体它种动物体内存在的异种动物干细胞方法与实验方法。例如把人的造血干细胞植入胎羊或胎猪等动物胎儿体内，在出生后生长为成体动物的生存期内，通过每年实施多次造血干细胞动员，能够在成体动物外周血中分离得到，足够多的人造血干细胞。解决造血干细胞来源匮乏等移植学难题。

摘要： 本发明涉及动物基因工程领域，尤其涉及一种可用于异种器官移植的供体猪的构建方法。本发明的构建方法包括以下步骤：(1)在猪胎儿成纤维细胞的基础上，敲除GGTA1基因，同时转入基因HLA‑G5，得到GTKO/HLA‑G5+克隆细胞；(2)将GTKO/HLA‑G5+克隆细胞作为核供体进行体细胞核移植，培育得到重组胚，将重组胚移植入代孕母猪，妊娠后产仔得到供体猪。本发明构建了具有重要科研价值和应用前景的基因敲除和转基因GTKO/HLA‑G5+克隆猪，为异种器官移植提供重要的研究工具和新的研究途径。

摘要： 一种异种混合移植用皮片，包括猪皮皮片和自体皮皮片，采用以下方法制备而成：（1）猪皮皮片制备；（2）自体皮皮片制备；本发明以猪为供体，供体来源广泛，并加工成特殊的形状，便于后期与患者自体皮镶嵌混合移植修复创面，可大幅缓解大面积皮肤缺损如烧伤、皮肤撕脱伤等患者皮源缺乏的现状，减少供区损伤，拯救患者生命，具有重大的社会价值，并且具有非常大的产业化、商品化价值，投入临床市场后将带来可观的经济价值。

摘要： 本发明涉及一种异种器官移植基础供体猪的构建方法，属动物生物技术领域。在胎儿成纤维细胞的基础上，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除GGTA1、CMAH、B4GalNT2三个基因，并定点插入hCD55、hCD59、hCD46三个人源化修饰基因，结合体细胞核移植技术构建GTKO/CMAHKO/B4GalNT2KO/hCD55/hCD59/hCD46多基因修饰的异种移植供体基础猪。本发明在一定程度上解决了异种器官移植中存在的抗原抗体免疫排斥反应及补体调节的共性问题，为在基础供体猪的基础上研究开发适合心脏、肾脏、肝脏等器官及胰岛、皮肤等组织特异性的异种器官移植供体猪的构建奠定了基础，对构建多基因修饰的异种移植供体猪具有重要的应用价值和应用前景。

摘要： 本发明公开了一种纳米纤维表面改性的异种脱细胞神经移植物及其制备方法。所述纳米纤维表面改性的异种脱细胞神经移植物由异种脱细胞神经移植物和附着于其表面的可降解聚酯纳米纤维膜组成，异种脱细胞神经移植物为健康哺乳动物的离体周围神经经脱细胞处理得到的细胞外基质。纳米纤维表面改性的异种脱细胞神经移植物经过冷冻干燥处理后水分含量极低，性能稳定，灭菌、封装后可以实现无保护液、常温保存；本发明纳米纤维表面改性的异种脱细胞神经移植物，来源广泛、价格低廉，同时无免疫原性、生物相容性好、使用安全；完整保留了周围神经细胞外基质的微结构，为神经轴突再生、恢复神经传导功能提供天然的管道支架和营养环境。

摘要： 本发明公开了一种具有预防组织粘连功能的异种脱细胞神经移植物及其制备方法。所述预防组织粘连的异种脱细胞神经移植物由异种脱细胞神经移植物和附着于其表面的防粘连高分子层组成；异种脱细胞神经移植物为健康哺乳动物的离体周围神经经脱细胞处理得到的细胞外基质。本发明防粘连异种脱细胞神经移植物，来源广泛、价格低廉，同时无免疫原性、生物相容性好、使用安全；完整保留了周围神经细胞外基质的微结构，为神经轴突再生、恢复神经传导功能提供天然的管道支架和营养环境；本发明预防组织粘连的异种脱细胞神经移植物中的防粘连高分子层在植入体内后可转变为凝胶层附着在脱细胞神经表面，能够很好地起到防止异种脱细胞神经与周围组织粘连的作用。

摘要： 本发明公开了一种脱细胞异种神经移植物及其制备方法。该方法，包括如下步骤：将离体的哺乳动物的周围神经依次用碱溶液、表面活性剂溶液、脱脂剂、PBS缓冲液进行浸泡处理后，冻干，灭菌，得到所述脱细胞异种神经移植物。本发明所制备的脱细胞异种神经移植物具有良好的组织相容性，能重建神经再生通路，引导轴突再生，加速神经功能修复，在周围神经的损伤修复领域具有良好的临床应用前景。